黎佩茹 林朗華 何思雅 潘美均 吳愛(ài)華,2 梁雪芳,3△

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州 510006；2.廣東省中醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，廣東 廣州 510000；3.廣東省中醫(yī)院婦科，廣東 廣州 510000)

先兆流產(chǎn)是最常見(jiàn)的妊娠并發(fā)癥，發(fā)病率為15%～20%，并且發(fā)生率呈逐年上升趨勢(shì)[1-2]，對(duì)婦女的身體、心理健康造成嚴(yán)重影響。先兆流產(chǎn)若未得到及時(shí)治療，約10%～15%的患者可發(fā)展為難免流產(chǎn)[3]。先兆流產(chǎn)的病因復(fù)雜，涉及因素繁多，且其相關(guān)發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，西醫(yī)治療一般采用適當(dāng)休息、禁止性生活，同時(shí)予人絨毛膜促性腺激素、孕激素等藥物治療[4]。先兆流產(chǎn)屬中醫(yī)學(xué)“胎漏”“胎動(dòng)不安”范疇。中醫(yī)藥治療先兆流產(chǎn)臨床療效顯著，不良反應(yīng)少[1]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，氣虛胎失所載，血虛胎失所養(yǎng)，氣血虛弱，沖任失養(yǎng)，胎氣不固，故見(jiàn)胎漏或胎動(dòng)不安[5]，氣血虛弱是先兆流產(chǎn)的重要病機(jī)。胎元飲出自張景岳所著《景岳全書(shū)》，具有補(bǔ)氣養(yǎng)血、固腎安胎之功，主治氣血虛弱型胎漏、胎動(dòng)不安，是中醫(yī)臨床治療先兆流產(chǎn)的經(jīng)典方劑[5-6]。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對(duì)“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”的相互作用關(guān)系進(jìn)行分析，并對(duì)藥物的作用機(jī)制進(jìn)行預(yù)測(cè)，為將中醫(yī)從經(jīng)驗(yàn)醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)化為循證醫(yī)學(xué)體系提供了新的研究方法，是近年來(lái)中醫(yī)藥研究的新方法[7-8]。因此，本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)對(duì)胎元飲治療先兆流產(chǎn)的主要活性成分及核心靶點(diǎn)等進(jìn)行預(yù)測(cè)、分析，探討胎元飲治療先兆流產(chǎn)的作用機(jī)制，以為臨床推廣提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 胎元飲有效成分及相關(guān)作用靶點(diǎn)篩選 在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)(TCMSP，https://tcmsp-e.com/)[9]，分別以胎元飲中的8味中藥“白芍”“白術(shù)”“陳皮”“當(dāng)歸”“杜仲”“甘草”“人參”“熟地黃”為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，然后根據(jù)藥物藥動(dòng)學(xué)特征[口服生物利用度(OB)≥30%、類藥性(DL)≥0.18]，篩選出胎元飲的有效活性成分及其作用的蛋白質(zhì)靶點(diǎn)，并根據(jù)目前已發(fā)表的文獻(xiàn)報(bào)道來(lái)補(bǔ)充未預(yù)測(cè)到的有效活性成分的已知靶點(diǎn)。然后利用UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.uniprot.org)選取已被驗(yàn)證的人類蛋白，將靶點(diǎn)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，以獲取基因名。

1.2 先兆流產(chǎn)相關(guān)靶點(diǎn)篩選 以“threatened abortion” “threatened miscarriage”為關(guān)鍵詞，在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.genecards.org/)、DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.drugbank.com/)、OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)(https://omim.org/)、PharmGKB數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.pharmgkb.org/)、TTD數(shù)據(jù)庫(kù)(http://db.idrblab.net/ttd)中檢索先兆流產(chǎn)的相關(guān)靶點(diǎn)，最后合并5個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)靶點(diǎn)，并刪除重復(fù)值，獲得先兆流產(chǎn)疾病相關(guān)靶點(diǎn)。

1.3 “藥物-疾病”交集靶點(diǎn)獲取 利用R語(yǔ)言(R i386 4.0.5)將胎元飲有效活性成分靶點(diǎn)與先兆流產(chǎn)疾病相關(guān)靶點(diǎn)取交集并繪制韋恩圖。

1.4 “藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析 將以上步驟得到的藥物有效活性成分、有效活性成分對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)、“藥物-疾病”交集靶點(diǎn)的數(shù)據(jù)整合，運(yùn)用 Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建 “藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)圖，并利用Cytoscape 3.7.2 軟件中“Network Analyzer”的功能，計(jì)算出不同節(jié)點(diǎn)的度(Degree)值，Degree值越大，節(jié)點(diǎn)面積越大，表示該節(jié)點(diǎn)的生物功能越重要。根據(jù) Degree 值由大到小排序，篩選前3位作為胎元飲的主要活性成分。

1.5 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析 將“藥物-疾病”交集靶點(diǎn)提交至STRING 11.0數(shù)據(jù)庫(kù)(https://string-db.org)構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)模型[10]，將生物種類設(shè)定為“Homo sapiens”，參數(shù)設(shè)置均為默認(rèn)設(shè)置。將獲得的PPI網(wǎng)絡(luò)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件繪制PPI網(wǎng)絡(luò)圖，并使用Cytoscape 3.7.2軟件中CytoNCA插件的初始網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)的中介中心性(betweenness centrality, BC)、緊密中心性(closeness centrality, CC)、特征向量中心性(eigenvector centrality, EC)、度中心性(degree centrality，DC)、局部平均連通性(local average connectivity-based method, LAC)、網(wǎng)絡(luò)中心性(network centrality, NC)等拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)的中位數(shù)作為篩選依據(jù)進(jìn)行1次篩選以精簡(jiǎn)網(wǎng)絡(luò)。最后再利用Cytoscape 3.7.2軟件中的MCODE 1.6.1插件，根據(jù)該插件默認(rèn)參數(shù) “degree cutoff ≥2, node score cutoff≥0.2,K-score≥2, maximum depth=100”得到不同的靶點(diǎn)團(tuán)[11]，選取分?jǐn)?shù)(score)最高的靶點(diǎn)團(tuán)作為胎元飲治療先兆流產(chǎn)的核心靶點(diǎn)團(tuán)。其中，MCODE score 可反映單個(gè)節(jié)點(diǎn)與其周圍節(jié)點(diǎn)的緊密程度[12]，將靶點(diǎn)團(tuán)中MCODE score 排名前3的靶點(diǎn)作為胎元飲治療先兆流產(chǎn)的核心靶點(diǎn)。

1.6 “藥物-疾病”交集靶點(diǎn)基因本體(GO)功能和京都基因與基因組百科全書(shū)(KEGG)通路富集分析 運(yùn)用R語(yǔ)言(R i386 4.0.5)將“藥物-疾病”交集靶點(diǎn)的基因名轉(zhuǎn)換為Entrez ID，并將ClusterProfiler、DOSE、enrichplot等軟件包安裝至R軟件中，通過(guò)運(yùn)行ClusterProfiler進(jìn)行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析，按P值由小到大排序，分別篩選出排名前10的條目繪制GO功能富集分析氣泡圖，排名前30的通路制作KEGG通路富集分析條形圖。其中，GO功能包括生物過(guò)程(biological process，BP)、細(xì)胞組分(cellular component，CC)及分子功能(molecular function, MF)。

1.7 分子對(duì)接驗(yàn)證 將篩選得到的胎元飲主要活性成分與PPI網(wǎng)絡(luò)分析得到的核心靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證。首先從PDB數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.rcsb.org/)下載PPI網(wǎng)絡(luò)中核心靶點(diǎn)PDB格式的3D結(jié)構(gòu)，通過(guò)PubChem數(shù)據(jù)庫(kù)(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)獲取主要活性成分的sdf結(jié)構(gòu)，并通過(guò)OpenBabel轉(zhuǎn)換成PDB文件；再運(yùn)用AutoDock Tools 1.5.6軟件對(duì)蛋白質(zhì)靶點(diǎn)進(jìn)行去水、加氫等操作，并將活性成分及靶蛋白格式轉(zhuǎn)換為pdbqt格式；最后通過(guò) AutoDock Vina 進(jìn)行分子對(duì)接，選取部分結(jié)合力較強(qiáng)結(jié)果利用Pymol軟件進(jìn)行可視化。

2 結(jié)果

2.1 胎元飲有效成分及其相關(guān)作用靶點(diǎn) 在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中共得到符合篩選標(biāo)準(zhǔn)的有效成分191個(gè)，其中白芍14個(gè)，白術(shù)7個(gè)，陳皮77個(gè)，當(dāng)歸5個(gè)，杜仲41個(gè)，甘草103個(gè)，人參25個(gè)，熟地黃11個(gè)(有的成分同時(shí)存在于不同的藥物中)。將8味中藥有效成分的作用靶點(diǎn)合并、刪除重復(fù)值后共得到靶點(diǎn)307個(gè)。

2.2 先兆流產(chǎn)相關(guān)靶點(diǎn) 在GeneCards、DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)中分別檢索出1849、3個(gè)先兆流產(chǎn)相關(guān)靶點(diǎn)，OMIM、PharmGKB、TTD數(shù)據(jù)庫(kù)中未檢索到相關(guān)靶點(diǎn)。把上述數(shù)據(jù)庫(kù)的相關(guān)靶點(diǎn)匯總、去重后共得到1849個(gè)疾病靶點(diǎn)。

2.3 “藥物-疾病”交集靶點(diǎn) 將篩選的307個(gè)胎元飲有效成分作用靶點(diǎn)與先兆流產(chǎn)疾病靶點(diǎn)取交集，再通過(guò)R 語(yǔ)言繪制韋恩圖，得到“藥物-疾病”交集靶點(diǎn)162個(gè)，見(jiàn)圖 1。

圖1 “藥物-疾病”交集靶點(diǎn)韋恩圖

2.4 “藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析 運(yùn)用 Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建胎元飲與先兆流產(chǎn)之間的“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)圖，見(jiàn)圖2。根據(jù)Cytoscape 3.7.2中“Network Analyzer”計(jì)算的Degree值，排名前3位的分別為山柰酚(kaempferol)、木黃酮(genistein)、熊果酸(ursolic acid)，為主要活性成分。見(jiàn)表1。

表1 胎元飲的主要活性成分

圖2 “藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)圖

2.5 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析 將“藥物-疾病”交集靶點(diǎn)提交至STRING 11.0數(shù)據(jù)庫(kù)，得到PPI網(wǎng)絡(luò)，再將得到的網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建，獲得初始PPI網(wǎng)絡(luò)圖(見(jiàn)圖3A)。初始PPI網(wǎng)絡(luò)由162個(gè)節(jié)點(diǎn)和2875條邊組成。經(jīng)CytoNCA插件進(jìn)行拓?fù)鋵W(xué)分析，得到由58個(gè)節(jié)點(diǎn)和1208條邊組成的精簡(jiǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)(見(jiàn)圖3B)。最終經(jīng) MCODE 1.6.1插件分析得到由48個(gè)節(jié)點(diǎn)和933條邊組成的核心靶點(diǎn)團(tuán)(MCODE score為39.702)，在該靶點(diǎn)團(tuán)中，MCODE score 排名前3的靶點(diǎn)分別為CC基序趨化因子2(C-C motif chemokine 2，CCL2)、表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)、絲裂原活化蛋白激酶 8(mitogen-activated protein kinase 8，MAPK8)(見(jiàn)圖3C)，其 MCODE score 分別為 28.29、28.24 和27.99。

圖3 PPI網(wǎng)絡(luò)圖

2.6 “藥物-疾病”交集靶點(diǎn)GO功能和KEGG通路富集分析 運(yùn)用R語(yǔ)言對(duì)162個(gè)交集靶點(diǎn)進(jìn)行 GO 功能富集分析，共獲得2854個(gè)條目，其中BP 2524個(gè)，MF 131個(gè)，CC 199個(gè)。根據(jù)P值排序，篩選出排名前10的條目繪制氣泡圖(見(jiàn)圖4)。根據(jù)氣泡圖結(jié)果，可以推測(cè)出胎元飲治療先兆流產(chǎn)的BP主要涉及對(duì)脂多糖反應(yīng)(response to lipopolysaccharide)、對(duì)類固醇激素的反應(yīng)(response to steroid hormone)、肌肉細(xì)胞增殖(muscle cell proliferation)等；CC主要與膜筏(membrane raft)、膜微結(jié)構(gòu)域(membrane microdomain)、膜區(qū)(membrane region)等相關(guān)；MF主要涉及血紅素結(jié)合(heme binding)、四吡咯綁定(tetrapyrrole binding)、絲氨酸水解酶活性(serine hydrolase activity)。

注：縱坐標(biāo)為富集條目，橫坐標(biāo)為該 GO 的基因數(shù)占輸入總基因的比率，氣泡越大代表該 GO 的基因越多；顏色代表P值的大小，P值越小，顏色越紅，則表示富集程度越高

KEGG 通路富集分析可獲得183條代謝通路，按P值由小到大排序篩選出排名前30的通路繪制條形圖(見(jiàn)圖5)，剔除不相關(guān)通路，預(yù)測(cè)胎元飲可能通過(guò)白細(xì)胞介素17(IL-17)信號(hào)通路(IL-17 signaling pathway)、p53通路(p53 signaling pathway)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信號(hào)通路(PI3K/Akt signaling pathway)等治療先兆流產(chǎn)。通過(guò)查閱文獻(xiàn)，PI3K/Akt信號(hào)通路可能是胎元飲治療先兆流產(chǎn)的主要作用途徑，信號(hào)通路見(jiàn)圖6。

注：縱坐標(biāo)為通路名稱，橫坐標(biāo)為富集基因數(shù)；P值代表富集的顯著性，P值越小，顏色越紅，則富集程度越高

圖6 PI3K/Akt信號(hào)通路圖

2.7 分子對(duì)接結(jié)果 參考文獻(xiàn)[13-14]數(shù)據(jù)，結(jié)合能≤-5.0 kcal/mol認(rèn)為可結(jié)合，≤-7.0 kcal/mol認(rèn)為結(jié)合能力較強(qiáng)，即配體與受體具有較好的結(jié)合活性。若結(jié)合能>-5.0 kcal/mol認(rèn)為結(jié)合能力較弱。本研究分子對(duì)接結(jié)果顯示，3個(gè)主要主要活性與3個(gè)核心靶點(diǎn)的結(jié)合能力整體較強(qiáng)，其中熊果酸與EGFR結(jié)合能為-9.4 kcal/mol，結(jié)合活性最高(見(jiàn)表2)。選擇各靶點(diǎn)對(duì)應(yīng)成分結(jié)合能低且能形成氫鍵的對(duì)接組合進(jìn)行繪圖。結(jié)果顯示，化學(xué)物配體均結(jié)合在靶蛋白的活性口袋內(nèi)且匹配良好。各核心靶點(diǎn)-主要活性成分分子對(duì)接模擬圖及對(duì)接位點(diǎn)見(jiàn)圖7。

表2 分子對(duì)接結(jié)果 kcal/mol

注：A為山柰酚-CCL2對(duì)接圖，B為木黃酮-CCL2對(duì)接圖，C為熊果酸-CCL2對(duì)接圖；D為山柰酚-EGFR對(duì)接圖，E為木黃酮-EGFR對(duì)接圖，F(xiàn)為熊果酸-EGFR對(duì)接圖；G為山柰酚-MAPK8對(duì)接圖，H為木黃酮-MAPK8對(duì)接圖，I為熊果酸-MAPK8對(duì)接圖

3 討論

多項(xiàng)臨床研究已表明，胎元飲治療先兆流產(chǎn)有較好的療效。有研究顯示，胎元飲治療氣血虛弱型先兆流產(chǎn)2周后的有效率可達(dá)98%，并且發(fā)現(xiàn)胎元飲可能通過(guò)調(diào)節(jié)氣血虛弱型先兆流產(chǎn)患者外周血IL-2、干擾素γ(IFN-γ)、IL-10及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)的表達(dá)發(fā)揮治療作用[15]。趙偉等[16]研究顯示，加味胎元飲配合黃體酮治療早期先兆流產(chǎn)的療效及血清β-人絨毛膜促性腺激素(β-HCG)水平均優(yōu)于單用黃體酮治療(P<0.05)，由此可知加味胎元飲配合黃體酮治療先兆流產(chǎn)的效果優(yōu)于單獨(dú)應(yīng)用黃體酮。

本研究結(jié)果顯示，初始PPI網(wǎng)絡(luò)有162種靶點(diǎn)，存在2875種作用關(guān)系，充分體現(xiàn)了中藥多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)。MCODE 1.6.1插件分析得到3個(gè)核心靶點(diǎn)，分別為CCL2、EGFR、MAPK8。免疫學(xué)認(rèn)為，妊娠屬于一種特殊的同種異體移植，妊娠結(jié)局的關(guān)鍵在于母體與胚胎之間的免疫平衡。趨化因子參與反復(fù)自然流產(chǎn)的發(fā)生發(fā)展，其高表達(dá)會(huì)使妊娠維持，減少流產(chǎn)，在維持胎兒正常發(fā)育中有重要作用。CCL2是典型的炎性趨化因子，與免疫系統(tǒng)密切聯(lián)系，參與血管生成、炎性反應(yīng)過(guò)程，其異常表達(dá)可使胚胎植入、形成障礙從而誘發(fā)流產(chǎn)[17-18]。一項(xiàng)關(guān)于CCL2與早期流產(chǎn)相關(guān)性的臨床研究亦證明了早孕母胎界面絨毛和蛻膜組織中可見(jiàn)CCL2的表達(dá)，CCL2高表達(dá)與早期流產(chǎn)的發(fā)病機(jī)制有關(guān)[19]。胎盤(pán)是維持胎兒生長(zhǎng)發(fā)育的重要器官，具有物質(zhì)交換、防御、合成及免疫等功能。胎盤(pán)由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成，其中葉狀絨毛膜是胎盤(pán)的主要結(jié)構(gòu)。生理狀態(tài)下，晚期囊胚著床之后，著床部位的滋養(yǎng)層細(xì)胞迅速分裂增殖。有研究報(bào)道，EGF及其受體在早期妊娠組織中表達(dá)下降，推測(cè)EGFR及其配體促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化的作用降低，從而使滋養(yǎng)細(xì)胞增殖、分化受到抑制，因此EGF調(diào)控HCG的生成及HCG維持黃體的作用受到抑制[20]。植枝福等[21]研究也證明了絨毛組織中EGFR的表達(dá)與絨毛血管生成狀況密切相關(guān)，EGFR低表達(dá)可導(dǎo)致絨毛血管形成障礙。輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)在調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)中承擔(dān)著核心角色作用[22]。妊娠期間Th1細(xì)胞因子高表達(dá)，Th2細(xì)胞因子低表達(dá)，Th1/Th2細(xì)胞因子平衡偏向Th1可能與流產(chǎn)的發(fā)生相關(guān)[23]。MAPK8是Th細(xì)胞極化分化為T(mén)h1細(xì)胞必需的因子[24]，由此推測(cè)MAPK8與先兆流產(chǎn)存在著一定的聯(lián)系。分子對(duì)接驗(yàn)證結(jié)果亦表明，山柰酚、木黃酮、熊果酸與核心靶點(diǎn)(CCL2、EGFR、MAPK8)的結(jié)合活性較強(qiáng)，因此胎元飲可能主要通過(guò)山柰酚、木黃酮、熊果酸等治療先兆流產(chǎn)。

GO功能富集分析顯示胎元飲治療先兆流產(chǎn)主要與脂多糖反應(yīng)、對(duì)類固醇激素的反應(yīng)、血紅素結(jié)合、絲氨酸水解酶活性等方面有關(guān)。KEGG通路富集分析顯示，壽胎丸治療先兆流產(chǎn)可能的信號(hào)通路為IL-17、p53、PI3K/Akt信號(hào)通路。細(xì)胞因子對(duì)于維持和協(xié)調(diào)人類孕期免疫細(xì)胞的正?；顒?dòng)至關(guān)重要。IL-17是一種促炎細(xì)胞因子，主要由Th17細(xì)胞產(chǎn)生。關(guān)于人類母胎界面，有學(xué)者認(rèn)為蛻膜細(xì)胞通過(guò)分泌CCL2來(lái)吸引Th17細(xì)胞，并通過(guò)分泌IL-17抑制人類滋養(yǎng)層細(xì)胞的凋亡，并誘導(dǎo)它們?cè)鲋巢⑶秩胪懩25]。有研究發(fā)現(xiàn)，血IL-17水平在健康妊娠中升高，但在自然流產(chǎn)中未表現(xiàn)升高，根據(jù)這一發(fā)現(xiàn)推測(cè)IL-17為維持妊娠必不可少的調(diào)節(jié)細(xì)胞因子[26]。有研究在人類自然流產(chǎn)絨毛中發(fā)現(xiàn)，在促凋亡合胞體滋養(yǎng)層中觀察到細(xì)胞質(zhì)和頂膜上的層黏連蛋白受體表達(dá)增加，而這一過(guò)程最有可能是由p53介導(dǎo)的[27-28]。研究表明，p53信號(hào)通路功能異常及p53通路基因多態(tài)性的改變均可影響蛻膜化及妊娠結(jié)局[27]。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道顯示，PI3K/Akt信號(hào)通路在細(xì)胞增殖和胚胎發(fā)育中扮演著重要角色[29]。若PI3K/Akt信號(hào)通路一旦受到抑制，可激活線粒體凋亡途徑，進(jìn)而引起滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡增加，最終導(dǎo)致分泌β-HCG和孕酮的功能降低，繼而可導(dǎo)致胎兒生長(zhǎng)發(fā)育停止[30]。

綜上所述，本研究表明胎元飲治療先兆流產(chǎn)主要的活性成分可能為山柰酚、木黃酮、熊果酸等，這些活性成分通過(guò)作用于CCL2、EGFR、MAPK8等靶標(biāo)以及調(diào)節(jié)IL-17、p53、PI3K/Akt等信號(hào)通路發(fā)揮治療作用，從而實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)母體免疫狀態(tài)、促進(jìn)滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖等生物過(guò)程來(lái)維持妊娠，體現(xiàn)了胎元飲多通路、多靶點(diǎn)聯(lián)合作用的特點(diǎn)，為胎元飲治療先兆流產(chǎn)的臨床運(yùn)用提供了科學(xué)依據(jù)，為后續(xù)挖掘其潛在作用機(jī)制提供了新角度。