古聯(lián) 梁寶云 周文君 劉永輝 龍建雄 嚴(yán)雁 朱路路 蘇莉

(廣西中醫(yī)藥大學(xué) 1第一附屬醫(yī)院腦病科二區(qū)，廣西 南寧 530023；2研究生學(xué)院；廣西醫(yī)科大學(xué) 3公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)教研室；4公共衛(wèi)生學(xué)院)

缺血性腦卒中(IS)系由機(jī)體“內(nèi)傷積損頹敗”，又遇風(fēng)、火、痰、瘀等邪氣而發(fā)，屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)“中風(fēng)”的范疇。中醫(yī)診斷的過(guò)程強(qiáng)調(diào)“辨證”，以“望、聞、問(wèn)、切”四診收集的資料為作為辨證診斷依據(jù)，診斷過(guò)程可能會(huì)受個(gè)人知識(shí)儲(chǔ)備及臨床經(jīng)驗(yàn)等的主觀認(rèn)識(shí)干擾，缺乏客觀依據(jù)的指導(dǎo)，故探尋證候診斷的物質(zhì)基礎(chǔ)以實(shí)現(xiàn)“精準(zhǔn)證候”是亟待解決的問(wèn)題?；蚪M學(xué)研究認(rèn)為，中醫(yī)證候的形成存在分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)〔1〕，基因多態(tài)性可能是不同疾病如不寐、高血壓等不同證型診斷的依據(jù)〔2,3〕?？缒さ鞍?TMEM)63C基因存在于人體的第14號(hào)染色體上，由其指導(dǎo)合成的蛋白可參與高滲激活離子通道結(jié)構(gòu)的構(gòu)成，介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)外離子的轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程〔4〕，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外離子的平衡狀態(tài)，進(jìn)而影響腦卒中早期腦組織的病理變化過(guò)程〔5〕。目前關(guān)于跨膜蛋白家族相關(guān)基因的文獻(xiàn)報(bào)道主要集中在腫瘤方面的探索上，關(guān)于TMEM63C基因遺傳多態(tài)性與IS中醫(yī)證候要素關(guān)聯(lián)的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究以中國(guó)南方漢族人為研究對(duì)象，基于病例對(duì)照的研究方法，通過(guò)探索TMEM63C基因遺傳多態(tài)性與IS中醫(yī)證候要素之間的關(guān)系，旨在為IS的中醫(yī)辨證診斷及分型提供客觀的參考依據(jù)和物質(zhì)基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象 病例組：來(lái)源于廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院治療的IS患者，共計(jì)774例。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有納入病例組的研究對(duì)象發(fā)病時(shí)間均在7 d以?xún)?nèi)，由兩名主治及以上職稱(chēng)的神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師在頭顱CT和(或)磁共振成像(MRI)頭顱平掃檢查的輔助下明確診斷；所有病例組患者的診斷必須同時(shí)符合IS的中、西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中中醫(yī)診斷符合《中風(fēng)病診斷療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)(試行)》(1994年國(guó)家中醫(yī)藥管理局腦病急癥科研協(xié)作組制定)的診斷標(biāo)準(zhǔn)，西醫(yī)診斷則參照《各類(lèi)腦血管疾病診斷要點(diǎn)》(1996年中華醫(yī)學(xué)會(huì)第四次全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂版)中腦卒中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷；中國(guó)南方的漢族患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：由動(dòng)脈炎、血液病、腦外傷、腫瘤、腦血管畸形、藥物等引起的腦卒中；其他特殊類(lèi)型的腦卒中，如出血性腦卒中、腦梗死昏迷或失語(yǔ)、短暫性腦缺血發(fā)作等；合并嚴(yán)重肝腎功能不全、血液系統(tǒng)疾病、重度休克或不能合作完成各項(xiàng)資料的收集及相關(guān)指標(biāo)測(cè)定的患者。

對(duì)照組：來(lái)源于同時(shí)期同醫(yī)院體檢中心參加體檢的正常人及骨科住院輕癥患者，共計(jì)793例。納入標(biāo)準(zhǔn)：既往無(wú)腦卒中等腦血管疾病病史者；各系統(tǒng)均無(wú)重大疾病者；性別、年齡的分布與病例組相匹配者；中國(guó)南方的漢族人。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有心腦血管疾病史或家族史的患者；因精神、語(yǔ)言等因素?zé)o法合作者完成資料收集者。

病例組男459例、女315例，對(duì)照組男437例、女356例；兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.815，P=0.093)。病例組平均年齡(64.12±10.34)歲，對(duì)照組平均年齡(63.81±10.36)歲，兩組差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.582，P=0.561)。本研究所納入研究的對(duì)象相互間均不存在血緣關(guān)系，并簽署知情同意書(shū)且自我報(bào)告三代以?xún)?nèi)均為的中國(guó)漢族人。本研究方案交由廣西醫(yī)科大學(xué)倫理委員會(huì)進(jìn)行審核并通過(guò)。

1.2中醫(yī)辨證 依據(jù)《中風(fēng)病辨證診斷標(biāo)準(zhǔn)》(1996年國(guó)家中醫(yī)藥管理局腦病急癥科研組頒發(fā))中的中醫(yī)證候診斷量表，對(duì)納入的IS患者進(jìn)行中醫(yī)證候診斷評(píng)分，按照評(píng)分結(jié)果判定相應(yīng)的中醫(yī)證候。該辨證診斷量表分為6個(gè)基本證候要素(分別為風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證、氣虛證、陰虛陽(yáng)亢證)，將診斷某一證候各項(xiàng)要點(diǎn)所得的最高分相加作為該證候的得分，得分≥7分，則為該證候診斷成立。診斷過(guò)程由兩名經(jīng)統(tǒng)一培訓(xùn)、具有主治醫(yī)師或以上職稱(chēng)的腦病科中醫(yī)師，在IS患者起病7 d內(nèi)進(jìn)行評(píng)分，根據(jù)證候評(píng)分診斷中醫(yī)證候。若出現(xiàn)兩名中醫(yī)醫(yī)師對(duì)同一患者的證候辨證診斷結(jié)果不統(tǒng)一，則立即交由第3名具有副主任醫(yī)師以上職稱(chēng)腦病科的中醫(yī)醫(yī)師進(jìn)行最終的證候診斷。中醫(yī)辨證結(jié)果(同一患者可同時(shí)存在多個(gè)證候要素)：風(fēng)證318例、火熱證88例、痰證351例、血瘀證177例、氣虛證89例、陰虛陽(yáng)亢證17例。因陰虛陽(yáng)亢證樣本量過(guò)少，故不進(jìn)行基因多態(tài)性位點(diǎn)與該證型的遺傳關(guān)聯(lián)分析。

1.3基因分型 以乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管抽取研究對(duì)象2 ml清晨空腹外周靜脈血，通過(guò)北京艾德萊生物科技有限公司(Aidlab biotechnologies CO.Ltd)的全血基因組DNA提取試劑盒進(jìn)行全血基因組DNA的提取，使用NanoDrop2000儀器檢測(cè)全血基因組DNA的OD值及1.25%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)法對(duì)全血基因組DNA進(jìn)行質(zhì)檢，質(zhì)檢合格后的全血基因組DNA轉(zhuǎn)移至-80℃的低溫冰箱凍存以備用。引物設(shè)計(jì)PCR和單堿基擴(kuò)展引物則交由生物公司采用 AssayDesigner3.1 軟件進(jìn)行合成。對(duì)收集的全血基因組DNA樣本采用MassARRAY SNP技術(shù)進(jìn)行基因分型檢測(cè)。對(duì)其中5%樣本的DNA樣本進(jìn)行基因分型重復(fù)檢測(cè)，檢測(cè)過(guò)程采用盲法，即事先未告知實(shí)驗(yàn)操者樣本的病例、對(duì)照分組情況，兩次檢測(cè)符合率為100%。

1.4血脂水平、凝血標(biāo)志物及血尿酸水平的測(cè)定 采用非抗凝管和抗凝管分別抽取研究對(duì)象各2 ml清晨空腹外周血，運(yùn)用HITACHI日立7600全自動(dòng)生化分析儀，對(duì)其中2 ml非抗凝血進(jìn)行血脂水平〔包括總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)等生化指標(biāo)〕及尿酸(UA)水平的測(cè)定；另取2 ml抗凝血，分別采用邁瑞6900全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀和法國(guó)StAgO Capact血凝儀對(duì)血小板(PLT)水平及凝血功能指標(biāo)〔包括活化部分凝血酶原時(shí)間(APTT)、D-二聚體(D-D)、纖維蛋白原(FIB)、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比率(INR)、凝血酶原時(shí)間(PT)、凝血酶原時(shí)間活動(dòng)度(PTA)、凝血酶時(shí)間(TT)等〕進(jìn)行測(cè)定。其中血小板的測(cè)定采用電極阻抗聚集度測(cè)定法(MEA)，凝血功能相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定采用凝固法。各指標(biāo)的測(cè)定過(guò)程均嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)程序的要求進(jìn)行。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 本研究中涉及的遺傳關(guān)聯(lián)分析采用PLINK軟件進(jìn)行。其中，哈溫平衡(HWE)的檢驗(yàn)采用擬和優(yōu)度χ2檢驗(yàn)；基因型頻率分布的組間比較采用χ2檢驗(yàn)；各遺傳模型(加性模型、顯性模型、隱性模型、等位基因型)與疾病的關(guān)聯(lián)分析采用非條件多因素 Logistic 回歸模型，并計(jì)算關(guān)聯(lián)強(qiáng)度，以O(shè)R值及 95%置信區(qū)間(CI)表示；使用一般線性模分析基因多態(tài)性位點(diǎn)與疾病數(shù)量性狀的關(guān)聯(lián)。其他資料的統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS18.0軟件進(jìn)行，以χ2檢驗(yàn)進(jìn)行計(jì)數(shù)資料的組間比較，通過(guò)t檢驗(yàn)或方差分析進(jìn)行正態(tài)分布計(jì)量資料的組間比較，非參數(shù)法進(jìn)行非正態(tài)分布計(jì)量資料的組間比較。本研究涉及的統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1TMEM63C基因rs383459、rs3813539多態(tài)性位點(diǎn)的HWE檢驗(yàn)及基因型頻率分布比較 TMEM63C基因rs383459(PHWE=0.645)、rs3813539(PHWE=0.817)多態(tài)性位點(diǎn)在對(duì)照組中的基因型頻率分布均符合HWE定律。rs383459的基因型頻率在氣虛證組與對(duì)照組之間的分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但在風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證等證候組與對(duì)照組之間的分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)；rs3813539的基因型頻率在氣虛證組與對(duì)照組之間的分布差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但在風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證等證候組中與對(duì)照組之間的分布差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 TMEM63C基因rs383459、rs3813539多態(tài)性位點(diǎn)的基因型頻率分布比較(n)

2.2TMEM63C基因rs383459、rs3813539多態(tài)性與IS及其中醫(yī)證候要素發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)分析 風(fēng)證、痰證、血瘀證、氣虛證、火熱證、陰虛陽(yáng)亢證證候要素分別為：318例(41.09%)、351例(45.35%)、177例(22.87%)、89例(11.50%)、88例(11.37%)、17例(2.20%)。TMEM63C基因多態(tài)性位點(diǎn)rs383459與IS氣虛證的易感性顯著關(guān)聯(lián)〔加性模型：OR(95%CI)=1.46(1.07～2.01)，P=0.019；隱性模型：OR(95%CI)=1.97(1.15～3.38)，P=0.014；等位基因模型：OR(95%CI)=1.46(1.06～2.00)，P=0.018〕，校正性別、年齡后，關(guān)聯(lián)仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔加性模型：ORadj(95%CI)=1.46(1.06～2.01)，Padj=0.021；隱性模型：ORadj(95%CI)=1.98(1.15～3.40)，Padj=0.014〕。多態(tài)性位點(diǎn)rs3813539與缺血性中風(fēng)氣虛證的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)亦顯著關(guān)聯(lián)〔加性模型：OR(95%CI)=1.55(1.08～2.22)，P=0.017；顯性模型：OR(95%CI)=1.56(1.00～2.44)，P=0.049；隱性模型：OR(95%CI)=2.43(1.02～5.75)，P=0.044；等位基因模型：OR(95%CI)=1.54(1.08～2.20)，P=0.017〕，校正性別、年齡后，關(guān)聯(lián)仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔加性模型：ORadj(95%CI)=1.57(1.09～2.25)，Padj=0.015；顯性模型：ORadj(95%CI)=1.59(1.02～2.48)，Padj=0.043；隱性模型：ORadj(95%CI)=2.48(1.04～5.91)，Padj=0.040〕。但在所有遺傳模型中，rs383459、rs3813539多態(tài)性與風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)(均為P>0.05)。

2.3TMEM63C基因rs383459、rs3813539多態(tài)性與IS患者中醫(yī)證候要素評(píng)分的關(guān)聯(lián)分析 風(fēng)證、痰證、血瘀證、氣虛證、火熱證、陰虛陽(yáng)亢證證候要素評(píng)分分別為：(9.53±2.75)分、(9.99±2.51)分、(8.63±1.73)分、(7.94±1.61)分、(8.80±1.91)分、(11.17±3.67)分。TMEM63C基因多態(tài)性位點(diǎn)rs3813539與IS氣虛證評(píng)分顯著關(guān)聯(lián)〔加性模型：β(95%CI)=0.39(0.05～0.74)，P=0.027〕；校正性別、年齡后，關(guān)聯(lián)仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔加性模型：βadj(95%CI)=0.39(0.04～0.74)，Padj=0.027〕。但多態(tài)性位點(diǎn)rs383459與IS風(fēng)證、火熱證、氣虛證、痰證、血瘀證等證候要素評(píng)分的關(guān)聯(lián)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。

2.4TMEM63C基因rs383459、rs3813539多態(tài)性與IS患者血脂水平的關(guān)聯(lián)分析 兩組血脂水平數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。兩組TC、TG、HDL-C、LDL-C、載脂蛋白A1差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。校正性別、年齡后，TMEM63C基因多態(tài)性位點(diǎn)rs383459與IS患者的TG水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)〔隱性模型：βadj(95%CI)=0.19(0.01～0.37)，Padj=0.040〕。而多態(tài)性位點(diǎn)rs3813539與IS患者的HDL、LDL、VLDL、TC、TG水平之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)(均為P>0.050)。

2.5TMEM63C基因rs383459、rs3813539多態(tài)性與IS患者凝血標(biāo)志物的關(guān)聯(lián)分析 兩組凝血功能指標(biāo)數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。兩組PT、INR、PTA、APTT、TT、FIB差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。校正性別、年齡后，TMEM63C基因多態(tài)性位點(diǎn)rs383459多態(tài)性與IS患者的PTA指標(biāo)顯著相關(guān)〔隱性模型：βadj(95%CI)=3.79(0.08～7.51)，Padj=0.047〕，但與FIB、PT、D-D、TT、APTT、INR、PLT等凝血指標(biāo)之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.050)；多態(tài)性位點(diǎn)rs3813539與IS患者PTA、FIB、PT、D-D、TT、APTT、INR、PLT等凝血指標(biāo)之間的關(guān)聯(lián)亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.050)。

2.6TMEM63C基因rs383459、rs3813539多態(tài)性與IS患者尿酸(UA)水平的關(guān)聯(lián)分析 兩組UA數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。IS組UA水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。TMEM63C基因多態(tài)性位點(diǎn)rs3813539與IS患者的UA水平顯著關(guān)聯(lián)〔加性模型：β(95%CI)=-13.35(-26.49～0.21)，P=0.047；隱性模型：β(95%CI)= -39.10(-77.67～-0.53)，P=0.047〕，校正性別、年齡后，關(guān)聯(lián)仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔加性模型：βadj(95%CI)= -13.39(-26.54～0.23)，Padj=0.046；隱性模型：βadj(95%CI)=-39.24(-77.92～-0.55)，Padj=0.047〕。

表2 兩組臨床指標(biāo)比較

3 討 論

TMEM 63C是TMEM63C基因的表達(dá)產(chǎn)物，該蛋白主要與TMEM63A、TMEM63B共同形成一個(gè)高滲激活的離子通道結(jié)構(gòu)，在高滲刺激狀態(tài)下參與細(xì)胞膜表面滲透壓受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過(guò)程，通過(guò)感受細(xì)胞內(nèi)外滲透壓的變化參與調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外離子轉(zhuǎn)運(yùn)及平衡〔6〕。離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白功能障礙和離子穩(wěn)態(tài)失衡可影響神經(jīng)毒性信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞水腫、凋亡及自噬等細(xì)胞退化的過(guò)程，是腦缺血腦組織損傷的早期病理改變〔5，7〕。TMEM 63C屬于TMEM蛋白家族的成員之一，與其相類(lèi)似的還有糖基化蛋白(TMEM9B)、神經(jīng)毒素(TMEM16)、LR8(TMEM176B)、RAS誘導(dǎo)衰老蛋白(TMEM158)等，綜合現(xiàn)有的功能報(bào)道，TMEM家族蛋白在體內(nèi)可參與如離子通道質(zhì)膜的組成、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活、細(xì)胞趨化、黏附及凋亡過(guò)程的介導(dǎo)等多項(xiàng)生理病理的變化過(guò)程〔8，9〕。細(xì)胞趨化、黏附、凋亡時(shí)沉積于血管內(nèi)皮下，釋放炎癥因子，致使血管內(nèi)皮損傷發(fā)生慢性炎癥，促使或加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展，而動(dòng)脈粥樣硬化是缺血性腦卒中發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素和病理基礎(chǔ)。TMEM63C最終可能通過(guò)上述途徑來(lái)影響和參與腦卒中的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。雖然本研究未發(fā)現(xiàn)TMEM63C基因rs383459、rs3813539兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與IS的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，但發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)均與IS氣虛證的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著關(guān)聯(lián)，與IS風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)聯(lián)。

IS是一種異質(zhì)性疾病，其在病因、臨床表現(xiàn)、病情的進(jìn)展、預(yù)后及對(duì)治療藥物的敏感性等方面均存在著群體差異〔10，11〕。如臨床上依據(jù)IS的病因特點(diǎn)，可將其分為大動(dòng)脈粥樣硬化型、心源性栓塞型、小動(dòng)脈閉塞型及其他病因型等，依據(jù)腦卒中發(fā)生后的臨床表現(xiàn)又可分為完全前循環(huán)梗死、部分前循環(huán)梗死、后循環(huán)梗死、腔隙性梗死等，還可依據(jù)病程及預(yù)后的不同分為腦梗死急性期、腦梗死恢復(fù)期及腦梗死后遺癥期?，F(xiàn)代基因組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，疾病的異質(zhì)性是在遺傳因素與環(huán)境因素共同作用下相互影響的結(jié)果〔12〕。如Das等〔13〕報(bào)道TLR4基因C1196T多態(tài)性與顱內(nèi)大動(dòng)脈粥樣硬化型腦卒中顯著關(guān)聯(lián)，但與顱外大動(dòng)脈硬化型腦卒中、腔隙性腦梗死的發(fā)生無(wú)關(guān)聯(lián)；胥麗霞等〔14〕學(xué)者也發(fā)現(xiàn)COX-1上C50T基因突變會(huì)增加阿司匹林抵抗(RA)的風(fēng)險(xiǎn)。由此說(shuō)明，IS疾病異質(zhì)性具有分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)。

中醫(yī)對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)以辨證論治的思想原則為基礎(chǔ)，“證候”是中醫(yī)對(duì)疾病在發(fā)生發(fā)展過(guò)程中某一階段的病因、病位、病性及病勢(shì)等總的病理概括，不同的人患同一疾病或同一疾病的不同階段，其所形成的證候亦因人、因時(shí)而異，即“同病異證”，是疾病個(gè)體多樣性的體現(xiàn)。遺傳多態(tài)性是種內(nèi)群體間或群內(nèi)個(gè)體間多態(tài)現(xiàn)象的根本原因，包括染色體多態(tài)性、酶和蛋白質(zhì)多態(tài)性、抗原多態(tài)性、單核苷酸多態(tài)性(SNP)等五類(lèi)，其中SNP是最常見(jiàn)的多態(tài)性類(lèi)型。可見(jiàn)，“同病異證”與疾病遺傳多態(tài)性有著相通之處。縱觀中醫(yī)體質(zhì)學(xué)說(shuō)與現(xiàn)代基因組學(xué)，二者均存在遺傳的本質(zhì)，均受遺傳因素和環(huán)境因素的影響，體質(zhì)是證候的內(nèi)在基礎(chǔ)，證候的形成亦受遺傳因素的影響，基因-體質(zhì)-證候之間存在著必然聯(lián)系〔15,16〕。近年來(lái)越來(lái)越多的觀點(diǎn)支持中醫(yī)證候的形成與基因遺傳多態(tài)性有關(guān)，并且某些基因表現(xiàn)的證候特異性可作為疾病中醫(yī)辨證的物質(zhì)基礎(chǔ)，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β1基因rs4803455位點(diǎn)的AC基因型與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎肺間質(zhì)病變肺腎氣虛證密切相關(guān)〔17〕，絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)1基因rs9340多態(tài)性可增加男性IS風(fēng)痰瘀阻證的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，但對(duì)IS氣虛血瘀證的易感性無(wú)影響〔18〕。本研究發(fā)現(xiàn)，TMEM63C基因rs3813539多態(tài)性位點(diǎn)均與IS氣虛證的易感性、證候評(píng)分顯著關(guān)聯(lián)，與風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證等其他中風(fēng)中醫(yī)證候要素均無(wú)關(guān)聯(lián)，本研究的結(jié)果與既往的研究成果一致，均支持中醫(yī)證候具有分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)。

腦卒中的病機(jī)總屬本虛標(biāo)實(shí)。早在清代，著名醫(yī)家王清任就明確指出“半身不遂,虧損元?dú)?是其本源……若元?dú)庖惶?經(jīng)絡(luò)自然空虛……氣虧得半身不遂,以致跌仆〔19〕”。醫(yī)籍《雜病源流犀燭》中亦有記載:“曰痰曰火,總由于虛,故虛為中風(fēng)之根也〔20〕”。體質(zhì)是人體生命在遺傳基礎(chǔ)上形成具有相對(duì)穩(wěn)定的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理功能、代謝等特征的表現(xiàn)，45歲以上年齡段人群體質(zhì)以虛為主〔21〕?？梢?jiàn)，正氣虧虛是IS發(fā)生的關(guān)鍵及根本病理基礎(chǔ)，風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證等證候的產(chǎn)生均是在氣虛的基礎(chǔ)上變生而成〔22〕。血脂、凝血及UA等生化指標(biāo)分別是中醫(yī)痰、瘀、濕的物質(zhì)體現(xiàn)〔23，24〕?；蚪M學(xué)認(rèn)為，人體內(nèi)的血脂、凝血、UA等生化指標(biāo)的代謝受基因多態(tài)性的調(diào)節(jié)。如Verbeek等〔25〕發(fā)現(xiàn)TRIB1基因rs2954029位點(diǎn)多態(tài)性與人體內(nèi)TG水平顯著相關(guān)，rs7094081多態(tài)性位點(diǎn)與人體內(nèi)的凝血指標(biāo)關(guān)系密切〔26〕，冠心病相關(guān)基因C6orf105 rs6903965多態(tài)性與漢族人群的無(wú)癥狀型高尿酸血癥顯著關(guān)聯(lián)〔27〕。本研究也發(fā)現(xiàn)，TMEM63C基因rs383459多態(tài)性與IS患者的TG水平和PTA指標(biāo)顯著相關(guān)，rs3813539與IS患者的UA水平顯著關(guān)聯(lián)，提示TMEM63C基因多態(tài)性可能影響血脂、凝血及UA等IS危險(xiǎn)因素的代謝及病理過(guò)程，進(jìn)而影響IS的發(fā)生及證候演變的過(guò)程。

本研究以“精準(zhǔn)醫(yī)療計(jì)劃”為研究背景，從基因組學(xué)的角度探索腦卒中中醫(yī)證候的物質(zhì)基礎(chǔ)，發(fā)現(xiàn)TMEN63C基因多態(tài)性?xún)H與IS虛證顯著關(guān)聯(lián)，與其他中醫(yī)證候要素均無(wú)關(guān)聯(lián)，為中醫(yī)“同病異證”理論提供了物質(zhì)支持，為IS“精準(zhǔn)證候”診斷提供了客觀依據(jù)。