龔雪娜，王雪松，羅梓文，陳洪云，汪云剛，龍亞芹，陳林波

（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所/云南省茶樹種質(zhì)資源創(chuàng)新與配套栽培技術(shù)工程研究中心/云南省茶學(xué)重點實驗室，昆明 650201）

0 引言

茶谷蛾(Agriophara rhombata)又稱茶灰木蛾，屬鱗翅目谷蛾科，是茶樹重要的食葉性害蟲之一，以幼蟲吐絲綴葉成苞，匿居苞中咀食葉肉為害茶樹[1]。該蟲喜食成葉和老葉，大發(fā)生時亦危害嫩葉，受害輕的植株葉片形成缺刻、干枯，受害重時茶樹葉片被食盡[1]，曾是東北印度的主要害蟲，后在國內(nèi)廣東、福建、廈門、四川等地普遍爆發(fā)[2]。近年來開始在云南省局部茶園爆發(fā)性為害，對云南茶園茶谷蛾為害規(guī)律的調(diào)查研究顯示，全年有4個幼蟲為害時期，以第1代和第4代密度較大，并有逐年加重趨勢，給茶葉生產(chǎn)帶來巨大損失[1]。殺蟲劑一直是農(nóng)作物害蟲防治的主要措施，這種措施不僅能夠快速遏制其危害，又能彌補監(jiān)測預(yù)警落后的問題，減少人力物力和財力不必要的浪費[3]。因此，在研究茶谷蛾的危害規(guī)律基礎(chǔ)上，從節(jié)約成本、增加防治效果的角度出發(fā)篩選出比較實用的防治藥劑，對于防治茶谷蛾有重要意義。

乙基多殺菌素是陶氏益農(nóng)公司出品的一種新型多殺菌素類殺蟲劑，通過胃毒和觸殺作用，影響昆蟲正常的神經(jīng)活動[4]；對絕大多數(shù)主要益蟲沒有影響，比目前市場上常用的殺蟲劑用量更低、防效更好；而且在環(huán)境中的滯留時間更短，具有優(yōu)異的環(huán)境特性，主要用于防治鱗翅目幼蟲[5-6]。蟲螨腈是吡咯類殺蟲劑[7]，通過抑制細(xì)胞線粒體上的二磷酸腺苷(ADP)向三磷酸腺苷(ATP)轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致其因能量供應(yīng)不足而死亡，具有殺蟲譜廣、防效高、持效長、安全的特點，可以控制抗性害蟲[8]。茚蟲威是兼具噁二嗪結(jié)構(gòu)的氨基甲酸酯類殺蟲劑，它通過阻斷昆蟲神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的鈉離子通道，使神經(jīng)細(xì)胞失去功能，導(dǎo)致害蟲運動失調(diào)，0～4 h內(nèi)即停止取食、麻痹并最終死亡[9]。唑蟲酰胺是一種新型吡唑雜環(huán)類殺蟲殺螨劑，它通過阻礙線粒體代謝系統(tǒng)中的氧化磷酸化作用使其最終因能量不足而死亡，主要用于鱗翅目幼蟲的防治，具有低毒高效快速降解等特點[10-11]。有對茶谷蛾生物習(xí)性的研究提出，幼蟲期、蛹期、成蟲期是茶谷蛾的3個有效防治時期[1]。由于幼蟲期的發(fā)育歷期最長（平均33.1天），為害最嚴(yán)重[1]，故筆者以幼蟲期為突破口，選取上述4種不同機制的殺蟲劑，測定其對茶谷蛾的生物活性，旨在篩選對茶谷蛾防效較好的藥劑及劑量，為田間防治茶谷蛾提供科學(xué)用藥指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

供試蟲源于2021年5月采自云南省勐?？h云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所基地內(nèi)。收集老熟幼蟲50頭，用放置有新鮮茶樹葉片植株的采蟲袋（80目）帶回室內(nèi)，用茶苗飼養(yǎng)，經(jīng)過化蛹、羽化后將成蟲放入40 cm×40 cm×40 cm的養(yǎng)蟲籠內(nèi)，喂以10%蜂蜜水，放入茶苗供其產(chǎn)卵，孵化后的幼蟲用茶苗飼養(yǎng)至3齡，挑選大小一致、健康的3齡初期幼蟲進(jìn)行毒力測定。

1.2 供試藥劑

供試殺蟲劑種類和生產(chǎn)廠家信息見表1，表中推薦劑量為各農(nóng)藥登記的推薦劑量范圍的平均值。

表1 供試殺蟲劑

1.3 試驗方法

采用浸葉法進(jìn)行生物測定。在預(yù)試驗的基礎(chǔ)上，用含0.05% Triton X-100的蒸餾水將殺蟲劑稀釋成5個系列濃度梯度，每濃度藥液量200 mL。將準(zhǔn)備好的茶樹葉片（最長直徑6 cm）浸于不同濃度的藥液中10 s，取出后在室內(nèi)晾干至表面無游離水。用0.05% Triton X-100浸漬的葉片作為對照。將晾干的葉片放入10 mL的冷凍管中，冷凍管貼壁放有濾紙保濕，用鑷子接入發(fā)育程度相同的茶谷蛾3齡幼蟲，每管1頭，每個濃度30頭試蟲，用蘸有少量水的脫脂棉封口。放入溫度(25±1)℃，相對濕度70%，光周期14 h L/10 h D的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。分別于24、48、72、96 h后在體式顯微鏡下用毛刷輕觸幼蟲體表，不動者判定為死亡，并記錄死亡數(shù)、存活數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

利用Excel 2019、SPSS 22.0[12]計算4種化學(xué)殺蟲劑對3齡茶谷蛾幼蟲的致死率、毒力回歸方程、LC50及LC90，并以24%蟲螨腈SC的毒力為1計算相對毒力指數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 4種殺蟲劑對茶谷蛾的毒殺作用

6%乙基多殺菌素SC 500倍稀釋液24 h的致死率為93.33%，48 h后即達(dá)到了100%；750倍稀釋液24 h的致死率為93.33%，48 h后達(dá)到96.67%；1000倍稀釋液24 h的致死率為76.67%，48 h后達(dá)到93.33%；1500倍稀釋液24 h的致死率為63.33%，48 h后達(dá)到90%；2000倍稀釋液24 h致死率為43.33%，48 h后達(dá)到76.67%。24 h內(nèi)的劑量—死亡率效應(yīng)最顯著，并都在48 h后達(dá)到最大死亡率，持效性好（圖1A）。

圖1 4種化學(xué)殺蟲劑不同處理下的茶谷蛾死亡情況

24%蟲螨腈SC 24 h內(nèi)500、750倍稀釋液的致死率能達(dá)到50%，96 h后才超過90%；1000倍稀釋液在48 h致死率達(dá)到50%，96 h才達(dá)到90%；2000倍稀釋液在72 h致死率達(dá)到50%，毒殺作用具有明顯的時間—劑量—死亡率效應(yīng)（圖1B）。

15%茚蟲威EC 24 h內(nèi)1000倍稀釋液致死率最高，達(dá)96.67%，后隨濃度降低致死率逐漸下降；各濃度處理均能在48 h后達(dá)到最大致死率，分別為96.67%、96.67%、83.33%、56.67%、53.33%（圖1C）。

15%唑蟲酰胺SC 24 h內(nèi)750倍稀釋液致死率最高，為63.33%，后隨濃度降低致死率下降；各濃度處理的致死率均在48 h后達(dá)到最大并持效到96 h，750倍液處理下的茶谷蛾死亡率最高（圖1D）。

2.2 4種殺蟲劑隨時間變化對茶谷蛾的毒力大小

相關(guān)系數(shù)是變量之間相關(guān)程度的指標(biāo)，通常r＞0.8時認(rèn)為2個變量有很強的線性相關(guān)性，而相關(guān)系數(shù)越接近1.0，則回歸效果越好[6]。6%乙基多殺菌素SC、15%茚蟲威EC、15%唑蟲酰胺SC、24%蟲螨腈SC對3齡茶谷蛾幼蟲24 h的LC50值分別為32.509、57.907、142.645、328.572 mg/L（表2）。以24%蟲螨腈SC的毒力為1計算，6%乙基多殺菌素SC的相對毒力是其10.11倍，15%茚蟲威EC的相對毒力是其5.67倍，15%唑蟲酰胺SC的相對毒力是其2.31倍。毒力由大到小表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC＞24%蟲螨腈SC。

表2 4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾的室內(nèi)毒力(24 h)

6%乙基多殺菌素SC、15%茚蟲威EC、15%唑蟲酰胺SC、24%蟲螨腈SC對3齡茶谷蛾幼蟲48 h LC50值分別為 15.959、57.480、72.698、234.227 mg/L。以24%蟲螨腈SC的毒力為1計算，6%乙基多殺菌素SC的相對毒力是其14.68倍，15%茚蟲威EC的相對毒力是其4.07倍，15%唑蟲酰胺SC的相對毒力是其3.22倍（表3）。毒力由大到小表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC＞24%蟲螨腈SC。

表3 4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾的室內(nèi)毒力(48 h)

72 h 24%蟲螨腈SC的LC50值為99.633 mg/L，其他3種藥劑的LC50值與48 h時相同。6%乙基多殺菌素SC、15%茚蟲威EC、15%唑蟲酰胺SC的相對毒力分別是24%蟲螨腈SC的6.24、1.73、1.37倍（表4）。毒力由大到小表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC＞24%蟲螨腈SC。

表4 4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾的室內(nèi)毒力(72 h)

96 h 24%蟲螨腈SC的LC50值為52.534 mg/L，其他3種藥劑的LC50值與48 h時相同。6%乙基多殺菌素SC、15%茚蟲威EC、15%唑蟲酰胺SC的相對毒力分別是24%蟲螨腈SC的3.29、0.91、0.72倍（表5）。毒力由大到小表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞24%蟲螨腈SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC。

表5 4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾的室內(nèi)毒力(96 h)

3 結(jié)論與討論

茶葉是中國傳統(tǒng)的重要經(jīng)濟作物和重要飲品，作為滇西南經(jīng)濟支柱特色產(chǎn)業(yè)，對云南省產(chǎn)業(yè)發(fā)展、增加農(nóng)民收入、擴大就業(yè)、實施鄉(xiāng)村振興具有重要作用。近年來，茶谷蛾在云南部分茶區(qū)呈現(xiàn)大面積爆發(fā)，具有蟲口密度大、繁殖能力強、隱蔽性強等特點，對春茶和夏茶為害尤其嚴(yán)重[1]。為了尋求安全有效的殺蟲劑，筆者選用了4種在防治鱗翅目害蟲中廣泛使用且作用機理不同的低毒高效藥劑對茶谷蛾的毒殺效果進(jìn)行比對。室內(nèi)毒力測定試驗發(fā)現(xiàn)，4種化學(xué)殺蟲劑對3齡茶谷蛾幼蟲的毒力作用由強到弱表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC＞24%蟲螨腈SC。

乙基多殺菌素結(jié)構(gòu)中的鼠李糖基3-位，是由天然甲基醚轉(zhuǎn)變?yōu)橐一训慕Y(jié)果，僅是多加了一個亞甲基的產(chǎn)物，其活性就提高了10倍[13-14]，在防治草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda)[15-16]、棉鈴蟲(Helicoverpa armigera)[17]、梨小食心蟲(Grapholita molesta)和蘋果蠹蛾(Cydia pomonella)[18]、茶細(xì)蛾(Caloptilia theivora)[19]時，均體現(xiàn)了較高的生物活性和觸殺效果。本研究中，6%乙基多殺菌素SC 24 h內(nèi)的劑量—死亡率效應(yīng)最明顯，隨著處理濃度的降低，茶谷蛾死亡率下降。每個濃度處理的致死率均在48 h時達(dá)到最高，并且殺蟲效果能持續(xù)到96 h，而500倍稀釋液在24 h時死亡率能達(dá)到90%以上、48 h時達(dá)到100%，為本試驗設(shè)置中的最優(yōu)劑量。4種藥劑的毒力測定發(fā)現(xiàn)，24、48、72、96 h時，6%乙基多殺菌素SC的LC50值均低于其他3種藥劑，毒力作用最大，在48 h時最大毒力顯現(xiàn)，且在48～96 h內(nèi)能保持同等毒殺力，證明6%乙基多殺菌素SC是一種見效快、持效時間長的可選殺蟲劑，對茶谷蛾的防治以500倍的稀釋液效果最佳。

茚蟲威屬噁二嗪類殺蟲劑，其作用機制獨特，雖沒有內(nèi)吸活性，但具有較好的耐雨水沖刷性能[20]，持效期長達(dá)14天左右[21]，是治理衛(wèi)生害蟲（白蟻和蟑螂）及鱗翅目害蟲的首選藥劑，在國內(nèi)已使用近20年[22-25]。本試驗中15%茚蟲威EC體現(xiàn)出了高效的殺蟲活性，1000倍稀釋液在24 h即達(dá)到最大致死率，中毒反應(yīng)快、持效時間長，這與趙世文等[20]在茚蟲威對柞蠶幼蟲的毒性試驗中的結(jié)果類似。在24～72 h內(nèi)15%茚蟲威EC毒力作用僅次于6%乙基多殺菌素SC，是24%蟲螨腈SC的1.73～5.67倍，這與商暾等[26]的研究結(jié)果存在差異，說明不同害蟲對每種藥劑的敏感性不同。

唑蟲酰胺主要通過與害蟲接觸后使其出現(xiàn)麻痹、難以活動和取食癥狀，最終影響生理代謝使其死亡[27]，兼具殺蟲譜廣、安全性高、復(fù)配性好等特點[10-11]，且在茶葉和土壤中易消解[28]；對柑橘木虱(Diaphorina citri)、茶小綠葉蟬(Empoasca pirisuga)和小菜蛾(Plutella xylostella)等具有良好的防治效果[29-31]。張丹等[11]的研究表明，15%唑蟲酰胺SC 850倍液對小菜蛾和菜青蟲的處理在藥后24、72 h的防效均在90%以上，而本研究中500倍稀釋液96 h后死亡率未達(dá)到90%，750倍稀釋液下死亡率最高，于48 h后達(dá)到86.67%?？赡苁遣煌ハx對同種藥劑的敏感性存在差異，且因為唑蟲酰胺的作用機理，用藥后生效需要一定時間。毒力回歸測定表明，用藥48 h后毒力作用最大，且持效至96 h，72 h內(nèi)毒力作用次于15%茚蟲威乳油。

蟲螨腈主要通過胃毒及觸殺作用干擾昆蟲體內(nèi)細(xì)胞線粒體呼吸鏈上的電子傳遞，影響昆蟲體內(nèi)能量轉(zhuǎn)化，有殺蟲譜廣、適用作物多、延緩抗藥性、安全環(huán)保等優(yōu)點[7]。莫志蓮等[7]的研究表明，240 g/L的蟲螨腈SC對柑橘全爪螨(Panonchus citri)有很好的防效，其1500倍液在藥后35天防效達(dá)90.92%以上。戴昌金[32]的研究表明10%蟲螨腈SC防治田甜菜夜蛾幼蟲在施藥后1天防效即達(dá)86.54%。本試驗中24%蟲螨腈SC在24～72 h內(nèi)毒力最弱。不同稀釋倍數(shù)下的茶谷蛾致死率24 h內(nèi)均未超過60%，48 h后致死率開始上升，到96 h才達(dá)到最大致死率，毒力作用超過15%茚蟲威EC。相對于其他3種化學(xué)藥劑，對茶谷蛾3齡幼蟲的藥效發(fā)揮相對較慢，對茶谷蛾的毒殺作用存在明顯的時間效應(yīng)，這可能與其以內(nèi)吸殺蟲為主的作用機理及種群差異有關(guān)。

綜上所述，本試驗中4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾3齡幼蟲均有較強毒殺作用，6%乙基多殺菌素SC 500倍稀釋液的致死率最高，毒力作用最大，其次為15%茚蟲威EC，二者對茶谷蛾幼蟲的毒殺速效性均可作為應(yīng)急防治茶谷蛾幼蟲的推薦藥劑。相對于其他3種藥劑，24%蟲螨腈SC作用發(fā)揮較緩，其96 h時才達(dá)到最大毒殺力。但殺蟲劑的篩選不能只依據(jù)室內(nèi)毒力測定結(jié)果下結(jié)論，還需要通過田間試驗進(jìn)行驗證，要充分考慮田間環(huán)境、溫濕度天氣等外界因素[33-34]，延長時間檢驗藥劑持效性，并綜合考慮藥劑殘留問題。目前生產(chǎn)上缺乏防治茶谷蛾的有效措施，本研究可為茶谷蛾田間藥劑防控的初篩提供基礎(chǔ)依據(jù)，并將繼續(xù)開展茶谷蛾的綠色防控研究。