■喬 敏 張生楠 郭世偉 徐元慶 金 曉 邢媛媛 史彬林
(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,內(nèi)蒙古呼和浩特 010018)
肉雞養(yǎng)殖是我國(guó)畜牧業(yè)中貢獻(xiàn)占比較大的一部分,其中白羽肉雞的平均存欄增幅近5%,對(duì)我國(guó)雞肉生產(chǎn)的貢獻(xiàn)約45%,產(chǎn)能居高位[1]。禽肉肉質(zhì)鮮嫩,是飲食中的重要肉源之一,而肉產(chǎn)品也逐漸多元化,不只局限于生鮮肉,熟肉類成品或者半成品也有很大的消費(fèi)占比[2]。動(dòng)物在飼養(yǎng)中易受環(huán)境中應(yīng)激因素的影響,引發(fā)機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),導(dǎo)致丙二醛等有毒有害物質(zhì)生成并在動(dòng)物屠宰后蓄積,這不僅會(huì)降低動(dòng)物的生長(zhǎng)性能還影響肉品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。此外,在養(yǎng)殖過(guò)程中大幅度依靠抗生素治療細(xì)菌感染,提高生長(zhǎng)性能的同時(shí),也使動(dòng)物體內(nèi)菌群形成耐藥性,且藥物殘留會(huì)引發(fā)人體過(guò)敏和致癌等潛在問(wèn)題,因此,確保畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全成為重中之重[3]。我國(guó)從2020 年7 月1 日起禁止在動(dòng)物飼糧中添加促生長(zhǎng)類藥物飼料添加劑(中藥類除外),尋找綠色、安全的抗生素替代品保障動(dòng)物健康已成為重中之重。已有研究發(fā)現(xiàn),天然植物多糖既有利于畜禽的健康生長(zhǎng),還能通過(guò)調(diào)節(jié)抗氧化酶活性進(jìn)而抑制肉質(zhì)氧化,延長(zhǎng)肉品的貨架期,發(fā)揮抗氧化、改善肉品質(zhì)和抑菌防腐等功效,從而提供營(yíng)養(yǎng)健康的肉品[4-6]。因此,植物多糖作為綠色飼料添加劑用于生產(chǎn)安全、風(fēng)味獨(dú)特、營(yíng)養(yǎng)成分均衡的畜產(chǎn)品,保障動(dòng)物健康,推進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)健康發(fā)展,具有廣闊的前景。
黃花蒿(Artemisia annuaL.)別名青蒿,為一年生菊科蒿屬草本藥用植物,具有降血脂、退熱和抗瘧疾等療效,普遍分布在亞洲和歐洲等各地[7-8]。黃花蒿在每年4-7月生長(zhǎng)旺盛,枝葉鮮嫩,有多糖、倍半萜類和香豆素等活性成分,表現(xiàn)出促生長(zhǎng)、抗氧化和抗癌等藥理學(xué)作用[9-10]。天然植物多糖種類豐富,來(lái)源廣泛,容易從植物的花、根、莖和葉中提取[11]。已有研究表明,黃花蒿水提物可以調(diào)節(jié)肉雞肝脾中抗氧化酶的活性[12],而黃花蒿多糖(Artemisia annuaL polysaccharide,AAP)對(duì)肉仔雞肉品質(zhì)及其抗氧化的影響方面研究還未見報(bào)道,為此本試驗(yàn)旨在探討肉仔雞飼糧中添加不同劑量的AAP 對(duì)其生長(zhǎng)性能、肉品質(zhì)及抗氧化功能的影響,為AAP 在禽類生產(chǎn)中的實(shí)際應(yīng)用提供參考依據(jù)。
在內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)校內(nèi)采集的黃花蒿全株收割后,經(jīng)室溫陰干剪成小段,再粉碎得黃花蒿粉,稱取40 g參照杜涓等[13]的提取方法,按黃花蒿粉與蒸餾水比例為1∶15(g/mL)加入相應(yīng)的蒸餾水?dāng)嚢杈鶆?,?∶1∶1的比例添加纖維素酶、木瓜蛋白酶、果膠酶各6 g,酶解3 h 后抽濾得到提取液,再經(jīng)過(guò)濃縮、醇沉、凍干等流程得到本試驗(yàn)所用的AAP粉末。
采用單因素隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),將240只同一批次健康、體重相近[(44.19±0.25)g]的1 日齡AA 肉仔雞隨機(jī)分為5 個(gè)日糧處理組,每組設(shè)6 個(gè)重復(fù)(籠),每籠8 只,公母各半,經(jīng)檢驗(yàn)每組試驗(yàn)雞初始重統(tǒng)計(jì)學(xué)差異不顯著(P>0.05)。參照雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 33—2004)配制試驗(yàn)肉仔雞所需的玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧,分前、后期兩個(gè)階段均21 d,5組飼糧分別在基礎(chǔ)日糧中添加0(對(duì)照)、250、500、750 mg/kg和1 000 mg/kg AAP,飼養(yǎng)期42 d?;A(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
1.4.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定
在試驗(yàn)第1、21天和第42天早晨以每個(gè)重復(fù)籠為單位分別對(duì)肉仔雞和飼糧進(jìn)行稱重并記錄,根據(jù)肉仔雞初始體重(IBW)和各階段各處理組的總體重計(jì)算平均末體重(FBW)、體增重(BWG),依據(jù)加料量和剩料量計(jì)算每個(gè)試驗(yàn)期的總采食量(FI)和飼料轉(zhuǎn)換率(FE)。
FBW(g/只)=試驗(yàn)期各重復(fù)總體重/雞只數(shù)
BWG(g/只)=(試驗(yàn)期末體重-試驗(yàn)期初始體重)/雞只數(shù)
FI(g/只)=試驗(yàn)期飼料總耗量/雞只數(shù)
FE=BWG/FI
思辨能力培養(yǎng)并非一般意義上的技能訓(xùn)練,它應(yīng)該是結(jié)合具體語(yǔ)境和主題內(nèi)容的技能訓(xùn)練。因此,應(yīng)該將思辨技能的培養(yǎng)融入課文內(nèi)容的學(xué)習(xí)中?!兜聽柗茍?bào)告》中的詮釋、分析和解釋子技能可以歸結(jié)為對(duì)文本所要傳遞的思想的真正理解[11]61-65。在大學(xué)英語(yǔ)課堂學(xué)習(xí)中,對(duì)課文的理解應(yīng)該包含如下3個(gè)層次的內(nèi)容。
1.4.2 抗氧化指標(biāo)測(cè)定
分別稱取0.5 g胸肌、腿肌組織樣品于試管中,按1∶9比例加入4 ℃保存的0.9%生理鹽水4.5 mL進(jìn)行勻漿,整個(gè)過(guò)程都在冰浴中進(jìn)行,充分勻漿后置于4 ℃離心機(jī)3 500 r/min 離心10 min,取其上清液分裝于離心管,保存在-20 ℃。參照南京建成生物工程研究所有限公司提供的試劑盒說(shuō)明書的方法測(cè)定胸肌、腿肌上清液的蛋白濃度(考馬斯亮藍(lán)法)、丙二醛(MDA)含量、總抗氧化能力(T-AOC)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)的活性。
1.4.3 肉品質(zhì)測(cè)定
在試驗(yàn)第42 天從各重復(fù)籠中隨機(jī)挑選1 只肉仔雞進(jìn)行稱重,屠宰后取左側(cè)胸肌和腿肌,根據(jù)宋揚(yáng)等[15]的測(cè)定方法測(cè)定肉色、pH、剪切力和系水力等肉品質(zhì)指標(biāo)。
滴水損失(%)=(儲(chǔ)藏前肉樣重-儲(chǔ)藏后肉樣重)/儲(chǔ)藏前肉樣重×100
失水率(%)=(壓前肉樣重-壓后肉樣重)/壓前肉樣重×100
熟肉率(%)=熟肉重/生肉重×100
使用SAS 9.2 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)經(jīng)Microsoft Excel 2010整理后的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行線性關(guān)系回歸分析和ANVOVA 單因子方差分析,并采取Duncan’s 法進(jìn)行多重比較,判斷不同濃度AAP的添加效應(yīng)。P<0.01表示差異極顯著,0.01<P<0.05表示差異顯著。
由表2 可知,隨著AAP 添加劑量的遞增,試驗(yàn)前期肉仔雞的BWG 和21 d 的FBW 均呈顯著的一次線性增加(P<0.05);且方差分析結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,飼糧中添加750 mg/kg AAP顯著提高了肉仔雞42 d的FBW、試驗(yàn)全期的BWG 和試驗(yàn)后期的FE(P<0.05),極顯著提高了試驗(yàn)后期肉仔雞的BWG(P<0.01),而各處理組間其他指標(biāo)無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表2 AAP對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響
2.2.1 AAP對(duì)肉仔雞胸肌抗氧化指標(biāo)的影響
由表3 可知,隨著AAP 添加劑量的遞增,在試驗(yàn)42 d時(shí),肉仔雞胸肌中GSH-Px活性呈顯著的一次線性或二次曲線升高(P<0.05);且方差分析結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,飼糧中添加500、750 mg/kg 和1 000 mg/kg AAP 顯著提高了胸肌中GSH-Px 的活性(P<0.05),而各處理組間其他指標(biāo)無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表3 AAP對(duì)肉仔雞胸肌抗氧化指標(biāo)的影響
2.2.2 AAP對(duì)肉仔雞腿肌抗氧化指標(biāo)的影響
由表4 可知,隨著AAP 添加劑量的遞增,在試驗(yàn)42 d 時(shí),肉仔雞腿肌中MDA 含量呈顯著的一次線性降低(P<0.05),GSH-Px 活性呈顯著的一次線性或二次曲線升高(P<0.05);且方差分析結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,飼糧中添加750 mg/kg AAP 顯著提高了腿肌中GSH-Px 的活性(P<0.05),而各處理組間其他指標(biāo)無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表4 AAP對(duì)肉仔雞腿肌抗氧化指標(biāo)的影響
2.3.1 AAP對(duì)肉仔雞胸肌肉品質(zhì)的影響
由表5 可知,隨著AAP 添加劑量的遞增,在試驗(yàn)42 d時(shí),肉仔雞胸肌的亮度值(L*)和剪切力均呈顯著的一次線性或二次曲線降低(P<0.05);屠宰后45 min的胸肌pH 呈顯著的二次曲線升高(P<0.05);屠宰后48 h 的胸肌滴水損失呈一次線性或二次曲線極顯著降低(P<0.01);且方差分析結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,飼糧中添加750 mg/kg AAP顯著降低了胸肌的亮度值(P<0.05);500、750 mg/kg和1 000 mg/kg AAP組的胸肌剪切力顯著低于對(duì)照組(P<0.05);250、500、750 mg/kg和1 000 mg/kg AAP組宰后48 h的胸肌滴水損失顯著低于對(duì)照組(P<0.05),而各處理組間其他指標(biāo)無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表5 AAP對(duì)肉仔雞胸肌肉品質(zhì)的影響
2.3.2 AAP對(duì)肉仔雞腿肌肉品質(zhì)的影響
由表6 可知,隨著AAP 添加劑量的遞增,在試驗(yàn)42 d時(shí),肉仔雞腿肌的亮度值(L*)和剪切力均呈顯著的一次線性或二次曲線降低(P<0.05);腿肌紅度值(a*)呈極顯著的一次線性或二次曲線升高(P<0.01);屠宰后48 h的腿肌滴水損失呈一次線性或二次曲線極顯著降低(P<0.01);且方差分析結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,飼糧中添加500、750 mg/kg 和1 000 mg/kg AAP顯著提高了腿肌紅度值而宰后48 h的腿肌滴水損失顯著降低(P<0.05),各處理組間其他指標(biāo)無(wú)顯著差異。
表6 AAP對(duì)肉仔雞腿肌肉品質(zhì)的影響
青蒿等中草藥中的多糖、黃酮和揮發(fā)油等成分均有改善動(dòng)物機(jī)體代謝進(jìn)而促進(jìn)生長(zhǎng)的功能[16]。FBW、BWG、FI 和FE 等指標(biāo)可以直觀反映家禽的生長(zhǎng)性能。有研究表明,在飼糧中添加草本多糖可提高肉仔雞干物質(zhì)和氮的消化率進(jìn)而提高生長(zhǎng)性能[17]。此外,有研究發(fā)現(xiàn)在雪山草雞公雞飼糧中添加含黃花蒿的發(fā)酵粉和未添加黃花蒿的發(fā)酵粉進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),有黃花蒿組的試驗(yàn)雞14、21 d 體重、體增重均顯著增加,且添加水平為0.8%時(shí)更有利于其生長(zhǎng)[18]。曹楠等[19]發(fā)現(xiàn),將400 mg/kg 的白術(shù)多糖添加在飼糧中飼喂給嶺南黃雞后能夠顯著降低其平均日采食量和料重比,有提高總增重的趨勢(shì)。李文嘉等[20]發(fā)現(xiàn)把添加0.1%龍須菜多糖的飼糧喂給肉雞后其22~42 d 的末體重和ADG 均顯著增加,而采食量變化不顯著。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),隨著AAP 添加劑量的遞增,不同程度地提高了肉仔雞試驗(yàn)各期的BWG 和21、42 d 的FBW,且在飼糧中添加750 mg/kg AAP顯著提高了肉仔雞42 d的FBW 和試驗(yàn)全期的BWG,與王丹暉等[21]在肉雞飼糧中添加300~900 mg/kg 甘草多糖可不同程度地提高試驗(yàn)期的BWG 的研究結(jié)果相似,且與先前報(bào)道的黃花蒿水提物能夠有效改善試驗(yàn)各期肉仔雞的末體重,提高FE 的研究結(jié)果一致[12]。另有本試驗(yàn)結(jié)果,F(xiàn)I和肉雞初體重不顯著,這也與Long 等[22]在肉仔雞飼糧中添加刺五加多糖提取物對(duì)肉仔雞初體重和平均日采食量(ADFI)無(wú)顯著影響的研究結(jié)果相符。綜上,本試驗(yàn)說(shuō)明適宜劑量的AAP 具有促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)的作用,原因可能是AAP 中的多糖活性成分有促生長(zhǎng)功效,添加在飼糧中能夠補(bǔ)充機(jī)體所需的營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)腸道分泌更多的消化酶,進(jìn)而更有利于肉仔雞的健康生長(zhǎng)。
正常生物氧化產(chǎn)生的少量活性氧自由基可以調(diào)節(jié)細(xì)胞生成,是維持生命活動(dòng)所不可或缺的物質(zhì),但動(dòng)物屠宰后,肌肉中氧化反應(yīng)仍在進(jìn)行,自身抗氧化酶活性會(huì)隨宰后肌肉放置時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷降低,如果降到不能有效減少活性氧(ROS)對(duì)機(jī)體的損害時(shí)會(huì)攻擊細(xì)胞膜且禽肉中多不飽和脂肪酸和氨基酸含量高,容易引起脂質(zhì)過(guò)氧化造成氧化損傷,導(dǎo)致肌肉品質(zhì)劣變并產(chǎn)生潛在的有毒有害物質(zhì)從而威脅消費(fèi)者的健康[23]。此外,肉質(zhì)指標(biāo)能夠直觀反映肌肉脂質(zhì)氧化的程度,肉質(zhì)主要包括肉色、剪切力、保水力和pH等參數(shù),可以體現(xiàn)肌肉品質(zhì)的優(yōu)劣。pH能客觀體現(xiàn)動(dòng)物屠宰后肌肉中無(wú)氧糖酵解的速度,與肌肉的顏色、嫩度和保水力呈顯著負(fù)相關(guān),肉中pH 越高,剪切力越小,肉質(zhì)越嫩[24]。肉色包括亮度、紅度、黃度,能反映肌肉的新鮮度與肌肉中肌紅蛋白、血紅蛋白、肌內(nèi)脂肪和放置時(shí)間等有關(guān)。保水力通過(guò)滴水損失、蒸煮損失及壓力損失來(lái)判斷,水分損失越少說(shuō)明保水性越好,肉越多汁鮮嫩[25]。而過(guò)度氧化會(huì)破壞肌肉組織細(xì)胞膜的完整性,使肌肉中水分和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)流失,加速肌肉中氧合肌紅蛋白被氧化的速度使肉色由鮮紅色轉(zhuǎn)呈褐色,出現(xiàn)肉質(zhì)變硬不新鮮,肌肉色澤變差和保質(zhì)期縮短等特征,從而影響口感和消費(fèi)者的購(gòu)買欲望,而添加抗氧化物質(zhì)后,機(jī)體抗氧化能力提高,能夠改善肉仔雞的氧化應(yīng)激進(jìn)而提高了其肉品質(zhì)[26-27]。
CAT、SOD 和GSH-Px 等抗氧化酶能夠發(fā)揮協(xié)同作用一起清除過(guò)量的氧自由基,共同保護(hù)機(jī)體免受損傷從而維持良好的肌肉品質(zhì),而MDA 是脂質(zhì)過(guò)氧化物在機(jī)體內(nèi)的代謝產(chǎn)物,能致使細(xì)胞的多項(xiàng)功能無(wú)法發(fā)揮作用且其含量越高證明氧化損傷越嚴(yán)重[28]。已有研究報(bào)道,植物多糖能夠加強(qiáng)抗氧化酶活性,減少ROS的產(chǎn)生進(jìn)而減輕氧化損傷改善肉質(zhì),延長(zhǎng)肉品的貨架期[29]。楊耀翔[30]在肉雞飼糧中添加0.1%和0.2%苜蓿多糖均使宰后45 min 的胸肌pH 顯著增加,而24 h 后的胸肌pH 差異不明顯。另有研究表明,在肉雞飼糧中添加1、2、4 g/kg 大棗多糖后其胸肌和腿肌的失水率、滴水損失均降低,且胸肌的pH和紅度值均明顯增加,更有利于維持良好的肉品質(zhì)[31]。Long 等[22]的研究證明,將添加刺五加多糖提取物的飼糧飼喂肉雞后其血清中SOD和GSH-Px活性均增加,且MDA濃度降低從而更好的減少ROS 和自由基對(duì)肉雞造成的損傷。孫甜甜[32]在飼糧中添加枸杞粗多糖能顯著提高肉雞肝臟GSH-Px活性,降低MAD含量。本試驗(yàn)從肉質(zhì)理化指標(biāo)和抗氧化兩方面結(jié)合來(lái)探討AAP 對(duì)肉仔雞肌肉肉品質(zhì)的影響,本試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著AAP添加劑量的遞增,可以不同程度地降低肉仔雞胸肌、腿肌的L*值、剪切力和屠宰后48 h 的滴水損失以及腿肌中的MDA 含量,提高屠宰后45 min 的胸肌pH、腿肌a*值和胸肌、腿肌中的GSH-Px 活性,而胸肌和腿肌的pH24h、pH48h變化不顯著,這與前人的研究結(jié)果相符,而以上肉質(zhì)指標(biāo)與肌肉抗氧化能力有相關(guān)性,由此我們可以推測(cè)黃花蒿及其多糖成分具有抗氧化能力能夠改善肉品質(zhì),適宜劑量的AAP用作飼料添加劑有利于營(yíng)養(yǎng)成分積聚在肌肉組織中,通過(guò)提高肌肉的抗氧化酶活性,減少ROS 的形成進(jìn)而減緩肌肉中pH 降低和改善肌肉顏色,保護(hù)宰后肌肉細(xì)胞膜的完整性,提高肌肉保水力并防止肌質(zhì)中水分和營(yíng)養(yǎng)成分外流,增加肌肉的嫩度從而發(fā)揮肉質(zhì)保鮮和延長(zhǎng)肉品貨架期的作用。
在飼糧中添加750 mg/kg AAP 可提高肉仔雞21、42 d FBW及試驗(yàn)前期、后期和全期的BWG;通過(guò)提高肉仔雞胸肌、腿肌中的GSH-Px 活性,降低MDA 含量來(lái)提高肌肉抗氧化能力,且通過(guò)降低胸肌、腿肌的L*值、剪切力和滴水損失來(lái)提高肌肉系水能力和增加肌肉嫩度。