劉 洋，郭慶梅 ，宋艷梅（山東中醫(yī)藥大學藥學院，濟南 250355）

牡丹皮為毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮，味苦、辛，微寒，歸心、肝、腎經(jīng)，具有清熱涼血、活血化瘀的功效，臨床上多用于治療熱入營血、溫毒發(fā)斑、吐血衄血、夜熱早涼、無汗骨蒸、經(jīng)閉痛經(jīng)、跌撲傷痛、臃腫瘡毒等癥[1]。據(jù)相關文獻報道，牡丹皮化學成分復雜，主要含有酚及酚苷類、單萜及其苷類、三萜類、甾醇及其苷類、黃酮類成分，另外還含有大量的揮發(fā)油及微量元素[2―6]。牡丹皮為常用大宗藥材，在我國有兩千多年的藥用歷史，主產(chǎn)于安徽、重慶、山東、河南等地，其中以安徽銅陵和南陵所產(chǎn)的藥材為道地藥材[7]。

近年來，市場上牡丹皮藥材質量參差不齊，為確保牡丹皮藥材的質量穩(wěn)定性和用藥安全性，相關研究者系統(tǒng)深入地探究了牡丹皮的產(chǎn)地加工方法和質量控制方法。基于此，筆者對牡丹皮藥材的采收期與生長年限，產(chǎn)地加工過程中涉及的刮皮、抽心、趁鮮切制、硫磺熏蒸、干燥和貯存，以及商品規(guī)格等級、質量控制方法等研究概況進行歸納總結，并探究行之有效的改進方式和對策，以期為規(guī)范牡丹皮的采收加工方法和質量控制提供參考。

1 牡丹皮采收期與生長年限研究

在不同生長發(fā)育階段，植物所含的化學成分種類與含量各有差異，因此，采收期與生長年限不同，將直接影響藥材的質量和產(chǎn)量。胡煜雯等[8]同時測定了安徽南陵地區(qū)不同采收期和生長年限的鳳丹皮（牡丹皮的主流品種）中丹皮酚和沒食子酸的含量，結果顯示，不同采收期的鳳丹皮中兩種藥效成分的含量有顯著差異，以9、10月份采收樣品的含量相對較高，以5、6年生樣品的含量相對較高。張曉梅[9]測定了山東菏澤地區(qū)不同采收期的牡丹皮中丹皮酚的含量，結果顯示，3－6月和11－12月采收的牡丹皮中丹皮酚含量較高，由此推斷，牡丹皮采收的最佳時期是花期或初冬。張洪坤等[10]測定了安徽亳州地區(qū)牡丹皮中8種指標性成分（丹皮酚、芍藥苷、氧化芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、沒食子酸、兒茶素、苯甲酸和浸出物）的含量，結果表明，牡丹皮在不同時期采收其有效成分和浸出物含量具有顯著差異，6年生牡丹皮的有效成分含量最高，同一生長年限8－10月采收期樣品的有效成分含量較高。據(jù)研究報道，牡丹皮中丹皮酚含量的累積在一年中出現(xiàn)兩個高峰期（5－6月和9－10月），5－6月正值牡丹皮生長發(fā)育最旺盛時期，根皮內丹皮酚的合成加快，含量增加，但春夏兩季雨水較多，藥材不易干燥，不適宜采收；8－10月牡丹皮的地上部分凋謝，根系貯存的營養(yǎng)物質最為豐富，有效成分含量也相對較高，此時采挖的牡丹皮形體飽滿、品質優(yōu)良、藥用價值最高[10]。由此可知，牡丹皮一般種植5～6年后在秋季的晴天采收為宜，這與牡丹皮藥材傳統(tǒng)采收習慣一致。

2 牡丹皮產(chǎn)地加工方法研究

2.1 刮皮抽心

2020年版《中國藥典》（一部）收載的牡丹皮加工方法為：秋季采挖根部，除去細根和泥沙，剝取根皮，曬干；或刮去粗皮，除去木心，曬干[1]。前者習稱“連丹皮”，后者習稱“刮丹皮”。鳳丹皮主產(chǎn)于安徽銅陵、南陵，為傳統(tǒng)道地藥材，其一般不刮皮、不熏硫，抽心率可達100%[11]。

刮丹皮、連丹皮的說法是近代才有的，清代以前的本草文獻中均未記載牡丹皮加工需要刮去栓皮。張洪坤等[12]測定了不同加工方式（留皮留心、留皮去心、去皮留心、去皮去心）牡丹皮藥材或鮮切片中丹皮酚、芍藥苷、沒食子酸等7種指標性成分的含量，結果表明，牡丹皮質量高低排序依次為：留皮留心藥材＞去皮去心藥材＞留皮去心鮮切片＞留皮去心藥材＞留皮留心鮮切片＞去皮留心藥材＞去皮留心鮮切片＞去皮去心鮮切片。因此，該研究者建議在產(chǎn)地加工時保留牡丹皮栓皮部，采用留皮去心藥材/鮮切片的加工方法。范旭航等[13]測定了不同產(chǎn)地不同部位牡丹皮中6種活性成分（丹皮酚、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、苯甲酰氧化芍藥苷、苯甲酸和沒食子酸）的含量，結果發(fā)現(xiàn)，連丹皮的整體質量優(yōu)于刮丹皮，且栓皮中各活性成分含量均較高，其中以有效成分芍藥苷含量差異最為明顯——栓皮中芍藥苷含量最多可高于刮丹皮近4倍，高于連丹皮近2.5倍；而丹皮酚含量在牡丹皮各部位中均較高，且其在連丹皮中的含量高于刮丹皮。因此，該研究者建議牡丹皮加工過程中可以不刮掉栓皮。

《本草經(jīng)集注》云“色赤者為好，用之去心”，首次提出牡丹皮的去心加工方法。牡丹皮在實際加工過程中，完全抽去木心很難實現(xiàn)。牡丹皮的直徑大小對抽心率有一定影響，直徑大的容易抽心，市場價也較高。周立艷等[14]測定了牡丹皮栓皮部、韌皮部和木質部各占總質量的比例分別為8.14%、81.42%、10.44%，同時通過比較牡丹皮不同部位中丹皮酚的含量發(fā)現(xiàn)，栓皮部中丹皮酚含量約為韌皮部的2倍，不同粗細的木質部中丹皮酚含量無明顯差異，約為韌皮部的一半。因此，該研究者建議牡丹皮加工過程中可不刮皮而只抽心。有研究報道，木心中主要含質韌的木纖維，所含化學成分的種類最少且含量較低，保留木心將顯著降低牡丹皮的質量[11，15]。因此，牡丹皮產(chǎn)地加工過程中的抽心操作有一定的科學合理性。

2.2 趁鮮切制

大多數(shù)中藥在產(chǎn)地采收后即加工成中藥材，然后再流入飲片加工企業(yè)。由于貯存時間久，使得其有效成分流失或發(fā)生化學變化，尤其是含揮發(fā)性成分的藥材。此外，飲片的生產(chǎn)還需要經(jīng)過浸潤、切制、炮制、干燥等過程，導致其有效成分進一步損失，療效也隨之降低。因此，減少飲片加工環(huán)節(jié)，縮短貯存時間，是保證飲片質量的有效方法。

王軍等[16]比較了鳳丹皮趁鮮切制和干燥后軟化切制兩種加工方法制備的飲片中丹皮酚和芍藥苷的含量，結果表明，趁鮮切制飲片中丹皮酚的含量低于干燥后軟化切制飲片約50%，但芍藥苷的含量卻高于干燥后軟化切制飲片約10%。因此，牡丹皮產(chǎn)地加工時采用趁鮮切制的方法較為適宜，為減少丹皮酚的流失，趁鮮切制后可選擇適當?shù)姆椒ǜ稍?。龍全江等[17―18]通過測定牡丹皮飲片中丹皮酚和芍藥苷的含量，來探討產(chǎn)地趁鮮切制的可行性，結果發(fā)現(xiàn)，與傳統(tǒng)切制相比，鳳丹皮趁鮮切制其丹皮酚和芍藥苷含量雖略有下降，但該法是直接從鮮藥材進入切片過程，省工省時，而且避免了飲片中的藥效成分在中間流通環(huán)節(jié)因貯存時間久而造成損失，從而保證了飲片質量的穩(wěn)定性。張洪坤等[12]也認為牡丹皮趁鮮切制工藝是可行的，并提議牡丹皮在產(chǎn)地采收后直接加工成飲片，然后干燥使含水量達到要求后再密封包裝，置于適宜條件下貯存。

此外，牡丹皮在貯存過程中會出現(xiàn)丹皮酚析出結晶的現(xiàn)象，俗稱“亮銀星”，若采用干燥后軟化切制，會使丹皮酚在牡丹皮軟化時隨水流失，影響牡丹皮質量[19]。但目前牡丹皮產(chǎn)地趁鮮切制加工方法尚不成熟，且產(chǎn)地加工水平與條件不如飲片加工企業(yè)，并考慮到“封刀丹皮”（指牡丹皮宜冬天切片，一般在其他藥材切完后的最后季節(jié)切丹皮）的傳統(tǒng)切制經(jīng)驗，故迫切需要進一步優(yōu)化趁鮮切制的工藝參數(shù)，并綜合考慮藥效成分的理化性質和藥材流通、運輸、貯存等環(huán)節(jié)的實際情況，提高中藥飲片質量，使該方法規(guī)范化。

2.3 硫磺熏蒸

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，硫磺熏蒸不僅導致中藥中某些固有活性成分發(fā)生化學轉化[20]，而且易造成二氧化硫等有害物殘留，危害人體健康。硫磺熏蒸是國家明令禁止的行為，但目前在中藥材市場中仍然存在硫熏牡丹皮，其之所以在實際加工生產(chǎn)中屢禁不止，是因為熏硫在中藥干燥、增白、防霉、防蟲蛀等方面具有顯著優(yōu)勢。但熏硫破壞了牡丹皮特有的清香氣味，又易導致二氧化硫殘留量超標，影響牡丹皮的內在質量。

有些商家為了防止在抽檢時被檢測出二氧化硫殘留量超標，常采用脫硫劑對熏硫藥材進行脫硫處理。鄧愛平等[21]測定了正常、熏硫和脫硫牡丹皮中10種次生代謝產(chǎn)物的含量及脫硫前后熏硫牡丹皮中二氧化硫的殘留量。結果表明，牡丹皮熏硫后，其次生代謝產(chǎn)物含量發(fā)生變化，二氧化硫殘留量也明顯高于2020年版《中國藥典》（一部）中的限量要求（不得超過150 mg/kg）[1]，這說明硫磺熏蒸極易導致二氧化硫超標；進一步經(jīng)脫硫處理后發(fā)現(xiàn)，牡丹皮中二氧化硫殘留量有所降低，但同時也降低了次生代謝產(chǎn)物的含量。因此，在產(chǎn)地加工過程中，該研究者不建議對牡丹皮進行熏硫和脫硫處理。有研究顯示，貯藏可顯著降低牡丹皮中二氧化硫殘留量，但特征含硫衍生物——芍藥苷亞硫酸酯在貯藏前后含量變化不大[22―23]，這說明二氧化硫殘留量可能無法真正反映牡丹皮的硫熏程度，后續(xù)可考慮將特征含硫衍生物作為硫熏牡丹皮質量控制方法的補充。

此外，與未經(jīng)硫磺熏蒸的牡丹皮相比，硫熏后的牡丹皮表面更白、粉性更足、保存時間也更長，這常使人們誤認為這樣的牡丹皮質量更佳。因此，不能僅依靠傳統(tǒng)“色白、粉性足為佳”的牡丹皮質量評價標準，而應建立以有效成分含量為指標的客觀評價標準。

2.4 干燥方法

中藥材干燥是產(chǎn)地加工過程中不可或缺的重要環(huán)節(jié)，干燥后不僅有利于運輸和貯藏，而且能形成和賦予中藥材所特有的藥性。牡丹皮的傳統(tǒng)干燥方法有曬干、陰干、晾干、烘干或幾法相結合。傳統(tǒng)干燥方法雖然成本低，但存在干燥周期長、易受氣候條件影響、干燥后藥材質量參差不齊等弊端，而且難以實現(xiàn)牡丹皮加工工藝的統(tǒng)一性和規(guī)范性，不利于保障中藥材的質量。近年來，隨著中藥材生產(chǎn)過程工業(yè)化程度的深化，現(xiàn)代干燥技術如熱風干燥、遠紅外干燥和微波干燥等，因表現(xiàn)出生產(chǎn)效率高、干燥條件可控和產(chǎn)品質量穩(wěn)定等優(yōu)點，被逐漸應用于中藥材干燥加工中[24]。趙秋龍等[25]研究新鮮牡丹皮藥材在不同干燥溫度（40、50、60、70 ℃）下分別以熱風干燥法、遠紅外干燥法、微波干燥法3種現(xiàn)代干燥方法及曬干、陰干2種傳統(tǒng)方法處理，并測定了牡丹皮中16種化學成分的含量。結果發(fā)現(xiàn)，在40 ℃下，采用遠紅外干燥法的綜合得分最高，這說明以這種方式干燥所得的牡丹皮藥材綜合品質最好。因此，該研究者建議牡丹皮藥材在40 ℃下采用遠紅外干燥法為宜。

2.5 貯藏方法

影響牡丹皮質量的因素除了藥材加工方法外，貯藏方式也同樣重要。牡丹皮是一種具有特殊芳香氣味的根皮類藥材，其在貯藏過程中有效成分易流失且容易發(fā)霉，因此，根據(jù)藥材的性質采取相應的貯藏方式尤為重要。呂建洪等[26]研究不同貯藏方法及貯藏期對安徽南陵牡丹皮中丹皮酚、芍藥苷和沒食子酸3種有效成分含量的影響。結果發(fā)現(xiàn)，隨著貯藏時間的延長，牡丹皮中3種有效成分的含量均呈下降趨勢；密封包裝貯存明顯優(yōu)于散裝貯存；與澤瀉對抗同貯可使丹皮酚和芍藥苷的含量遞增，沒食子酸的含量遞減。因此，該研究者建議對牡丹皮采用密封包裝并與澤瀉對抗同貯的貯藏方法。據(jù)研究報道，牡丹皮藥材貯藏14.3個月，飲片貯藏12.3個月，其丹皮酚含量均低于1.2%，不符合《中國藥典》相關標準[27]。曹臣等[28]通過經(jīng)典恒溫實驗和留樣觀察實驗研究牡丹皮的有效期，建議將牡丹皮制成小包裝飲片，且貯藏時間不宜過久，確保在200 d內用完。李靜等[29]則對牡丹皮的包裝材料進行了深入研究，在陰涼[溫度為（15±2） ℃，濕度為50%±2%]和常溫[溫度為（25±2） ℃，濕度為50%±2%]2種儲存環(huán)境下，通過比較復合膜真空袋、普通聚乙烯袋、編織袋3種包裝材料對沒食子酸、氧化芍藥苷、芍藥苷、丹皮酚4種主要指標性成分含量的影響，結果發(fā)現(xiàn)，牡丹皮以復合膜真空包裝并于陰涼條件儲存時效果最好。

3 牡丹皮商品規(guī)格等級研究

中藥材商品規(guī)格等級標準是促使中藥材市場規(guī)范化的標準，目前使用最多的是1984年頒布的《七十六種藥材商品規(guī)格標準》[30]，其中收載的牡丹皮分為鳳丹皮、連丹皮、刮丹皮3種規(guī)格，以其長度和中部圍粗分別劃分為一、二、三、四等品，以“縱形隙口緊閉、皮細肉厚、粉質足、有亮銀星、香氣濃，長6 cm以上、中部圍粗2.5 cm以上”者質量最佳。鄧愛平等[11]采用牡丹皮外觀性狀與內在質量相結合的方法，重新整理了牡丹皮的商品規(guī)格等級現(xiàn)狀；在《七十六種藥材商品規(guī)格標準》的基礎上，將牡丹皮按產(chǎn)地劃分為“鳳丹皮”與“其他產(chǎn)區(qū)”2種規(guī)格，其他產(chǎn)區(qū)又按產(chǎn)地加工中是否去皮劃分為“刮丹皮”和“連丹皮”2種規(guī)格，各種規(guī)格項下再依據(jù)藥材長度和直徑大小劃分等級。藥材市場上除了依據(jù)牡丹皮的產(chǎn)地、長度、直徑大小、雜質含量劃分等級外，還以抽心率的高低作為等級劃分的依據(jù)。木心為牡丹皮的非藥用部位，2020年版《中國藥典》（一部）中規(guī)定了木心的限量要求（不得過3%）[1]，因此，以這種方法來劃分牡丹皮的等級必須基于2020年版《中國藥典》（一部）的相關規(guī)定，嚴格控制木心的含量，否則將顯著影響牡丹皮的藥材質量。

4 牡丹皮的質量控制研究

2020年版《中國藥典》（一部）僅規(guī)定了牡丹皮中丹皮酚的含量，其在藥材和飲片中均不得低于1.2%[1]。近年來，為了使牡丹皮的質量得到更好的控制，研究者們采取了多種方法和策略，主要有高效液相色譜（HPLC）法、氣相色譜-質譜（GC-MS）法等。

4.1 HPLC法

夏成凱等[31]采用HPLC單波長法檢測牡丹皮中沒食子酸、5-羥甲基糠醛、沒食子酸甲酯、氧化芍藥苷、兒茶素、芍藥苷、1，2，3，6-O-四沒食子酰葡萄糖、1，2，4，6-O-四沒食子酰葡萄糖、1，2，3，4，6-O-五沒食子酰葡萄糖、牡丹皮苷C、苯甲酰氧化芍藥苷、丹皮酚、苯甲酸的含量，結果發(fā)現(xiàn)，該研究所建立的HPLC單波長方法可用于同時測定牡丹皮中多個指標成分的含量。劉小蔓等[32]采用HPLC雙波長法檢測牡丹皮中沒食子酸、芍藥苷、丹皮酚、1，2，3，4，6-O-五沒食子酰葡萄糖的含量，結果發(fā)現(xiàn)，該方法簡便、準確、重復性好，可為牡丹皮的質量控制與評價提供參考。謝劍琳等[33]采用HPLC波長切換法檢測牡丹皮中沒食子酸、氧化芍藥苷、芍藥苷、1，2，3，4，6-O-五沒食子酰葡萄糖、丹皮酚、苯甲酰芍藥苷的含量，結果發(fā)現(xiàn)，該方法保證了各成分在最大吸收波長處的檢測，可全面評價牡丹皮的質量。曹杰楠等[34]采用HPLC指紋圖譜法標定了牡丹皮中10個共有峰，指認出其中4個成分，分別為氧化芍藥苷、芍藥苷、1，2，3，4，6-O-五沒食子酰葡萄糖、丹皮酚，并篩選出芍藥苷等6個差異成分，可更加全面地評價牡丹皮的質量。Li等[4]采用超高效液相色譜-四極桿/飛行時間質譜（UPLC-QTOF-MS/MS）法檢測牡丹皮中丹皮酚、丹皮酚原苷、丹皮酚新苷、芍藥苷、氧化芍藥苷等15種成分的含量，并在UPLCQTOF-MS/MS上建立了一種基于時間段掃描的準多反應監(jiān)測模式。結果發(fā)現(xiàn)，該模式提高了UPLC-QTOFMS/MS的定量分析能力，可更加準確地定量分析牡丹皮的化學成分。

4.2 GC-MS法

胡云飛等[35]采用GC-MS法從牡丹皮提取物中鑒別出了41個成分，主要為芳香族和脂肪酸類化合物，占總量的80%以上，其中丹皮酚、苯甲酸、鄰苯三酚含量最高。該方法可用于牡丹皮的多指標質量控制，可為牡丹皮藥材的質量評價與道地藥材的鑒別提供依據(jù)。

4.3 其他

劉威等[6]采用HPLC波長融合法檢測了牡丹皮中沒食子酸、芍藥內酯苷、芍藥苷、1，2，3，4，6-O-五沒食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍藥苷、丹皮酚的含量，并采用微波消解-電感等離子體質譜（ICP-MS）法檢測了Fe、Mg、Al等24種微量元素的含量，可多角度、多方面地評價牡丹皮質量，為牡丹皮優(yōu)質藥材選擇提供參考。

5 總結和展望

5.1 牡丹皮刮皮、抽心及切制工藝的不確定

牡丹皮在傳統(tǒng)刮皮抽心加工中，關于是否需要刮皮的問題仍存在爭議。目前牡丹皮在產(chǎn)地加工和藥材市場上以刮丹皮為主，刮丹皮價格也高于連丹皮。牡丹皮栓皮層占牡丹根總質量的比例較小，但其中藥理活性成分的含量較高，加工過程中若刮去栓皮層，在一定程度上會影響牡丹皮的質量或造成有效成分的損失。關于牡丹皮刮皮與否建議結合其他相關因素如臨床藥效、農(nóng)藥殘留及重金屬含量等綜合考慮。牡丹皮加工過程中的抽心操作符合2020年版《中國藥典》（一部）規(guī)定，不僅有利于提高其內在質量，還可減少干燥時間。

從牡丹皮切制工藝來看，趁鮮切制在產(chǎn)地加工中盛行。與傳統(tǒng)切制相比，牡丹皮趁鮮切制不僅省工省時，而且可避免飲片中有效成分在中間流通環(huán)節(jié)因貯存時間久而造成損失，但目前產(chǎn)地趁鮮切制加工方法尚不成熟。因此，建議后續(xù)研究進一步優(yōu)化牡丹皮趁鮮切制的工藝參數(shù)，綜合考慮其藥效成分的理化性質及其流通、運輸、貯存等環(huán)節(jié)的實際情況，制定牡丹皮產(chǎn)地加工規(guī)范化規(guī)程。

5.2 牡丹皮的質量評價指標單一

2020年版《中國藥典》僅以丹皮酚作為牡丹皮藥材及飲片質量控制的指標[1]，然而單一或少數(shù)幾種指標成分往往不能全面反映藥材的整體質量。隨著現(xiàn)代分析方法和技術的開發(fā)與普及，多指標成分含量測定、指紋圖譜等已經(jīng)用于同時定量分析牡丹皮的多個活性成分，但是否能反映牡丹皮的整體質量還需更深入的研究和探討。筆者建議后續(xù)研究可從酚及酚苷類、單萜及其苷類等不同類別中選擇具有代表性的指標成分進行含量測定，從而建立可有效反映牡丹皮整體質量的評價方法。