高 天，杜冬華，2，哈斯蘇榮，3

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部動物疾病診療技術(shù)重點實驗室，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；2.河北北方學(xué)院動物科技學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點實驗室，河北 張家口 075131；3.內(nèi)蒙古駱駝研究院，內(nèi)蒙古 阿拉善右旗 750300）

肝損傷類型很多，按病因可分為化學(xué)性肝損傷、藥物性肝損傷、免疫性肝損傷、酒精性肝損傷、病毒性肝損傷和肝臟部分切除術(shù)等。肝臟是特殊的免疫器官，含肝巨噬細胞、肝血竇內(nèi)皮細胞、樹突狀細胞、肝星狀細胞（hepatic stellate cell，HSC）以及膽管細胞等。發(fā)生肝損傷時，肝細胞表面表達死亡受體，免疫細胞表達死亡配體，這些死亡配體和死亡受體在不同的肝損傷中相互作用導(dǎo)致肝細胞死亡。在此期間，肝細胞、中性粒細胞和巨噬細胞產(chǎn)生高水平的活性氧 （reactive oxygen species，ROS），增強了氧化應(yīng)激（oxidative stress,OS），直接引起細胞毒性［1］。OS 常常伴隨炎癥反應(yīng)的加劇，炎癥反應(yīng)是許多疾病的共同表現(xiàn)，肝巨噬細胞和浸潤性巨噬細胞被激活，然后通過分泌趨化因子，如轉(zhuǎn)化生長因子-β1 （transforming growth factor-β1，TGF-β1）等，激活HSC，加劇初始肝損傷?；罨腍SC 不僅可以轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞，加快慢性肝纖維化的進展，而且HSC 中的NADPH 氧化酶（NADPH oxidase，NOX）和線粒體呼吸通過產(chǎn)生ROS 參與肝臟炎癥和纖維化［2］。

駱駝是生活在荒漠、半荒漠戈壁草原的動物，其分為3 個種屬：單峰駝、雙峰駝和野駱駝（野生雙峰駝）。中國是雙峰駝的主要分布區(qū)域之一，集中分布于內(nèi)蒙古、新疆、寧夏、甘肅等省區(qū)的荒漠和半荒漠草原。駱駝足底厚實，適合在沙漠中行走，背有肉峰，用于積蓄脂肪，胃里的水脬可以貯水，所以耐饑渴，較長時間無需飲食，所以被稱為“沙漠之舟”。因此，駱駝從古代就作為役畜，以供馱運和騎乘［3-4］。

目前，可用于治療肝損傷的藥物選擇仍舊有限，而且會產(chǎn)生某些副作用。據(jù)報道，家畜奶在預(yù)防和治療各種疾病方面具有較好的效果，其中駝乳（camel milk,CM）是最佳的候選天然奶之一。CM是牧民傳統(tǒng)的飲品和食品，除了可以做成奶茶外，還可以做成奶酪、酸奶等，在牧區(qū)的飲食和經(jīng)濟結(jié)構(gòu)中擁有重要地位，被稱作“沙漠中的白金”，其具有獨特的成分，脂肪含量高，產(chǎn)熱量大，富含蛋白質(zhì)、維生素和微量元素，如鎂、鋅、錳和硒等。此外，CM 促進B 族維生素、VC 和VE 的吸收和代謝，這些維生素對細胞的氧化應(yīng)激損傷具有保護作用。CM 的總蛋白含量較高，高于牛乳，其主要成分是酪蛋白和駱駝乳清蛋白 （camel whey protein,CWP），現(xiàn)階段的研究證明CWP 是一種強大的天然抗氧化劑，其抗氧化作用遠超牛乳清蛋白［5］。

CM 富含多種抗氧化成分，具有抗氧化作用，對不同的肝損傷具有不同程度的保護作用。第一，CWP 可通過增加谷胱甘肽（glutathione，GSH）和抗氧化酶的表達降低氧化應(yīng)激和組織損傷［6］，CWP中缺乏易引起幼齡動物和嬰幼兒過敏反應(yīng)的β-乳球蛋白（β-lactoglobulin，β-LG）；第二，CM 富含抗氧化生物活性肽，具有顯著的抗氧化作用，已證明CM 具有清除自由基的能力［7］；第三，CM 中富含的多種礦物質(zhì)，如鐵、鈉、鎂，以及含量較高的維生素C 同樣可以作為抗氧化劑清除自由基，具有抗OS 的功效［8］。因此，該研究圍繞CM 對上述各種肝損傷的抗炎和抗OS 作用展開綜述，以期為其他學(xué)者進行后續(xù)研究提供線索，為CM 的推廣提供相關(guān)參考。

1 駝乳對化學(xué)性肝損傷的保護作用

1.1 駝乳對四氯化碳引起的肝損傷的保護作用

四 氯 化 碳（tetrachloride，CCl4）是 一 種 劇 毒 揮發(fā)性液體，在工業(yè)和家庭中均用作滅火劑、溶劑、清潔劑和脫脂劑。人接觸的主要途徑是吸入和皮膚接觸，例如，打掃衛(wèi)生時把清潔劑和漂白劑混合使用，會釋放大量含氯氣體，造成吸入中毒；泡洗抹布擦拭家具會接觸中毒；長時間在金屬冶煉車間工作或者紡織車間工作和打掃衛(wèi)生也可能引起吸入中毒［9-10］。

CCl4誘導(dǎo)的肝損傷是比較經(jīng)典的肝病模型，CCl4經(jīng)細胞色素藥物代謝酶（CYP2E1、CYP2B1 或CYP2B2）代謝形成三氯甲基自由基，三氯甲基自由基結(jié)合細胞膜上磷脂分子，引起脂質(zhì)過氧化。丙二醛（malondialdehyde，MDA）是脂質(zhì)過氧化形成的最終產(chǎn)物，可損傷細胞膜、加重肝臟損傷程度，導(dǎo)致肝細胞變性甚至壞死。一氧化氮（nitric oxide，NO）可促進自由基產(chǎn)生，加重氧化應(yīng)激，因此MDA和NO 含量水平可間接表明肝組織脂質(zhì)過氧化的程度［11］。CCl4不僅引起脂質(zhì)過氧化，還可以激活Toll 樣 受 體4/核 因 子-kB （Toll-like receptor 4,TLR4/nuclear factor-κB,NF-κB）炎癥信號通路，引起NF-κB 蛋白過度表達，激活淋巴細胞，釋放促炎因子，如腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factorα，TNF-α）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）等，形成正反饋回路，增強炎癥信號，進一步加重肝細胞凋亡、炎癥細胞浸潤，使得肝組織炎癥反應(yīng)惡性循環(huán)［12］。

研究證明，CCl4所致肝損傷患者服用駝乳一段時間后肝功能會得到一定程度的改善，這與發(fā)酵駝乳具有抗炎作用和免疫調(diào)節(jié)作用，以及消除自由基，抑制脂質(zhì)過氧化有關(guān)［13］。不僅發(fā)酵駝乳有此作用，鮮駝乳中富含的氨基酸和氨基酸與鈣形成的螯合物能夠增強機體的抗氧化能力，尤其是半胱氨酸和甲硫氨酸能夠有效提高肝臟的GSH含量；CWP 具有清除超氧化物、羥基自由基和抑制脂類氧化的作用，通過加強細胞抗氧化能力，對肝細胞起到一定的保護作用，其通過改善CCl4造成的細胞變性和壞死，修復(fù)壞死的肝組織［14］。

1.2 駝乳對甲氰菊酯引起的肝損傷的保護作用

擬除蟲菊酯類殺蟲劑（pyrethroid insecticides）是世界上廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、獸醫(yī)和家庭日常生活中的殺蟲劑，屬于吡咯類藥物。由于其在生產(chǎn)生活中使用頻繁，且人易與之接觸，所以相關(guān)研究人員仍在探索吡咯類藥物的危害和作用方式，一般情況下，人類接觸吡咯類藥物通過飲水、食物等途徑。在室內(nèi)使用吡咯類藥物殺蟲劑，使其在空氣中長期殘留，在住宅和食物等經(jīng)?？蓹z測出吡咯類藥物，所以，應(yīng)該考慮其積累風(fēng)險［15］。甲氰菊酯（fenpropathrin，F(xiàn)NP）是α-氰基吡咯的一種，表現(xiàn)出神經(jīng)毒性反應(yīng)，其作為殺蟲劑，用于棉花、土豆等農(nóng)作物的蟲害控制，廣泛使用FNP 所帶來的危害是其殘留物在其他生物體內(nèi)積累，并且增加了人類在工作時的接觸風(fēng)險，特別是農(nóng)民和溫室工人［16］。此類殺蟲劑對經(jīng)濟進步和公共衛(wèi)生有重要作用，但是，其對環(huán)境健康的危害也同樣不容忽視，特別是此類藥物有可能產(chǎn)生遺傳毒性。

FNP 可誘導(dǎo)大鼠的DNA 損傷和細胞凋亡，F(xiàn)NP 暴露大鼠血清中OS 相關(guān)生物標(biāo)志物顯著增加。OS 是體內(nèi)氧化和抗氧化作用失衡的一種狀態(tài)，也是FNP 暴露固有不良反應(yīng)的潛在機制。FNP暴露導(dǎo)致血清中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和過氧化氫酶（catalase，CAT）活力顯著升高，MDA 和蛋白質(zhì)羰基 （protein carbonyl，PCO）的濃度升高，GSH 血清水平顯著下降。先前的研究認為，MDA 濃度的顯著升高與ROS 的生成增加有關(guān)，吡咯烷酮的代謝過程中可能會產(chǎn)生ROS，從而觸發(fā) 脂質(zhì)過氧化［17］。不僅如此，肝臟CYP1A1 基因表達在FNP 暴露大鼠中上調(diào)，可能由于FNP 與CYP1A1 競爭結(jié)合代謝相關(guān)的酶，且含α-氰基的FNP 更加敏感，F(xiàn)NP 暴露后觀察到的肝臟DNA 損傷，可能是自由基攻擊DNA 所產(chǎn)生的后果［18］。

CM 可治療由FNP 暴露引起的肝臟DNA 損傷與氧化應(yīng)激。CM 可以顯著增加血清GSH 含量，顯著降低由FNP 誘導(dǎo)升高的SOD、CAT、MDA、PCO 水平，CM 處理還可使CYP1A1 基因表達顯著下調(diào)，這歸因于CM 在蛋白質(zhì)水平上可以改變CYP1A1 mRNA 表達方式。CM 也可以發(fā)揮對肝臟DNA 損傷的調(diào)節(jié)作用，這可能與CM 的乳鐵蛋白和高水平的VC 有關(guān)［19］。所以，CM 可以改善FNP殺蟲劑引起的OS 和遺傳毒性結(jié)果。

2 駝乳對酒精性肝損傷的保護作用

長期或者大量飲酒會引起酒精性肝?。╝lcoholic liver disease，ALD），其癥狀包括可逆的脂肪變性和危及生命且不可逆的肝硬化，以及極少數(shù)情況下發(fā)生癌變。酒精誘導(dǎo)的肝損傷一直是研究的焦點，其誘發(fā)因素也很多，其中，大量或者長期飲酒是直接誘發(fā)因素。另外，空腹飲酒、肥胖人群飲酒和本身患有肝病的人飲酒會加劇酒精性肝損傷的發(fā)生。雖然酒精性肝損傷的發(fā)病原因明確，但其發(fā)病機制還不完全清楚，目前，氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、脂肪變性和腸道微生物群紊亂被認為是ALD 的主要原因［20］。

乙醇在體內(nèi)代謝主要有兩條途徑：其一是在肝臟中經(jīng)乙醇脫氫酶 （alcohol dehydrogenase，ADH）代謝轉(zhuǎn)化成乙醛，釋放大量的氫離子，大量的氧化型輔酶 （NAD+）轉(zhuǎn)變?yōu)檫€原型輔酶Ⅰ（nicotinamide adenine dinucleotide，NADH），破壞正常的氧化還原反應(yīng)，產(chǎn)生大量的自由基，破壞細胞的結(jié)構(gòu)和功能，由此造成肝損傷，降低對脂肪酸的氧化能力，導(dǎo)致脂肪堆積。不僅如此，NADH/NAD+的比值還能夠反映肝臟氧化還原狀態(tài)［21］。其二是在肝臟中經(jīng)肝微粒體酶細胞色素P4502E1（CYP2E1）代謝，造成GSH 的減少和CYP2E1 的活化，經(jīng)乙醇誘導(dǎo)活化后的CYP2E1 會產(chǎn)生大量的ROS，加重肝細胞的OS、脂質(zhì)過氧化和炎性因子的釋放，最終導(dǎo)致肝細胞壞死或者凋亡［22］。

CM 可改善酒精性肝損傷。目前還沒有特定的藥物或療法可以逆轉(zhuǎn)人類ALD 的進展，戒酒是ALD 最有效和無毒的治療方法。隨著研究的深入，針對ALD 的實驗性營養(yǎng)策略逐漸增多，因為此類方法比服用合成藥物的副作用更小，所以受到越來越多的關(guān)注［23］。在游牧地區(qū)的傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)實踐中，CM 是可以保護肝臟的，CM 不僅可以防止酒精誘導(dǎo)的結(jié)腸功能障礙和脂質(zhì)積聚，還可以調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激和炎性細胞因子的產(chǎn)生，從而防止小鼠慢性ALD。CM 富含乳鐵蛋白，其通過降低肝細胞內(nèi)的甘油三酯（triacylglycerol，TG）含量，改善脂肪變性，通過誘導(dǎo)產(chǎn)生大量抗炎因子，抑制促炎因子的釋放［24］。

3 駝乳對熱應(yīng)激所致肝損傷的保護作用

熱應(yīng)激（heat stress，HS）是一種非特異性的身體反應(yīng)，由體核溫度的病理性升高引起，長期暴露在高溫環(huán)境中會導(dǎo)致HS，甚至死亡。在牲畜中，HS可導(dǎo)致繁殖率下降，以及牛奶和肉類產(chǎn)量減少，從而造成巨大的經(jīng)濟損失。預(yù)防HS 的管理措施，包括改善圈舍條件、應(yīng)用不同的營養(yǎng)方案或培育耐熱品種［25］。

研究表明，HS 誘發(fā)的體溫升高和代謝紊亂會引起細胞內(nèi)ROS 的含量增多。當(dāng)產(chǎn)生的ROS 超出了機體抗氧化防御機制所能承受的極限時，就會導(dǎo)致OS 的發(fā)生。OS 會損傷細胞成分，包括核酸、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，造成細胞內(nèi)DNA 突變、脂質(zhì)過氧化和PCO 等不良后果，進而造成氧化損傷，如果沒有及時采取有效的處理方案，這種反應(yīng)會引起嚴重的后果［26］。HS 不僅會直接造成機體的損傷，其抑制機體免疫系統(tǒng)同樣造成嚴重后果，會增加動物的患病致死率和流行病暴發(fā)的潛在風(fēng)險［27］。

肝損傷是HS 病理中最常見且致命的并發(fā)癥，其機制涉及氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)。天然抗氧化劑因其具有安全、有效和廉價等特性被廣泛用于某些疾病的輔助治療。CWP 是一種強大的天然抗氧化劑，其通過降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶 （glutamic-pyruvic transaminase，GPT）和IL-1β 水平，恢復(fù)體核溫度，防止肝臟中的細胞凋亡和組織病理學(xué)改變來發(fā)揮作用，通過防止炎性小體被激活，進而減少HS 誘導(dǎo)的大鼠肝臟炎癥［28］。不僅如此，CWP 可以顯著降低AST、GPT 水平，通過調(diào)節(jié)GSH、SOD、CAT等，控制OS 的發(fā)展，呈劑量依賴性降低ROS 和MDA 水平，最終緩解HS 所致的肝損傷［28-29］。

4 駝乳對糖尿病肝損傷的保護作用

糖尿病是世界范圍內(nèi)越來越嚴重的健康問題，可細分為1 型糖尿病（type 1 diabetes mellitus，T1DM）和2 型糖尿病 （type 2 diabetes mellitus ，T2DM）。其發(fā)病與生活方式和復(fù)雜的代謝紊亂有關(guān)，主要由胰島素抵抗 （insulin resistance，IR）引起，隨著疾病的發(fā)展，機體組織或血管損傷隨之發(fā)生，導(dǎo)致嚴重的糖尿病并發(fā)癥，如視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)病變、腎病、心血管并發(fā)癥和潰瘍等。IR 引起的胰島素信號受損和胰島素敏感性降低與糖尿病的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切［30］。

肝臟在維持代謝內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定、控制葡萄糖和脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)方面起著至關(guān)重要的作用，肝臟損傷是糖尿病的一種嚴重并發(fā)癥。IR 可引起葡萄糖穩(wěn)態(tài)失衡和脂質(zhì)積聚，從而導(dǎo)致肝臟胰島素不敏感［31］。糖尿病患者肝臟受損時，肝細胞的抗氧化酶活性降低，并產(chǎn)生大量氧自由基，導(dǎo)致OS，肝臟脂質(zhì)過氧化，肝臟中的MDA 水平顯著升高，SOD 和谷胱甘肽過氧化物酶 （glutathione peroxidase，GSH-Px）水平降低，組織病理學(xué)特征顯著改變。不僅如此，糖尿病通常被認為是一種促炎癥狀態(tài)，OS會增加和刺激炎性細胞因子的釋放，而細胞炎性因子的釋放會誘發(fā)全身炎癥，加速糖尿病的發(fā)展和糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生［32］。

治療糖尿病的方法有很多，非藥理學(xué)方法包括飲食、運動和減肥；藥理學(xué)方法包括胰島素分泌促進劑、胰島素增敏劑和α-葡萄糖苷酶抑制劑，由于需要考慮將副作用降到最低，糖尿病患者通常更喜歡使用非藥理學(xué)方法替代藥物［33］。

CM 可以提升胰島素濃度，抑制糖異生，促進糖原合成，對糖尿病具有改善作用。治療糖尿病時，CM 中的鎂可以保護細胞免受ROS 的侵害，并幫助吸收B 族維生素、VC 和VE，這些維生素具有抗氧化作用。CM 還能增強腎臟、肝臟和紅細胞中抗氧化酶的表達，牛奶或水牛奶在增強腎臟、肝臟和紅細胞抗氧化酶方面要么沒有作用，要么作用很?。?4］。不僅如此，CWP 能夠降低糖尿病小鼠的血糖水平和自由基二苯基吡啶酰（diphenylpicrylhydrazyl，DPPH）水平，抑制脂質(zhì)過氧化，保護中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central neural system ，CNS）神經(jīng)元免受氧化應(yīng)激，改善糖尿病小鼠的神經(jīng)癥狀，還可顯著改善糖尿病大鼠的組織病理學(xué)，降低MDA 水平，并恢復(fù)SOD 和GSH-Px 活性，降低血清炎癥細胞因子（如IL-6 和TNF-α）水平。CWP 增強SOD 和GSH-Px 的活性有助于清除氧自由基，降低氧化應(yīng)激，從而減少炎癥因子的釋放，改善肝細胞損傷［35］。因此，CM 治療可以通過減少肝臟氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)來保護肝臟。

5 小結(jié)

綜上所述，各類肝損傷的發(fā)病機制涉及氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，且各類肝損傷涉及的炎癥反應(yīng)主要是無菌性炎癥。CM/CWP 因兼有強大的抗氧化和抗炎作用，所以具有抗肝損傷的潛在價值。然而，駝乳抗肝損傷的作用機制尚未完全闡明，相關(guān)研究數(shù)據(jù)很少，極大限制了其臨床轉(zhuǎn)化及應(yīng)用，其確切有效成分亦有待進一步研究。因此，未來一方面可以將研究范圍擴大到無菌性炎癥的信號通路，高遷移率族蛋白B1（high mobility group protein B1，HMGB1）是無菌性炎癥的一種重要炎癥介質(zhì)，可以進一步探索CM 對各種肝損傷的保護作用是否與調(diào)節(jié)HMGB1 有關(guān)，對其相應(yīng)受體及下游多種基因的轉(zhuǎn)錄和表達有何影響；另一方面可以探索CM 中其他組成成分是否發(fā)揮了對肝損傷的保護作用、如何發(fā)揮保護作用，從而促進CM 在保健品及畜牧獸醫(yī)生產(chǎn)中的應(yīng)用。