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        聯(lián)合檢測ANuA、Anti-ds-DNA、anti-P和Anti-sm在SLE伴腎損害患者中的診斷價值

        2023-03-02 01:35:42王立鼎唐曉磊秦嫚
        分子診斷與治療雜志 2023年1期
        關(guān)鍵詞:檢測研究

        王立鼎 唐曉磊 秦嫚

        系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種慢性炎癥性自身免疫性疾病,多見于女性,發(fā)病高峰期為15 至40 歲。SLE 的臨床表現(xiàn)復雜,可對皮膚、關(guān)節(jié)、腎臟和中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成損害腎臟損傷最為嚴重,若不及時治療會導致腎衰竭,增加患者病死風險[1]。因此,尋找腎損害預測指標對SLE 腎損害的早期診斷及判斷患者病情活動度意義重大。SLE 的特點是存在多種自身抗體,自身抗體直接或通過免疫復合物形成介導不同器官的炎癥和損傷,與疾病進展、活動性和臨床表現(xiàn)密切相關(guān)。有研究表明,抗核糖體P 蛋白(anti-ribonucleoproteinantibody,anti-P)可導致腎小球基底膜破壞,與腎功能損傷密切相關(guān)[2]。抗雙鏈DNA 抗體(anti-doublestrain DNAantibody,Antids-DNA)、抗核小體抗體(anti-nucleosome antibody,ANuA)與SLE 疾病活動度密切相關(guān),參與疾病的發(fā)生與發(fā)展。鑒于上述指標與SLE 腎功能損害及疾病進展的關(guān)系,提示它們可應用于SLE 伴腎損害患者的早期診斷[3]。因此,本研究將ANuA、Anti-ds-DNA、anti-P 和Anti-sm 聯(lián)合檢測,旨在探究其在SLE 伴腎損害患者中的診斷價值。

        1 對象與方法

        1.1 研究對象

        選取2019年1月至2022年4月黃山市人民醫(yī)院收治的SLE 患者163 例為研究對象,根據(jù)患者是否合并腎損害分為SLE 組(n=55)與SLE 伴腎損害組(n=108)。納入標準:①符合《系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷及治療指南》[4]中SLE 的診斷標準并確診;②腎損害診斷標準[5]:持續(xù)性蛋白尿(>0.5 g/d 或>+),出現(xiàn)血尿或管型尿;③患者知情并簽署同意書。排除標準:①合并類風濕性關(guān)節(jié)炎等其他免疫系統(tǒng)疾??;②患有神經(jīng)系統(tǒng)疾病,如意識障礙、帕金森等,無法配合研究;③近一個月內(nèi)服用過免疫抑制藥物或糖皮質(zhì)激素;④肝功能障礙。SLE組男19 例,女36 例;年齡17~80 歲,平均年齡(49.93±14.73)歲。SLE 伴腎損害組男32 例,女76例;年齡19~86 歲,平均年齡(50.89±14.12)歲。兩組性別、年齡等一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究經(jīng)黃山市人民醫(yī)院醫(yī)學倫理會審批并通過(倫理批號:2022-C-012)。

        1.2 抗體檢查方法

        于研究對象入院次日清晨采集空腹肘正中靜脈血5 mL,注入不含抗凝劑的分離膠試管中混勻后于室溫靜置30 min,3 000 r/min 離心10 min(離心半徑10cm),保存于4℃冰箱中待測。Anti-sm 采用歐蒙印跡法進行檢測,ANuA 采用ELISA 法檢測,Anti-P 采用歐蒙印記法進行檢測,Anti-ds-DNA 采用間接免疫熒光法(IIF)檢測,試劑盒由德國歐蒙醫(yī)學診斷實驗有限公司提供,嚴格按試劑盒進行操作。

        1.3 統(tǒng)計學方法

        采用SPSS Statistics 21 統(tǒng)計學軟件進行分析。計量資料以()表示,采用t檢驗;計數(shù)資料以n(%)表示,采用χ2檢驗。采用多因素Logistic 回歸分析SLE 伴腎損害的獨立影響因素,ROC曲線分析各指標診斷價值,曲線下面積值(AUC)的比較采用非參數(shù)檢驗,P<0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組4 種抗體單一及聯(lián)合檢測陽性率比較

        SLE 組Anti-ds-DNA、Anti-sm 抗體單一及聯(lián)合檢測陽性率均高于SLE 伴腎損害組,差異均具有統(tǒng)計學意義(χ2=18.360、10.513、8.010,P<0.05);SLE 組ANuA、anti-P 檢測陽性率均低于SLE 伴腎損害組,差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=7.094、4.281,P<0.05)。見表1。

        表1 兩組4 種抗體單一及聯(lián)合檢測陽性率比較[n(%)]Table 1 Comparison of the positive rates of single and combined detection of the four antibodies in the two groups[n(%)]

        2.2 SLE 伴腎損害的多因素Logistic 回歸分析

        多因素Logistic 回歸分析顯示,ANuA(β=2.284,OR=9.816)、Anti-ds-DNA(β=0.749,OR=2.115)、anti-P(β=1.386,OR=3.999)和Anti-sm(β=0.475,OR=1.608)是SLE 伴腎損害的獨立影響因素(P<0.05)。見表2。

        表2 SLE 伴腎損害的多因素Logistic 回歸分析Table 2 Multivariate Logistic Regression Analysis of SLE with Kidney Damage

        2.3 四種抗體單一及聯(lián)合檢測對SLE 伴腎損害患者的診斷價值

        ROC 曲線顯示,ANuA、Anti-ds-DNA、anti-P 和Anti-sm 四者聯(lián)合檢測時,預測SLE 伴腎損害的AUC 為0.911,敏感性、特異性分別為89.0%、92.6%,優(yōu)于單一檢測(P<0.05)。見表3、圖1。

        圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curves

        表3 四種抗體單一及聯(lián)合檢測對SLE 伴腎損害患者的診斷價值Table 3 Diagnostic value of single and combined detection of four antibodies in patients with SLE with renal impairment

        3 討論

        既往研究表明[6],約50% 的SLE 患者出現(xiàn)腎損害,組織病理學研究證實100% 的SLE 患者出現(xiàn)不同程度的腎臟病理改變。目前,臨床可通過尿液中蛋白質(zhì)增多、血尿酸水平升高及血紅蛋白和補體水平降低等指標的變化反映SLE 腎損害程度[7]。

        免疫復合物被廣泛認為在SLE 伴腎損害進展中起重要作用。SLE 患者血清中產(chǎn)生ANuA 等多種自身抗體,是SLE 患者免疫系統(tǒng)紊亂的表現(xiàn)。然而,ANuA 還存在于一些結(jié)締組織疾病患者的血清中[8]。因此,缺乏特異性的ANuA 檢測可作為SLE 伴腎損害診斷的篩查工具,但不能作為最終診斷指標。文獻報道[9],SLE 患者血清中存在anti-SM、AnuA、anti-SSA、anti-dsDNA 等自身抗體,其中anti-SM 和anti-dsDNA 在SLE 中伴腎損害具有較高的特異性,但也存在靈敏度低等不足之處。因此,本研究將ANuA、Anti-ds-DNA、anti-P 和Anti-sm 抗體4 種抗體聯(lián)合檢測,以提高SLE 伴腎損害診斷的敏感性和特異性,減少誤診漏診的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示,SLE 組Anti-ds-DNA、Anti-sm 抗體單一及聯(lián)合檢測陽性率均高于SLE 伴腎損害組,SLE 組ANuA、anti-P 檢測陽性率均低于SLE 伴腎損害組。ROC 曲線顯示,Anti-ds-DNA 的AUC 僅次于四者聯(lián)合檢測。這可能是由于antidsDNA 的反應點位于DNA 脫氧核糖磷酸框架上,可有效結(jié)合腎小球基底膜微血管結(jié)構(gòu)上的原位DNA 分子,形成抗原抗體復合物,通過補體活化途徑激活炎癥系統(tǒng),導致腎組織損傷,進而誘導腎小球免疫負荷物不斷沉積并致使腎功能不斷受損[10]。此外,anti-dsDNA 還可進入腎小球膜細胞,引起腎小球細胞增殖,促進細胞融合和蛋白尿形成,不斷損害腎功能。近年來,隨著醫(yī)學研究的深入了解到DNA 不是導致狼瘡性腎炎的唯一抗原,通過其他細胞內(nèi)蛋白(如核糖體P 蛋白)或通過抗層粘連蛋白抗體與腎小球系膜內(nèi)層粘連蛋白的直接結(jié)合也可能導致腎組織在腎損傷中。國內(nèi)研究表明[11],anti-dsDNA 水平與臨床表現(xiàn)、疾病嚴重程度和疾病活動度之間存在相關(guān)性,表明在評估患者狀況和預后方面具有潛在作用。腎損害通常發(fā)生在疾病的活動期,而anti-dsDNA 不僅發(fā)揮重要的致病作用,還是LN 的危險因素[12]。Wang 等[13]報道進一步表明anti-P 與LN 的發(fā)生密切相關(guān),也可能與LN 的病理類型有一定的相關(guān)性。anti-SM也是SLE 疾病活動的主要指標,既往研究表明[14],與無anti-SM 的SLE 患者相比,anti-SM 陽性的SLE患者腎損害的發(fā)生率更高,尤其是anti-dsDNA也呈陽性的患者。Yuan 等[15]在一項回顧性研究中發(fā)現(xiàn),重度LN 患者的anti-SM 陽性率顯著增加,表明anti-SM 與LN 及其病理病變有關(guān),并且較高的anti-SM 陽性率Sm 抗體滴度與更嚴重的病理損傷相關(guān)。本研究結(jié)果顯示,Anti-P、anti-Sm、anti-dsDNA 和ANuA 對SLE 伴腎損害的診斷具有相當?shù)奶禺愋院兔舾行裕? 種抗體聯(lián)合檢測后,診斷SLE 伴腎損害的敏感性和準確性得到顯著提高,這與王琦等[16]的研究部分相符。這說明入院時檢測外周血Anti-P、anti-Sm、anti-dsDNA 和ANuA對預測SLE 患者是否伴有腎損害有一定價值。

        綜上,ANuA、Anti-ds-DNA、anti-P 和Anti-sm都與SLE 伴腎損害有關(guān),聯(lián)合檢測ANuA、Anti-ds-DNA、anti-P 和Anti-sm 對于提高SLE 伴腎損害的診斷準確性具有重要價值。

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