于杰，李洪玲，趙鋼，李金貴

在新型冠狀病毒感染疫情中，醫(yī)護(hù)人員由于長(zhǎng)時(shí)間佩戴口罩易導(dǎo)致顏面部出現(xiàn)壓瘡，美國(guó)國(guó)家壓瘡咨詢委員會(huì)（National Pressure Ulcer Advisory Panel，NPUAP）將其定義為器械相關(guān)壓力性損傷（device related pressure injuries，DRPI），本病多由于固定裝置及呼吸設(shè)備等器械的壓力、潮濕狀態(tài)及器械的材質(zhì)致使皮膚及皮下組織出現(xiàn)損傷，多見于醫(yī)護(hù)人員的職業(yè)損傷及ICU病房患者[1-6]。壓瘡（又稱褥瘡、席瘡）對(duì)應(yīng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)壓力性損傷[2-5]，是由于局部組織長(zhǎng)期受壓，繼而發(fā)生持續(xù)缺血、缺氧以及營(yíng)養(yǎng)不良，導(dǎo)致組織發(fā)生潰爛、壞死的外科疾病?！吨袊?guó)急性缺血性腦卒中診治指南2018》[7]并發(fā)癥防治部分新增加了壓瘡內(nèi)容，壓瘡作為腦卒中并發(fā)癥具有高發(fā)病率的特點(diǎn)已達(dá)成共識(shí)，應(yīng)當(dāng)引起廣泛關(guān)注和重視，其有效防治及機(jī)制亟待深入研究。壓瘡創(chuàng)面修復(fù)早期存在炎性細(xì)胞過度持續(xù)浸潤(rùn)，致使創(chuàng)面由炎癥期向增殖期發(fā)展受阻是影響壓瘡修復(fù)的重要因素，新生血管的生成在壓瘡修復(fù)過程中具有關(guān)鍵作用。艾灸治療壓瘡其臨床效果顯著[8-16]，但機(jī)制不清，項(xiàng)目組近年來對(duì)艾灸促進(jìn)壓力性損傷組織血管新生的機(jī)制進(jìn)行了研究[17-21]。本研究采用透射電鏡觀察回旋灸對(duì)壓力性損傷皮膚組織超微結(jié)構(gòu)的影響，明確回旋灸促進(jìn)壓力性損傷組織創(chuàng)面修復(fù)的作用，旨在為回旋灸治療壓力性損傷提供理論依據(jù)和參考方案。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 研究時(shí)間 2020年12月至2021年11月。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 120只雌性健康Sprague-Dawly（SD）成年大鼠，購(gòu)自揚(yáng)州大學(xué)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證編號(hào)：SCXK（蘇）2017-0007，體質(zhì)量225～235 g 。大鼠在溫度（19.0±2.1） ℃、相對(duì)濕度（RH）40%～50% 、明暗周期12 h的環(huán)境中適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后建立壓力性損傷大鼠模型，期間使其自由進(jìn)食、飲水、活動(dòng)。實(shí)驗(yàn)全程單籠飼養(yǎng)大鼠，本研究通過揚(yáng)州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理審查，編號(hào)：2020-FSYY-12。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備 紅外熱像儀（美國(guó)FLIR SC640，F(xiàn)LIR SYSTEM），電子天平（上海精密儀器廠，MP200A型），透射電鏡（日本日立，H-7650 ），切片機(jī)（Reichert），小動(dòng)物麻醉機(jī)（Matrx VMR，北京益仁恒業(yè)科技有限公司），自制造模裝置〔有機(jī)玻璃板（厚度15 mm）、塑料制尼龍?jiān)鷰А⒉讳P鋼絲網(wǎng)、水瓶底座、十字形托盤、502膠水、鋼珠、膨脹螺絲及帆布條〕。

1.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑 鋨酸、戊二醛溶液、磷酸鹽緩沖液、丙酮及環(huán)氧樹脂812（上海富宇），異氟烷麻醉劑（山東科源制藥有限公司），0.9%氯化鈉溶液（青島華仁藥業(yè)股份有限公司），五年陳艾（規(guī)格：18 mm×200 mm的有煙艾條，南陽藥益寶艾草制品有限公司），75%乙醇、醫(yī)用碘伏，敏感肌膚型脫毛膏（薇婷牌，利潔時(shí)家化中國(guó)有限公司）及醫(yī)用棉簽。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 構(gòu)建壓力性損傷大鼠模型 采用自制裝置通過塑料制尼龍?jiān)鷰б来螌?duì)大鼠7個(gè)部位（雙側(cè)腋下、腹部、雙側(cè)腹股溝內(nèi)側(cè)及雙踝部）進(jìn)行固定，確保待造模部位充分暴露，備皮處理（面積20 mm×20 mm），后使用碘伏對(duì)待造模部位和裝置螺釘錐度側(cè)進(jìn)行消毒。將自制裝置固定于實(shí)驗(yàn)大鼠腿部近膝關(guān)節(jié)骨隆突處（造模部位），通過缺血-再灌注損傷循環(huán)周期模式制備壓力性損傷大鼠模型。缺血期（120 min）+再灌注期（30 min）=1個(gè)循環(huán)，5個(gè)循環(huán)/d，共持續(xù)3 d。再灌注期（30 min）內(nèi)需將全部大鼠解壓松綁，放至鼠籠自由飲水、進(jìn)食及活動(dòng)。造模3 d結(jié)束后，再持續(xù)1 d（觀察期），目的是用以評(píng)價(jià)壓力性損傷大鼠模型制備是否成功，對(duì)于造模失敗的動(dòng)物模型，給予剔除處理[17-20]。

1.2.2 動(dòng)物模型的評(píng)價(jià) 大鼠模型評(píng)價(jià)參照2016年NPUAP指南[2]和2019年最新指南NPIAP/EPUAP壓力性損傷分類系統(tǒng)2～3期[3-5]，造模全程密切觀察SD大鼠行為學(xué)變化（整體狀態(tài)、步態(tài)、性情及二便等）及創(chuàng)面肉眼觀察（創(chuàng)面顏色、形態(tài)、滲出物性質(zhì)及結(jié)痂情況）的改變[22]。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)分組 嚴(yán)格遵循先造模后隨機(jī)的原則，將85只SD大鼠施以壓力性損傷缺血-再灌注模型制備，期間共有7只大鼠造模失敗、8只大鼠于造模過程中死亡。將最終模型制備成功的70只SD大鼠通過隨機(jī)數(shù)字表法分為回旋灸組（n=35）與模型對(duì)照組（n=35），另外選取35只健康SD大鼠作為空白對(duì)照組。每組再根據(jù)干預(yù)時(shí)間分為5個(gè)亞組，即1、3、5、7、10 d 5個(gè)亞組，每亞組各7只。造模后至干預(yù)治療過程中，模型對(duì)照組和回旋灸組各有5只SD大鼠脫落，空白對(duì)照組有5只SD大鼠在備皮處理時(shí)不慎出現(xiàn)副損傷，予剔除。

1.2.4 干預(yù)措施 三組SD大鼠采用統(tǒng)一的捆綁方式。（1）回旋灸組：先對(duì)創(chuàng)面施以碘伏處理，再予回旋灸操作，以其壓力性損傷創(chuàng)面為中心，10 mm長(zhǎng)度為移動(dòng)半徑，1次/d，每次持續(xù)15 min。通過紅外熱像儀及實(shí)驗(yàn)大鼠的狀態(tài)、反應(yīng)和操作者手部的溫感及時(shí)調(diào)整艾條燃燒端與創(chuàng)面的距離，使紅外熱像儀檢測(cè)創(chuàng)面皮膚表面溫度值控制在40～42 ℃，每5 s測(cè)量1次創(chuàng)面皮膚表面的溫度，全程施灸操作務(wù)必注意對(duì)灰燼（艾條燃燒過程中產(chǎn)生）及時(shí)處理。（2）模型對(duì)照組：造模后只對(duì)創(chuàng)面施以常規(guī)碘伏處理。（3）空白對(duì)照組：不予造模，僅對(duì)模擬造模部位處施以碘伏處理。分別于干預(yù)的1、3、5、7、10 d對(duì)各亞組大鼠取樣進(jìn)行透射電鏡觀察。

1.2.5 透射電鏡觀察

1.2.5.1 取材前準(zhǔn)備 將磷酸鹽緩沖液（PBS溶液）、2.5%戊二醛固定液、所需器械（蠟板、手術(shù)刀片、一次性注射器、眼科手術(shù)剪、EP管及鑷子等）均放置于4 ℃冰箱內(nèi)預(yù)冷處理。

1.2.5.2 取材步驟 （1）通過塑料制尼龍?jiān)鷰б来螌?duì)SD大鼠7個(gè)部位（雙側(cè)腋下、腹部、雙側(cè)腹股溝內(nèi)側(cè)及雙踝部）固定于不銹鋼絲網(wǎng)上，開啟小動(dòng)物麻醉機(jī)和氧氣瓶，吸入異氟烷和氧氣麻醉實(shí)驗(yàn)大鼠，約30 s后待實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)入麻醉狀態(tài)，此時(shí)將異氟烷的持續(xù)吸入量降低至最小劑量。麻醉期間應(yīng)確保異氟烷劑量有效、適中、平穩(wěn)。待其進(jìn)入麻醉狀態(tài)后，將壓力性損傷局部創(chuàng)面充分暴露，可在創(chuàng)面周圍通過記號(hào)筆做出標(biāo)記，將預(yù)冷的2.5%戊二醛固定液通過1 ml注射器注入EP管中，同時(shí)將少許2.5%戊二醛固定液滴入預(yù)冷的蠟板中，等待取材。（2）選取壓力性損傷大鼠創(chuàng)面皮膚的正中部位，通過眼科手術(shù)剪進(jìn)行取材，注意下刀快速、準(zhǔn)確，以確保取材組織新鮮。（3）將取材后的皮膚組織在離體后迅速經(jīng)過PBS溶液和0.9%氯化鈉溶液徹底沖洗。（4）將經(jīng)過沖洗的大鼠皮膚組織放置于具有2.5%戊二醛固定液的蠟板中，采用雙刀片拉鋸的方法將組織切成體積不超過1 mm3的小塊組織，切塊須快速，切塊時(shí)確保組織浸沒在固定液中。用小號(hào)鑷子輕輕將切好的組織移送至裝有2.5%戊二醛固定液的EP管中，放置于4 ℃冰箱保存。

1.2.5.3 透射電鏡制片 （1）前固定：2.5%戊二醛溶液中固定標(biāo)本180 min，4 ℃保存。（2）PBS溶液漂洗：0.1 mol/L PBS溶液漂洗，15 min/次，共進(jìn)行3次。（3）后固定：1%鋨酸固定液固定120 min。（4）PBS溶液漂洗：0.1 mol/L PBS溶液漂洗，15 min/次，共進(jìn)行3次。（5）梯度脫水：室溫下50%丙酮15 min→70%丙酮15 min→80%丙酮15 min→90%丙酮15 min→100%丙酮15 min，進(jìn)行3次。（6）浸透、包埋、固化：純丙酮+包埋液（2∶1）于室溫180 min→純丙酮+包埋液（1∶2）于室溫過夜→純包埋液于37 ℃ 120～180 min→在37 ℃烤箱內(nèi)過夜→在45 ℃烤箱內(nèi)0.5 d→在60 ℃烤箱內(nèi)1 d。用牙簽輕輕將已滲透完畢的樣品移送至包埋板中，在45 ℃給予樹脂包埋0.5 d。（7）超薄切片：用超薄切片機(jī)切片，厚度保持50 nm左右，載網(wǎng)。（8）染色：分別進(jìn)行醋酸鈾、枸櫞酸鉛的雙重染色。（9）透射電鏡下觀察各亞組大鼠皮膚創(chuàng)面的超微結(jié)構(gòu)。

2 結(jié)果

2.1 空白對(duì)照組電鏡結(jié)果 空白對(duì)照組1、3、5、7、10 d各亞組大鼠皮膚組織電鏡下超微結(jié)構(gòu)所示，基底細(xì)胞、棘細(xì)胞的線粒體結(jié)構(gòu)清晰、數(shù)量很多，狀態(tài)較好且豐富，表皮呈現(xiàn)完整的全層結(jié)構(gòu)，棘細(xì)胞的橋粒連接狀態(tài)很好，線粒體豐富發(fā)達(dá)，基底細(xì)胞的功能活躍，線粒體結(jié)構(gòu)正常，基膜存在，結(jié)構(gòu)尚可，見圖1。

圖1 空白對(duì)照組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織的超微結(jié)構(gòu)Figure 1 The ultrastructure of wound tissue in rats with pressure injury in blank control group

2.2 模型對(duì)照組電鏡結(jié)果 模型對(duì)照組1 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織電鏡下可見，絕大部分表皮脫落，少部分表皮呈現(xiàn)萎縮狀態(tài)，可見大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，其中以中性粒細(xì)胞為主，創(chuàng)面外緣伴有細(xì)菌感染，見圖2 A～B。模型對(duì)照組3 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織鏡下所示，表皮局灶性損傷，可見大量的炎性細(xì)胞，伴有結(jié)晶體存在，見圖2C～D。模型對(duì)照組5 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織鏡下所示，表皮部分脫落，部分殘存，存在大量的炎性細(xì)胞高度浸潤(rùn)，其中以中性粒細(xì)胞為主，此時(shí)期的中性粒細(xì)胞為新鮮狀態(tài)，見圖2E～F。模型對(duì)照組7 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織鏡下所示，未見表皮全層結(jié)構(gòu)，基底細(xì)胞及棘細(xì)胞的線粒體腫脹，數(shù)量較少，細(xì)胞間隙較寬，可見大量的炎性細(xì)胞，以吞噬細(xì)胞為主，伴有少量的陳舊性中性粒細(xì)胞，見圖2G～H。模型對(duì)照組10 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織鏡下可見少部分表皮結(jié)構(gòu)完整，大部分未見全層表皮結(jié)構(gòu)，僅存在基底層及棘層，缺失顆粒層、透明層及角質(zhì)層?；准?xì)胞與棘細(xì)胞的線粒體仍呈現(xiàn)腫脹狀態(tài)，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)以凋亡的淋巴細(xì)胞與吞噬細(xì)胞為主，見圖2I～J。

圖2 模型對(duì)照組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)壓力性損傷創(chuàng)面組織的超微結(jié)構(gòu)Figure 2 The ultrastructure of wound tissue in rats with pressure injury in model control group at different time points

2.3 回旋灸組電鏡結(jié)果 回旋灸組1 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織鏡下超微結(jié)構(gòu)顯示，表皮呈局灶性損傷，部分脫落，部分萎縮，真皮層受損，真皮出現(xiàn)大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)（以中性粒細(xì)胞為主），見圖3 A～B?；匦慕M3 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織透射電鏡下可見，基底細(xì)胞部分變性，部分功能尚可，基膜附近存在變性細(xì)胞，基底細(xì)胞的線粒體腫脹，橋粒連接不清楚，兩個(gè)基底細(xì)胞之間間隙增大，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)基底細(xì)胞層。棘細(xì)胞的部分線粒體呈腫脹狀態(tài)，細(xì)胞間隙較寬。表皮的角質(zhì)層脫落，真皮層有中等量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，與回旋灸組1 d亞組的炎性細(xì)胞數(shù)量相比，此時(shí)期數(shù)目相對(duì)減少，部分炎性細(xì)胞處于凋亡狀態(tài)，核固縮明顯，見圖3C～D?；匦慕M5 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織鏡下所示，表皮部分完整，部分缺失，部分僅可見基底層及棘層，顆粒層，透明層與角質(zhì)層消失，部分可見基底層、棘層、顆粒層、透明層及角質(zhì)層。絕大部分基底細(xì)胞的線粒體狀態(tài)很好，豐富發(fā)達(dá)，結(jié)構(gòu)清晰，少部分略有腫脹，橋粒連接狀態(tài)較好，結(jié)構(gòu)較清晰，基膜清晰可見，棘細(xì)胞的部分線粒體腫脹或變性，但橋粒連接尚可，真皮層可見不新鮮的粒細(xì)胞浸潤(rùn)，大量的成纖維細(xì)胞增生活躍，伴有少量的淋巴細(xì)胞，見圖3E～F。回旋灸組7 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織鏡下可見完整的表皮全層結(jié)構(gòu)，基底層、棘層、顆粒層、透明層、角質(zhì)層均清晰可見。絕大部分基底細(xì)胞的線粒體結(jié)構(gòu)清楚，數(shù)量較多且豐富，棘細(xì)胞的線粒體部分腫脹，部分尚可，真皮炎性細(xì)胞以吞噬細(xì)胞為主，淋巴細(xì)胞進(jìn)入表皮，可見新生的毛囊及皮脂腺，見圖3G～H。回旋灸組10 d亞組大鼠壓力性損傷創(chuàng)面組織鏡下所示，表皮結(jié)構(gòu)完整，可見清晰、完整的表皮全層結(jié)構(gòu)，即基底層、棘層、顆粒層、透明層、角質(zhì)層?；准?xì)胞的線粒體數(shù)量多，豐富，未見腫脹，橋粒形態(tài)較好，棘細(xì)胞的線粒體更為豐富，結(jié)構(gòu)清晰，橋粒形態(tài)較好，炎性細(xì)胞以大量的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主，所見毛囊較為完整，見圖3 I～J。

圖3 回旋灸組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)壓力性損傷創(chuàng)面組織的超微結(jié)構(gòu)Figure 3 The ultrastructure of wound tissue in rats with pressure injury in circling moxibustion group at different time points

3 討論

近年來壓瘡發(fā)病率呈持續(xù)升高狀態(tài)[23]，面對(duì)壓瘡易發(fā)、難治的特點(diǎn)以及治療成本昂貴的問題，壓瘡的有效防治尤為重要，因此尋求安全有效、成本低廉的防治手段曾一度成為醫(yī)學(xué)研究的關(guān)注熱點(diǎn)[24-25]。從祖國(guó)醫(yī)學(xué)特色理論分析，艾灸治療壓力性損傷有的放矢?！夺t(yī)學(xué)入門·針灸》載：“藥之不及，針之不到，必須灸之?！薄鹅`樞·官能》：“針?biāo)粸?，灸之所宜。”艾灸行氣消瘀，溫?jīng)通絡(luò)[26]，回旋灸溫?zé)岽碳こ志?，活血溫通之力更甚，用于治療壓力性損傷體現(xiàn)了中醫(yī)學(xué)的優(yōu)勢(shì)與特色，因此本研究具有鮮明的中醫(yī)理論支撐。從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究角度分析，壓力性損傷歸屬于慢性難愈合創(chuàng)面，其修復(fù)愈合的過程相對(duì)較復(fù)雜，原因之一在于與一般的皮膚損傷相比，壓力性損傷組織修復(fù)過程中的每個(gè)階段均相對(duì)較滯后。壓瘡創(chuàng)面修復(fù)的早期存在炎性細(xì)胞過度持續(xù)浸潤(rùn)，致使創(chuàng)面由炎癥期向增殖期發(fā)展受阻是影響壓瘡修復(fù)重要因素，新生血管的生成在壓瘡修復(fù)過程中具有關(guān)鍵作用。項(xiàng)目組前期HE染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與模型對(duì)照組相比，回旋灸組大鼠其壓力性損傷組織中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)高峰提前，肉芽組織出現(xiàn)時(shí)間點(diǎn)亦提前，其成纖維細(xì)胞增生程度與數(shù)量更明顯，且出現(xiàn)時(shí)間點(diǎn)較早，回旋灸組大鼠創(chuàng)面組織更早出現(xiàn)新生血管和表皮結(jié)構(gòu)的恢復(fù)[18]。

通過透射電鏡觀察回旋灸對(duì)壓力性損傷大鼠創(chuàng)面組織超微結(jié)構(gòu)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組比較，造模后表皮脫落或萎縮，呈缺失或萎縮狀態(tài)，原有正常皮膚結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，透射電鏡觀察的重點(diǎn)在于表皮中的細(xì)胞器及炎性細(xì)胞狀態(tài)。與模型對(duì)照組比較，回旋灸組對(duì)于表皮結(jié)構(gòu)的修復(fù)具有明顯優(yōu)勢(shì)，在治療5 d后可見表皮結(jié)構(gòu)，部分完整，部分僅可見基底層及棘層，在7 d后可見表皮的完整全層結(jié)構(gòu)，即基底層、棘層、顆粒層、透明層、角質(zhì)層。而模型對(duì)照組在碘伏處理10 d后少部分表皮結(jié)構(gòu)完整，大部分未見全層表皮結(jié)構(gòu)，僅見基底層及棘層，未見顆粒層、透明層、角質(zhì)層，由此說明回旋灸對(duì)壓力性損傷大鼠創(chuàng)面組織的表皮修復(fù)發(fā)揮明顯促進(jìn)作用。同時(shí)，回旋灸組組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)，隨著艾灸干預(yù)刺激的累積，5、7、10 d三亞組中基底細(xì)胞及棘細(xì)胞的線粒體的結(jié)構(gòu)、數(shù)量、形態(tài)由損傷后的腫脹、數(shù)量較少、不豐富、結(jié)構(gòu)不清逐漸向修復(fù)后的不腫脹、數(shù)量較多、豐富、結(jié)構(gòu)清晰的方向發(fā)展轉(zhuǎn)變，其中修復(fù)因素占主導(dǎo)作用，從而促進(jìn)壓力性損傷創(chuàng)面組織的修復(fù)及愈合過程。此時(shí)期超微結(jié)構(gòu)的改變可能歸因于殘存表皮功能狀態(tài)的改善以及新生表皮存在完整兩方面。模型對(duì)照組組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)呈現(xiàn)了壓力性損傷創(chuàng)面損傷及經(jīng)碘伏處理后自身修復(fù)中的基本病理狀態(tài)變化，直至碘伏處理10 d后，基底細(xì)胞及棘細(xì)胞的線粒體仍呈腫脹、數(shù)量較少、不豐富、大而空的形態(tài)特點(diǎn)，從損傷出現(xiàn)后經(jīng)碘伏處理至單純自身修復(fù)的進(jìn)程比較緩慢，損傷因素占主導(dǎo)作用。此時(shí)期線粒體呈腫脹狀態(tài)考慮為兩個(gè)原因，一是新生血管形成較為緩慢，不足以供應(yīng)受損區(qū)的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，尤其針對(duì)新生組織的營(yíng)養(yǎng)成分與氧氣的提供較為缺乏，導(dǎo)致新生組織的再生相對(duì)較緩慢，殘存表皮線粒體腫脹，從而阻礙表皮的修復(fù)；二是炎性細(xì)胞浸潤(rùn)期的延長(zhǎng)對(duì)表皮的修復(fù)具有抑制作用，阻礙表皮的修復(fù)，導(dǎo)致其線粒體腫脹。本研究發(fā)現(xiàn)在炎性細(xì)胞的鏡下改變方面，回旋灸組從1 d的大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，3 d中等量的中性粒細(xì)胞，5 d的不新鮮、陳舊性中性粒細(xì)胞，7 d吞噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞，10 d的淋巴細(xì)胞，反映出回旋灸治療后壓力性損傷創(chuàng)面組織從急性炎癥高度浸潤(rùn)發(fā)展至慢性炎癥階段的變化，中性粒細(xì)胞從新鮮至陳舊的狀態(tài)變化。模型對(duì)照組在碘伏處理5 d后為急性炎癥的高度浸潤(rùn)階段，模型對(duì)照組的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)期延長(zhǎng)。與模型對(duì)照組比較，回旋灸組從整體上提前急性炎癥浸潤(rùn)的高峰，因而在整體進(jìn)程上縮短壓力性損傷創(chuàng)面修復(fù)時(shí)間。

綜上所述，透射電鏡下觀察回旋灸對(duì)壓力性損傷大鼠創(chuàng)面組織超微結(jié)構(gòu)的影響與前期光鏡下觀察其創(chuàng)面病理形態(tài)學(xué)改變[18]，二者對(duì)于炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及表皮的觀察結(jié)果基本一致，由此說明，一方面回旋灸對(duì)壓力性損傷大鼠創(chuàng)面組織的表皮修復(fù)具有明顯促進(jìn)作用。另一方面回旋灸從整體上提前急性炎癥浸潤(rùn)的高峰，在整體進(jìn)程上縮短創(chuàng)面愈合時(shí)間，因此回旋灸能夠有效促進(jìn)壓力性損傷組織的創(chuàng)面修復(fù)。

作者貢獻(xiàn)：于杰負(fù)責(zé)選題，進(jìn)行研究設(shè)計(jì)與實(shí)施、資料收集整理、撰寫論文并對(duì)文章負(fù)責(zé)；李洪玲進(jìn)行研究實(shí)施、評(píng)估、資料收集；于杰、趙鋼進(jìn)行論文的修訂、英文的修訂；李金貴進(jìn)行質(zhì)量控制及審校，對(duì)文章整體負(fù)責(zé)，監(jiān)督管理。所有作者確認(rèn)了論文的最終稿。

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