王貴波，武 娜，魏 紅，朱 娜

(河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院小兒外科，河北 張家口 075000)

急性闌尾炎是急診科腹痛最常見的原因之一[1]，它是一種闌尾蚓狀畸形的炎癥，位于右下腹四象限，疼痛常隨著炎癥的加重而加重，并成比例地轉(zhuǎn)移[2]。但是急性闌尾炎的診斷并不容易，隨著超聲檢查和計(jì)算機(jī)斷層掃描的普及，對(duì)急性闌尾炎的診斷準(zhǔn)確率可達(dá)85%～90%，事實(shí)上這些診斷方式耗時(shí)、昂貴且可能并非一直可用，尤其是對(duì)于不能準(zhǔn)確描述疼痛的年幼兒童[3，4]。在做出診斷之前，約有三分之一的此類患兒會(huì)出現(xiàn)闌尾炎穿孔[5]。因此為了及時(shí)診斷急性闌尾炎及其并發(fā)癥，需要找到經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確的檢查方法。CXC趨化因子受體3(CXC chemokine receptor 3，CXCR3)是一種7次跨膜G蛋白偶聯(lián)趨化因子受體[6]。主要在活化的效應(yīng)/記憶T細(xì)胞上表達(dá)，與靶細(xì)胞表面受體結(jié)合，可以趨化免疫細(xì)胞到相應(yīng)部位，參與感染、自身免疫性疾病、炎癥、腫瘤、血管形成等病理生理過程[7，8]。干擾素誘導(dǎo)蛋白-10(interferon induced protein-10，IP-10)屬于CXC類趨化因子，是一種經(jīng)典的干擾素-γ誘導(dǎo)型CXCR3配體，CXCR3與IP-10特異性結(jié)合，介導(dǎo)趨化因子效應(yīng)[9，10]。急性闌尾炎是由于闌尾管壁充血水腫后，大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，導(dǎo)致組織破壞，進(jìn)而引起急性闌尾炎，因此闌尾炎癥水平與闌尾炎的嚴(yán)重程度密切相關(guān)[11]。但CXCR3、IP-10在急性闌尾炎中的變化及是否對(duì)該病有診斷效能、是否與穿孔發(fā)生有關(guān)的報(bào)道很少。本研究通過檢測(cè)急性闌尾炎患兒血清中CXCR3、IP-10的水平變化，探討二者與穿孔的關(guān)系及臨床意義?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年3月至2022年2月我院小兒外科收治的急性闌尾炎患兒165例，納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合急性闌尾炎診斷診斷標(biāo)準(zhǔn)[12]；②沒有闌尾切除術(shù)史；③無(wú)其他內(nèi)科或外科合并癥。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有代謝或內(nèi)分泌疾病；②有凝血功能障礙或其他血液系統(tǒng)疾??；③有華法林或肝素用藥史；④臨床資料不完整。根據(jù)是否發(fā)生闌尾穿孔分為穿孔組61例，其中男38例，女23例，年齡1～12歲[(7.84±2.50)歲]；未穿孔組104例，其中男55例，女49例，年齡1～12歲[(7.94±2.70)歲]；同時(shí)選取在我院進(jìn)行體檢的健康兒童60例為對(duì)照組，其中男25例，女35例，年齡1～12歲[(8.12±2.55)歲]。本研究所有樣品采集均取得受試者監(jiān)護(hù)人知情同意，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，批準(zhǔn)號(hào)：(2019)第003號(hào)。

1.2 方法急性闌尾炎患兒入院后(進(jìn)行治療前)采集靜脈血，體檢健康兒童于體檢時(shí)采集靜脈血6 ml，分成兩部分，一部分血液樣本采用全自動(dòng)血液分析儀(型號(hào)BC-11，青島聚創(chuàng)華業(yè)分析儀器有限公司)進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(NEUT)等成分分析，計(jì)算中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值(NLR)。另一部分血液樣本室溫靜置15 min后，采用6000 r/min離心處理10 min，取上層血清于-70 ℃保存?zhèn)溆?；采用全自?dòng)生化分析儀(型號(hào)LST008，日本日立公司)測(cè)定血清C反應(yīng)蛋白(CRP)、血紅蛋白(Hb)、白蛋白(ALB)水平；采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清CXCR3、IP-10水平，具體操作步驟按照試劑盒(批號(hào)JN-1912K、JN-1815K，上海梵態(tài)生物科技有限公司)說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間比較行方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；采用Pearson法分析患兒血清CXCR3、IP-10水平及與生化指標(biāo)的相關(guān)性；受試者工作特征(ROC)曲線評(píng)價(jià)血清CXCR3、IP-10、二者聯(lián)合對(duì)急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的診斷價(jià)值；多因素Logistic回歸分析穿孔的影響因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組生化指標(biāo)比較三組Hb、ALB比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；WBC、NEUT、PLT、NLR、CRP水平穿孔組>未穿孔組>對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組生化指標(biāo)比較

2.2 三組血清CXCR3、IP-10水平比較CXCR3、IP-10水平穿孔組>未穿孔組>對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 三組血清CXCR3、IP-10水平比較

2.3 急性闌尾炎伴穿孔患兒血清CXCR3、IP-10水平及與生化指標(biāo)的相關(guān)性分析急性闌尾炎伴穿孔患兒血清CXCR3與IP-10水平呈正相關(guān)(P<0.05)，血清CXCR3、IP-10與WBC、NEUT、PLT、NLR、CRP均呈正相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 急性闌尾炎伴穿孔患兒血清CXCR3、IP-10水平及與生化指標(biāo)的相關(guān)性分析

2.4 血清CXCR3、IP-10、二者聯(lián)合對(duì)急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的診斷價(jià)值ROC曲線結(jié)果顯示，血清CXCR3、IP-10、二者聯(lián)合診斷急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的曲線下面積(AUC)分別為0.920、0.860、0.960。見圖1和表4。

表4 血清CXCR3、IP-10、二者聯(lián)合對(duì)急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的診斷價(jià)值

圖1 血清CXCR3、IP-10、二者聯(lián)合診斷急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的ROC曲線

2.5 影響急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的多因素Logistic回歸分析Logistic回歸分析結(jié)果顯示，CXCR3、IP-10、WBC、NEUT、PLT、NLR、CRP是影響急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表5。

表5 影響急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的多因素Logistic回歸分析

3 討論

闌尾炎是兒科急診常見的腹部急癥。典型的闌尾炎以臍部周圍疼痛開始，繼而發(fā)展為右下腹部疼痛，伴有發(fā)熱、嘔吐、食欲不振。根據(jù)有無(wú)穿孔可分為穿孔性闌尾炎和非穿孔性闌尾炎[13]。急性闌尾炎的穿孔可能會(huì)導(dǎo)致極為重要的并發(fā)癥，增加膿腫形成、傷口感染和敗血癥的風(fēng)險(xiǎn)[14]。與成人相比，由于病史不完整、癥狀不典型，兒童闌尾炎的臨床診斷往往較為困難[15]。診斷和治療的延遲增加了穿孔的風(fēng)險(xiǎn)。另一方面，穿孔的增加會(huì)提高術(shù)后發(fā)病率、死亡率和住院率[16]。因此選擇合適的指標(biāo)對(duì)穿孔闌尾炎進(jìn)行診斷，對(duì)患者進(jìn)行及時(shí)治療有重要作用。

CXCR3配體是由多種細(xì)胞分泌的CXC趨化因子。據(jù)報(bào)道，CXCR3受體在幾種免疫細(xì)胞類型中表達(dá)，包括內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等[17]。CXCR3正常情況下，在大多數(shù)非淋巴組織中檢測(cè)不到，但在感染、損傷和免疫炎癥反應(yīng)中，CXCR3被細(xì)胞因子干擾素-γ強(qiáng)烈誘導(dǎo)[18]。何冬平等[19]研究表明CXCR3在毛細(xì)支氣管炎患兒外周血中表達(dá)水平升高。在本研究中，急性闌尾炎患兒血清CXCR3水平高于體檢健康兒童，且穿孔患兒血清CXCR3水平高于未發(fā)生穿孔患兒，表明CXCR3可能參與急性闌尾炎疾病的發(fā)展，且與發(fā)生穿孔密切相關(guān)。本研究還發(fā)現(xiàn)，與未發(fā)生穿孔的患兒相比，急性闌尾炎發(fā)生穿孔患兒WBC、NEUT、PLT、NLR、CRP水平均升高，急性闌尾炎伴穿孔患兒血清CXCR3與WBC、NEUT、PLT、NLR、CRP均呈正相關(guān)，提示CXCR3表達(dá)升高可能導(dǎo)致患兒機(jī)體內(nèi)炎癥反應(yīng)劇烈，免疫代謝異常，進(jìn)一步造成穿孔的發(fā)生。ROC結(jié)果顯示血清CXCR3診斷急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的AUC為0.920，敏感度為91.80%，特異度為78.85%。表明CXCR3可在一定程度上診斷急性闌尾炎患兒穿孔的發(fā)生。

IP-10是一種10.8 kD的小蛋白，由許多細(xì)胞類型分泌，包括單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，主要通過結(jié)合細(xì)胞表面的CXCR3起作用[20]，廣泛參與一些病理生理過程。對(duì)T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞起趨化作用[21]。本研究中，急性闌尾炎患兒血清IP-10水平高于體檢健康兒童，且穿孔患兒血清IP-10水平高于未發(fā)生穿孔患兒，急性闌尾炎伴穿孔患兒血清IP-10與WBC、NEUT、PLT、NLR、CRP均呈正相關(guān)，提示IP-10參與急性闌尾炎患兒穿孔的發(fā)生發(fā)展，這可能與患兒的炎癥反應(yīng)及免疫代謝異常有關(guān)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，急性闌尾炎伴穿孔患兒血清CXCR3與IP-10水平呈正相關(guān)，提示CXCR3、IP-10相結(jié)合共同參與影響急性闌尾炎穿孔的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程。ROC結(jié)果顯示，血清IP-10診斷急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的AUC為0.860，對(duì)應(yīng)的敏感度為68.85%，特異度為87.50%；血清CXCR3、IP-10二者聯(lián)合診斷急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的AUC為0.960，敏感度為85.25%，特異度為94.23%；CXCR3、IP-10均是影響急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的獨(dú)立危險(xiǎn)因素；提示二者可能作為診斷急性闌尾炎患兒發(fā)生穿孔的血清標(biāo)志物，且二者聯(lián)合診斷效能高于單一指標(biāo)診斷。

綜上，CXCR3、IP-10在急性闌尾炎伴穿孔患兒血清中表達(dá)均升高，二者呈正相關(guān)，二者聯(lián)合檢測(cè)可作為急性闌尾炎發(fā)生穿孔的有效診斷指標(biāo)，具有重要的臨床意義。