閆雪崧

（山東省濱州市沾化區(qū)海洋和漁業(yè)發(fā)展服務中心，山東濱州 256600）

南美白對蝦（Penaeus vannamei，也被稱為凡納濱對蝦）不僅肉質(zhì)鮮美、蛋白含量高，而且富含不飽和脂肪酸和多種維生素和礦物質(zhì)，受到廣大消費者的喜愛（房媛等，2022）。同時南美白對蝦飼養(yǎng)周期短，食性廣，抗病強，除了沿海地區(qū)還可以利用純淡水或半咸水等池塘養(yǎng)殖，養(yǎng)殖要求相對較低，目前已成為我國養(yǎng)殖產(chǎn)量、養(yǎng)殖面積最大的蝦類品種。《中國漁業(yè)統(tǒng)計年鑒》統(tǒng)計表明，南美白對蝦占我國海水養(yǎng)殖蝦類的80.52%，是僅次于克氏原螯蝦的第二淡水養(yǎng)殖蝦類品種。我國南美白對蝦蝦苗需要量大，2019年達到15070億尾，較2018年相比增加47.36%（王丹等，2021）。與成蝦相比，蝦苗對環(huán)境要求高，蝦苗質(zhì)量直接影響?zhàn)B殖產(chǎn)量和經(jīng)濟效益。作為變溫動物，南美白對蝦適應的溫度范圍較廣，25～30℃生長性能最佳，溫度過高存活率顯著下降（肖善勢等，2016）。南美白對蝦經(jīng)歷無節(jié)幼體（Nauplius stage，N）、溞狀幼體（Zoea stage，Z）、糠蝦幼體（Mysis stage，M）和仔蝦（Post larval stage，P）4個階段完成變態(tài)，各階段的習性及生長性能存在差異（楊章武等，2011）。南美白對蝦適宜高密度養(yǎng)殖，但養(yǎng)殖密度過高時會導致群體內(nèi)競爭增加，平均餌料系數(shù)和抗病能力降低（陳亞坤等，2011）。目前養(yǎng)殖密度對生長性能的影響主要集中于成蝦，幼蝦階段的密度要求及其對后續(xù)生長的影響報道較少。

南美白對蝦工業(yè)化養(yǎng)殖不斷普及，蝦苗需求量大，但成活率低、生長能力差等問題影響了后續(xù)的養(yǎng)殖工作。本研究分析溫度及養(yǎng)殖密度對南美白對蝦幼體成活率的影響，并對蝦苗后續(xù)生長性能及消化道酶進行分析，明確育苗條件對后續(xù)養(yǎng)殖的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 采用同一批南美白對蝦群體的親蝦的F1代無節(jié)幼體，使用餌料為蝦片、藻粉、豐年蟲、BP粉等。試驗用水為經(jīng)沉淀、砂濾、消毒的海水[pH=（8.0±0.2）、鹽度（30±1）%]，使用前曝氣、檢測余氯并涂板檢測弧菌數(shù)量。所有試驗均在0.3 m3的可控溫不透明玻璃鋼桶中進行。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設(shè)計 試驗分別設(shè)置3種溫度處理[（27±0.5）℃、（30±0.5）℃、（33±0.5）℃]，在每種溫度處理下設(shè)置3種培育密度（15、25、35萬尾/m3），共9組不同處理，每組設(shè)計3個平行。幼蝦投餌6次/d，每個階段的投餌量不同：ZⅠ期投餌（1.5±0.5）g/m3·次，ZⅡ和ZⅢ期投餌（3±0.5）g/m3·次，M期投餌（4±0.5）g/m3·次，P期投餌（5±0.5）g/m3·次，在M和P期適量添加豐年蟲，以保證其營養(yǎng)要求，記錄不同處理組幼蝦各階段的存活率。

對上述各組獲得的蝦苗進行蝦苗標粗，10 d后在每個處理組中隨機選取蝦苗，31℃下300尾/m3繼續(xù)養(yǎng)殖6周，每組處理設(shè)計3個平行。養(yǎng)殖階段投餌4次/d，初次投喂量為平均體重的3%，后續(xù)根據(jù)攝食情況適當調(diào)整。6周后停止投喂，1 d后各組隨機選取30只對蝦，記錄并計算平均身長和體重。

為明確造成差異的原因，對不同溫度、密度培育的各組仔蝦中隨機取樣10只剝?nèi)「我扰K，利用液氮速凍后于-80℃保存，用于測定胰蛋白酶（Trypsin）、脂肪酶（Lipase）和淀粉酶（Amylase），每組設(shè)計3個平行。

1.2.2 幼蝦各階段存活率的測定 利用顯微鏡觀察上述組中幼蝦的變態(tài)階段，當各組處理90%以上幼蝦處于ZⅠ后開始計算時間，當其中90%以上幼蝦進入下一個發(fā)育階段后計算存活率。在不同位置隨機取樣3次，每次取樣500 mL，利用水體比例法計數(shù)，并計算對應階段幼體數(shù)量的平均值及存活率。

1.2.3 消化酶活性指標分析 準確稱取等量上述各組仔蝦的肝胰臟樣本，在冰浴下進行勻漿及離心，取上清液等比例混合，使用試劑盒測定消化酶活性（上海通蔚生物，TW30161、TW30674、TW30561），具體方法見相關(guān)說明書。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 利用GraphPad Prism 8軟件處理上述各組數(shù)據(jù)，結(jié)果用“平均值±標準差”表示；同時利用SPSS 20.0軟件進行單因素方差分析，P＜0.05表示組間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度、密度對南美白對蝦幼蝦各發(fā)育階段存活率的影響 由表1可知，隨著溫度的提高，南美白對蝦各階段的存活率降低。當培育密度較高時（25和35萬尾/m3），30和33℃的溫度對仔蝦存活率均顯著低于對應密度下27℃時的存活率（P＜0.05）。尤其是當溫度33℃時，當培育密度達到35萬尾/m3時，各階段的存活率均為最低。但MⅢ期以后，30和33℃兩組培育溫度下的幼蝦存活率差異不顯著。大部分發(fā)育階段15和25萬尾/m3培育時存活率無顯著差異（P＞0.05）。

表1 溫度、培育密度對南美白對蝦幼蝦不同階段存活率的影響

2.2 蝦苗培育的溫度和密度對后續(xù)養(yǎng)殖生長性能的影響 由圖1可知，蝦苗培育密度對體長的影響較小，但對后期飼養(yǎng)過程中成蝦平均體重的影響較為明顯，結(jié)果顯示，當蝦苗培育密度達到35萬尾/m3時，同樣狀態(tài)下飼養(yǎng)的成蝦體重均為同溫度3組中的最低值（P＜0.05）。蝦苗培育溫度較高時（33℃）對后續(xù)飼養(yǎng)中成蝦的體重影響較大，尤其是當33℃時培育密度達到35萬尾/m3得到的蝦苗經(jīng)6周養(yǎng)殖平均體重最低，僅為2.67 g；而當蝦苗培育溫度為30℃，培育密度為25萬尾/m3時平均體重最高，達到3.75 g。

圖1 蝦苗培育溫度和密度對南美白對蝦體長及體重的影響

2.3 蝦苗培育的溫度和密度對消化酶的影響由圖2可知，仔蝦肝胰臟的3種消化酶酶活在15和25萬尾/m3時均表現(xiàn)為隨著溫度增加而增加，但溫度對脂肪酶的影響較小。在27℃時培育密度對淀粉酶和脂肪酶的影響較小，當溫度處于30℃時，提高密度到25萬尾/m3以上對胰蛋白酶和脂肪酶的影響無顯著差異，但當培育溫度升高到33℃時，高密度（35萬尾/m3）育苗導致仔蝦消化酶活性不同程度地下降，尤其是胰蛋白酶下降顯著（P＜0.05）。

圖2 蝦苗培育溫度和密度對消化酶的影響

3 討論

南美白對蝦在我國養(yǎng)殖規(guī)模大，蝦苗需要量已達到1.5千億尾以上，因此，蝦苗質(zhì)量直接影響了其產(chǎn)量和經(jīng)濟效益（王丹等，2021）。與成蝦相比，蝦苗對環(huán)境要求更高，工業(yè)化育苗不受天然環(huán)境條件的影響，可以對溫度、密度、鹽度、溶氧等多條件進行精準控制。溫度通過影響酶活性、機體代謝等方面可以影響蝦類變溫動物的生長發(fā)育（馮旭等，2022）。而較高的養(yǎng)殖密度容易造成密度脅迫，影響應激相關(guān)蛋白的表達，導致其抗逆性降低，生長速率和存活率降低（Yang等，2017）。但也有報道顯示，不同生長發(fā)育階段的適應性可能存在差異，如南美白對蝦的最適溫度在成蝦和幼蝦期存在差異（歐黃思，2015）；非洲鯰魚（Clarias lazera）成魚高密度養(yǎng)殖導致攻擊性增加，生長性能降低，但幼魚階段可以適當提高密度（劉洪軍等，2010）。本研究結(jié)果顯示，南美白對蝦育苗過程中溫度及密度存在交互作用。隨著溫度增加，幼蝦各階段的存活率降低，但糠蝦生長后期對溫度的適應性明顯增強，提高溫度后存活率無顯著差異。育苗溫度較低（27℃），培養(yǎng)密度為25萬尾/m3時部分發(fā)育階段的存活率高于15萬尾/m3（表2），這可能是由于適當?shù)姆N間競爭對南美白對蝦幼蝦的存活具有促進作用。

由于溫度增加會縮短蝦的變態(tài)發(fā)育時間，因此，工業(yè)化育苗過程中經(jīng)常采用提高水溫的方法來縮短周期，但這是否對蝦苗后續(xù)養(yǎng)殖造成影響尚不清楚。本文同時進行了蝦苗生長試驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，蝦苗培育的溫度和密度對后續(xù)成蝦的平均體重具有一定影響，發(fā)現(xiàn)蝦苗培育溫度和密度過高（33℃35萬尾/m3）會影響蝦苗后續(xù)生長，但27和30℃對蝦苗體重的影響沒有差異。為了分析引起差異的原因，本文對仔蝦消化酶進行了分析。消化酶可以反映蝦類攝食情況和對營養(yǎng)物質(zhì)的利用程度，溫度及密度均影響消化酶活性（周元雪，2014）。研究發(fā)現(xiàn)，低密度培育時，溫度升高可導致仔蝦肝胰臟淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶酶活增加，但育苗條件為33℃、35萬尾/m3時會導致胰蛋白酶酶活顯著下降。這表明高水溫和高密度培育得到的蝦苗其機體代謝受到影響，導致后續(xù)生長性能下降。

4 結(jié)論

本文著重探討了溫度和培育密度對南美白對蝦幼蝦的影響，進一步驗證了不同培育條件獲得的蝦苗在后續(xù)養(yǎng)殖過程中生長特性等方面的差異，結(jié)果顯示，33℃、35萬尾/m3的條件不利于南美白對蝦蝦苗的培育，而且會影響蝦苗質(zhì)量。本文結(jié)果為南美白對蝦養(yǎng)殖技術(shù)的完善提供了理論參考。