郭紅佳，普朝華，陶忠永

（1.新平縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南新平 653400；2.新平縣畜牧站，云南新平 653400；3.戛灑鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村綜合服務(wù)中心，云南新平 653400）

口蹄疫（foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV）引起的一種急性熱性高度接觸性傳染病[1]，偶蹄動(dòng)物易感，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（WOAH）將其列為須通報(bào)動(dòng)物疫病，我國(guó)將其歸為一類動(dòng)物疫病[2-4]。FMD 發(fā)病急、傳播速度快、傳播范圍廣，通常春秋兩季高發(fā)。FMDV 常見的血清型有A、O、C、Asial、SAT1、SAT2 和SAT3 等7種[5-6]，主要通過接觸（直接接觸、間接接觸）和空氣傳播?；疾?dòng)物主要臨床癥狀表現(xiàn)為口、蹄、乳房等部位出現(xiàn)水皰和潰瘍。病豬和帶毒豬是FMD 主要傳染源。FMD 沒有特效的藥物治療，疫苗免疫是預(yù)防該病的主要手段。

新平縣位于云南省中部偏西南，地處哀勞山中段東麓，是滇中地區(qū)重要的畜牧業(yè)養(yǎng)殖大縣。截至2022年11 月，全縣生豬存欄約37.37 萬(wàn)頭、牛約7.51 萬(wàn)頭、羊約11.33 萬(wàn)只。為了解家畜口蹄疫免疫效果，本研究利用O 型FMDV 抗體ELISA 試劑盒，對(duì)新平縣2018—2022年豬牛羊血清樣品進(jìn)行抗體檢測(cè)，然后匯總檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，旨在為新平縣FMD 防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 抽樣設(shè)計(jì)與采集

按照玉溪市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局印發(fā)的《玉溪市動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》，新平縣每年對(duì)全縣應(yīng)免豬牛羊進(jìn)行O 型FMD 強(qiáng)制免疫，規(guī)模場(chǎng)按各自的免疫程序?qū)嵤┟庖撸B(yǎng)戶實(shí)行春防、秋防集中免疫。本研究分別于每年春季（4月10—30日）、秋季（9 月20 日—10 月10 日），在全縣12 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）采集免疫豬牛羊的血液樣品，離心分離血清后進(jìn)行O 型FMDV 免疫抗體檢測(cè)。

飼養(yǎng)規(guī)模劃分標(biāo)準(zhǔn)：生豬存欄300 頭或年出欄500 頭以上、牛存欄100 頭或年出欄50 頭以上、羊存欄100 只或年出欄100 只以上為規(guī)模場(chǎng)，達(dá)不到劃定標(biāo)準(zhǔn)的為散養(yǎng)戶[7]。合格場(chǎng)戶標(biāo)準(zhǔn)：場(chǎng)戶內(nèi)免疫抗體個(gè)體合格率≥70%為合格場(chǎng)戶。采樣設(shè)計(jì)：原則上每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）隨機(jī)抽取豬牛羊規(guī)模場(chǎng)至少各1 個(gè)，散養(yǎng)戶1～10 戶；每個(gè)規(guī)模場(chǎng)隨機(jī)至少采集血液樣品10 份，每戶散養(yǎng)戶至少采集樣品5 份。

2018—2022年，分別累計(jì)采集豬、牛、羊場(chǎng)群255、236、315 個(gè)，其中規(guī)模場(chǎng)分別為95、85、95 個(gè)，散養(yǎng)戶分別為160、151、220 戶；分別分離豬、牛、羊血清樣品2 289、2 020、2 491 份，其中規(guī)模場(chǎng)分別為1 385、1 186、1 168 份，散養(yǎng)戶分別為904、834、1 323 份。

1.2 主要儀器和試劑

Multiskan FC 酶標(biāo)儀，購(gòu)自Thermo 公司；10～1 000 μL單道移液器及30～300 μL多道移液器，購(gòu)自德國(guó)Brand 公司；O 型FMDV 抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自北京金諾百泰生物技術(shù)有限公司。

1.3 檢測(cè)方法

按照O 型FMDV 抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行檢測(cè)。試驗(yàn)成立條件：陰性對(duì)照OD450平均值＞0.7，陽(yáng)性對(duì)照S/N平均值＜0.3。如果檢測(cè)結(jié)果不在界定范圍，則需要重新進(jìn)行檢測(cè)。判定標(biāo)準(zhǔn)：S/N=樣品OD 值/陰性對(duì)照OD 值；S/N≤0.5 為抗體陽(yáng)性，判為抗體合格，＞0.5為抗體陰性，判為不合格。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用Excel 軟件和SPSS 22.0 軟件，對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)按不同畜種、不同規(guī)模、不同季節(jié)進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同畜種

本次檢測(cè)的血清樣品覆蓋全縣12 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道），涉及豬、牛、羊3 個(gè)畜種的806 個(gè)場(chǎng)群。不同畜種統(tǒng)計(jì)結(jié)果（表1）顯示：2018—2022年，豬、牛、羊O 型FMDV 平均個(gè)體抗體合格率分別為68.20%（1 561/2 289）、86.53%（1 748/2 020）、81.65%（2 034/2 491），場(chǎng)群合格率分別為75.29%（192/255）、88.56%（209/236）、84.76%（267/315），不同種類畜群間的個(gè)體抗體合格率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。

表1 2018—2022年不同畜種O 型FMDV 抗體合格率統(tǒng)計(jì) 單位：%

2.2 不同規(guī)模

不同飼養(yǎng)規(guī)模場(chǎng)戶統(tǒng)計(jì)結(jié)果（表2～3）顯示：2018—2022年，規(guī)模場(chǎng)豬、牛、羊平均個(gè)體抗體合格率分別為73.36%（1 016/1 385）、89.54%（1 062/1 186）、83.48%（975/1 168），散養(yǎng)戶豬、牛、羊平均個(gè)體抗體陽(yáng)性率分別為62.09%（545/904）、82.25%（686/834）、80.05%（1 059/1 323），豬規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶（P＜0.001）、牛規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶（P＜0.001）、羊規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶（P=0.027 ＜0.05）的個(gè)體抗體合格率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；豬、牛、羊規(guī)模場(chǎng)群體合格率均為100%，散養(yǎng)戶群體合格率分別為60.63%（97/160）、82.12%（124/151）、78.18%（172/220），不同畜種規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶間的群體抗體合格率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。結(jié)果表明，規(guī)模場(chǎng)的免疫合格率明顯高于散養(yǎng)戶。

表2 2018—2022年不同規(guī)模場(chǎng)點(diǎn)O 型FMDV 個(gè)體抗體合格率 單位：%

2.3 不同季節(jié)

不同季節(jié)統(tǒng)計(jì)結(jié)果（表4）顯示：2018—2022年，春季、秋季間的豬平均個(gè)體陽(yáng)性率（P=0.230 ＞0.05）、牛平均個(gè)體陽(yáng)性率（P=0.626 ＞0.05）、羊平均個(gè)體陽(yáng)性率（P=0.540 ＞0.05）差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表4 2018—2022年家畜春秋季節(jié)O 型FMDV 抗體檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì) 單位：%

表3 2018—2022年不同規(guī)模場(chǎng)點(diǎn)O 型FMDV 群體抗體合格率 單位：%

3 討論

3.1 不同畜種

本研究發(fā)現(xiàn)，不同畜種的免疫合格率存在差異，其中牛羊的免疫合格率均在80%以上，免疫效果較好，而豬的免疫合格率不足70%，免疫效果較差。其原因可能是：當(dāng)?shù)貙?duì)豬實(shí)行“三針同免”，即口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征疫苗同時(shí)接種，疫苗間可能存在相互干擾而降低口蹄疫疫苗的免疫效果；牛僅免疫口蹄疫疫苗，不存在疫苗混用情況；羊主要免疫小反芻獸疫和口蹄疫疫苗，但這兩種疫苗不同時(shí)免疫，疫苗間相互影響較小。此外，也有動(dòng)物自身個(gè)體差異（品種、日齡、性別、營(yíng)養(yǎng)、健康狀況）[8]，以及疫苗免疫操作不規(guī)范及免疫密度等原因。新平縣豬口蹄疫免疫效果不理想的原因需要進(jìn)一步分析，找出具體原因，提出對(duì)策，同時(shí)加大對(duì)豬口蹄疫免疫抗體水平的監(jiān)測(cè)力度，做好補(bǔ)免工作，使豬群免疫抗體達(dá)到保護(hù)水平。

3.2 不同飼養(yǎng)規(guī)模

散養(yǎng)戶的抗體陽(yáng)性率無論是個(gè)體水平還是群體水平均低于規(guī)模場(chǎng)。其原因可能是：散養(yǎng)戶大多飼養(yǎng)環(huán)境較差，飼舍簡(jiǎn)陋、設(shè)備落后，飼養(yǎng)過程無專業(yè)人士指導(dǎo)[9]，自身文化素質(zhì)不高，每年僅進(jìn)行春防、秋防兩次集中免疫，存在漏免現(xiàn)象，補(bǔ)免意識(shí)也欠缺，未能根據(jù)牲畜生長(zhǎng)狀況適時(shí)免疫；而規(guī)模場(chǎng)管理相對(duì)精細(xì)化，且多聘有駐場(chǎng)獸醫(yī)，有科學(xué)系統(tǒng)的疫苗接種程序，免疫檔案記錄詳細(xì)，補(bǔ)免及時(shí)，部分規(guī)模場(chǎng)定期進(jìn)行抗體水平監(jiān)測(cè)，能確定合理的首免和加強(qiáng)免疫時(shí)間，有效減少免疫真空期。此外，散養(yǎng)戶的免疫工作多由村級(jí)防疫員負(fù)責(zé)，其專業(yè)技能普遍不高，免疫時(shí)存在“飛針”“漏針”現(xiàn)象，會(huì)影響免疫效果[10]。建議加強(qiáng)對(duì)散養(yǎng)戶的免疫和監(jiān)測(cè)工作，不斷強(qiáng)化村級(jí)防疫員隊(duì)伍建設(shè)，加大培訓(xùn)宣傳力度，提高散養(yǎng)戶的飼養(yǎng)管理水平和補(bǔ)免意識(shí)。

3.3 不同季節(jié)

從春季、秋季的免疫抗體統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)來看，同一畜種不同季節(jié)的免疫合格率差異不大，說明規(guī)模場(chǎng)的程序免疫和散養(yǎng)戶的春秋集中免疫對(duì)保證豬牛羊的O 型口蹄疫免疫抗體水平全年穩(wěn)定起到了積極作用，效果較好。建議規(guī)模場(chǎng)定期進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，適時(shí)調(diào)整免疫程序；散養(yǎng)戶在春防、秋防集中免疫時(shí)，保證免疫密度和免疫操作規(guī)范。

4 結(jié)論

綜合分析認(rèn)為，2018年以來云南省新平縣牛羊O 型FMD 免疫效果較好，抗體合格率超過了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部70%的要求，但豬免疫效果相對(duì)較差，尤其是散養(yǎng)戶，抗體合格率不足70%，存在疫情發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，亟需采取措施進(jìn)一步提高生豬疫苗免疫接種強(qiáng)度和抗體監(jiān)測(cè)力度，以降低豬群O 型FMDV感染風(fēng)險(xiǎn)。