強(qiáng) 鄭，劉 鑫，王山杉，梁錦炎，唐婭琴，周心怡*

（1.珠海市婦幼保健院，珠海 519000；2.桂林醫(yī)學(xué)院智能醫(yī)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院，桂林 541000；3.桂林醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院，桂林 541000）

腹瀉是全球范圍內(nèi)健康領(lǐng)域的重要問(wèn)題，通常表現(xiàn)為大便次數(shù)增多，便稀、呈水樣或黏液樣，伴隨著腹痛、嘔吐等癥狀。造成腹瀉的原因眾多，其中，由病毒引起的感染性腹瀉占據(jù)主導(dǎo)地位［1］。輪狀病毒歸類于呼腸孤病毒科（Reoviridae），其基因組為分11 節(jié)段的單股雙鏈RNA，病毒在宿主細(xì)胞漿內(nèi)復(fù)制［2］，主要經(jīng)糞-口或口-口傳播，亦可通過(guò)食物、水源、氣溶膠等形式經(jīng)食道、呼吸道傳播，是引起感染性腹瀉的主要病原之一。

輪狀病毒基于外殼蛋白VP6 的抗原性差異，被分為8 個(gè)組（group A～group H）和2個(gè)暫定組（group I～group J）［3］。A 組輪狀病毒（group A rotavirus，RVA）在人類中致病性較高，是引起嬰幼兒重癥腹瀉的主要病原體［4］，幾乎每名兒童在5 歲以前都感染過(guò)RVA［5-6］。與發(fā)達(dá)國(guó)家相比，發(fā)展中國(guó)家的感染率和病死率更高。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年大約有250 萬(wàn)嬰幼兒因RVA 感染導(dǎo)致腹瀉，因其死亡的5 歲以下兒童高達(dá)2.7萬(wàn)［7］。目前尚無(wú)臨床特效藥針對(duì)RVA，只能依賴監(jiān)測(cè)和接種疫苗等措施進(jìn)行預(yù)防。

2019 年，國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)宣布，將輪狀病毒疫苗納入國(guó)家免疫規(guī)劃，預(yù)防RVA的單價(jià)口服輪狀病毒活疫苗（lanzhou lamp rotaviros vaccine，LLR）以及預(yù)防G1、G2、G3、G4、G9 血清型輪狀病毒的口服五價(jià)重配輪狀病毒減毒活疫苗（reassortant rotavirus vaccine，live，oral，pentavalent，RV5）等在我國(guó)被批準(zhǔn)使用。隨著輪狀病毒疫苗的廣泛推廣，RVA 感染的流行病學(xué)格局正在發(fā)生變化。為了更科學(xué)地指導(dǎo)RVA的防控策略，本研究對(duì)珠海市婦幼保健院散發(fā)腹瀉患者的RVA 感染情況進(jìn)行為期4 年的連續(xù)監(jiān)測(cè)，旨在了解珠海地區(qū)RVA感染性腹瀉的流行情況、趨勢(shì)及特點(diǎn)，希望為本地區(qū)制定更為精準(zhǔn)和有效的公共衛(wèi)生措施提供可靠的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料來(lái)源

采集2019 年1 月1 日至2022 年12 月31 日就診于珠海市婦幼保健院的腹瀉患者的糞便樣本。樣本采集病例符合輪狀病毒感染性腹瀉病例監(jiān)測(cè)定義。納入研究的病例總數(shù)為11 385 例，其中男性6 461 例，女性4 924 例，最小年齡為1 日齡，最大年齡為91歲。

1.2 病例定義

根據(jù)廣東省藥品檢驗(yàn)所發(fā)布的《輪狀病毒疫苗》中關(guān)于輪狀病毒臨床表現(xiàn)的介紹，規(guī)定病例納入標(biāo)準(zhǔn)為：1）每日（24 h）排便≥3 次且大便性狀發(fā)生改變；2）臨床表現(xiàn)非腹瀉或腹瀉未達(dá)到3 次/日，表現(xiàn)為突起發(fā)熱、嘔吐、腹痛；3）入選標(biāo)準(zhǔn)患者的糞便樣本均經(jīng)過(guò)RVA 抗原檢測(cè)。排除標(biāo)準(zhǔn)：1）7 d 內(nèi)相同登記號(hào)的重復(fù)結(jié)果；2）臨床資料不完整。

1.3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

用檢便匙取水樣或含絮狀物的液狀糞便1～2 mL，成形糞便至少取蠶豆大小糞便1 塊（約5 g）放入檢便盒內(nèi)，于-20℃保存。采用北京新興四寰生物技術(shù)有限公司輪狀病毒（A 組）/腺病毒抗原二合一檢測(cè)試劑盒（膠體金法）進(jìn)行抗原檢測(cè)。該試劑盒利用膠體金免疫層析作用原理，金標(biāo)墊上固定膠體金標(biāo)記的鼠抗輪狀病毒抗體。檢測(cè)陽(yáng)性樣本時(shí)，樣本中的輪狀病毒抗原與金標(biāo)墊上的鼠抗輪狀病毒抗體結(jié)合形成復(fù)合物，并在層析作用下沿膜移動(dòng)。經(jīng)過(guò)檢測(cè)線時(shí)與預(yù)包被的抗體形成夾心復(fù)合物而凝聚顯色，并在質(zhì)控線處與羊抗鼠IgG 抗體結(jié)合而顯色，陰性樣本則僅在質(zhì)控線處顯色。檢測(cè)時(shí)，使用采便螺旋棒從糞便樣本中取出100 mg，放入裝有樣本稀釋液的采便器中，旋緊瓶蓋；振蕩混勻，擰開(kāi)采便器頂端小帽；將檢測(cè)卡平放于干燥的平面上，垂直滴加100 μL（約2～3 滴）混勻后的樣本至測(cè)試卡加樣端中心；5～15 min 判讀；僅C 線顯色為陰性，C線、R線均顯色為RVA陽(yáng)性。該試劑盒系列稀釋的最低檢出限內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)品，陽(yáng)性終點(diǎn)的稀釋體積比應(yīng)不低于1:8。金黃色葡萄球菌陽(yáng)性、致瀉性大腸桿菌陽(yáng)性、腸炎沙門菌陽(yáng)性、痢疾桿菌陽(yáng)性、諾如病毒陽(yáng)性（S/C 值：≤8.34）、星狀病毒陽(yáng)性（S/C 值：≤9.22）樣本均不影響此試劑盒對(duì)糞便樣本中RVA抗原的檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用Excel 2020 整理數(shù)據(jù)并繪制分布圖；使用SPSS 20.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)值精確至小數(shù)點(diǎn)后三位；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（例）或百分比率（%）表示，組間計(jì)數(shù)資料以率比較，結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后三位。率的比較使用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 RVA感染的性別分布

11 385 例標(biāo)本中（男性患者的標(biāo)本為6 461 例，女性患者標(biāo)本為4 924 例），RVA 陽(yáng)性結(jié)果為1 044例，陽(yáng)性率為9.170%。男性病例與女性病例陽(yáng)性率分別為9.395%（607/6 461）、8.875%（437/4 924），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），不同性別腹瀉患者RVA抗原的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 2019—2022 年腹瀉患者RVA感染的性別分布Tab.1 Gender distribution of RVA infection in 2019—2022 diarrhea patients

2.2 RVA感染的時(shí)間分布

2.2.1 不同年份腹瀉患者RVA感染的情況及分布

2019—2022 年中，2019 年陽(yáng)性率最高，為12.850%（147/1 144），均高于其他年份（P＜0.05），各年份與之比較的結(jié)果見(jiàn)表2；2022 年陽(yáng)性率最低，為7.652%（248/3 241）；不同年份間RVA陽(yáng)性率的比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=41.038，P=0.000）。

表2 2019—2022年腹瀉患者RVA 感染的年度分布Tab.2 Annual distribution of RVA infection in 2019—2022 diarrhea patients

2.2.2 不同季節(jié)腹瀉患者RVA感染的情況及分布

參照中國(guó)氣象劃分法，各季節(jié)分別劃分為以下組別：春季（3—5 月）、夏季（6—8 月）、秋季（9—11 月）、冬季（12 月—次年2 月）。珠海本地的RVA 感染以春季陽(yáng)性率最高（11.666%），冬季次之（11.136%），兩個(gè)季節(jié)相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。不同季節(jié)的RVA 陽(yáng)性率相比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=68.550，P=0.000）。不同季節(jié)與春季的RVA陽(yáng)性率的比較結(jié)果見(jiàn)表3。2019～2022 年腹瀉患者RVA感染的分布情況見(jiàn)圖1。

圖1 1 044例腹瀉患者感染RVA 的季節(jié)分布圖Fig.1 Seasonal distribution of 1 044 cases of RVA infection in diarrhea patients

表3 2019—2022年腹瀉患者RVA 感染的季節(jié)分布Tab.3 Seasonal distribution of RVA infection in 2019—2022 diarrhea patients

2.2.3 不同月份腹瀉患者RVA感染的情況及分布

RVA 感染全年均有發(fā)生，2 月陽(yáng)性率最高，陽(yáng)性率為15.456%；其次是1 月、3 月，陽(yáng)性率分別為13.733%、12.393%，該兩月份分別與2 月份比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；11 月RVA 陽(yáng)性率最低，為5.297%；不同月份間RVA陽(yáng)性率的比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=131.907，P=0.000）。不同月份與1 月份的RVA陽(yáng)性率的比較見(jiàn)表4。不同月份RVA陽(yáng)性率的分布統(tǒng)計(jì)情況見(jiàn)圖2。

圖2 1 044例腹瀉患者感染RVA 月份的分布圖Fig.2 Mothly distribution of 1 044 cases of RVA infection in diarrhea patient

表4 2019—2022 年腹瀉患者RVA 感染月份分布Tab.4 Monthly distribution of RVA infection in 2019—2022 diarrhea patients

2.3 RVA感染的年齡分布

以不同發(fā)育階段為依據(jù)，按照常見(jiàn)的年齡劃分標(biāo)準(zhǔn)，將不同年齡段劃分為以下年齡組：新生兒（1 d～＜29 d）、嬰兒（1 月～＜1 歲）、幼兒（1歲～＜ 3歲）、學(xué)齡前兒童（3歲～＜6歲）、學(xué)齡兒童（6歲～＜12歲）、青少年（12歲～＜18歲）、成年人（≥18歲）。對(duì)不同年齡組RVA陽(yáng)性率進(jìn)行比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=48.038，P=0.000）。嬰兒的RVA 陽(yáng)性率最高；幼兒、學(xué)齡前兒童RVA 陽(yáng)性率較高，與嬰兒期相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；其他年齡組與嬰兒的RVA陽(yáng)性率比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），其中，學(xué)齡兒童、成年人的RVA陽(yáng)性率顯著低于與嬰兒（P＜0.01）（表5）。不同年齡段RVA感染的分布統(tǒng)計(jì)見(jiàn)圖3。1 044例RVA陽(yáng)性患者中，6歲以下兒童RVA 陽(yáng)性為971 例，所占比例為93.008%（971/1 044）。對(duì)6歲以下兒童的RVA陽(yáng)性率進(jìn)行逐歲分布統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示，6歲以下兒童各年齡間RVA陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=3.901，P=0.690），其中，2～＜3歲的RVA陽(yáng)性率最高，為10.949%，其余各年齡的陽(yáng)性率與之比較結(jié)果見(jiàn)表6。

圖3 1 044例腹瀉患者感染RVA年齡段分布圖Fig.3 Age group distribution of 1 044 cases of RVA infection in diarrhea patients

表5 2019—2022年腹瀉患者RVA 感染年齡段分布Tab.5 Age group distribution of RVA infection in 2019—2022 diarrhea patients

表6 6歲以下腹瀉患兒RVA感染的年齡分布Tab.6 Age distribution of RVA infection in diarrhea children under 6 years age

3 討論

腹瀉是一種在全年內(nèi)好發(fā)于不同年齡段人群的常見(jiàn)癥狀，主要特點(diǎn)為糞便性狀改變及次數(shù)增多。在全球范圍內(nèi)，輪狀病毒感染仍然是發(fā)展中國(guó)家腹瀉發(fā)病和死亡的主要原因［8］。約有90%嬰幼兒輪狀病毒感染性腹瀉是由RVA感染所致［9］。RVA感染患者主要表現(xiàn)為腹瀉、嘔吐、腹痛、發(fā)熱等癥狀，嚴(yán)重者還會(huì)出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟及心肌等系統(tǒng)的損傷，導(dǎo)致死亡率增加［10］。針對(duì)于RVA 感染，目前仍缺乏特效治療的藥物，常通過(guò)補(bǔ)液等對(duì)癥治療方法進(jìn)行控制，但效果并不理想，故依據(jù)流行特征科學(xué)布防尤為重要。輪狀病毒疫苗納入國(guó)家兒童免疫計(jì)劃是一項(xiàng)重要的政策舉措，隨著疫苗的廣泛推廣，我們期望看到RVA的流行病學(xué)格局發(fā)生積極的變化。本研究主要分析了珠海地區(qū)的RVA流行特點(diǎn)，為RVA感染特征分析提供統(tǒng)計(jì)學(xué)依據(jù)。

本研究對(duì)2019—2022 年珠海市婦幼保健院的散發(fā)腹瀉病例數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，腹瀉患者的平均RVA 陽(yáng)性率為9.170%，與北京市海淀區(qū)報(bào)道的9.78%接近［11］，高于浙江省臺(tái)州市報(bào)道的5.06%［12］，明顯低于西安地區(qū)報(bào)道的33.3%［9］。從表1 RVA 感染的性別分布來(lái)看，男性構(gòu)成比略高于女性，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，這與國(guó)內(nèi)外大部分報(bào)道一致［13-16］，提示本地區(qū)男性和女性對(duì)RVA感染的易感性沒(méi)有明顯的性別差異，性別通常不是直接影響感染的決定性因素。珠海地區(qū)RVA 陽(yáng)性率以2019 年最高（12.850%），2020 年降低（7.808%），2021 年陽(yáng)性率有所回升（10.359%），2022 年陽(yáng)性率降至最低（7.652%），年度陽(yáng)性率的變化趨勢(shì)與成都市的流行情況相似［17］。2019 年，RVA 陽(yáng)性率達(dá)到最高值，可能反映了當(dāng)年的病毒傳播波較為活躍，導(dǎo)致更多的個(gè)體受到感染，也可能有聚集性病例的暴發(fā)。2020年，RVA 陽(yáng)性率的下降可能與COVID-19 大流行相關(guān)，全球范圍內(nèi)居家學(xué)習(xí)、居家辦公、佩戴口罩、勤洗手等各種公共衛(wèi)生措施的實(shí)施可能對(duì)其他病原體的傳播產(chǎn)生了一定的干擾，人們對(duì)衛(wèi)生和個(gè)人防護(hù)的關(guān)注可能在一定程度上減少了RVA 的傳播。2021 年，RVA 陽(yáng)性率有所回升，這可能反映了對(duì)疫情的應(yīng)對(duì)措施逐漸減緩，人們的生活逐漸回歸正常，因而RVA 的傳播再次增強(qiáng)，也可能與一些環(huán)境和季節(jié)性因素有關(guān)。2022年，RVA陽(yáng)性率降至最低值，這可能與疫苗接種的推廣、衛(wèi)生宣傳和其他防控策略的實(shí)施有關(guān)?？傮w而言，這些年份的RVA感染率波動(dòng)可能受到多種因素的綜合影響，可能包括疫苗推廣、疫情干預(yù)、季節(jié)性變化等，深入研究這些波動(dòng)的原因?qū)⒂兄诟玫乩斫釸VA的流行動(dòng)態(tài)，從而更有效地制定預(yù)防和控制策略。

珠海地區(qū)位于廣東省珠江三角洲地區(qū)，屬亞熱帶季風(fēng)氣候，高溫持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)［18］，全年降水充沛，溫暖濕潤(rùn)的氣候條件有利于病毒的繁殖。從圖2 可知，連續(xù)4年內(nèi)，珠海地區(qū)各月均有RVA感染發(fā)生，1 至3 月份RVA 陽(yáng)性率處于高峰期，同時(shí)云南地區(qū)以及湖北地區(qū)RVA 感染也處于高峰［19-20］；但西安地區(qū)RVA 感染高峰為11 月至次年1 月［9］、上海浦東新區(qū)RVA 感染高峰為11 月至次年2 月［21］，這可能是氣象因素（溫度、濕度、氣壓）、人口流動(dòng)、行為習(xí)慣等導(dǎo)致的地區(qū)流行差異。研究結(jié)果表明，流行高峰具有很強(qiáng)的季節(jié)性，主要集中在春季與冬季，且明顯高于夏季與秋季，這一流行特征與相關(guān)報(bào)道一致［11，22-23］；但部分地區(qū)呈現(xiàn)秋冬季高發(fā)，春夏季低發(fā)的流行特征［24-25］，這可能是由于珠海地區(qū)晚冬、初春季節(jié)氣溫較低，寒冷、低溫、濕潤(rùn)的環(huán)境條件為RVA的傳播提供了有利條件。RVA感染在不同地區(qū)呈現(xiàn)出季節(jié)性變化的復(fù)雜性，受到多種因素的綜合影響，故應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)珠海地區(qū)晚冬、初春季節(jié)RVA 的疫情防控工作。

既往研究發(fā)現(xiàn)，RVA 易感于5 歲以下嬰幼兒［9，13，17，26］。本研究通過(guò)對(duì)1 044 例患者的年齡分布進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)RVA 在各年齡段均有感染，6 歲以下幼兒童是本地區(qū)RVA 腹瀉的高發(fā)人群，所占比例為93.008%（971/1 044），且6 歲以下幼兒童RVA 感染年齡分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。由圖3 可知，各年齡段相比，RVA 陽(yáng)性率呈現(xiàn)上升-下降-上升的變化趨勢(shì)，1 d～＜29 d 新生兒的RVA 陽(yáng)性率低于29 d～＜1 歲嬰兒的陽(yáng)性率，這可能是由于新生兒有母源抗體的保護(hù)，或因所處環(huán)境因素簡(jiǎn)單，故感染RVA 的機(jī)會(huì)較小；29 d～＜1 歲的嬰兒處于離乳期，其體內(nèi)母源抗體水平下降，或因其免疫系統(tǒng)尚未完全發(fā)育成熟，且不再僅居于室內(nèi)，比新生兒更容易感染RVA。與29 d～＜1 歲嬰兒相比，1 歲～＜3 歲幼兒、3 歲～＜6 歲學(xué)齡前期兒童陽(yáng)性率有所下降，6 歲～＜12 歲學(xué)齡期兒童陽(yáng)性率顯著降低，12 歲～＜18 歲青少年陽(yáng)性率最低，這可能由于隨著年齡的增長(zhǎng)，免疫系統(tǒng)逐漸建立，腸胃功能逐漸完善。然而≥18 歲的成年人陽(yáng)性率高于12 歲～＜18 歲青少年，與國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道相近［9，28-29］?？赡芘c成年人在社交活動(dòng)中接觸病毒更頻繁、以及體內(nèi)抗體水平下降等因素有關(guān)。成年人感染對(duì)兒童具有潛在傳染風(fēng)險(xiǎn)，因此需加強(qiáng)成年人防護(hù)意識(shí)。

綜上所述，RVA 導(dǎo)致的感染性腹瀉較為常見(jiàn)，陽(yáng)性率與季節(jié)、年齡密切相關(guān)。6 歲以下嬰幼兒童為易感人群，29 d～＜3 歲嬰幼兒屬于RVA 的重點(diǎn)防控人群。應(yīng)在冬、春兩季加強(qiáng)對(duì)重點(diǎn)人群RVA的感染檢測(cè)，及早發(fā)現(xiàn)，及早治療。加強(qiáng)疫苗科普宣傳，通過(guò)疫苗注射等方式針對(duì)性地預(yù)防RVA 感染。此外，需加強(qiáng)成年人的健康教育，最大程度減少病毒潛在的傳染風(fēng)險(xiǎn)。