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        彌漫大B細胞淋巴瘤患者化療前后免疫功能變化的臨床意義

        2023-01-30 03:59:46劉莎陶麗菊
        右江醫(yī)學 2022年12期
        關鍵詞:亞群外周血淋巴細胞

        劉莎,陶麗菊

        (右江民族醫(yī)學院附屬醫(yī)院風濕免疫科,廣西百色 533000)

        彌漫大B細胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)是源于成熟B細胞的非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma,NHL),也是最常見的具有高度侵襲性NHL,占NHL的35%~40%,且已成為發(fā)病率逐年增長的惡性腫瘤之一[1],其在遺傳學、形態(tài)學和臨床表現等多方面均具備高度侵襲性和異質性,治療效果不佳、預后差、易復發(fā)。目前其病因不詳,但其發(fā)生、發(fā)展與機體免疫功能密切相關,主要是腫瘤細胞在機體的淋巴器官內異常增殖,破壞淋巴組織,致機體免疫系統受損,而機體抗腫瘤免疫反應減弱又進一步導致腫瘤的增殖。本研究對我院2016年1月至2019年10月收治的60例DLBCL患者,檢測其化療前及化療第二周期后第三周期前第3、4天的外周血T淋巴細胞亞群、B淋巴細胞、自然殺傷(NK)細胞表達水平的動態(tài)變化,探討其在不同時期的表達水平與疾病發(fā)生、發(fā)展、治療效果的關系,為病情判斷、療效評估及可能采取的相關治療提供理論依據。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料選擇2016年1月至2019年10月在我院就診,經病理活檢確診為DLBCL的初治患者60例為研究對象(研究組),年齡21~79歲,平均(52.88±12.41)歲,男性36例,女性24例;納入標準:①研究組患者符合DLBCL診斷標準;②為初診患者并同意化療;③參加本次研究的對象均簽署了知情同意書。排除標準:①伴有肝腎功能不全者;②精神障礙類患者;③伴有其他腫瘤患者;④合并其他免疫性疾病者。所有患者均化療,化療方案為RCHOP(R:利妥昔單抗,C:環(huán)磷酰胺,H:阿霉素,O:長春新堿,P:潑尼松),21天為一個化療周期;療效標準采用張之南編著的《血液病診斷及療效標準》。選擇同期60名健康體檢者為對照組,年齡18~76歲,平均(48.33±13.30)歲,男性41人,女性19人。兩組在年齡、性別等方面比較差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。

        1.2 檢測方法T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、B淋巴細胞(CD19+)、NK細胞表達水平檢測:所有研究對象于化療前及化療第二周期后第三周期前的第3、4天清晨空腹抽取外周靜脈血2 mL,肝素抗凝。采用美國BD公司的全自動流式細胞儀測定,型號為 FACSCANTO II FLOW Cytometer。

        2 結 果

        2.1 兩組化療前后T淋巴細胞亞群、NK細胞及B淋巴細胞CD19+水平的比較研究組患者化療前T淋巴細胞亞群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK細胞水平明顯低于對照組,CD8+水平高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05);B淋巴細胞CD19+水平與對照組相比無統計學意義(P>0.05)。研究組化療后T淋巴細胞亞群及NK細胞水平均較化療前明顯改善(P<0.05);B淋巴細胞CD19+水平較化療前稍升高,但差異無統計學意義(P>0.05)。如表1。對照組與研究組化療前、化療后患者T淋巴細胞亞群、NK細胞、CD19+細胞水平如圖1。

        表1 對照組與研究組化療前及化療后T淋巴細胞亞群、NK細胞與CD19+水平比較

        圖1 對照組與研究組化療前、化療后T淋巴細胞亞群、NK細胞、CD19+細胞平均值圖

        2.2 化療有效和無效患者T淋巴細胞亞群及NK細胞表達水平比較60例DLBCL患者經化療后有43例有效,其中24例完全緩解(complete response, CR),9例不確定的完全緩解(complete response of uncertainty, Cru),10例部分緩解(partial response, PR),有17例無效,其中7例疾病無進展(stable disease, SD),10例疾病進展(progressive disease, PD)?;熐?,化療有效組患者T淋巴細胞亞群及NK細胞表達水平優(yōu)于化療無效組(P<0.05)?;熀?,化療有效組T淋巴細胞亞群及NK細胞水平明顯改善(P<0.05),但仍低于對照組(P<0.05);化療無效組無明顯變化(P>0.05),且低于對照組(P<0.05)。化療有效患者T淋巴亞群及NK細胞表達水平較化療無效患者明顯改善(P<0.05)。CD19+水平化療前后無明顯改變(P>0.05),與對照組相比也無統計學意義(P>0.05)。見表2、表3、圖2。

        表2 化療有效組和無效組化療前后T淋巴細胞亞群、NK細胞及CD19+水平比較

        表3 對照組與化療后有效組及無效組T淋巴細胞亞群、NK細胞水平及CD19+水平的比較

        圖2 有效組與無效組化療前后各指標平均值圖

        3 討 論

        DLBCL是一種源自免疫系統的具有高度異質性和侵襲性的惡性腫瘤。相關報道表明,免疫力異常降低常常是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的誘因,當腫瘤細胞超出免疫監(jiān)視或進行清除時,便可能加速腫瘤的形成[2-3]。人體免疫系統根據其表面抗原表達所具備的差異,可將外周血淋巴細胞分為B淋巴細胞、T淋巴細胞與NK細胞等類型。T淋巴細胞可分為CD4+和CD8+兩大淋巴細胞亞群,其表面均表達CD3+,代表機體內T淋巴細胞總體數量,CD4+細胞是一類輔助/誘導性T淋巴細胞,CD8+細胞是一類抑制/細胞毒T細胞,兩者共同維持機體免疫內環(huán)境穩(wěn)定,CD4+/CD8+比值可直接反映機體免疫功能狀態(tài)[4]。NK細胞是天然免疫應答中關鍵的效應細胞,是機體抗腫瘤作用的第一道防線,與T淋巴細胞共同參與細胞免疫。B淋巴細胞主要參與體液免疫,CD19+細胞屬于B細胞表面膜抗原,可對體液免疫應答進行介導,在體液免疫應答中發(fā)揮重要作用,并可分泌多種細胞因子,從而在免疫調節(jié)中發(fā)揮作用[5]。有研究表明監(jiān)測T細胞亞群、NK細胞水平的變化可作為臨床上診斷、治療和評估惡性腫瘤的重要指標[6]。

        本研究發(fā)現,DLBCL患者外周血中T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值)及NK細胞水平均顯著低于健康對照組,CD8+水平顯著高于健康對照組,表明DLBCL患者的細胞免疫功能被明顯抑制。有研究表明DLBCL患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值顯著降低,認為DLBCL患者存在總體T淋巴細胞缺乏以及免疫功能紊亂的問題,導致其原因可能是疾病引起的強烈免疫反應致大量淋巴細胞消耗,還可能與大量淋巴細胞向病灶聚集后的負反饋調節(jié)有關[7]。本研究結果顯示對照組的NK細胞表達水平顯著高于DLBCL患者,說明NK細胞作為機體抵御外來入侵的重要屏障,當機體免疫系統平衡被打破后,機體易受腫瘤侵害,NK細胞的水平也隨之下降。張麗萍[8]通過研究表明NHL患者體內細胞免疫功能被明顯抑制,外周血中T淋巴細胞亞群及NK細胞的變化與NHL的發(fā)生、發(fā)展存在密切關聯,與本研究一致,說明DLBCL患者在確診時即存在細胞免疫功能的異常。

        本研究還發(fā)現,研究組化療后化療有效者外周血中T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值)及NK細胞水平較化療前升高,CD8+水平較化療前降低,與對照組相比,化療有效者外周血中T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值)及NK細胞水平均低于對照組,CD8+水平高于對照組,表明DLBCL化療有效者的免疫功能雖有所恢復,但與正常人群免疫功能相比仍存在差異,提示后期仍需繼續(xù)治療。而化療后化療無效者外周血中的T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值)及NK細胞水平較化療前稍上升,CD8+細胞水平較化療前稍下降,與對照組相比較,研究組化療無效者外周血中T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值)及NK細胞水平均明顯降低,CD8+水平顯著升高,表明DLBCL化療無效者免疫系統被腫瘤細胞廣泛侵犯,化療后免疫功能也難以恢復。DLBCL患者化療前存在細胞免疫功能被抑制,經化療后,化療有效者的外周血中T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值)水平較化療前明顯上升,CD8+水平較化療前明顯下降,說明化療有效的DLBCL患者體內細胞免疫功能有所恢復,化療后機體在藥物的作用下腫瘤細胞逐漸被殺死,腫瘤細胞對機體的損害逐漸被削弱,故患者病情逐漸恢復;在腫瘤發(fā)展與機體免疫對抗腫瘤的過程中,腫瘤細胞對機體的損害已不占主導地位,隨著患者疾病的好轉,機體自身的免疫系統功能逐漸恢復,使細胞免疫在抗腫瘤過程中恢復主導地位。經化療后,化療有效者CD8+水平下降,對CD4+的調節(jié)性抑制作用減弱,使機體外周血中CD4+水平上升,CD4+/CD8+比值增高,機體的免疫功能較前恢復。而化療無效者細胞免疫功能仍處于受抑狀態(tài),故外周血中的T淋巴細胞亞群及NK細胞水平與化療前相比無明顯改善。NK細胞是人體天然免疫系統中的重要組成成分,具有抗腫瘤、抗感染、免疫調節(jié)等功能,被認為是機體免疫應答中的第一道免疫殺傷防線。經化療后DLBCL化療有效者NK細胞水平較化療前顯著升高,說明化療后機體的抗腫瘤功能也在逐漸的恢復。由此可知NK細胞在輔助機體抵抗腫瘤方面有重要作用,說明DLBCL患者化療前細胞免疫功能明顯處于抑制狀態(tài),而化療有效的DLBCL患者體內細胞免疫功能有所恢復。

        另外,化療前化療有效組外周血中T淋巴細胞亞群CD4+及CD4+/CD8+比值水平顯著高于化療無效組,CD8+水平顯著低于化療無效組;化療后化療有效組外周血T淋巴細胞亞群CD4+及CD4+/CD8+比值較化療無效組明顯升高,CD8+水平較化療無效組明顯下降;且化療無效者與化療前相比T淋巴細胞亞群無明顯改善,說明化療無效者的細胞免疫功能被嚴重破壞,免疫功能難以修復,故治療效果差、預后不佳。有研究表明當DLBCL發(fā)生發(fā)展時,其免疫性反應被激活,T淋巴細胞亞群發(fā)生應激性改變,主要表現為CD4+、NK水平異常降低及CD8+水平異常升高,隨著疾病嚴重程度升高,免疫系統受損加重,其異常變化加強[9]。DLBCL患者化療無效組的T淋巴細胞(CD4+及CD4+/CD8+比值)顯著低于化療有效組,CD8+細胞水平顯著高于化療有效組,說明DLBCL患者體內免疫功能被抑制,對識別和殺傷癌變細胞的能力減弱,機體的免疫平衡狀態(tài)被打破,從而使腫瘤持續(xù)發(fā)展,難以緩解。而且DLBCL患者化療前T淋巴細胞(CD4+及CD4+/CD8+比值)越低,CD8+細胞水平越高,病情越難緩解。包維鶯等學者[10]通過研究表明NHL患者細胞免疫功能受到抑制,且化療無效組的CD4+細胞數量和CD4+/CD8+比值越低,淋巴系統受侵越嚴重,治療療效越差。ANSELL等[11]早期研究表明DLBCL患者機體內T淋巴細胞中活化的CD4+細胞含量越高則預后越好。本研究也發(fā)現化療前T淋巴細胞CD4+及CD4+/CD8+比值越低,CD8+細胞水平越高,化療后DLBCL越難以緩解。

        綜上所述,DLBCL患者體液免疫化療前后水平變化不大,但目前臨床上對惡性腫瘤與體液免疫相關性研究較少,有待以后臨床上擴大樣本量進一步研究。本研究認為動態(tài)監(jiān)測DLBCL患者外周血T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及NK細胞水平可作為DLBCL患者免疫功能監(jiān)測、監(jiān)測病情及判斷預后的指標之一。

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