孫曉武

胎兒染色體異常在臨床較為常見,屬于一種先天性疾病。為降低新生兒染色體異常率,確保優(yōu)生優(yōu)育,積極開展產(chǎn)前診斷工作十分必要［1］。產(chǎn)前超聲屬于一種應(yīng)用率較高的產(chǎn)前診斷方式,具有無創(chuàng)性特點(diǎn)［2］。無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測同樣具有無創(chuàng)特點(diǎn),是臨床用來判斷是否存在染色體非整倍體異常的技術(shù),已被廣泛應(yīng)用于全球［3］。本研究為提高胎兒染色體異常早期篩查準(zhǔn)確性,聯(lián)合應(yīng)用產(chǎn)前超聲與無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測方式,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016 年5 月～2019 年2 月于本院進(jìn)行早期篩查的7234 例孕婦,從中選取624 例需行羊水細(xì)胞染色體核型檢測的高危孕婦為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①對本研究知情同意；②自愿參與本研究；③早孕期出現(xiàn)異常超聲結(jié)構(gòu)；④均為單胎孕婦。排除標(biāo)準(zhǔn)：①錯過最佳羊水細(xì)胞染色體核型檢測時間；②拒絕接受檢查；③因終止妊娠而未行羊水細(xì)胞染色體核型檢測。624 例孕婦年齡23～45 歲,平均年齡(29.96±3.28)歲；孕周11～16 周,平均孕周(13.28± 1.29)周。

1.2 方法 624 例孕婦均行產(chǎn)前超聲、無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測及羊水細(xì)胞染色體核型檢測。

羊水細(xì)胞染色體核型檢測方式：采用超聲儀進(jìn)行定位,嚴(yán)格遵循無菌操作原則,行羊膜腔穿刺,抽取 20 ml 羊水,行10 min 離心處理之后留取0.5 ml,將其制作成為細(xì)胞懸液,然后再加入到培養(yǎng)基中,將其混勻,在37℃溫箱中進(jìn)行開放培養(yǎng),培養(yǎng)液適時更換,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),對羊水細(xì)胞生長情況進(jìn)行觀察；將適量秋水仙素加入培養(yǎng)瓶中,促使細(xì)胞分裂于中期停止,然后再行37℃低滲、固定、制片、顯帶以及染色處理,最終獲得羊水細(xì)胞表本片,之后再行核型分析與計數(shù)。

無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測方式：采集10 ml 外周血,放置在EDTA 抗凝管內(nèi),行血漿分離處理,對血漿內(nèi)游離DNA 進(jìn)行提取,行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增處理,獲取樣本DNA 文庫,對其進(jìn)行高通量檢測,將測得的基因序列和人類參考基因組進(jìn)行對比分析。當(dāng)樣本chr21 T 值≥3 時,便可認(rèn)為存在較高唐氏綜合征風(fēng)險；當(dāng)樣本chr18 T 值≥3 時,便可認(rèn)為存在較高18-三體綜合征風(fēng)險［4］。

產(chǎn)前超聲檢測方式：診斷儀器采用GE Voluson E10 彩色多普勒超聲診斷儀,選擇二維探頭,探頭頻率設(shè)置為1.6～4.5 MHz,檢查前囑咐孕婦充分排空膀胱,檢查體位取仰臥位,嚴(yán)格遵循英國胎兒醫(yī)學(xué)基金會標(biāo)準(zhǔn)采集、分析圖像,由2 名高資質(zhì)醫(yī)生行圖像質(zhì)量控制,行陰道超聲檢查,選擇陰道超聲探頭,探頭頻率設(shè)置為5～9 MHz,對矢狀切面、顱腦橫切面、胸部橫切面、腹部橫切面以及胎兒雙側(cè)上下肢切面進(jìn)行采集,判斷胎兒超聲結(jié)構(gòu)(馬蹄內(nèi)翻足、腹壁缺損、顱內(nèi)結(jié)構(gòu)異常、十二指腸閉鎖、心臟畸形等)、軟指標(biāo)(脈絡(luò)叢囊腫、鼻骨缺失、胎兒頸部透明帶增厚、肱骨或股骨縮小、腎盂擴(kuò)張、腸管強(qiáng)回聲、心室強(qiáng)光點(diǎn)、腦室擴(kuò)張等)以及和染色體異常相關(guān)的超聲指標(biāo)(靜脈導(dǎo)管a 波倒置、三尖瓣反流、額上頜角增大)情況［5］。

1.3 觀察指標(biāo) 將羊水細(xì)胞染色體核型檢測結(jié)果視為金標(biāo)準(zhǔn),分析無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測、產(chǎn)前單獨(dú)超聲檢測與聯(lián)合應(yīng)用診斷胎兒染色體異常的準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 羊水細(xì)胞染色體核型檢測結(jié)果 羊水細(xì)胞染色體核型檢測結(jié)果顯示,共有54 例染色體異常胎兒,先天性卵巢發(fā)育不全(Turner 綜合征)、13-三體、18-三體、21-三體綜合征胎兒分別有2、4、18、30 例。

2.2 產(chǎn)前超聲檢測結(jié)果 超聲檢測結(jié)果顯示,共有156 例染色體異常胎兒,其中胎兒超聲結(jié)構(gòu)、軟指標(biāo)以及和染色體異常相關(guān)的超聲指標(biāo)異常者分別有52、88、16 例。

2.3 無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測結(jié)果 無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測結(jié)果顯示,共篩查出62 例染色體異常胎兒,其中13-三體、18-三體、21-三體綜合征胎兒分別有8、24、30 例。其中52 例經(jīng)羊水細(xì)胞染色體核型檢測分析確診,13-三體、18-三體、21-三體綜合征胎兒分別有4、18、30 例。

2.4 三種診斷方式診斷準(zhǔn)確率對比 超聲聯(lián)合無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測診斷準(zhǔn)確率高于超聲檢測、無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 三種診斷方式診斷準(zhǔn)確率對比(%)

3 討論

早孕期行超聲檢查的主要內(nèi)容包括嚴(yán)重結(jié)構(gòu)異常、非整倍體染色體篩查。國際婦產(chǎn)科超聲學(xué)會(ISUOG)指出［6］,產(chǎn)前超聲特別是陰道超聲在早孕期胎兒發(fā)育狀況評價方面具有重要作用。早孕期經(jīng)超聲檢查可判斷胎兒存活情況,對胎兒大小進(jìn)行測量,對孕周進(jìn)行核對,通過測量胎兒頸部透明帶增厚,可協(xié)助行染色體篩查［7-9］。早孕期胎兒超聲篩查染色體異常的常見指標(biāo)包括額上頜角增大、靜脈導(dǎo)管a 波反向、三尖瓣反流、鼻骨缺如、胎兒頸部透明帶增厚等［10-12］。本研究中,經(jīng)超聲檢查共發(fā)現(xiàn)156 例胎兒可能染色體異常,其中胎兒超聲結(jié)構(gòu)、軟指標(biāo)以及和染色體異常相關(guān)的超聲指標(biāo)異常者分別有52、88、16 例。無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測是通過抽取母體外周血來對胎兒游離DNA 含量進(jìn)行檢測,并對染色體異常風(fēng)險率進(jìn)行推算。Turner 綜合征、13-三體、18-三體、21-三體綜合征等均為常見的遺傳性疾病,本研究經(jīng)無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測發(fā)現(xiàn),13-三體、18-三體、21-三體綜合征胎兒分別有8、24、30 例。本研究將羊水細(xì)胞染色體核型結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),分析各種方式的診斷準(zhǔn)確性,結(jié)果發(fā)現(xiàn),超聲聯(lián)合無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測診斷準(zhǔn)確率高于超聲檢測、無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。究其原因,雖然經(jīng)產(chǎn)前超聲能觀察到胎兒嚴(yán)重結(jié)構(gòu)異常,但對胎兒染色體異常的檢出率尚有待提高,尤其是21-三體綜合征胎兒。無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測雖然在篩查染色體異常方面的優(yōu)勢明顯,能避免宮內(nèi)感染與流產(chǎn),但各種可能會對孕婦外周血游離胎兒DNA 產(chǎn)生影響,對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。故聯(lián)合應(yīng)用超聲與無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測診斷胎兒染色體異常可發(fā)揮優(yōu)勢互補(bǔ)作用,進(jìn)一步提高診斷準(zhǔn) 確性。

綜上所述,胎兒染色體異常早期篩查中應(yīng)用超聲聯(lián)合無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測的診斷價值顯著,可提高篩查準(zhǔn)確性。