高院，宋延峰，張曉艷，趙雪艷，高輝

肺癌是全球第二常見和病死率最高的惡性腫瘤，2020年我國肺癌新發(fā)和死亡病例分別為81.6萬例和71.5萬例，發(fā)病率和病死率居我國所有惡性腫瘤的首位[1]。近年來隨著環(huán)境污染和人口老齡化的加劇，肺癌發(fā)病率和病死率逐年升高，早期診斷和治療是降低肺癌病死率的有效措施，病理檢查雖然是肺癌診斷的金標準，但侵入性操作會給患者造成諸多不便和痛苦。近年來隨著CT掃描技術(shù)的發(fā)展，低劑量螺旋CT(low-dose computed tomography，LDCT)被廣泛應(yīng)用于肺癌診斷，成為肺癌診斷的重要參考依據(jù)之一[2]。但LDCT結(jié)果易受主觀經(jīng)驗判斷影響，假陽性率高。腫瘤相關(guān)自身抗體(tumor associated autoantibodies，TAAB)是癌細胞發(fā)育過程中產(chǎn)生的相關(guān)抗原被免疫系統(tǒng)捕獲形成的自身抗體，能預(yù)示腫瘤發(fā)生或進展[3]。近年來，多項TAAB聯(lián)合為診斷肺癌、乳腺癌、甲狀腺癌等惡性腫瘤的新方向[4-6]?，F(xiàn)分析LDCT聯(lián)合血清肺癌7項腫瘤相關(guān)自身抗體(7-tumor associated autoantibodies，7-TAAB)在肺癌早期診斷中的價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2020年8月—2022年8月延安市人民醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學科收治肺癌患者120例為肺癌組，另選取醫(yī)院同期收治的肺部良性病變患者46例為對照組。2組性別、年齡、吸煙、飲酒及合并癥等臨床資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(2020倫理1021)，患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。

表1 對照組與肺癌組患者臨床資料比較

1.2 病例選擇標準 (1)納入標準：①經(jīng)病理檢查或穿刺活檢確診肺癌；②TNM分期0～Ⅱ期[7]；③初次確診且入院前未接受任何抗腫瘤治療；④年齡≥18歲。(2)排除標準：①非原發(fā)性肺癌或合并其他部位惡性腫瘤；②合并造血、免疫系統(tǒng)損害；③近3個月內(nèi)急慢性感染；④伴有嚴重器質(zhì)性疾病。

1.3 觀測指標與方法

1.3.1 CT掃描：患者入院后均接受LDCT掃描，選擇日本佳能公司生產(chǎn)的AquilionONETSX-301C型 320排640層螺旋CT，設(shè)置參數(shù)層厚7 mm、層間距7 mm、管電流47 mA、管電壓120 kV、掃描矩陣512×512。從肺尖部掃描至肺下緣，掃描后采用肺算法對原始數(shù)據(jù)進行薄層重建，重建層厚1 mm，層間20%重疊。對存在肺結(jié)節(jié)患者的薄層圖像進行結(jié)節(jié)靶重建及三維重建，通過最大密度投影重建。所有圖像以DICOM格式上傳至工作站，由2名經(jīng)驗豐富的影像學醫(yī)師閱片，若意見不統(tǒng)一則協(xié)商一致。

1.3.2 血清7-TAAB檢測：患者入院后翌日清晨采取空腹肘靜脈血5 ml，離心分離血清保存于-80℃冰箱待測。選擇杭州凱保羅生物科技有限公司生產(chǎn)的7-TAAB試劑盒，通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測7個抗體，包括p53、蛋白基因產(chǎn)物9.5(protein gene product 9.5，PGP9.5)、SRY盒轉(zhuǎn)錄因子2(SRY-box transcription factor 2，SOX2)、G抗原7(G antigen 7，GAGE7)、ATP結(jié)合RNA解旋酶(ATP-binding RNA helicase，GBU4-5)、黑色素瘤抗原A1(melanoma antigen A1，MAGE A1)、腫瘤相關(guān)基因(cancer associated gene，CAGE)。

1.4 7-TAAB單項及聯(lián)合陽性判斷標準 7-TAAB正常范圍分別為p53(0～13.1 U/ml)、PGP9.5(0～11.1 U/ml)、SOX2(0～10.3 U/ml)、GAGE7(0～14.4 U/ml)、GBU4-5(0～7.0 U/ml)、MAGE A1(0～11.9 U/ml)、CAGE(0～7.2 U/ml)。單項抗體超過正常值范圍判斷為陽性，7-TAAB中≥1項抗體陽性判斷為聯(lián)合陽性，LDCT聯(lián)合7-TAAB時任意1項為陽性判定為陽性。

1.5 統(tǒng)計學方法 選用SPSS 28.0軟件分析數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以頻數(shù)或率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher檢驗；偏態(tài)分布計量資料以M(Q1,Q3)表示，組間比較采用U檢驗；受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic，ROC)分析LDCT聯(lián)合血清7-TAAB在肺癌早期診斷中的價值，曲線下面積(area under the curve，AUC)比較采用Hanley & McNeil檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組CT征象比較 肺癌組CT征象中磨玻璃結(jié)節(jié)、支氣管充氣征、空泡征、胸膜凹陷征、毛刺征、分葉征比例高于對照組(P均<0.05)，見表1、圖1。

圖1 肺癌患者部分CT征象

2.2 LDCT診斷肺癌結(jié)果 166例研究對象中，LDCT診斷陽性病例114例，陰性病例52例，24例肺癌誤診為良性病變，28例肺部良性病變誤診為肺癌，見表3。

表2 對照組與肺癌組患者CT征象比較 [例(%)]

表3 LDCT診斷肺癌的結(jié)果分析

2.3 2組血清7-TAAB水平比較 肺癌組患者血清p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE A1、CAGE水平均高于對照組(P<0.01)，見表4。

表4 對照組與肺癌組患者血清7-TAAB水平比較 [M(Q1,Q3)，U/ml]

2.4 2組血清7-TAAB單項與聯(lián)合陽性率比較 肺癌組血清p53、SOX2、GAGE7、MAGE A1、CAGE、7-TAAB陽性率均高于對照組(P<0.01)，2組PGP9.5、GBU4-5陽性率比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表5。

表5 2組血清7-TAAB單項與聯(lián)合陽性率比較 [例(%)]

2.5 LDCT聯(lián)合血清7-TAAB在肺癌早期診斷中的價值 ROC曲線顯示，LDCT、血清7-TAAB及二者聯(lián)合診斷早期肺癌的AUC分別為0.704、0.725、0.886，二者聯(lián)合診斷早期肺癌的效能高于單項指標(Z=4.000、4.184，P均<0.001)，見表6和圖2。

圖2 LDCT聯(lián)合血清7-TAAB診斷肺癌早期的ROC曲線

表6 LDCT、血清7-TAAB在肺癌早期診斷中的價值

3 討 論

肺癌是起源于肺部支氣管黏膜或腺體的惡性腫瘤，早期肺癌多無顯著癥狀，我國臨床中64.6%的肺癌患者在確診時處于Ⅲ～Ⅳ期，肺癌患者生存率隨著診斷分期的升高而降低，Ⅰ期患者5年生存率可達55.5%，而Ⅳ期患者5年生存率僅5.3%，因此早期診斷對降低肺癌病死率至關(guān)重要[8-9]。

螺旋CT是早期肺癌影像學篩查方式之一，與常規(guī)CT比較，螺旋CT的空間和密度分辨率更高、掃描速度更快，且具備強大的后處理能力，有助于更好地評估病變良惡性，LDCT則是通過降低電壓和毫安秒進行螺旋CT掃描，在降低輻射水平的同時獲得良好診斷效能，目前已被國內(nèi)外肺癌篩查指南推薦用于高危人群肺癌篩查[10-11]。但LDCT由于電壓和毫安秒降低損失部分圖像質(zhì)量，同時由影像學醫(yī)師閱片判斷，其結(jié)果易受主觀經(jīng)驗影響，存在假陽性結(jié)果等潛在危害，可能導致不必要的有創(chuàng)檢查和過度診斷、治療[12]。本研究結(jié)果顯示，肺癌患者CT征象中磨玻璃結(jié)節(jié)、支氣管充氣征、空泡征、胸膜凹陷征、毛刺征、分葉征比例明顯升高，提示LDCT有助于鑒別肺部良惡性病變。進一步分析LDCT診斷早期肺癌價值發(fā)現(xiàn)，本研究應(yīng)用LDCT雖然診斷早期肺癌的敏感度達到80.00%，但仍然有24例肺癌誤診為良性病變，28例肺部良性病變誤診為肺癌，說明LDCT并不能完全鑒別肺部良性與惡性病灶。國內(nèi)外學者也指出，LDCT作為肺癌篩查的主要手段，雖然對診斷肺癌的敏感度高，但易出現(xiàn)假陽性，需要長期隨訪或有創(chuàng)檢查確診[13-14]。因此有必要通過聯(lián)合其他篩查方式提高準確性。

血清癌胚抗原、神經(jīng)元特異性烯醇化酶、細胞角蛋白19等腫瘤標志物是早期肺癌篩查的常用方法之一，但這些腫瘤標志物的敏感度和特異度均較低，更多地用于輔助診斷和病情監(jiān)測。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤形成過程中會產(chǎn)生異位表達抗原(腫瘤—睪丸抗原)、突變或重組后抗原、病毒抗原等腫瘤相關(guān)抗原以突破免疫耐受，這些腫瘤相關(guān)抗原在體液免疫中能通過刺激B淋巴細胞產(chǎn)生TAAB，通常為異常、突變和過表達的蛋白質(zhì)，不僅具有免疫反應(yīng)、免疫防御、免疫監(jiān)視等作用，同時在腫瘤患者循環(huán)中具備穩(wěn)定的豐度，且往往在腫瘤出現(xiàn)癥狀前產(chǎn)生，為腫瘤早期診斷提供了新的契機[15-17]。研究表明，TAAB較腫瘤相關(guān)抗原更加穩(wěn)定，半衰期更長，因此，檢測TAAB較腫瘤相關(guān)抗原具備更好的應(yīng)用前景[18]。同血清腫瘤標志物一樣，腫瘤形成過程中會釋放多種TAAB，目前尚無單一TAAB可同時獲得較高的敏感度和特異度，需采用多種TAAB以提高敏感度和特異度[19-20]。Jiang等[21]聯(lián)用9種TAAB(PC4和SFRS1相互作用蛋白、拓撲異構(gòu)酶Ⅱα、肌動蛋白相關(guān)蛋白3、核糖體蛋白S6激酶A5、高遷移率組盒3、基質(zhì)金屬蛋白酶12、Gremlin 1、ZW10相互作用動粒蛋白、核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1)診斷肺癌敏感度和特異度分別為0.701、0.874。Healey等[22]聯(lián)用7種TAAB(p53、紐約食管鱗狀細胞癌1、CAGE、GBU4-5、SOX2、MAGE A4、HuD)診斷肺癌的特異度高達0.980，但敏感度僅0.250。本研究采用的7-TAAB試劑盒包括p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE A1、CAGE共7項自身抗體組合，結(jié)果顯示，肺癌患者血清p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE A1、CAGE水平顯著升高，說明7項自身抗體能很好地區(qū)分肺癌與肺部良性病變患者，這與以往研究結(jié)果基本一致[23-25]。通過分析2組研究對象血清7-TAAB單項與聯(lián)合陽性率發(fā)現(xiàn)，除PGP9.5、GBU4-5外，肺癌患者血清p53、SOX2、GAGE7、MAGE A1、CAGE、7-TAAB陽性率顯著增加，與任真等[23]報道非小細胞肺癌患者與肺部良性病變患者GBU4-5陽性率比較有差異和MAGE A1、CAGE陽性率比較無差異結(jié)果不一致，也與Ouyang等[24]報道肺癌患者與肺部良性病變患者7-TAAB單項和聯(lián)合陽性率比較均無差異結(jié)果不一致，考慮與納入樣本例數(shù)和構(gòu)成不同有關(guān)。進一步分析ROC曲線顯示，LDCT、血清7-TAAB及二者聯(lián)合診斷早期肺癌的AUC分別為0.704、0.725、0.886，LDCT聯(lián)合7-TAAB 診斷早期肺癌的效能較好，說明與單獨LDCT診斷比較，LDCT聯(lián)合7-TAAB能提升早期肺癌的診斷價值。

綜上所述，在LDCT基礎(chǔ)上聯(lián)合肺癌自身抗體能提升早期肺癌的診斷價值，但本研究結(jié)果還需多中心研究證實，同時本研究納入病例均為早期，關(guān)于LDCT聯(lián)合血清7-TAAB對早期與晚期肺癌的鑒別價值還需進一步研究。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明

高院：提出研究思路，設(shè)計研究方案，分析試驗數(shù)據(jù)，實施研究過程、論文撰寫；宋延峰、張曉艷：設(shè)計研究方案，實施研究過程；趙雪艷、高輝：資料搜集整理，統(tǒng)計分析，論文審核