趙舉輝，牛雪濤

漢中市中心醫(yī)院醫(yī)療美容整形外科1、燒傷科2，陜西 漢中 723000

傷口愈合是人體再生表皮和真皮組織的自然生物學(xué)過(guò)程，包括止血、炎癥、上皮再形成和組織重塑。由于各種原因無(wú)法通過(guò)正常而有序的修復(fù)過(guò)程達(dá)到完整狀態(tài)的傷口被稱為慢性傷口。慢性傷口不僅給臨床治療帶來(lái)了巨大挑戰(zhàn)，也給患者家庭和社會(huì)帶來(lái)了經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[1]。重要的是，隨著年齡的增長(zhǎng)，慢性皮膚傷口無(wú)法治愈的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加[2]。在皮膚傷口愈合過(guò)程中，上皮再形成在皮膚組織修復(fù)中起著至關(guān)重要的作用。上皮再形成是角質(zhì)形成細(xì)胞從傷口邊緣遷移到表面再形成的復(fù)雜過(guò)程[3]。因此，角質(zhì)形成細(xì)胞的生理功能在傷口愈合過(guò)程中至關(guān)重要。上皮再生的過(guò)程受多種生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)，在這些細(xì)胞因子中，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)參與角質(zhì)形成細(xì)胞增殖和遷移的調(diào)控[4-5]。大量研究顯示，在傷口愈合過(guò)程中TGF-β1的表達(dá)顯著升高，且角質(zhì)形成細(xì)胞是TGF-β1作用的主要細(xì)胞[6-7]。三七是中草藥中極有藥用價(jià)值的植物，三七總皂苷是三七中的重要活性成分，在抗炎和抗氧化等領(lǐng)域具有許多應(yīng)用價(jià)值[8-9]。據(jù)報(bào)道，三七皂苷能夠抑制傷口炎癥反應(yīng)進(jìn)而促進(jìn)傷口愈合[10]。然而，三七總皂苷對(duì)傷口愈合的作用及機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)采用TGF-β1刺激角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT體外建立皮膚損傷模型，探究三七總皂苷對(duì)傷口愈合的影響及作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞和主要試劑 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞株HaCaT購(gòu)自美國(guó)ATCC細(xì)胞庫(kù)；三七總皂苷標(biāo)準(zhǔn)品(純度98%)購(gòu)自中檢所；AG490(JAK2信號(hào)通路抑制劑，純度99.97%)購(gòu)自美國(guó)MedChemExpress公司；DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清購(gòu)自美國(guó)Gibco公司；MTT檢測(cè)試劑、TGF-β1購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；RNA提取試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒購(gòu)自賽默飛世爾科技有限公司；JAK2和p-JAK2單克隆抗體和HRP標(biāo)記的IgG二抗購(gòu)自美國(guó)CST公司。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和分組處理 HaCaT細(xì)胞培養(yǎng)在DMEM培養(yǎng)基中，內(nèi)含10%胎牛血清，放置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中。當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)匯合90%左右時(shí)傳代培養(yǎng)，比例為1∶3。取對(duì)數(shù)期的HaCaT細(xì)胞接種到96孔板中，將細(xì)胞隨機(jī)分為空白對(duì)照(Con)組、模型(TGF-β1)組、三七總皂苷處理(NT)組和NT+AG490組。其中Con組的HaCaT細(xì)胞以正常培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，TGF-β1組的HaCaT細(xì)胞以5 ng/mL的TGF-β1處理24 h，NT組的HaCaT細(xì)胞以5 ng/mL的TGF-β1和100μg/mL三七總皂苷處理24 h。NT+AG490組的HaCaT細(xì)胞在三七總皂苷處理后加入25μmol/L的AG490處理24 h。

1.3 MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖 將HaCaT細(xì)胞接種到96孔板中，分組處理，分別在0、24 h、48 h和72 h時(shí)將10μL MTT試劑添加到每孔細(xì)胞中，并在5%CO2培養(yǎng)箱中于37℃孵育4 h，然后再向細(xì)胞中添加150μL二甲基亞砜，振蕩孵育，使用酶標(biāo)儀在570 nm處測(cè)定光密度值(OD值)。

1.4 平板克隆形成實(shí)驗(yàn) 各組HaCaT細(xì)胞接種于6孔板(500個(gè)/孔)，將其置于培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)直至出現(xiàn)肉眼可見的細(xì)胞克隆團(tuán)，隨后棄培養(yǎng)基，并加入預(yù)冷磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌，按照每孔500μL的密度將甲醇加入其中固定20 min(-20℃)，棄甲醇后按照每孔400μL的密度將1%結(jié)晶紫染色液加入其中染色15 min(室溫)，采用蒸餾水洗滌后晾干，拍照并觀察細(xì)胞克隆形成數(shù)。

1.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期 對(duì)數(shù)期的HaCaT細(xì)胞以6×105/孔接種到6孔板中，分組處理24 h后加入胰蛋白酶消化并收集細(xì)胞，PBS洗滌數(shù)次，加入染色緩沖液500μL重懸細(xì)胞，向細(xì)胞中添加250μL PI染液和10μL RnaseA染液，在37℃下避光孵育30 min，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布。

1.6 劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力 分組處理后的HaCaT細(xì)胞加入胰酶進(jìn)行消化，收集各組HaCaT細(xì)胞，計(jì)數(shù)后在培養(yǎng)皿中接種約1×103個(gè)細(xì)胞，放置在37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞單層匯合時(shí)，使用槍頭做劃痕，以PBS沖洗細(xì)胞及細(xì)胞碎片，拍照并記錄此時(shí)細(xì)胞劃痕距離，添加新的細(xì)胞培養(yǎng)液，培養(yǎng)48 h，拍照并記錄此時(shí)細(xì)胞劃痕距離，計(jì)算各組HaCaT細(xì)胞相對(duì)遷移率，相對(duì)遷移率=(0 h劃痕距離-48 h劃痕距離)/0 h劃痕距離。Transwell小室實(shí)驗(yàn)：將各組HaCaT細(xì)胞用不含血清的培養(yǎng)基重懸(1×105個(gè)/mL)，取100μL細(xì)胞懸液接到Transwell小室的上室中，下室加入600μL含10%胎牛血清的培養(yǎng)基，孵育48 h后取出Transwell小室，用棉簽拭去上表面的細(xì)胞，4%多聚甲醛固定30 min后，0.1%結(jié)晶紫染色10 min，于顯微鏡下計(jì)數(shù)遷移細(xì)胞數(shù)量。

1.7 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PCNA、MMP-2和MMP-9基因表達(dá) HaCaT細(xì)胞分組處理后，分別對(duì)各組HaCaT細(xì)胞進(jìn)行RNA提取，測(cè)定RNA的純度和濃度，使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒采用PCR儀進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，以反轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA作為模板，使用Real time PCR儀行qRT-PCR檢測(cè)，獲取內(nèi)參基因β-actin和目的基因PCNA、MMP-2和MMP-9的Ct值，使用相對(duì)定量2-ΔΔCt法計(jì)算目的基因的相對(duì)表達(dá)水平。

1.8 Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)JAK2和p-JAK2蛋白表達(dá) 加入適量細(xì)胞裂解液分別提取各組HaCaT細(xì)胞中總蛋白，采用BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)樣品濃度，取40μg蛋白加樣，制備10%SDS-PAGE凝膠，進(jìn)行電泳分離蛋白，隨后電轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜上，封阻，加入相應(yīng)1∶800稀釋的一抗，4℃進(jìn)行過(guò)夜雜交，取出膜再加入HRP標(biāo)記的IgG二抗，室溫進(jìn)行雜交2 h，在膜上滴加ECL化學(xué)發(fā)光顯色液，顯影、定影，采用GAPDH為內(nèi)參，使用Image J軟件分析條帶灰度值，分別計(jì)算JAK2和p-JAK2蛋白相對(duì)表達(dá)水平。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 以上實(shí)驗(yàn)均至少重復(fù)3次，采用SPSS20.0版軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間差異比較采用單因素方差分析，組間兩兩差異比較采用SNK-q檢驗(yàn)。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三七總皂苷對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖活力及克隆形成的影響 與Con組比較，TGF-β1組HaCaT細(xì)胞的增殖活力降低，細(xì)胞克隆形成數(shù)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與TGF-β1組比較，NT組HaCaT細(xì)胞的增殖活力升高，細(xì)胞克隆形成數(shù)增多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1和圖1。

圖1 三七總皂苷對(duì)HaCaT細(xì)胞克隆形成的影響Figure1 Effect of Panax notoginseng saponinson HaCaT cell cloneformation

表1 各組HaCaT細(xì)胞增殖活力(OD值)及克隆形成比較(±s，n=3)Table 1 Comparison of proliferation activity(OD value)and cloneformation of HaCaT cellsin each group(±s,n=3)

表1 各組HaCaT細(xì)胞增殖活力(OD值)及克隆形成比較(±s，n=3)Table 1 Comparison of proliferation activity(OD value)and cloneformation of HaCaT cellsin each group(±s,n=3)

注：與Con組比較，a P<0.05；與TGF-β1組比較，b P<0.05。Note:Compared with Con group,a P<0.05;Compared with TGF-β1 group,b P<0.05.

組別Con組TGF-β1組NT組F值P值0 h 0.23±0.02 0.22±0.02 0.22±0.01 0.333 0.729 24 h 0.46±0.04 0.29±0.02a 0.44±0.04b 21.583 0.002 48 h 0.72±0.07 0.46±0.04a 0.67±0.06b 16.960 0.003細(xì)胞克隆形成數(shù)(個(gè))107.61±10.63 44.95±4.77a 89.24±7.97b 46.861 0.001 72 h 1.21±0.11 0.53±0.05a 1.15±0.10b 92.244 0.001細(xì)胞增殖活力

2.2 三七總皂苷對(duì)HaCaT細(xì)胞周期的影響 與Con組比較，TGF-β1組中G0/G1期細(xì)胞比例升高，S期和G2/M期細(xì)胞比例降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與TGF-β1組比較，NT組中G0/G1期細(xì)胞比例降低，S期和G2/M期細(xì)胞比例升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2和圖2。

表2 各組中G0/G1期、S期和G2/M期細(xì)胞比例比較(±s，n=3)Table 2 Comparison on the proportion of cells in G0/G1,S,and G2/M phasesin each group(±s,n=3)

表2 各組中G0/G1期、S期和G2/M期細(xì)胞比例比較(±s，n=3)Table 2 Comparison on the proportion of cells in G0/G1,S,and G2/M phasesin each group(±s,n=3)

注：與Con組比較，a P<0.05；與TGF-β1組比較，b P<0.05。Note:Compared with thevalue in Con group,a P<0.05;Compared with the valuein TGF-β1 group,b P<0.05.

組別Con組TGF-β1組NT組F值P值G0/G1 48.72±4.75 64.06±5.66a 51.36±4.48b 8.107 0.020 S 33.16±3.13 22.32±2.04a 31.04±2.87b 13.384 0.006 G2/M 18.12±1.09 13.62±1.04a 17.60±1.16b 15.086 0.005

圖2 三七總皂苷對(duì)HaCaT細(xì)胞周期的影響Figure 2 Effect of Panax notoginseng saponinson HaCaT cell cycle

2.3 三七總皂苷對(duì)HaCaT細(xì)胞遷移能力的影響 與Con組比較，TGF-β1組HaCaT細(xì)胞的相對(duì)遷移率、遷移細(xì)胞數(shù)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與TGF-β1組比較，NT組HaCaT細(xì)胞的相對(duì)遷移率、遷移細(xì)胞數(shù)升高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見圖3和表3。

圖3 三七總皂苷對(duì)TGF-β1刺激的HaCaT細(xì)胞遷移的影響Figure3 Effect of Panax notoginseng saponins on migration of HaCaT cellsstimulated by TGF-β1

表3 各組HaCaT細(xì)胞遷移能力比較(±s，n=3) Table 3 Comparison of migration ability of HaCaT cells in each group(±s,n=3)

表3 各組HaCaT細(xì)胞遷移能力比較(±s，n=3) Table 3 Comparison of migration ability of HaCaT cells in each group(±s,n=3)

注：與Con組比較，a P<0.05；與TGF-β1組比較，b P<0.05。Note:Compared with the value in Con group,a P<0.05;Compared with the valuein TGF-β1 group,b P<0.05.

組別Con組TGF-β1組NT組F值P值相對(duì)遷移率1.00±0.09 0.54±0.05a 0.87±0.09b 27.064 0.001遷移細(xì)胞數(shù)(個(gè))127.76±11.86 54.16±5.04a 105.49±11.40b 43.313 0.001

2.4三七總皂苷對(duì)HaCaT細(xì)胞中PCNA、MMP-2和MMP-9基因表達(dá)的影響 與Con組比較，TGF-β1組HaCaT細(xì)胞中PCNA、MMP-2和MMP-9的表達(dá)量降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與TGF-β1組比較，NT組HaCaT細(xì)胞中PCNA、MMP-2和MMP-9的表達(dá)量升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

表4 各組HaCaT細(xì)胞中PCNA、MMP-2和MMP-9表達(dá)量比較(±s，n=3)Table 4 Comparison of the expression levels of PCNA,MMP-2,and MMP-9 in HaCaT cellsof each group(±s，n=3)

表4 各組HaCaT細(xì)胞中PCNA、MMP-2和MMP-9表達(dá)量比較(±s，n=3)Table 4 Comparison of the expression levels of PCNA,MMP-2,and MMP-9 in HaCaT cellsof each group(±s，n=3)

注：與Con組比較，a P<0.05；與TGF-β1組比較，b P<0.05。Note:Compared with the value in Con group,a P<0.05;Compared with the valuein TGF-β1 group,b P<0.05.

組別Con組TGF-β1組NT組F值P值PCNA 1.00±0.10 0.41±0.06a 1.47±0.14b 76.473 0.001 MMP-2 1.00±0.09 0.62±0.08a 1.37±0.14b 37.17 0.001 MMP-9 1.00±0.09 0.57±0.07a 1.44±0.14b 52.243 0.001

2.5 三七總皂苷對(duì)HaCaT細(xì)胞中JAK2信號(hào)通路激活的影響 與Con組比較，TGF-β1組HaCaT細(xì)胞中JAK2的磷酸化水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與TGF-β1組比較，NT組HaCaT細(xì)胞中JAK2的磷酸化水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見圖4和表5。

表5 各組HaCaT細(xì)胞JAK2和p-JAK2的表達(dá)水平比較(±s，n=3)Table 5 Comparison of the expression levels of JAK2 and p-JAK2 in HaCaT cells of each group(±s，n=3)

表5 各組HaCaT細(xì)胞JAK2和p-JAK2的表達(dá)水平比較(±s，n=3)Table 5 Comparison of the expression levels of JAK2 and p-JAK2 in HaCaT cells of each group(±s，n=3)

注：與Con組比較，a P<0.05；與TGF-β1組比較，b P<0.05。Note:Compared with the value in Con group,a P<0.05;Compared with the valuein TGF-β1 group,b P<0.05.

組別Con組TGF-β1組NT組F值P值JAK2 0.79±0.08 0.81±0.08 0.81±0.07 0.068 0.935 p-JAK2 0.20±0.02 0.07±0.01a 0.45±0.05b 111.900 0.000

圖4 Western blot檢測(cè)各組HaCaT細(xì)胞JAK2和p-JAK2的表達(dá)水平Figure 4 Expression levels of JAK2 and p-JAK2 in HaCaT cells of each group detected by Western blot

2.6 AG490減弱三七總皂苷對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞增殖、遷移的影響 與NT組比較，NT+AG490組細(xì)胞活力降低，細(xì)胞克隆形成數(shù)減少，G0/G1期比例升高，S期比例降低，相對(duì)遷移率降低，遷移細(xì)胞數(shù)減少，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見圖5和表6。

表6 AG490減弱三七總皂苷對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞增殖、周期和遷移的影響(±s，n=3)Table 6 AG490 attenuates the effects of Panax notoginseng saponins on proliferation,cycle,and migration of HaCaT cells induced by TGF-β1(±s,n=3)

表6 AG490減弱三七總皂苷對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞增殖、周期和遷移的影響(±s，n=3)Table 6 AG490 attenuates the effects of Panax notoginseng saponins on proliferation,cycle,and migration of HaCaT cells induced by TGF-β1(±s,n=3)

注：與NT組比較，a P<0.05Note:Compared with thevaluein NT group,a P<0.05.

組別NT組NT+AG490組t值P值0 h 0.22±0.02 0.23±0.01 0.775 0.482 24 h 0.46±0.03 0.32±0.02a 6.725 0.003 48 h 0.69±0.05 0.53±0.04a 4.328 0.012 72 h 1.18±0.09 0.60±0.06a 9.287 0.001細(xì)胞克隆形成數(shù)(個(gè))92.55±7.56 53.12±5.46a 7.323 0.002 G0/G1 50.45±4.19 59.36±3.37a 2.870 0.045 S 33.58±3.04 26.48±2.94a 2.908 0.044 G2/M 15.97±2.14 14.14±1.85 1.120 0.325相對(duì)遷移率0.89±0.07 0.63±0.05a 5.235 0.006遷移細(xì)胞數(shù)(個(gè))108.62±10.14 62.24±5.78a 6.883 0.002

圖5 AG490減弱三七總皂苷對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞增殖、周期和遷移的影響Figure5 AG490 attenuatestheeffects of Panax notoginseng saponinson proliferation,cycle,and migration of HaCaT cellsinduced by TGF-β1

3 討論

皮膚傷口愈合障礙一直是嚴(yán)重的健康問(wèn)題，它可能導(dǎo)致患者潰瘍、復(fù)發(fā)、截肢甚至死亡[11]。皮膚傷口愈合是一個(gè)復(fù)雜且精確的調(diào)節(jié)過(guò)程，主要涉及以下四個(gè)階段：止血，炎癥，再上皮形成和組織重塑。再上皮化是用新的上皮使傷口重新表面化，角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖和遷移是再上皮形成過(guò)程中的關(guān)鍵步驟[12]。臨床上通過(guò)藥物、基因、細(xì)胞因子和手術(shù)作為治療策略，在傷口愈合的管理方面取得了較大的進(jìn)步[13]。

三七總皂苷是傳統(tǒng)中藥三七的有效活性成分，具有止血化瘀、抗炎消腫止痛等功效。以往研究顯示，三七總皂苷能夠有效促進(jìn)創(chuàng)傷愈合，然而其作用機(jī)制尚不清楚[14-15]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)TGF-β1誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞來(lái)構(gòu)建皮膚損傷模型來(lái)探究三七總皂苷在傷口愈合中的生物學(xué)功能及潛在機(jī)制。在前期預(yù)實(shí)驗(yàn)中，采用不同濃度的三七總皂苷刺激TGF-β1誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞，處理不同時(shí)間，最終篩選出三七總皂苷作用濃度為100μg/mL，作用時(shí)間為24 h。本實(shí)驗(yàn)采用100μg/mL的三七總皂苷干預(yù)TGF-β1誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞損傷模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三七總皂苷能夠有效提高TGF-β1誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞增殖活力，促進(jìn)HaCaT細(xì)胞遷移。表明三七總皂苷具有促進(jìn)創(chuàng)面再上皮化的潛力。PCNA是一種存在于細(xì)胞核中與DNA合成有關(guān)的蛋白質(zhì)，只存在于增殖的細(xì)胞中，對(duì)啟動(dòng)細(xì)胞增殖至關(guān)重要，目前已將其作為反映細(xì)胞處于增殖狀態(tài)的重要指標(biāo)之一[16]。MMP-2和MMP-9均屬于基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員，兩者編碼的蛋白質(zhì)能夠有效降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，賦予細(xì)胞轉(zhuǎn)移特性。因此，MMP-2和MMP-9表達(dá)水平的升高間接反映細(xì)胞具有較高的遷移能力[17]。在本實(shí)驗(yàn)中，三七總皂苷能上調(diào)TGF-β1誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞中PCNA、MMP-2和MMP-9的表達(dá)。再次證實(shí)三七總皂苷能促進(jìn)TGF-β1誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞增殖和遷移，具有促進(jìn)創(chuàng)面再上皮化的潛力。

JAK2信號(hào)傳導(dǎo)途徑是一種經(jīng)典的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，在細(xì)胞增殖、遷移和凋亡中起著關(guān)鍵作用[18-19]。據(jù)報(bào)道，激活JAK2信號(hào)通路可促進(jìn)兔脛骨骨折愈合[20]；且激活JAK2信號(hào)通路可促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖，這種促增殖作用可被AG490抑制[21]。為探究三七總皂苷的作用機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)采用Western blot檢測(cè)JAK2信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三七總皂苷能夠有效逆轉(zhuǎn)TGF-β1誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞中JAK2的磷酸化水平降低，提示三七總皂苷能夠激活JAK2信號(hào)通路。此外，JAK2信號(hào)通路抑制劑AG490可明顯減弱三七總皂苷對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞增殖和遷移的影響。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，三七總皂苷可能通過(guò)激活JAK2信號(hào)通路提高TGF-β1干預(yù)的HaCaT細(xì)胞增殖和遷移能力來(lái)促進(jìn)傷口愈合。

總之，三七總皂苷能有效促進(jìn)TGF-β1刺激的HaCaT細(xì)胞增殖和遷移來(lái)促進(jìn)傷口愈合，其作用機(jī)制可能與激活JAK2信號(hào)通路有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)表明三七總皂苷可能具有潛在的促進(jìn)傷口愈合功能，可用于開發(fā)新型傷口修復(fù)藥物。但是，三七總皂苷促進(jìn)傷口愈合的確切機(jī)制仍需要進(jìn)一步研究來(lái)驗(yàn)證。