萬品文 萬 春△ 閃海霞

1.南陽市中心醫(yī)院肝臟普外科 (河南 南陽， 473000) 2.南陽市中心醫(yī)院感染肝病科

目前全世界約有2.5億乙型肝炎病毒(HBV)感染者，大多集中在非洲與東南亞地區(qū)，已經(jīng)成為引起全球范圍關(guān)注的重大公共衛(wèi)生問題之一[1]。我國現(xiàn)階段HBV感染者約有9 000萬，其中慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者約占1/3[2]。目前針對CHB尚無根治性方法，其治療主要是抗HBV，抑制肝細胞變性壞死，從而延緩病情進展，延長患者生存期[3]。雙環(huán)醇片是我國獨立研制第一個擁有國際知識產(chǎn)權(quán)的抗肝炎新藥，兼有抗病毒與抗肝細胞損傷兩方面作用，且無明顯不良反應(yīng)[4]。在CHB發(fā)病過程中，黏附因子(AMs)參與其中并起著重要作用，血清P-選擇素(P-selectin)是選擇素超家族的一種，可促進單核細胞、血小板、中性粒細胞與內(nèi)皮細胞的黏附，幫助其到達炎癥反應(yīng)的部位，在此過程中起橋梁作用。血清細胞間黏附分子-1(ICAM-1)是免疫球蛋白超家族的一種,它可與其受體淋巴細胞功能相關(guān)抗原-1( LFA-1)相結(jié)合，從而介導(dǎo)免疫反應(yīng)與炎癥反應(yīng)，是導(dǎo)致肝細胞壞死重要機制[5]。P-selectin與ICAM-1均是黏附因子，已經(jīng)在CHB等多種可引起肝功能異常的肝臟疾病中發(fā)現(xiàn)其表達異常[6]。筆者研究雙環(huán)醇片對CHB患者血清P-selectin與ICAM-1表達的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2018年4月至2019年4月確診的214例CHB患者，將其按隨機數(shù)字表法分為對照組和觀察組，各107例。對照組患者男68例，女39例；年齡27～61歲，平均(45.37±5.03)歲；病程1.5～14年，平均(7.31±1.52)年。觀察組患者男64例，女43例；年齡29～65歲，平均(47.49±5.83)歲；病程1～15年，平均(8.15±2.04)年。兩組患者在性別、年齡、病程等方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會的批準，且患者已知情同意并簽字。

1.2 納入及排除標準 納入標準：①符合《慢性乙型肝炎診斷標準》[7]；②符合抗HBV治療的適應(yīng)證，HBeAg和HBV DNA陽性；③年齡18～65歲。排除標準：①伴有其他類型肝炎者；②其他原因?qū)е赂喂δ墚惓Ｕ?；?個月內(nèi)進行過抗HBV治療者；④妊娠或哺乳期婦女；⑤患有嚴重的腎臟疾病或全身性疾病者；⑥合并自身免疫性疾?。虎邔ρ芯克幬镞^敏者。

1.3 治療方法 兩組患者均口服恩替卡韋片(博路定，中美上海施貴寶制藥有限公司，國藥準字H20052237)0.5 mg/次，1次/d，觀察組患者加服雙環(huán)醇片(百賽諾，北京協(xié)和藥廠，國藥準字H20040467)25 mg/次，3次/d，兩組患者均治療6個月。

1.4 觀察指標

1.4.1 肝功能 分別在治療前和治療6個月結(jié)束時，用全自動生化檢測儀檢測血清肝功能，包括丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBil)、白蛋白(Alb)。

1.4.2 HBV DNA轉(zhuǎn)陰率 分別在治療3個月和治療6個月結(jié)束時，釆用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù)測定患者HBV DNA情況，儀器為美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司生產(chǎn)的Prism 7000型熒光定量儀。

1.4.3 肝纖維化指標 分別在治療前和治療6個月結(jié)束時，檢測患者血清Ⅲ型前膠原(PC-Ⅲ)、層黏連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸酶(HA)水平，試劑盒選自深圳安群生物工程有限責(zé)任公司，所有操作嚴格按試劑盒說明書進行。

1.4.4 血清P-selectin及ICAM-1 分別在治療前和治療后6個月結(jié)束時，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定患者血清P-selectin和ICAM-1水平，試劑盒選自上海信帆生物科技有限責(zé)任公司，操作嚴格按試劑盒說明書進行。

1.5 療效判定標準 治療6個月結(jié)束時，根據(jù)患者肝功能與HBV DNA載量結(jié)果進行療效評價。顯效：肝功能恢復(fù)正?；蚧菊＃琀BV DNA載量<1 000 copses/ml；有效：肝功能明顯好轉(zhuǎn)，HBV DNA載量≥1 000 copses/ml，但與治療前比較下降≥2log10 copses/ml；無效：肝功能未見好轉(zhuǎn)，且HBV DNA載量下降<2log10 copses/ml。有效率=(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床療效比較 見表1。

表1 兩組患者臨床療效比較 [n(%)]

2.2 治療后兩組患者HBV DNA 轉(zhuǎn)陰率情況 見表2。

表2 兩組患者治療后HBV DNA轉(zhuǎn)陰例數(shù)比較 [n(%)]

2.3 兩組患者治療前后血清P-selectin與ICAM-1水平檢測情況 見表3。

表3 兩組患者治療前后P-selectin與ICAM-1結(jié)果比較

2.4 兩組患者治療前后肝功能檢測結(jié)果 見表4。

表4 兩組患者治療前后肝功能結(jié)果比較

2.5 兩組患者治療前后肝纖維化指標檢查結(jié)果 見表5。

表5 兩組患者治療前后纖維化結(jié)果比較

3 結(jié)論

HBV感染途徑有血液傳播、醫(yī)源性傳播、母嬰垂直傳播等[8]。HBV激活宿主產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，誘發(fā)肝臟病理損傷，引起微循環(huán)功能障礙，導(dǎo)致肝細胞缺血、缺氧，進而出現(xiàn)繼發(fā)性肝細胞損傷，最終可形成肝纖維化。因此，采用積極有效的治療方案顯得尤為重要[9]。

雙環(huán)醇片是我國人工合成用于治療肝炎的藥物，具有清除體內(nèi)自由基與抗氧化作用，保護肝細胞膜與線粒體，減少肝細胞DNA損傷，降低細胞凋亡，進而發(fā)揮保肝作用[10]。除此以外，雙環(huán)醇還能夠加速肝細胞蛋白質(zhì)的合成，有助于肝細胞再生，抑制肝纖維化。它不但能夠提升肝臟解毒功能，還能提高肝臟自我修復(fù)能力，從而顯著提高機體免疫力[11]。

本研究結(jié)果提示雙環(huán)醇片聯(lián)合恩替卡韋治療CHB患者，能夠抑制HBV活性，改善肝功能，抑制肝纖維化進展，提高臨床療效。雙環(huán)醇可有效抑制肝細胞核DNA的裂解與細胞凋亡，保護肝細胞不受HBV的損傷[12]。它能清除體內(nèi)自由基，維持肝細胞生物膜結(jié)構(gòu)的完整性。當人體感染HBV后可產(chǎn)生包括氧自由基在內(nèi)的多種炎性細胞因子，損傷肝細胞核與線粒體，導(dǎo)致細胞壞死與凋亡。而雙環(huán)醇片清除體內(nèi)自由基的作用正好有助于阻斷上述病理過程。雙環(huán)醇可通過促進肝臟蛋白質(zhì)合成的方式提高肝細胞修復(fù)功能，同時可減少炎癥對機體的損傷，進而抑制肝臟纖維化，促進肝功能恢復(fù)[13]。董力等[14]研究證明應(yīng)用雙環(huán)醇片治療CHB能減少患者肝臟炎癥反應(yīng)，改善肝功能，降低肝纖維化，取得了較好的臨床療效，與本文研究結(jié)果一致。

P-selectin本質(zhì)是一種顆粒膜蛋白，主要存貯在內(nèi)皮細胞和血小板內(nèi)。在正常狀態(tài)下表達量很少，但是當出現(xiàn)病理因素損傷血小板和內(nèi)皮細胞時，可導(dǎo)致其表達量增高[15，16 ]。在CHB患者機體內(nèi)，P-selectin在血小板和內(nèi)皮細胞上過量表達，與單核細胞、中性粒細胞上的抗原相結(jié)合，能夠介導(dǎo)白細胞黏附在內(nèi)皮細胞上，并且滾動、聚集以及活化從而釋放炎癥介質(zhì)，參與對肝細胞的損傷。ICAM-1是一種具有多種免疫調(diào)節(jié)功能的細胞因子，主要是由肝細胞與血管內(nèi)皮細胞分泌[17]。正常人體中，肝細胞僅可少量表達ICAM-1，其血清水平不高，當肝組織發(fā)生炎癥反應(yīng)時，刺激內(nèi)皮細胞與淋巴細胞產(chǎn)生大量的ICAM-1，致其血清水平上升[18]。ICAM-1有助于T細胞黏附于肝細胞以及識別病毒抗原，從而造成病毒感染的肝細胞炎癥損傷。P-selectin和ICAM-1作為黏附因子的重要成員，兩者共同參與乙型肝炎的病理過程[19]。HBV感染機體后，肝細胞受損導(dǎo)致機體釋放TNF-α、IFN-γ等細胞因子可誘導(dǎo)機體過度表達P-selectin和ICAM1，進而發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。本研究結(jié)果提示雙環(huán)醇可下調(diào)體內(nèi)TNF-α、IFN-γ等細胞因子水平，從而抑制P-selectin和ICAM-1等黏附分子的轉(zhuǎn)錄，降低其血清濃度[12]。

綜上所述，采用雙環(huán)醇片聯(lián)合恩替卡韋治療CHB患者，能夠明顯減輕肝組織炎癥反應(yīng)，改善肝功能，降低肝纖維化程度，提高HBV DNA 轉(zhuǎn)陰率，抑制P-selectin和ICAM-1的過度表達，減少肝臟損傷。