孔新利，李愛萍，王 華，孔繁云，孔 偉，馬 超，蘇 強(qiáng)，梁邦武，郭亞亞

（1.甘肅省涇川縣畜牧獸醫(yī)中心，甘肅平?jīng)?744315；2.甘肅省莊浪縣南坪鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，甘肅平?jīng)?744600；3.甘肅省家畜繁育改良管理站，甘肅武威 733000）

產(chǎn)犢間隔是反映平?jīng)黾t牛核心繁育場繁殖力的重要指標(biāo)，直接影響繁殖母牛場的經(jīng)濟(jì)效益。抓好繁育是實現(xiàn)平?jīng)黾t牛擴(kuò)繁增量的基礎(chǔ)工作，平常對牛場產(chǎn)犢間隔的調(diào)控是通過加強(qiáng)繁殖母牛群營養(yǎng)，改善圍產(chǎn)期飼養(yǎng)管理，提高牛群舒適度，做好接產(chǎn)消毒工作和產(chǎn)后護(hù)理等措施來縮短空懷天數(shù)。但目前，在平?jīng)黾t牛產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展階段，受生產(chǎn)中產(chǎn)犢間隔延長、產(chǎn)后乏情、屢配不孕等問題困擾，不能完全實現(xiàn)1年1胎生產(chǎn)目標(biāo)，導(dǎo)致平?jīng)黾t牛繁殖母牛的繁殖周期和空懷期延長，增加了牛場的飼養(yǎng)費用和管理成本，降低了牛場效益。為縮短平?jīng)黾t牛繁殖母牛的產(chǎn)犢間隔，對產(chǎn)后不同時期的母牛用LRH-A3或PGF2a+維生素ADE處理，以促進(jìn)母牛子宮、卵巢機(jī)能恢復(fù)，及時發(fā)情配種，達(dá)到縮短產(chǎn)犢間隔的目的（楊利國，2014）。

1 材料與方法

1.1 試驗牛群 試驗于2020年10月25日在涇川縣泰恒牧業(yè)有限公司進(jìn)行，共選擇60頭體況良好，2～6胎，體重400～500 kg的3～8歲經(jīng)產(chǎn)平?jīng)黾t牛繁殖母牛，無繁殖障礙性疾病史，眼觀無子宮感染。正常飼養(yǎng)條件，每天飼喂3次，自由飲水、運動。

1.2 試驗藥品 促黃體素釋放激素A3（LRH-A3），氯前列醇鈉注射液（PGF2a），均為寧波第二激素廠生產(chǎn)，維生素ADE油制劑（有效成分及含量：維生素A 100萬IU，維生素D 10萬IU，維生素 E 3000 IU），為蘇州素仕生物科技有限公司生產(chǎn)，石蠟油、生理鹽水、聚維酮碘液。

1.3 試驗設(shè)計與儀器 試驗采用完全隨機(jī)設(shè)計，將60頭3～8歲平?jīng)黾t牛能繁母牛分4組，每組15頭。分別為試驗A組、B組、C組和對照組，試驗期為 450 d。

器材：一次性注射器，直檢手套、防護(hù)服、一次性手套、腳套、口罩、雨鞋等，MU-10型獸用超聲顯像診斷儀、7.5 MHz高頻線陣探頭等從大為醫(yī)療公司采購。

1.4 試驗方法

1.4.1 應(yīng)用激素與維生素ADE處理 對照組：隨機(jī)選15頭牛進(jìn)行正常飼養(yǎng)管理，不做任何處理。

試驗A組：隨機(jī)選15頭牛，在產(chǎn)后3周內(nèi)進(jìn)行直檢，子宮卵巢無明顯病變牛，一側(cè)肌注LRH-A3 50μg，另一側(cè)肌注維生素 ADE 10 mL。7～10 d后直檢卵巢上有無黃體，并觀察記錄牛群發(fā)情規(guī)律。

試驗B組：隨機(jī)選15頭牛，在產(chǎn)后30～50 d進(jìn)行直檢，觸摸卵巢上有黃體的牛，一側(cè)肌注 PGF2a 0.4 ～ 0.6 mg，另一側(cè)肌注維生素ADE 10 mL。若發(fā)情，看母牛爬跨表現(xiàn)、陰門腫脹程度和周圍分泌黏液情況適時配種；卵巢上沒黃體則肌注 LRH-A3 50μg，待 5～ 7 d后觀察并記錄牛的發(fā)情規(guī)律。

試驗C組：隨機(jī)選15頭牛，在產(chǎn)后60～70 d直檢，觸摸卵巢上有黃體者，肌注PGF2a 0.4 ～ 0.6 mg，等發(fā)情后適時配種 ；若卵巢上無黃體也不發(fā)情的，則要一側(cè)肌注LRH-A3 50μg，另一側(cè)肌注維生素 ADE 10 mL。7 ～ 10 d后再進(jìn)行直檢，卵巢上有黃體殘留的牛，肌注PGF2a 0.4 ～ 0.6 mg，待 48 ～ 72 h 后 觀 察 牛有無發(fā)情表現(xiàn)，若卵巢上無黃體的牛則繼續(xù)肌注 LRH-A3 50μg，同時配合注射維生素 ADE 10 mL，然后觀察記錄牛只發(fā)情規(guī)律。

1.4.2 B超檢查 試驗組母牛直檢卵巢大多處于卵泡期，觸摸形狀、質(zhì)地、大小及彈性，用LRH-A3+維生素ADE處理。自處理后，用B超及時跟蹤檢查，直到發(fā)情，記錄每次檢查的卵泡大小。若檢查卵巢上有黃體，則用PGF2a與維生素ADE配合處理，跟蹤觸摸處理后卵巢上黃體退化情況，以及發(fā)育卵泡的大小和位置。

1.5 試驗結(jié)果判斷 PGF2a+維生素ADE處理后母牛一般3～5 d發(fā)情，或直檢卵巢黃體溶解為見效；LRH-A3+維生素ADE處理后一般在7～10 d卵泡發(fā)育到排卵，然后有黃體生成即為見效。

1.6 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)采用方差分析處理。

2 試驗結(jié)果

2.1 激素和維生素ADE處理對平?jīng)黾t牛產(chǎn)犢間隔的影響 由表1可知，母牛產(chǎn)后40～50 d內(nèi)發(fā)情率試驗A組、B組與C組和對照組差異極顯著（P＜ 0.01），70 d內(nèi)發(fā)情率為試驗 A 組、B組與對照組差異極顯著（P＜0.01），而試驗C組與對照組表現(xiàn)差異顯著（P＜0.05）。試驗組分別與對照組第一情期受胎率差異不顯著（P＞0.05），但產(chǎn)后初次發(fā)情時間，試驗A組與對照組表現(xiàn)差異極顯著（P＜0.01），試驗B組與對照組差異顯著（P＜0.05），試驗C組與對照組之間表現(xiàn)差異不顯著（P＞0.05），試驗A組與C組之間對比表現(xiàn)差異顯著。產(chǎn)后至妊娠間隔時間，試驗A與對照組表現(xiàn)差異極顯著（P＜0.01），試驗B組、C組分別與對照組表現(xiàn)差異顯著（P＜0.05），試驗A組與C組對比差異顯著（P＜0.05）。

表1 激素和維生素ADE處理對平?jīng)黾t牛產(chǎn)犢間隔的影響

2.2 維生素ADE與PGF2a和LRH-A3結(jié)合處理對母牛卵巢的作用效果 由表2可知，平?jīng)黾t牛在產(chǎn)后3周內(nèi)，卵巢多數(shù)處于卵泡期階段，20 d后母牛卵巢有的處于黃體期，有的處于卵泡期，這是由產(chǎn)后初次排卵時間決定的。若產(chǎn)后初次發(fā)情推遲的母牛，卵巢多處于靜止階段，且主要為單側(cè)卵巢發(fā)育停止，一側(cè)卵巢基本正常。

表2 維生素ADE與PGF2a和LRH-A3處理后對母牛卵巢的效果

2.3 PGF2a+維生素ADE處理前后平?jīng)黾t牛母牛的卵巢狀態(tài)變化 由表3可知，用PGF2a+維生素ADE處理后，其發(fā)情時間一般為處理后3～5 d，待黃體溶解后母牛發(fā)情，此時發(fā)育卵泡大多在單側(cè)，以右側(cè)排卵為主。

表3 PGF2a與維生素ADE處理前后母牛的卵巢狀態(tài)變化

3 分析與討論

3.1 維生素ADE與PGF2a和LRH-A3結(jié)合處理產(chǎn)后母牛的效果 由表1可知，在產(chǎn)后40～50 d內(nèi)，對照組與C組母牛發(fā)情率明顯低于A組和B組，說明母牛產(chǎn)后早期用激素+維生素ADE對恢復(fù)卵巢生理功能有顯著效果；在產(chǎn)后70 d內(nèi)，對照組發(fā)情率明顯低于試驗A組、B組、C組，其原因是在母牛產(chǎn)后70d內(nèi)，對試驗組母牛群用激素和維生素ADE處理結(jié)果。試驗組經(jīng)過維生素ADE與激素處理后，母牛卵巢功能恢復(fù)加快，縮短了產(chǎn)后至發(fā)情間隔的時間；而對照組母牛處于產(chǎn)后泌乳期，機(jī)體長期處于營養(yǎng)負(fù)平衡狀態(tài)，性腺軸較長時間處于營養(yǎng)缺乏性靜止?fàn)顟B(tài)，導(dǎo)致卵巢生理功能恢復(fù)較慢，體內(nèi)生殖激素水平較低，產(chǎn)后初次發(fā)情推遲（佟桂芝等，2014）。此外，母牛膘情體況、氣候環(huán)境等也會影響母牛產(chǎn)后初次發(fā)情和排卵時間。

從表2分析，產(chǎn)后3周內(nèi)母牛，卵巢多數(shù)在卵泡期，20d后母牛卵巢有處于黃體期的，這與產(chǎn)后母牛初次排卵時間有關(guān)（呂雪峰等，2009）；產(chǎn)后初次發(fā)情推遲的母牛，卵巢多處于不發(fā)育、靜止?fàn)顟B(tài)，一般為單側(cè)卵巢靜止，兩側(cè)同時靜止的情況很少出現(xiàn)。當(dāng)然，母牛產(chǎn)后初次發(fā)情時間與機(jī)體功能恢復(fù)和失重有關(guān)。據(jù)生產(chǎn)統(tǒng)計，平?jīng)黾t牛產(chǎn)后初次排卵率若在70%以上，多數(shù)母牛發(fā)生在產(chǎn)后50d以后。因為在生產(chǎn)中，母牛卵巢生理周期功能在50 d內(nèi)很難恢復(fù)，相應(yīng)產(chǎn)后第一情期受胎率也自然會降低。用B超檢測青年母牛產(chǎn)后初次發(fā)情周期多在30～40 d，而且大多母牛表現(xiàn)為靜默發(fā)情。據(jù)此次試驗觀察平?jīng)黾t牛產(chǎn)后發(fā)情表現(xiàn)，在產(chǎn)后50 d前母牛出現(xiàn)發(fā)情行為較少。而對照組和C組第一情期受胎率比較高，是因為母牛自產(chǎn)后空懷時間延長，子宮和卵巢功能恢復(fù)良好，配種第一情期受胎率普遍較高。

從整個試驗分析看，平?jīng)黾t牛產(chǎn)后用維生素ADE和激素處理的時間越遲，母牛產(chǎn)后初次發(fā)情和配種時間就越遲，妊娠間隔相應(yīng)會延長。試驗A組母牛產(chǎn)犢間隔多在360～390 d，說明在母牛產(chǎn)后3周內(nèi)注射維生素ADE和LRH-A3可以促進(jìn)母牛卵巢功能恢復(fù)，實現(xiàn)母牛產(chǎn)后早期發(fā)情配種，按時妊娠。維生素ADE能解決母牛營養(yǎng)失衡問題，以提高繁殖性能、縮短產(chǎn)犢間隔、提升繁殖胎次為用途。LRH-A3能提升母牛性腺軸的生殖調(diào)節(jié)機(jī)能，對母牛有促進(jìn)排卵、誘導(dǎo)發(fā)情、提高受孕的作用（朱化彬，2018）。注射激素LRH-A3后能大幅提高血液中促黃體素釋放激素的濃度，使卵泡發(fā)育成熟，縮短母牛產(chǎn)后發(fā)情的首次排卵時間。同時，由于母牛產(chǎn)后初次發(fā)情時黃體功能不健全，分泌孕酮濃度低，但在第2～3次發(fā)情時黃體功能會逐漸完善，分泌孕激素增多，這樣可在母牛產(chǎn)后出現(xiàn)1～2個發(fā)情周期后再配種可明顯提高受孕率。

3.2 維生素ADE結(jié)合激素處理前后母牛卵巢的變化情況

3.2.1 維生素ADE與LRH-A3處理后母牛卵巢狀態(tài)的變化 維生素ADE與LRH-A3結(jié)合處理可促進(jìn)平?jīng)黾t牛卵泡生長發(fā)育，治療產(chǎn)后母牛卵巢靜止，提高母牛受胎率。從B超影像看，當(dāng)母牛卵巢有優(yōu)勢卵泡發(fā)育時，用藥處理后，卵泡會持續(xù)發(fā)育至排卵。同時，在母牛處理后8～13 d可看到卵巢上有黃體發(fā)育，液體腔基本消失。維生素ADE與LRH-A3結(jié)合使用能激發(fā)卵巢的周期性活動，促進(jìn)卵泡成熟排卵，可有效預(yù)防母牛卵泡囊腫（桑潤滋，2002）。在處理后3～6 d再檢查，觸摸發(fā)現(xiàn)卵巢體積增大，質(zhì)地變軟，B超檢測卵巢有3～5 mm灰暗區(qū)出現(xiàn)，說明卵巢功能在逐漸恢復(fù)，且有卵泡開始發(fā)育。

3.2.2 PGF2a與維生素ADE結(jié)合處理后母牛卵巢狀態(tài)的變化 B超顯示母牛卵巢上黃體呈灰色或暗黑色區(qū)域，在排卵后2 d內(nèi)，排卵窩與卵泡B超影像很難區(qū)分，在第3天時黃體逐漸形成，影像回聲增強(qiáng)；用PGF2a與維生素ADE處理后黃體開始溶解，卵巢上的優(yōu)勢卵泡開始發(fā)育（王建辰，1999）。同時試驗得到，平?jīng)黾t牛產(chǎn)后母牛卵巢上可同時有黃體和卵泡存在，但因為有黃體分泌的孕酮會抑制卵泡發(fā)育，會延長發(fā)情周期。母牛發(fā)情排卵的位置可以在同側(cè)卵巢，也可在另一側(cè)卵巢，用PGF2a和維生素ADE處理后明顯縮短了母牛發(fā)情配種間隔和繁殖周期。

3.3 試驗牛群中注射維生素ADE油制劑 試驗選擇維生素ADE油制劑注射而不添加在飼料中是因為維生素ADE是增強(qiáng)母牛繁殖不可或缺的關(guān)鍵營養(yǎng)元素，油制劑為復(fù)合型長效制劑，生物利用度高，減少應(yīng)激，一次注射長效可達(dá)15 d。粉劑具有良好的親水性和分散性，拌料更容易在空氣中被氧化和藥效降解，且易受胃腸道消化液的降解破壞和食物影響。同時又因機(jī)體需求量微小，在生產(chǎn)中很難拌勻，會影響試驗效果，所以選擇注射。

4 結(jié)論

在平?jīng)黾t牛產(chǎn)后3周內(nèi)注射維生素ADE油制劑與激素LRH-A3，可以有效縮短繁殖母牛產(chǎn)犢間隔。在母牛產(chǎn)后根據(jù)卵巢狀態(tài)分別用維生素ADE油制劑與PGF2a或LRH-A3處理，對縮短母牛產(chǎn)后首次發(fā)情出現(xiàn)時間效果顯著。