王晶晶

（上海動物園，上海，200335）

斑嘴環(huán)企鵝（Spheniscus demersus）又名非洲企鵝，隸屬企鵝科（Spheniscidae），環(huán)企鵝屬，被列為IUCN 瀕危（EN）物種，主要分布于納米比亞和南非，在安哥拉、莫桑比克、剛果和加蓬也有分布［1-2］。近年來，由于地理環(huán)境和氣候變化的影響，在一定程度上給斑嘴環(huán)企鵝的生存和繁衍造成了危害，致使種群數(shù)量大幅度下降［3］，再加上人類的威脅，如捕殺和撿拾鳥卵等行為，使得非洲大陸企鵝種群數(shù)量急劇減少，已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足其種群繁衍需求。因此，對斑嘴環(huán)企鵝進(jìn)行繁殖生物學(xué)研究，對開展人工孵化有重要的指導(dǎo)意義。目前國內(nèi)外很多動物園都飼養(yǎng)斑嘴環(huán)企鵝，上海動物園飼養(yǎng)和繁殖斑嘴環(huán)企鵝的歷史也有多年，但關(guān)于卵重與卵形指數(shù)對斑嘴環(huán)企鵝種卵人工孵化效果的影響卻沒有相關(guān)報道，本研究通過對種卵的卵重與卵形指數(shù)進(jìn)行研究，旨在為提高斑嘴環(huán)企鵝的繁育性能提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

種卵是上海動物園園內(nèi)和繁殖場斑嘴環(huán)企鵝自主所產(chǎn)，種卵入庫前對卵殼消毒，入庫后將種卵銳端朝下碼盤放置，庫內(nèi)溫度控制在36.8 ℃，濕度為55%～65%。孵化設(shè)備為孵化箱（9WF-552 Egg Incubator，無錫市萬利畜牧機(jī)械有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 卵重、卵形指數(shù)測定及分組

用游標(biāo)卡尺測量入孵種卵的長徑和短徑，并編號，計算種卵的卵形指數(shù)（卵形指數(shù)=長徑/短徑），結(jié)果精確至0.5 mm。使用電子天平測量卵重。依據(jù)卵重和卵形指數(shù)將園內(nèi)40 枚種卵各分為4 組，卵重分組編號為NW1～NW4，卵形指數(shù)分組編號為NS1～NS4；將繁殖場40 枚種卵分為5 組，卵重分組編號為FW1～FW5，卵形指數(shù)分組編號為FS1～FS5。

1.2.2 種卵孵化方法

種卵入孵前先消毒，后裝入蛋盤。種卵孵化7 d后，進(jìn)行第1次照卵，剔除無精卵和死胚卵；孵化14 d后，進(jìn)行第2 次照卵，剔除死胚卵；孵化38～40 d，落盤并出雛。

孵化溫度為36.3～36.8 ℃，濕度為55%～65%。孵化期間每天晾卵不少于1 次，氣室向上沿著短軸每隔2 h 翻卵1 次，全天不少于12 次。入孵前照卵 1 次，檢查卵的質(zhì)量和胚胎發(fā)育情況，中期每周照卵不少于1 次。整個孵化周期為39～42 d，平均孵化時間為40 d。

1.3 統(tǒng)計及檢驗方法

使用Excel 2003 統(tǒng)計軟件整理不同配對號種卵的卵重和卵形指數(shù)的相關(guān)數(shù)據(jù)，借助統(tǒng)計軟件SPSS 23.0比較組間差異，以P＜0.05為有顯著差異。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（mean±SE）表示。計算園內(nèi)組和繁殖場組的入孵卵、受精卵、出雛數(shù)量、受精率和受精卵孵化率等指標(biāo)，計算公式［4］為：種卵受精率=受精卵數(shù)/入孵卵數(shù)×100%；受精卵孵化率=出雛數(shù)/受精卵數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 卵重對園內(nèi)組種卵受精率和種卵孵化率的影響

園內(nèi)組40 枚斑嘴環(huán)企鵝種卵入孵7 d 后進(jìn)行第1次照卵，發(fā)現(xiàn)有15枚受精卵，剔除死胎卵后繼續(xù)孵化。孵化第14 天進(jìn)行第2 次照卵，又發(fā)現(xiàn)6 枚受精卵，剔除死胎卵后繼續(xù)孵化。經(jīng)過約40 d 的人工孵化，21 枚受精卵共出雛9 只，受精率為52.50%，受精卵孵化率為42.86%。

園內(nèi)組NW4 組平均卵重為（109.87±1.06）g，受精率和孵化率分別為66.67%和60.00%，為園內(nèi)組孵化效果最好的組別；其次為NW3 組，平均卵重為（106.43±0.96）g，受精率和孵化率分別為58.33%和42.86%；而平均卵重為（98.17±1.47）g 的NW1 組受精率和孵化率均最低。園內(nèi)組各組種卵的受精率和受精卵孵化率差異均顯著（P＜0.05），當(dāng)平均卵重為（109.87±1.06）g 時，種卵受精率和孵化率均最高（表1）。

表1 園內(nèi)組不同卵重對種卵孵化效果的影響Tab.1 Effect of different egg weights on egg hatching success in the garden groups

2.2 卵形指數(shù)對園內(nèi)組種卵受精率和種卵孵化率的影響

園內(nèi)組40 枚種卵平均卵形指數(shù)為（1.291±0.070）。NS4 組平均卵形指數(shù)為（1.358±0.003），受精率和孵化率均最高，分別達(dá)到78.57%和63.63%；NS3 組次之，平均卵形指數(shù)為（1.320±0.007），受精率和孵化率分別為72.72%和25.00%，NS3組與NS4組受精率差異不顯著（P＞0.05），但孵化率差異顯著（P＜0.05）（表2）。

表2 園內(nèi)組不同卵形指數(shù)對種卵孵化效果的影響Tab.2 Effect of different shape index on egg hatching success in the garden group

2.3 卵重對繁殖場組種卵受精率和種卵孵化率的影響

繁殖場組40 枚斑嘴環(huán)企鵝種卵經(jīng)過約40 d 的人工孵化后，共有16 枚受精卵出雛6 只，受精率為40.00%，受精卵孵化率為37.50%。

繁殖場組FW5 組的受精率最高，為58.33%，平均卵重為（113.50±1.62）g，其后依次為FW4 組和FW3 組，但組間無顯著性差異（P＞0.05）。繁殖場組受精卵孵化率最高的是FW5 組，達(dá)到71.43%，其次為FW4 組，二者間差異顯著（P＜0.05）。FW1 組、FW2組和FW3組的孵化率均為0（表3）。

表3 繁殖場組不同卵重對種卵孵化效果的影響Tab.3 Effect of different egg weight on egg hatching success in the bleeding ground

與園內(nèi)組平均卵重相比，繁殖場組的平均卵重最小值比園內(nèi)組低21.86%，平均卵重最大值則高于園內(nèi)組3.30%。

2.4 卵形指數(shù)對繁殖場組種卵受精率和種卵孵化率的影響

繁殖場組40 枚種卵的平均卵形指數(shù)為（1.385±0.090）。FS5 組的受精率最高，達(dá)到66.67%，其次是FS3 組，而FS1 組受精率最低，5 個組別間均存在顯著性差異（P＜0.05）。在受精卵孵化率中，F(xiàn)S5 組的孵化概率最高，為62.50%；其次是FS4 組，二者相差37.50%，差異顯著（P＜0.05）；而其余3 組的孵化率均為0，相互間無顯著差異（P＞0.05），但分別與FS4組和FS5組存在顯著差異（P＜0.05）（表4）。

表4 繁殖場組不同卵形指數(shù)對種卵孵化效果的影響Tab.4 Effect of different shape index on egg hatching success in the bleeding ground

3 討論

3.1 卵重對種卵受精率和種卵孵化效果的影響

有關(guān)斑嘴環(huán)企鵝種卵卵重對受精率及孵化效果的影響未有報道，李艷秋等［5］研究卵重和卵形指數(shù)對巴布亞企鵝（Pygoscelis papua）孵化效果的影響，除卵重為125～136 g和137～148 g的受精率和孵化率無顯著差異外，其他不同卵重和卵形指數(shù)組間的受精率和孵化率均存在顯著差異。吳錦波等［6］研究阿壩州藏雞種卵的卵形指數(shù)和卵重對孵化效果的影響，發(fā)現(xiàn)卵重為54.70～55.73 g 的受精卵孵化率較高。Alkan 等［7］的研究表明，日本鵪鶉種卵重為10.1～11.0 g 時，受精率和孵化率與大卵組（＞12 g）存在顯著性差異。卵重與斑嘴環(huán)企鵝孵化效果有一定的關(guān)聯(lián)，本研究與朱允青等［8］、哈瑪莉亞·達(dá)列力等［9］、宋遠(yuǎn)見等［10］、努爾泥沙·莫拉尼亞孜等［11］、孫宏君等［12］、黃名英等［13］和張玲勤［14］對雞形目（Galliformes）部分鳥類的孵化報道相符，指出卵重對于種卵的孵化效果確有一定影響。種卵過重，可能會導(dǎo)致人工孵化前期胚胎感受溫度的能力變差或孵化后期時出現(xiàn)散熱不均勻的情況，從而引發(fā)胚胎凍死或悶死；種卵過輕，可能會造成發(fā)育過程中營養(yǎng)供給不足、胚胎移位，引發(fā)后期胚胎與卵殼粘連而不易出殼的問題［15-18］。因此，選取園內(nèi)組108.0～112.0 g、繁殖場組111.0～116.0 g 的斑嘴環(huán)企鵝種卵進(jìn)行人工孵化的效果會更理想。

3.2 卵形指數(shù)對種卵受精率和種卵孵化效果的影響

斑嘴環(huán)企鵝人工孵化效果受種卵質(zhì)量、孵化條件和人工育雛等多種因素影響，其中種卵的質(zhì)量起到至關(guān)重要的作用，而卵重和卵形指數(shù)是評估種卵質(zhì)量的重要指標(biāo)，兩者遺傳力分別為0.25～0.50 和0.27～0.50［19-22］。所以，在人工孵化過程中，對卵形指數(shù)和卵重進(jìn)行優(yōu)化和篩選，是提高孵化率的重要前提。

種卵在人工孵化過程中不斷地進(jìn)行著新陳代謝，一定程度上會造成部分水分散失，而水是物質(zhì)代謝的主要因子，卵形指數(shù)太高，蛋形偏長，氣室會相應(yīng)變大，造成人工孵化前期胚胎感溫功能和胚胎后期散熱功能受到影響，引發(fā)水分蒸發(fā)過快，后期往往會因缺乏水分而出現(xiàn)胚胎死亡的情況。若種卵卵形指數(shù)過低，蛋形過圓，氣室會相應(yīng)變小，人工孵化后期會因空氣流通不暢或含氧量不足導(dǎo)致胚胎不宜轉(zhuǎn)身破殼而窒息死亡，導(dǎo)致孵化率降低［23］。張昊等［24］的研究表明，卵形指數(shù)對肉鴨種卵受精孵化率有顯著影響（P＜0.05），與本研究結(jié)果一致。本研究中，園內(nèi)組平均卵形指數(shù)為（1.320±0.007）和（1.358±0.003）時，受精率較高，分別為72.72%和78.57%，選擇卵形指數(shù)為1.353～1.364 的種卵，孵化率可達(dá)63.63%。繁殖場組的種卵平均卵形指數(shù)比園內(nèi)組高7.28%，且卵形指數(shù)為1.453～1.465 時，受精孵化率為62.50%，同簡承松等［25］的研究結(jié)果一致，說明卵形指數(shù)對種卵的受精率和孵化率有一定影響。

卵重和卵長徑、短徑及卵形指數(shù)是種卵人工孵化過程中重要的選淘指標(biāo)［26-28］。根據(jù)種卵的重量和卵形指數(shù)，可以提前預(yù)測種卵的受精率和孵化率，對后期人工孵化和育雛有重要意義［29-30］。綜上所述，本研究通過建立園內(nèi)組和繁殖場組斑嘴環(huán)企鵝卵重和卵形指數(shù)的數(shù)據(jù)集，可為種卵預(yù)篩選做準(zhǔn)備，為后期人工孵化提供參考和評估。上海動物園斑嘴環(huán)企鵝的卵重和卵形指數(shù)具有較好的遺傳力，通過對種卵進(jìn)行選育能夠較好地提高受精率和孵化率。