張玉瑩
(威海海洋職業(yè)學(xué)院,山東威海 264300)
維生素A(Vitamin A)又稱視黃醇,是一類具有視黃醇生物活性的物質(zhì)。維生素A除了影響視覺(jué),還對(duì)機(jī)體生長(zhǎng)代謝、維持免疫系統(tǒng)具有重要作用(黃鴻眉等,2008)。董以雷等(2019)報(bào)道在飼養(yǎng)豬仔的日糧中添加維生素A含量可增強(qiáng)豬仔的生長(zhǎng)性能,并提高機(jī)體的免疫力,降低發(fā)病率。同時(shí)維生素A也是一種非酶系統(tǒng)的抗氧化劑,具有抗氧化性和清除自由基的能力。代航等(2019)研究發(fā)現(xiàn),種鵝日糧中維生素A添加量在8 000 IU/kg時(shí)能提高種蛋品質(zhì)以及蛋黃抗氧化能力,并能有效降低脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物。但日糧添加過(guò)量維生素A會(huì)影響動(dòng)物的生長(zhǎng)性能,增加飼養(yǎng)成本(張春善等,2016)。目前,將維生素A添加到日糧用于肉兔養(yǎng)殖還鮮見(jiàn)相關(guān)報(bào)道,因此,本試驗(yàn)旨在研究維生素A對(duì)肉兔生長(zhǎng)性能、免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)的影響,并探討維生素A的適宜添加量,為肉兔飼糧中維生素A的合理使用提供依據(jù)。
1.1 材料與試劑 維生素A制劑的維生素A含量500000 IU/g:帝斯曼維生素有限公司;酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)試劑盒:美國(guó)Romer公司。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧 肉兔由山西綠草地生物技術(shù)有限公司提供,共選取200只體重相近的健康肉兔,飼養(yǎng)日糧符合NRC-1977《家兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》,日糧成分及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1(邱玉娥,2019)。
表1 飼料組成成分及營(yíng)養(yǎng)成分
1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)將200頭肉兔隨機(jī)分為5組,分別為對(duì)照組(基礎(chǔ)日糧)、3000 IU/kg維生素A組(基礎(chǔ)日糧+3000 IU/kg維生素A)、10000 IU/kg維生素A組(基礎(chǔ)日糧+10000 IU/kg維生素A)、20000 IU/kg維生素A組(基礎(chǔ)日糧+20000 IU/kg維生素A)、40000 IU/kg維生素A組(基礎(chǔ)日糧+40000 IU/kg維生素A)。試驗(yàn)為期60 d,期間肉兔自由飲水與采食,并按常規(guī)免疫程序?qū)ζ溥M(jìn)行免疫。
1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法
1.4.1 生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)期間對(duì)肉兔每日進(jìn)行稱重,計(jì)算肉兔平均日增重;記錄每組總采食量,計(jì)算平均日采食量和料重比。
1.4.2 免疫功能指標(biāo) 試驗(yàn)第一周后,每組隨機(jī)抽取10只試驗(yàn)兔,空腹抽取10 mL血液,用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒測(cè)定血清中免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白G(Ig G)、免疫球蛋白M(Ig M)以及白細(xì)胞介素-2(IL-2)含量。
1.4.3 抗氧化功能指標(biāo) 抽取制得的血清同時(shí)測(cè)定谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)和丙二醛(MDA)含量,GSH-Px活性采用比色法測(cè)定,T-SOD活性采用羥胺法測(cè)定,MDA含量采用硫代巴比妥酸法測(cè)定(洪平等,2012)。
1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因子方差分析。
2.1 對(duì)生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知,日糧中添加20000和40000 IU/kg維生素A組的肉兔末重、平均日增重提高最多,分別比對(duì)照組顯著提高27.5%和37.0%(P<0.05);而同時(shí)這兩組料重比相對(duì)較低;而3000和10000 IU/kg維生素A組的末重、平均日增重分別比對(duì)照組顯著提高10.7%和10.3%(P<0.05),但效果不及其他兩組,且這兩組的料重比也較高,所以在日糧中加入20000或40000 IU/kg維生素A對(duì)提高肉兔生長(zhǎng)性能效果顯著。
表2 不同添加水平對(duì)生長(zhǎng)性能的影響(n=5)
2.2 對(duì)免疫功能指標(biāo)的影響 由表3可知,與對(duì)照組相比,4個(gè)維生素A組肉兔血清中免疫球蛋白Ig A、Ig G、Ig M含量均有所提高,且不同組別之間免疫球蛋白的差異性也較顯著(P<0.05);4個(gè)維生素A組的IL-2含量雖然相差不大,但均顯著高于對(duì)照組(P<0.05);
表3 不同添加水平對(duì)免疫指標(biāo)的影響(n=5)
2.3 對(duì)抗氧化功能的影響 由表4可知,不同組間的GSH-PX、T-SOD和MDA含量差異顯著,其中20000 IU/kg維生素A組GSH-PX、T-SOD活性最高,分別比對(duì)照組顯著提高25.5%、23.4%(P<0.05);10000 IU/kg維生素A組MDA含量比對(duì)照組顯著降低21.8%(P<0.05)。說(shuō)明維生素A的添加能明顯提高肉兔抗氧化能力,且添加20000 IU/kg維生素A組的抗氧化效果最佳。
表4 不同添加水平對(duì)抗氧化功能的影響(n=5)
3.1 不同添加量對(duì)生長(zhǎng)性能的影響 由上述試驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn),不同添加水平的維生素A均能提高肉兔生長(zhǎng)性能,主要體現(xiàn)在肉兔增重和采食量的提高以及料重比的降低。這與以往研究結(jié)果相吻合,其研究結(jié)果表明,在肉雞飼糧中加入一定量的維生素A可以使肉雞平均日增重得到明顯提高(韓磊等,2004)。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),在日糧中加入20000 IU/kg維生素A的效果最佳,其平均日增重比對(duì)照組提高37.0%,料重比比對(duì)照組降低19.8%。這可能是由于維生素A能促進(jìn)腸道杯狀細(xì)胞合成腸道黏蛋白功能,黏蛋白是高度糖基化的蛋白,具有上調(diào)腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用效率。并且在日糧中再增加維生素A對(duì)其生長(zhǎng)性能的影響不大,因此,在肉兔日糧中加入20000 IU/kg維生素A對(duì)其生長(zhǎng)性能有較顯著的提升。
3.2 不同添加量對(duì)免疫指標(biāo)的影響 免疫球蛋白是動(dòng)物機(jī)體免疫系統(tǒng)組成中最為關(guān)鍵的物質(zhì)之一,是一類具有抗體活性與抗體相似的球蛋白,包括Ig A、Ig G、Ig M和IL-2。龐建建等(2010)研究表明,在日糧中添加適量維生素A可增強(qiáng)動(dòng)物的免疫反應(yīng),并使得抗體濃度迅速升高;黃利娜等(2012)研究指出,飼料維生素A缺乏或者添加水平過(guò)高時(shí),異種蛋白抗原BSA的抗體生成量會(huì)降低。本試驗(yàn)研究表明,隨著維生素A添加水平的增加,IgA、IgG、IgM的水平呈先增加后減小的趨勢(shì),維生素A添加水平為20000 IU/kg時(shí)最高;而維生素A添加水平對(duì)血清中IL-2影響較小,只有添加組與對(duì)照組差異顯著,故維生素A添加水平為20000 IU/kg組時(shí)血清免疫指標(biāo)最佳。
3.3 不同添加量對(duì)抗氧化功能的影響 GSH-Px和T-SOD是兩種重要的抗氧化酶,具有清除自由基的能力;而MDA可以反映出組織細(xì)胞的脂質(zhì)過(guò)氧化程度。蒲俊華等(2016)研究發(fā)現(xiàn),隨維生素A添加水平的增加,豬仔血清中GSH-Px和T-SOD含量升高,MDA含量降低,說(shuō)明維生素A在一定程度上提升了動(dòng)物抗氧化能力。這主要是由于維生素A對(duì)GSH-Px和T-SOD具有較強(qiáng)活力,在維持機(jī)體氧化平衡中起重要作用。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),維生素A添加水平為20000 IU/kg時(shí)GSHPx和T-SOD含量最高,MDA含量最低,對(duì)肉兔抗氧化功能具有一定的促進(jìn)作用。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,在肉兔日糧中加入適量的維生素A對(duì)其生長(zhǎng)性能有明顯的促進(jìn)作用,并能提高肉兔血清免疫指標(biāo)和抗氧化功能。同時(shí)發(fā)現(xiàn)在肉兔飼養(yǎng)日糧中添加20000 IU/kg維生素A時(shí)效果最佳。