■白 晨 盛宇飛 張 昊 哈斯額爾敦 敖長金* 張喜勝

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古自治區(qū)高校動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018；2.錫林浩特市鼎安生物科技有限公司，內(nèi)蒙古錫林浩特 026000）

小麥低聚肽具備多樣的生物學(xué)功能[1]，對(duì)動(dòng)物生長性能、免疫能力和抗氧化能力均具有一定的促進(jìn)作用，是良好的畜禽添加劑[2]。小麥低聚肽是將小麥蛋白進(jìn)行酶切及特定的小肽分離技術(shù)得到的小分子肽類混合物[3]，是常見的植物來源的肽類，總蛋白含量在80%左右[4]，氨基酸組成較為合理，其中谷氨酸含量較高。王石等[5]研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬飼糧中添加1.5%的小麥蛋白水解物，可以提高斷奶仔豬的平均日增重，降低腹瀉率，提高飼料消化率。呂可欣[6]用小麥肽飼喂肉羊，發(fā)現(xiàn)小麥低聚肽可以改善肉羊瘤胃發(fā)酵狀態(tài)且提高了血液免疫指標(biāo)和抗氧化相關(guān)指標(biāo)?，F(xiàn)階段國內(nèi)外研究中，缺乏小麥低聚肽的營養(yǎng)吸收特性研究，尤其對(duì)畜禽腸道消化特性的影響尚未見報(bào)道。因此本試驗(yàn)通過在肉羊飼糧中添加小麥低聚肽，探明小麥低聚肽對(duì)肉羊營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率、生長性能和小腸黏膜形態(tài)的影響，以期為小麥低聚肽在肉羊生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取30 只健康、體重相近[（35.58±3.18）kg]的4 月齡小尾寒羊公羊作為試驗(yàn)動(dòng)物。采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，共分為2 組，分別為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組15只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.3%小麥低聚肽，小麥低聚肽飼喂量參考呂可欣等[4]前期研究。小麥低聚肽于每日飼喂前用少量全混合日糧（TMR）混勻后先飼喂肉羊，待全部采食后，再飼喂剩余TMR，保證小麥低聚肽全部被采食。試驗(yàn)共75 d，包括預(yù)試期15 d，正試期60 d。

1.2 試驗(yàn)日糧組成與飼養(yǎng)管理

預(yù)試期試驗(yàn)羊自由采食、飲水，以便于估測試驗(yàn)羊每日采食量。正試期每天8：00 和16：00 各飼喂1 次，羊只自由飲水。每天飼喂前打掃料槽、水槽，確保羊舍清潔、羊只健康。試驗(yàn)所用基礎(chǔ)日糧由內(nèi)蒙古自治區(qū)巴彥淖爾市富川飼料科技有限公司提供。小麥低聚肽由錫林浩特市鼎安生物科技有限公司提供，小麥低聚肽中主要氨基酸含量為：谷氨酸28.78 g/100 g、亮氨酸5.14 g/100 g、異亮氨酸2.54 g/100 g、蛋氨酸1.16 g/100 g、纈氨酸2.82 g/100 g、苯丙氨酸3.91 g/100 g、賴氨酸1.14 g/100 g、甘氨酸2.64 g/100 g。試驗(yàn)羊的基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 樣品采集及指標(biāo)測定

正試期每日早晚飼喂后待羊只采食后及時(shí)收集剩余飼料，用于計(jì)算試驗(yàn)羊只平均日采食量（ADFI）。在正試期的第1、15、30、45、60 天晨飼前對(duì)試驗(yàn)肉羊空腹稱重，用于計(jì)算試驗(yàn)羊平均日增重（ADG）和料重比（F/G），同時(shí)采用四分法采集均勻飼料樣品，烘干后于-20 ℃保存用以測定飼料營養(yǎng)成分。正試期結(jié)束前一周，每天采集羊的糞便樣品，將每只羊每天采集的糞便混合均勻，烘干后于-20 ℃保存用以測定糞便營養(yǎng)成分。飼料和糞便中營養(yǎng)成分測定方法參考喬亞杰[7]的方法進(jìn)行測定。采用4 mol/L 鹽酸測定酸不溶灰分，方法參考GB/T 23742—2009，計(jì)算營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率。

營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率（%）=100-糞便某養(yǎng)分含量×日糧酸不溶灰分含量/日糧某養(yǎng)分含量×糞便酸不溶灰分含量×100

在正試期第60 天，分別從對(duì)照組和試驗(yàn)組中選取體重接近該組平均體重的6只羊進(jìn)行屠宰，屠宰后迅速采集十二指腸、空腸和回腸，從各腸段的中部取2 cm 用生理鹽水沖洗干凈，將洗凈的組織樣品浸入4%多聚甲醛中固定。各腸段組織進(jìn)行石蠟切片，經(jīng)H.E.染色后的切片在光學(xué)顯微鏡（OLYMPUS-BX53）40倍下觀察黏膜結(jié)構(gòu)。應(yīng)用Image-Pro Plus 6.0圖像處理軟件對(duì)所得照片進(jìn)行處理，以軟件右下角40 倍標(biāo)尺作為度量標(biāo)準(zhǔn)，在每張切片中挑選5根完整的絨毛，用于測量腸絨毛高度（μm）、隱窩深度（μm）及絨毛高度/隱窩深度（V/C）值。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

數(shù)據(jù)利用Excel（2017）軟件初步整理，運(yùn)用SAS 9.4 軟件統(tǒng)計(jì)分析，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P＞0.05 定義為差異不顯著，P＜0.05定義為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 小麥低聚肽對(duì)肉羊生長性能的影響

由表2可知，試驗(yàn)羊正試期的初始體重差異不顯著（P＞0.05）。0～15 d，對(duì)照組羊只ADG與試驗(yàn)組相比差異不顯著（P＞0.05），但對(duì)照組數(shù)值上高于試驗(yàn)組。16～30 d試驗(yàn)組ADG顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），31～45 d和46～60 d對(duì)照組與試驗(yàn)組沒有顯著差異（P＞0.05）。

表2 小麥低聚肽對(duì)肉羊平均日增重（ADG）的影響

由表3 可知，對(duì)照組與試驗(yàn)組的各階段ADFI 差異均不顯著（P＞0.05）。數(shù)值上觀測，除46～60 d 試驗(yàn)組平均日采食量略高于對(duì)照組外，其余各階段試驗(yàn)組平均日采食量均略低于對(duì)照組。

表3 小麥低聚肽對(duì)肉羊平均日采食量（ADFI）的影響（g）

由表4 可知，0～15 d，對(duì)照組F/G 值低于試驗(yàn)組，但無顯著差異（P＞0.05）。16～30 d 對(duì)照組F/G 值顯著高于試驗(yàn)組（P＜0.05），31～45 d 和46～60 d 對(duì)照組F/G值高于試驗(yàn)組，但差異不顯著（P＞0.05）。

表4 小麥低聚肽對(duì)肉羊料重比（F/G）的影響

2.2 小麥低聚肽對(duì)肉羊營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表5可知，試驗(yàn)組的干物質(zhì)、粗蛋白、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣、磷表觀消化率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），粗脂肪的表觀消化率兩組間差異不顯著（P＞0.05）。

表5 小麥低聚肽對(duì)肉羊營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響（%）

2.3 小麥低聚肽對(duì)肉羊小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

2.3.1 小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)切片

由圖1可知，對(duì)照組十二指腸的形態(tài)結(jié)構(gòu)與試驗(yàn)組相比有部分腸絨毛稀疏且長度較短，試驗(yàn)組的腸絨毛相對(duì)密集且長。由圖2可知，對(duì)照組空腸絨毛形態(tài)結(jié)構(gòu)與試驗(yàn)組相比相對(duì)短粗，排列不均勻，試驗(yàn)組腸絨毛明顯較長且排列整齊。由圖3可知，對(duì)照組回腸形態(tài)結(jié)構(gòu)中腸絨毛稀疏且排列散亂，試驗(yàn)組的腸絨毛密集且絨毛較長。

圖1 肉羊十二指腸形態(tài)結(jié)構(gòu)（H.E.，×40）

圖2 肉羊空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)（H.E.，×40）

圖3 肉羊回腸形態(tài)結(jié)構(gòu)（H.E.，×40）

2.3.2 小麥低聚肽對(duì)肉羊小腸絨毛高度的影響

由表6可知，小麥低聚肽能夠顯著提高肉羊十二指腸與空腸絨毛高度（P＜0.05），與對(duì)照組相比，分別提高了24.15%和14.23%。小麥低聚肽飼喂后雖然在數(shù)值上體現(xiàn)了回腸絨毛高度的增加，但與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

表6 小麥低聚肽對(duì)肉羊小腸絨毛高度的影響（μm）

2.3.3 小麥低聚肽對(duì)肉羊小腸隱窩深度的影響

由表7可知，小麥低聚肽能夠顯著降低肉羊十二指腸、空腸和回腸的隱窩深度（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，分別降低了22.31%、16.00%和23.15%。

表7 小麥低聚肽對(duì)肉羊小腸隱窩深度的影響（μm）

2.3.4 小麥低聚肽對(duì)肉羊小腸V/C值的影響

由表8可知，小麥低聚肽能夠顯著提高肉羊十二指腸、空腸和回腸的V/C 值（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，分別提高了90.91%、41.94%和53.61%。

表8 小麥低聚肽對(duì)肉羊小腸V/C值的影響

3 討論

3.1 小麥低聚肽對(duì)肉羊生長性能的影響

本研究中，日糧中添加小麥低聚肽后ADG 在0～15 d 無顯著變化，但數(shù)值上低于對(duì)照組，這可能是由于在試驗(yàn)開始階段肉羊?qū)μ砑有←湹途垭牡娘暭Z適應(yīng)時(shí)間不足，也可能是由于小麥低聚肽對(duì)肉羊生長性能的促進(jìn)作用與飼喂時(shí)長呈相關(guān)性，因?yàn)樵囼?yàn)結(jié)果表明飼喂小麥低聚肽后ADG 在16～30 d 顯著高于對(duì)照組。雖然31 d后到試驗(yàn)結(jié)束兩組間并無顯著差異，但試驗(yàn)組ADG 數(shù)值上高于對(duì)照組。同時(shí)，整個(gè)試驗(yàn)期ADFI 均無顯著差異，而F/G 與ADG 的變化規(guī)律一致。上述結(jié)果說明本試驗(yàn)添加的小麥低聚肽可能具有在不改變?nèi)庋虿墒沉康幕A(chǔ)上增加肉羊生產(chǎn)性能的作用，同時(shí)也說明肉羊飼喂小麥低聚肽需要一定的飼喂適應(yīng)期，本試驗(yàn)中肉羊適應(yīng)期為16～30 d。苗建軍等[8]在飼糧中添加小肽飼喂育肥牦牛的過程中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)小肽的添加量為2.25%時(shí)，牦牛的平均日增重和干物質(zhì)采食量均顯著增加，并且料重比顯著降低。有學(xué)者研究指出，小肽可能通過改善反芻動(dòng)物瘤胃發(fā)酵類型促進(jìn)生產(chǎn)性能發(fā)揮[9]。Liu等[10]研究指出，山羊日糧中添加抗菌肽可以提高ADG、改善瘤胃發(fā)酵參數(shù)和消化酶活性，并且促進(jìn)效果受山羊飼料中精料含量的影響。本試驗(yàn)研究與上述研究具有相同或相似的結(jié)果。

3.2 小麥低聚肽對(duì)肉羊營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

動(dòng)物對(duì)飼料消化吸收能力的增強(qiáng)，可以促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的高效利用，從而達(dá)到降本增效的目的。本研究發(fā)現(xiàn)，在肉羊飼糧中添加小麥低聚肽能夠顯著提高肉羊?qū)Ω晌镔|(zhì)、粗蛋白、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣和磷的消化吸收能力。有學(xué)者指出，肽的添加可能通過提高腸道內(nèi)酶的活性、降低腸道pH，從而促進(jìn)機(jī)體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收[11]。王文娟[12]也證實(shí)瘤胃灌注小肽能夠提高干物質(zhì)、中性洗滌纖維的消化率。此外，發(fā)現(xiàn)雛雞飼喂大豆肽能夠提高血清鈣的含量，說明大豆肽具有促進(jìn)鈣吸收的作用[13]。有學(xué)者指出，肽可能通過與鈣、鋅、銅、鐵等礦物質(zhì)離子形成螯合物進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體對(duì)礦物質(zhì)元素的吸收[14]。上述研究提示，小肽可能通過調(diào)節(jié)腸道環(huán)境、提高腸道吸收能力，進(jìn)而改善反芻動(dòng)物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率。

3.3 小麥低聚肽對(duì)肉羊小腸黏膜形態(tài)的影響

Wang 等[15]研究發(fā)現(xiàn)，利用100 mg/kg 抗菌肽飼喂肉雞能夠明顯提高空腸淀粉酶的活性，并且空腸和回腸的V/C值顯著提高，說明抗菌肽能夠通過改善肉雞腸道黏膜形態(tài)增強(qiáng)腸道對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。崔宇擎等[16]對(duì)中藥復(fù)合小肽的研究發(fā)現(xiàn)，中藥復(fù)合小肽能夠顯著提高肉雞十二指腸和空腸的絨毛高度、V/C值，并且能夠增加腸道內(nèi)益生菌的含量，從而提高肉雞的生長性能。祝平等[17]研究發(fā)現(xiàn)，植物小肽能夠刺激斷奶后仔豬的腸道發(fā)育，提高斷奶仔豬腸道絨毛高度以及V/C 值，并且隨著植物小肽添加量的增加而提高。小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)主要參數(shù)（絨毛高度、隱窩深度、V/C 值）可以反映小腸對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收能力，其中腸絨毛高度可以反映小腸與腸道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的接觸程度，腸絨毛高度越大，與營養(yǎng)物質(zhì)接觸面積越大，吸收能力越強(qiáng)[18]，隱窩深度反映了腸細(xì)胞的分泌能力，隱窩深度越低，成熟細(xì)胞比例越大，分泌功能越強(qiáng)[19]。本試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，在肉羊飼糧中添加小麥低聚肽能夠提高十二指腸、空腸絨毛高度和各腸段V/C 值，降低各腸段隱窩深度。表明小麥低聚肽可能通過改善肉羊小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)，提高腸道對(duì)于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，從而提高肉羊的生長性能。

4 結(jié)論

小麥低聚肽可通過改變小尾寒羊小腸的形態(tài)結(jié)構(gòu)、提高營養(yǎng)物質(zhì)消化率，進(jìn)而提高生長性能。