蔣云霞，羅偉生

廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧，530000

中醫(yī)學(xué)經(jīng)過(guò)幾千年的不斷地醫(yī)療實(shí)踐，累積了很多治療肝纖維化的經(jīng)驗(yàn)和文獻(xiàn)，眾學(xué)者通過(guò)對(duì)這些經(jīng)驗(yàn)及文獻(xiàn)進(jìn)行整理和研究發(fā)現(xiàn)，在治療肝纖維化的過(guò)程中，肝氣的條達(dá)通暢能深刻地影響疾病的發(fā)生發(fā)展，而疏肝理氣與化瘀理氣在肝纖維化的發(fā)展中具有十分重要的作用，許多具備此類功效的理氣類藥物具有治療肝纖維化的作用?，F(xiàn)將近年來(lái)理氣類藥物治療肝纖維化的研究進(jìn)展作一簡(jiǎn)要的總結(jié)論述。

1 疏肝理氣類藥物

1.1 香附韓廷廷［1］認(rèn)為，中藥香附的提取物竹節(jié)香附素A 呈劑量相關(guān)性地消除纖溶酶原激活物抑制劑1 對(duì)尿激酶型纖溶酶原激活劑活性的抑制作用，從而促進(jìn)纖溶過(guò)程，預(yù)防血栓的形成，在體內(nèi)條件下能夠?qū)Ω卫w維化有較好的治療作用。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實(shí)，香附提取物香附多糖在一定程度上具備抗氧化、抑制炎癥反應(yīng)的效用。尚雙艷等［2］通過(guò)注射牛血清白蛋白建立肝纖維化病鼠模型，予香附多糖灌胃給藥，其實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)各個(gè)劑量香附多糖處理組的大鼠肝纖維化病變程度均得到顯著改善。這種抗纖維化的作用可能與提高了血清基質(zhì)金屬蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）的水平和降低了具有抑制MMP-2活性的血清基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）水平有關(guān)。而MMP 具有促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）降解的效應(yīng)，可減少肝臟組織中的纖維增生從而達(dá)到減輕肝組織纖維化的目的。

1.2 荔枝核黃莎等［3］通過(guò)高通量篩選技術(shù)觀察23 種中藥提取物對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞T6 細(xì)胞株（hepatic stellate cell-T6，HSC-T6）的抑制作用發(fā)現(xiàn)，荔枝核乙醇提取物的石油醚萃部位、水飽和正丁醇部位、水萃取部位均可有效抑制HSC-T6的增殖，其中荔枝核石油醚萃部位抑制效果最為顯著。荔枝核提取物荔枝核總黃酮（total flavonoids of litchi seed，TFL）在治療肝纖維化疾病方面發(fā)揮重要的作用，因此眾多學(xué)者對(duì)TFL抗肝纖維化的作用機(jī)制及分子傳導(dǎo)通路進(jìn)行了大量實(shí)驗(yàn)研究。羅偉生等［4］認(rèn)為，TFL可降低肝纖維化病鼠的血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）及肝組織丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，提高超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）蛋白含量，并且下調(diào)了肝組織核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）的表達(dá)，這表明TFL 具備減少肝細(xì)胞破壞和逆轉(zhuǎn)肝纖維化病程的作用。曹杰［5］認(rèn)為，TFL抑制肝纖維化的作用機(jī)制在于其可通過(guò)降低Toll 樣受體4 和NF-κB 在人肝星狀細(xì)胞LX2 細(xì)胞株（hepatic stellate cell-LX2）內(nèi)的表達(dá)，并加速TGF-β1誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，從而也表明Toll 樣受體-白介素-1 受體（toll-like receptor-interleukin-1 receptor，TLR-IL-1R）炎癥通路與肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程密切相關(guān)，在之后的研究中可考慮通過(guò)抑制TLR-IL-1R 炎癥通路發(fā)揮逆轉(zhuǎn)肝纖維化病程的作用。張揚(yáng)武等［6］認(rèn)為，TFL在體外亦可通過(guò)提高HSC-T6 的過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferator activated receptorγ，PPAR-γ）活性與下調(diào)TGF-β1的水平從而減緩HSC-T6 的細(xì)胞增生繁殖速度，改善肝纖維化病變程度。歐士鈺等［7］認(rèn)為，TFL 可抑制MMP-2基因表達(dá)，MMP-2 可減少細(xì)胞外基質(zhì)的分泌，從而減少纖維組織的形成。黃旭平等［8］認(rèn)為，TFL可通過(guò)下調(diào)TGFβ-Ⅰ/Ⅱ型受體（TβRⅠ/Ⅱ）和Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原表達(dá)，從而改善二甲基亞硝胺法建模病鼠的肝纖維化病理改變，并減少HSC 的增殖及肝組織膠原纖維蛋白的生成。何志國(guó)等［9］發(fā)現(xiàn)，TFL呈劑量相關(guān)性減少病鼠在肝組織中的Toll樣受體2、Toll 樣受體4 蛋白含量，從而發(fā)揮抑制炎癥反應(yīng)，延緩膽管阻塞型肝纖維化病程的作用。亦有研究認(rèn)為，TFL 與水飛薊賓同樣具有良好的抗肝纖維化的作用，此機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào)血小板衍生生長(zhǎng)因子（platelet derived growth factor，PDGF）及腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）的mRNA表達(dá)以實(shí)現(xiàn)的［10］。

1.3 小茴香甘子明等［11］采用四氯化碳（carbon tetrachloride，CCl4）復(fù)合因素法造模，其實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)肝纖維化模型大鼠采用小茴香預(yù)防性用藥后，其肝功能較前改善，血清MDA 明顯降低，羥脯氨酸（hydroxyproline，HYP）明顯升高，肝組織病理結(jié)果顯示炎癥程度較前明顯緩解，證明小茴香可起到改善肝纖維化病變程度的作用。其機(jī)制可能與小茴香抑制肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)及多種細(xì)胞因子的合成與分泌，并使MMPs 的活性增強(qiáng)從而減少膠原纖維的產(chǎn)生有關(guān)。吳小川等［12-13］發(fā)現(xiàn)，小茴香可使病鼠肝組織中的膠原纖維含量及TGF-β1水平明顯下降，從而治療肝纖維化及逆轉(zhuǎn)肝纖維化的發(fā)展進(jìn)程。劉玉平等［14-15］認(rèn)為，小茴香呈劑量依賴性地減少TNF-α 和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（connective tissue growth factor，CTGF）的表達(dá)量而減少纖維組織的生成，發(fā)揮改善炎癥及纖維化的作用。范強(qiáng)等［16］發(fā)現(xiàn)，不同劑量的小茴香均可使病鼠血清總蛋白、白蛋白含量及SOD活性提高，血清ALT、AST、HYP與MDA含量下降，從而改善肝臟組織炎癥與肝纖維化。張澤高等［17］認(rèn)為，小茴香提取物治療肝纖維化的效用機(jī)制是由于其抑制TGF-β信號(hào)通路及下游的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子SMAD（drosophila mothers against decapentaplegic protein，SMAD）而減少HSC的生成及纖維組織的增生。

1.4 柴胡謝東浩等［18］認(rèn)為，春柴胡與北柴胡均可通過(guò)抑制肝細(xì)胞的異常凋亡、減少正常肝組織損害達(dá)到治療肝纖維化的作用，而春柴胡療效較低于北柴胡。何燕等［19］以柴胡提取物柴胡皂苷（saikosaponin，SS）最具有活性的成分柴胡皂苷d（saikosaponin d，SSd）預(yù)防性給藥予肝纖維化大鼠時(shí)發(fā)現(xiàn)，SSd 可促進(jìn)病鼠肝組織SOD 的表達(dá)，并降低血清ALT、AST、MDA 及肝纖四項(xiàng)指標(biāo)如透明質(zhì)酸、血清Ⅲ型前膠原氨端肽、血清Ⅳ型膠原蛋白、層黏連蛋白的含量，結(jié)果表明SSd 可抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)、減少正常肝細(xì)胞凋亡及肝纖維組織的增生。LEE等［20-21］研究發(fā)現(xiàn)，柴胡可抑制肝炎及肝星狀細(xì)胞活化，并認(rèn)為這種抑制作用機(jī)制可能與上調(diào)PPAR-γ表達(dá)相關(guān)。其也發(fā)現(xiàn)SS 能抑制蛋白激酶B/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶的磷酸化和NF-κB活性，從而發(fā)揮抗肝纖維化的作用。楊潔等［22］認(rèn)為，柴胡可抑制HSC 增殖活化，其作用機(jī)制可能與降低TGF-β1、PDGF 及TIMP-1/MMP-1 水平有關(guān)。郭景珍等［23］認(rèn)為，SSd 通過(guò)升高血清白細(xì)胞介素10、一氧化氮（nitric oxide，NO）和降低血清TNF-α的水平減輕肝細(xì)胞應(yīng)激氧化反應(yīng)，發(fā)揮保護(hù)肝細(xì)胞的作用。此外，SSd亦可通過(guò)TGFβ/Smad信號(hào)通路下調(diào)HSC-T6 的TGFβ1、Smad3 的表達(dá)以減少細(xì)胞ECM 的生成，并上調(diào)肝細(xì)胞保護(hù)性因子Smad7 mRNA的表達(dá)達(dá)到抗纖維化的作用［24］。

2 化瘀理氣類藥物

2.1 郁金黃小鷗等［25］通過(guò)皮下注射CCl4溶液建立大鼠肝纖維化模型，認(rèn)為桂郁金呈劑量依賴性地使ALT、AST、Ⅲ型前膠原含量下降，發(fā)揮保肝降酶、改善蛋白質(zhì)合成的作用。研究表明，桂郁金抗肝纖維化的作用機(jī)制可能與抑制TGF-β1/Smad信號(hào)傳導(dǎo)通路有關(guān)［26］。秦華珍等［27］研究發(fā)現(xiàn)，郁金能顯著減少肝組織中的HYP、MDA 的含量，增加SOD 及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的含量，發(fā)揮護(hù)肝和改善肝纖維化的作用。彭岳等［28］認(rèn)為，桂郁金提取物呈劑量依賴性地抑制HSC-LX2 增殖，減少纖維組織增生，減緩肝纖維化病變進(jìn)程。劉雪梅等［29］研究發(fā)現(xiàn)，桂郁金提取物可通過(guò)抑制HSCLX2 的增殖從而減少Ⅰ型和Ⅲ型膠原的分泌，并加強(qiáng)MMP-1 及MMP-13 的分泌，發(fā)揮促進(jìn)纖維蛋白降解、減少結(jié)締纖維組織生成的效應(yīng)，但這種效應(yīng)呈劑量依賴性。

2.2 姜黃近年的研究發(fā)現(xiàn)植物姜黃根莖中存在的一種天然色素——姜黃素具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎及抗病毒等生物學(xué)活性，其在抗肝纖維化方面具有良好的療效［30］。而姜黃素可通過(guò)降低肝纖維化大鼠血清中升高的ALT、AST、HYP、MDA、NO的含量發(fā)揮治療大鼠肝纖維化的作用［31］。趙珍東［32］認(rèn)為，姜黃素可抑制HSC 中的血小板衍生生長(zhǎng)因子-BB（platelet derived growth factor-BB，PDGF-BB）、血小板衍生生長(zhǎng)因子受體β及下調(diào)ERK 的表達(dá)，從而抑制成纖維細(xì)胞及膠質(zhì)細(xì)胞的分裂增生以改善纖維化。吳雄健等［33］認(rèn)為，姜黃素可在不同程度上降低血清內(nèi)毒素、組織內(nèi)活性氧類物質(zhì)及肝組織中MDA、NF-κB、TGF-β1、PDGF-BB、CTGF、TIMP-1 的含量與活性，并通過(guò)多種機(jī)制預(yù)防肝纖維化的發(fā)生發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素可以通過(guò)絲裂原活化蛋白激酶/信號(hào)通路抑制細(xì)胞外信息調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2、c-Jun 氨基末端激酶、p38絲裂原活化蛋白激酶的激活，并減少多種炎癥反應(yīng)因子的表達(dá)，達(dá)到保護(hù)肝細(xì)胞的作用［34］。

2.3 莪術(shù)現(xiàn)代研究顯示，莪術(shù)的活性成分為揮發(fā)油類，莪術(shù)油中的主要成分為多種倍半萜類物質(zhì)，如莪術(shù)酮、莪術(shù)醇、欖香烯、姜黃素等［35］。熊振芳等［36］認(rèn)為，莪術(shù)提取物藥物血清在一定程度上可起到鈣通道阻滯的作用，其可抑制PDGF 誘導(dǎo)的HSC細(xì)胞內(nèi)Ca2+內(nèi)流及磷脂酰肌醇3-激酶的表達(dá)，減少HSC 的活化與增殖，達(dá)到治療肝纖維化的效應(yīng)。江遠(yuǎn)等［37］、聶廣等［38］從分子層面解釋莪術(shù)提取物治療肝纖維化的效應(yīng)：莪術(shù)醇可抑制HSC-T6的TGF-β1、細(xì)胞色素P450a 表達(dá)，莪術(shù)油可抑制HSC-T6的TIMP-2、白細(xì)胞介素6表達(dá)，而這些細(xì)胞因子及蛋白均參與了肝纖維化的形成過(guò)程。胡勝軍等［39］認(rèn)為，莪術(shù)提取物β-欖香烯亦可起到治療肝纖維化的作用，其可通過(guò)抑制HSC 增殖活化，抑制肝組織中的TGF-β1、平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)，從而抑制ECM 的分泌與纖維組織的形成并逆轉(zhuǎn)肝纖維化的病程發(fā)展。劉雪梅等［40］認(rèn)為，桂莪術(shù)提取物可通過(guò)降低HSC-LX2 中的I 型膠原合成，增強(qiáng)HSC-LX2 中MMP-1 基因表達(dá)，減少HSC 的生成與活化，從而發(fā)揮治療肝纖維化作用。

3 小結(jié)與展望

中醫(yī)對(duì)于治療肝纖維化具有獨(dú)特且有效的理解，而肝纖維化的形成與肝氣郁滯關(guān)系密切。故而具有理氣作用的中藥如香附、荔枝核、小茴香、郁金、姜黃、莪術(shù)等在抗肝纖維化的方面均具有良好的表現(xiàn)。通過(guò)多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，目前各不同的理氣藥物其主要信號(hào)作用靶點(diǎn)主要在炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、纖維增生等相關(guān)通路上，通過(guò)不同的作用靶點(diǎn)發(fā)揮抗肝纖維化的作用，但由于各藥物對(duì)肝纖維化的藥理效應(yīng)仍缺乏準(zhǔn)確細(xì)致的分子機(jī)制及完整的自上而下的級(jí)聯(lián)信號(hào)傳導(dǎo)反應(yīng)，故而仍難以完整的形成對(duì)某一藥物的全面認(rèn)識(shí)。此外，目前對(duì)各中藥的研究仍較多停留在藥物的粗提取物上，缺乏對(duì)中藥提取的單一化合物的精確藥理作用認(rèn)識(shí)，一些對(duì)疾病無(wú)治療作用的物質(zhì)未得以祛除，隨著時(shí)代科技的發(fā)展，在之后的研究與實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，各學(xué)者應(yīng)立足于中醫(yī)理論與古籍論述，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)完善各中藥的藥理生物學(xué)實(shí)驗(yàn)與臨床研究，更為全面準(zhǔn)確地深入探討各味中藥是否具有治療肝纖維化的效用及其具體完整的相關(guān)作用機(jī)制，并將其合理運(yùn)用到之后的中藥研制與開(kāi)發(fā)當(dāng)中。