宋義運，孫曉辰，武維偉，張娜，萬子晨，劉淑艷，徐昀，李宏*，劉云國

1(中國合格評定國家認可中心，北京，100062)2(山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，山東 泰安，271018)3(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，北京，100193)4(臨沂大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，山東 臨沂，276000)

為了提高檢測和校準實驗室的質(zhì)量管理水平，我國很多檢測和校準實驗室通過中國合格評定國家認可委員會(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)的認可。一方面可以準確可靠地出具檢測結(jié)果，減少可能出現(xiàn)的質(zhì)量風(fēng)險；另一方面，也可以提高社會對認可實驗室的信任度，并實現(xiàn)檢測數(shù)據(jù)的雙邊和多邊互認[1-2]。

《檢測和校準實驗室能力認可準則》(CNAS-CL01,ISO/IEC 17025:2017)是我國對實驗室質(zhì)量管理體系構(gòu)建、運作和維持進行檢測和校準的基本要求。其中，微生物檢測領(lǐng)域中的專業(yè)領(lǐng)域指導(dǎo)性文件《檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領(lǐng)域的應(yīng)用說明》(CNAS-CL01-A001，簡稱應(yīng)用說明)，在我國實驗室認可活動中使用最為廣泛。該文件是CNAS在不增加和減少對《檢測和校準實驗室能力認可準則》的前提下，結(jié)合微生物檢測領(lǐng)域的特點，對準則所做的進一步說明。在進行實驗室認可評審時，同時使用該應(yīng)用說明文件與《檢測和校準實驗室能力認可準則》作為評審依據(jù)文件。

《檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領(lǐng)域的應(yīng)用說明》最早于2006年發(fā)布使用，在實驗室認可活動中已具有廣泛的應(yīng)用基礎(chǔ)。2013年， CNAS對該文件進行了第一次修訂。2018年，因ISO/IEC 17025的換版，應(yīng)用說明修訂為2018版，但2018版文件僅在2013版的基礎(chǔ)上調(diào)整了結(jié)構(gòu)和各條款分布，并未對說明的內(nèi)容進行修訂。隨著時間的推移，相關(guān)法律法規(guī)陸續(xù)出臺、檢測方法不斷推陳出新[3-9]，2018版中的部分條款已不適用目前微生物檢測的需要，CNAS對該文件進行了修訂，新版按照CNAS-CL01:2018的結(jié)構(gòu)，根據(jù)檢測技術(shù)的新變化及實驗室體系運行的實際情況，對部分條款進行了增刪和調(diào)整。

新版的應(yīng)用說明與舊版比較有哪些差異？實驗室在轉(zhuǎn)換新版的應(yīng)用說明時應(yīng)重點關(guān)注哪些條款？針對以上的問題，本文對新舊版之間的差異進行解析，幫助實驗室在認可過程中更好地理解和使用該文件。

1 新舊版本的變化情況

1.1 標準的結(jié)構(gòu)調(diào)整

《檢測和校準實驗室能力認可準則》修訂發(fā)布后，該標準在結(jié)構(gòu)框架上進行了較大的調(diào)整，雖然2018版的應(yīng)用說明文件在2013版的基礎(chǔ)上調(diào)整了結(jié)構(gòu)和各條款分布，但仍有個別不適宜的條款分布。為了使申請/已獲認可的實驗室更好地了解CNAS的認可要求，滿足實驗室體系運行，本次修訂一方面調(diào)整了個別不適宜的條款號，另一方面對主要內(nèi)容根據(jù)檢測技術(shù)的新變化及實驗室體系運行的實際情況進行了調(diào)整，并優(yōu)化了部分的語句措辭，使之更加清晰易懂。

1.2 新增內(nèi)容

與舊版的應(yīng)用說明相比，本次修訂分別在標準中的“4通用要求”，“6資源要求”和“7過程要求”新增了以下內(nèi)容：

(1)在4.2保密性中，增加了關(guān)于實驗室活動過程中微生物菌種的客戶信息的保密規(guī)定。

(2)在6.2人員中，增加了對微生物授權(quán)簽字人的要求，以及增加了對抽樣人員和樣品接收人員的授權(quán)規(guī)定。

(3)在6.3 設(shè)施和環(huán)境條件中，一是根據(jù)工作實際需要，如果對環(huán)境有特殊要求，如避光，增加采取措施確保環(huán)境符合要求的規(guī)定。二是由于微生物的采樣環(huán)境可能對微生物的檢測結(jié)果有潛在的影響，增加了對永久控制之外的采樣場所的要求。

(4)在6.4設(shè)備中，增加內(nèi)容涉及標準菌株和生物安全柜。本次修訂增加了標準菌株代數(shù)的規(guī)定，新增對標準菌株期間核查的建議[10-11]。另外，將生物安全柜視為對檢測結(jié)果有重要影響的儀器，增加對生物安全柜開展定期核查的要求，確保處于正常的使用狀態(tài)。

(5)在7.1 要求、標書和合同的評審中，新增在合同的評審中，實驗室應(yīng)關(guān)注合同中約定的結(jié)果符合性判定規(guī)范或標準與檢測方法的一致性，包括所使用的抽樣方法。

(6)在7.8 結(jié)果報告中，新增實驗室需要作出規(guī)范或標準符合性聲明時的相關(guān)要求和規(guī)定。

1.3 刪除的內(nèi)容

因在CNAS發(fā)布的其他規(guī)則文件中已明確規(guī)范，此次修訂刪除了部分規(guī)定，包括防止交叉污染的措施、檢測方法的選擇、風(fēng)險的識別、修正因子的使用、記錄的規(guī)范性、質(zhì)量控制計劃的制定、報告的規(guī)范性等。具體刪除的內(nèi)容參見表1。

1.4 變更的內(nèi)容

本次修訂，對部分條款進行了修改和規(guī)范，對部分條款進行了進一步的細化，使其更具有操作性。變更的內(nèi)容主要包括：

(1)修訂了范圍。明確規(guī)定微生物檢測領(lǐng)域包括采用傳統(tǒng)微生物學(xué)分析手段對待測樣品進行的定性分析和定量檢測[12-17]。修訂后的范圍描述更加簡潔和明確，且易于理解。

(2)修改了關(guān)于關(guān)鍵培養(yǎng)基驗收的依據(jù)標準。修訂后對食品微生物領(lǐng)域關(guān)鍵培養(yǎng)基[18]和試劑的技術(shù)性驗收，要求符合GB4789.28的規(guī)定。

(3)修改了微生物檢測方法查新要求，刪除了“至少每2個月”的查新要求，更改為“定期”的要求。其次，規(guī)范了關(guān)于微生物檢驗方法的確認依據(jù)。

(4)明確了關(guān)于測量不確定度的要求。對于微生物定性檢測方法，實驗室不需要對不確定度進行評定。對于定量(平板計數(shù)法)、半定量(MPN法)微生物檢測方法，實驗室應(yīng)分別進行不確定性評估[19-21]。

(5)細化了關(guān)于確保結(jié)果有效性的要求。修訂后，對質(zhì)量控制活動中的微生物定量檢測項目和定性檢測項目中所使用的質(zhì)控樣品的要求和來源進行了細化[22]。

(6)細化了微生物實驗室的風(fēng)險來源。

2 新版應(yīng)用說明的特點和關(guān)注點

2.1 關(guān)注實驗室的保密性

關(guān)注實驗室的保密性，在原有的4.2.2條款的基礎(chǔ)上，增加了4.2.1條款，規(guī)定實驗室在實施實驗室活動過程中所獲得的微生物物種信息、來源信息等均被視為專有信息，應(yīng)予保密。如有需要將相關(guān)信息進行公開時，要求實驗室應(yīng)事先通知客戶，并遵守相關(guān)國家法律法規(guī)的規(guī)定。

2.2 對授權(quán)簽字人和負責(zé)技術(shù)領(lǐng)域的人員要求更為嚴格

本次修訂，對6.2人員條款進行了較多的調(diào)整，在對部分條款進行了刪除，一些條款的章節(jié)號進行調(diào)整的基礎(chǔ)上，增加了對微生物授權(quán)簽字人的新要求。

新版規(guī)定，授權(quán)簽字人應(yīng)具有微生物或相關(guān)專業(yè)本科以上學(xué)歷，并符合CNAS-CL01-G001中6.2.2要求，其工作經(jīng)歷應(yīng)是相關(guān)領(lǐng)域微生物檢測工作經(jīng)歷。這就要求授權(quán)簽字人為本科學(xué)歷時，應(yīng)滿足5年及以上相關(guān)專業(yè)的工作經(jīng)歷的要求，與修訂前相比，增加了2年的工作經(jīng)歷要求。

同時，在實驗室管理層中，要求負責(zé)微生物領(lǐng)域技術(shù)活動的人員需具有本科以上學(xué)歷，所學(xué)專業(yè)需為微生物或與所從事檢測范圍密切相關(guān)的專業(yè)(以下簡稱微生物或相關(guān)專業(yè))，還需要有5年以上微生物檢測的工作經(jīng)歷。

2.3 抽樣的要求更為明確

樣品的抽取是食品微生物檢測的重要組成部分。如果在采集、運輸樣品過程以及保存樣品時出現(xiàn)操作不當，或者獲得的樣品不具有代表性，會導(dǎo)致實驗室的微生物檢測結(jié)果不準確且毫無意義。所以對抽樣人員的專業(yè)要求很高，在抽樣時不但要使樣品具有一致性和代表性，還要確保整個微生物檢驗過程不被污染，在無菌操作的條件下完成。因此，修訂版增加了抽樣時人員和環(huán)境2個方面的要求。在人員方面，新增6.2.6 微生物抽樣人員和樣品接收人員應(yīng)被授權(quán)并能履行其工作職責(zé)，確保微生物抽樣人員的能力滿足要求。在環(huán)境和設(shè)施方面，新增6.3.5規(guī)定，要求必要時，對永久控制之外的采樣場所，應(yīng)有措施保證滿足微生物樣品的采樣，同時要記錄環(huán)境條件和所采取的措施。

2.4 標準菌株的管理要求更加規(guī)范

在實驗室中保存著滿足試驗需要的標準菌種/菌株(標準培養(yǎng)物)是開展微生物檢測的必要條件。標準菌株的使用不僅是某些檢測方法中規(guī)定使用，同時還應(yīng)用于培養(yǎng)基(試劑)的驗收/質(zhì)量控制、陽性和陰性對照、方法確認或驗證、人員培訓(xùn)考核以及確保結(jié)果有效性等工作。首先，對于標準菌株，由于不同的菌株保藏機構(gòu)、檢測實驗室的操作人員以及評審員對標準菌株代數(shù)的理解不同，在實際工作中各實驗室的代數(shù)規(guī)定不同，造成混亂。因此，本次修訂增加了標準菌株代數(shù)的規(guī)定，明確規(guī)定從菌種保藏中心獲得的干燥菌種可視為第0代。其次，更為關(guān)注標準菌株的管理，不僅要求實驗室詳細記錄菌種的學(xué)名、株名、來源、批號、傳代日期和數(shù)量。而且在保管過程中，凡傳代、使用、銷毀，均應(yīng)清晰記錄，可追溯，并定期核對庫存數(shù)量。第三，新增對標準菌株期間核查的建議。建議需要時，標準菌株在使用期間應(yīng)按計劃進行期間核查。

2.5 風(fēng)險的識別具有微生物領(lǐng)域的特點

ISO/IEC17025:2017《檢測和校準實驗室能力認可準則》與2005版準則相比,有一個重大變化就是明確提出：實驗室要基于風(fēng)險的思維進行管理體系的策劃，同時要策劃并采取措施應(yīng)對風(fēng)險和機遇。全面認識并及時掌握實驗室活動中可能存在的風(fēng)險，是有效地應(yīng)對風(fēng)險和機遇的基礎(chǔ)。根據(jù)認可準則中對實驗室應(yīng)對風(fēng)險和機遇的新要求，如何準確識別在微生物檢驗活動中的風(fēng)險，通過有效措施應(yīng)對風(fēng)險和機遇，建立符合實驗室運行情況的程序和措施,提升管理體系的有效性，確保實驗室質(zhì)量目標的實現(xiàn)。對于未知樣品的檢測，實驗室可通過分析樣品的來源、樣品的儲存環(huán)境和運輸路徑等，幫助識別和控制其生物危害程度。由于生物危害是微生物檢測實驗室主要風(fēng)險之一[23-25]，本次修訂明確要求實驗室充分識別生物危害所帶來的風(fēng)險，這種風(fēng)險可能來自于環(huán)境與相應(yīng)生物安全等級的匹配性、人員操作的規(guī)范性、菌毒株的管理、設(shè)備的污染處理等方面，實驗室應(yīng)有程序和措施規(guī)避該風(fēng)險，并列明可能存在的危險因子清單。

3 新舊版本差異對照

新版相比于舊版有些變化明顯的要求，是需要實驗室在使用過程中需要重點關(guān)注的內(nèi)容。根據(jù)條款具體要求，實驗室在實際檢測活動過程中需考慮人員、設(shè)施和環(huán)境條件、設(shè)備、外部提供的產(chǎn)品和服務(wù)等是否滿足新版文件的要求。具體差異見表1。

表1 CNAS-CL01-A001《檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領(lǐng)域的應(yīng)用說明》修訂對照表Table 1 CNAS-CL01-A001 “Guidance on the Application of Testing and Calibration Laboratory Competence Accreditation Criteria in the field of Microbiological Testing” revision comparison table

續(xù)表1

續(xù)表1

續(xù)表1

4 結(jié)語

本次修訂前，CNAS就已向國內(nèi)已認可的實驗室和擬申請認可的實驗室廣泛征求意見，確保修訂后的應(yīng)用說明符合中國現(xiàn)狀，滿足微生物領(lǐng)域?qū)嶒炇艺J可發(fā)展的需求。

綜上所述，本次修訂實質(zhì)的內(nèi)容變化不大，但在修訂過程中，結(jié)合了文件在使用過程中的反饋意見，并綜合考慮國內(nèi)外對微生物檢測實驗室在環(huán)境、設(shè)備、生物安全等方面新的要求，對個別的條款進行了新增、刪除和變更。修訂后的應(yīng)用說明文件更具專業(yè)性、合規(guī)性、適用性和可操作性。