◆作者：李蘭 譯

◆文章來源：INRAE動(dòng)物生產(chǎn)期刊（INRAE:Institut national de recherche pour l’agriculture，l’alimentation et l’environnement，法國國立農(nóng)業(yè)食品環(huán)境研究所）。原文鏈接：https://doi.org/10.20870/productions-animales.2022.35.2.7073

每年，法國的農(nóng)業(yè)和食品工業(yè)會(huì)產(chǎn)生3億噸有機(jī)排放物，其中有2600萬噸糞便和80萬噸廄肥來自生豬養(yǎng)殖(Loyon，2017)。這些排放物有很多的營養(yǎng)和能量。然而它們也會(huì)對(duì)當(dāng)?shù)睾腿虻目諝?、水或者土壤造成污染，?duì)環(huán)境、動(dòng)物和人類產(chǎn)生危害（“同一健康”概念）。因此，我們的挑戰(zhàn)在于更好地利用廢液中所含的資源（營養(yǎng)物質(zhì)和能量），以減少其對(duì)環(huán)境的影響。并在循環(huán)生物經(jīng)濟(jì)的框架內(nèi)將它們的農(nóng)業(yè)、能源和經(jīng)濟(jì)潛力最大化。

由于鋅和銅的較低的吸收率，以及其對(duì)健康和生長性能的作用，往往在日糧中會(huì)超過動(dòng)物需求量添加。使用有機(jī)排放物時(shí)會(huì)根據(jù)氮磷的含量來推算需要施用的廄肥數(shù)量，然而其中鋅和銅的含量可能比植物需要量高出4-10倍（Jondreville等，2002；Revy，2003）。由于直接撒播是利用廢水的主要方式，因此鋅銅等元素會(huì)過量被灑播并積聚在土壤中（Coppenet等，1993；L'Herroux等，1997；Jensen等，2018）。這增加了土壤微生物中毒的風(fēng)險(xiǎn)（McGrath等，1995），也增加了對(duì)植物的風(fēng)險(xiǎn)（McGrath，1981；Jondreville等，2002；Revy，2003）。此外，在仔豬階段使用藥理學(xué)劑量的氧化鋅會(huì)增加細(xì)菌對(duì)抗生素的耐藥性（Jensen等，2018），這也使得減少藥理學(xué)劑量氧化鋅的使用成了一個(gè)重要議題。

為了減少對(duì)環(huán)境、動(dòng)物和人類健康的各種風(fēng)險(xiǎn)，歐盟法規(guī)對(duì)動(dòng)物飼料中鋅和銅的限量越來 越嚴(yán)格（EU-2016/1095；EU-2018/1039）。歐盟同時(shí)也存在撒播這些礦物質(zhì)的有關(guān)規(guī)定，以及關(guān)于肥料和有機(jī)土壤改良劑中鋅和銅含量的規(guī)范或者標(biāo)準(zhǔn)。另外，正在開發(fā)的各種有機(jī)肥處理技術(shù)（堆肥、好氧、厭氧消化等）可能導(dǎo)致這些元素的含量增加，尤其是與干物質(zhì)相關(guān)的濃度（Hsu和Lo，2001；Legros等，2017）。有必要需要了解鋅和銅的流向，以便于對(duì)其管理。

本文會(huì)對(duì)鋅、銅的流向及其發(fā)展變化，從飼料-動(dòng)物-糞便-土壤進(jìn)行描述。第一部分回顧了豬料中鋅和銅的使用以及豬的需求。第二部分描述了污水中這些元素的排放及其在各種豬污水的管理方式。最后，討論了生豬養(yǎng)殖中產(chǎn)生含有鋅和銅的廢水糞便回田對(duì)環(huán)境的影響。鑒于有關(guān)母豬的可用數(shù)據(jù)數(shù)量有限，本摘要主要關(guān)注仔豬和育肥豬。

1 豬料中的鋅和銅

鋅和銅被認(rèn)為是豬營養(yǎng)中的必要礦物元素。其在飼料原料中的生物可利用量不足以滿足生理需要（Manner，2008）。因此在飼料中會(huì)額外添加甚至超劑量添加以滿足營養(yǎng)學(xué)作用或營養(yǎng)學(xué)以外的作用，如促生長或者腸道健康。然而動(dòng)物對(duì)其吸收利用率很低，大部分通過糞便排出。因此，減少在飼料中鋅銅的添加量，是減少鋅銅在糞便、污水中的排放量以及減少對(duì)環(huán)境的潛在影響的主要手段。與此同時(shí)不能影響動(dòng)物的生長性能或健康。為此，必須更好地了解它們的功能和它們?cè)隗w內(nèi)的代謝，這會(huì)影響它們的生物利用度，從而影響它們的吸收和排泄。

1.1 鋅和銅對(duì)豬的作用

1.1.1 體內(nèi)含量

鋅大量存在于豬體內(nèi)，100kg活體重的動(dòng)物，其含量大約為1.5～2.5g，主要存在于豬的肌肉組織（占60%）和骨骼（占30%）中。骨骼是主要的儲(chǔ)存器官，也就是說當(dāng)鋅供應(yīng)過量或缺乏時(shí)，能儲(chǔ)存或動(dòng)員鋅。頭發(fā)（200mg/kg干 物 質(zhì)）和 肝 臟（150mg/kg干物質(zhì)）中的鋅濃度最高。與大多數(shù)哺乳動(dòng)物一樣，豬的血漿中鋅含量約為1mg/L，相當(dāng)于全身鋅的0.1%含量（Swinkels等，1994）。

豬體內(nèi)銅含量較低，100kg活體重的動(dòng)物，其含量大約為200mg。銅主要存在于骨骼（40%～46%）、肌肉（23%～26%）和肝臟中（8%～10%）(Cromwell，1997)。當(dāng)銅超過需求時(shí)主要儲(chǔ)存在肝臟中。屠宰后測定肝臟銅含量可以作為反應(yīng)動(dòng)物體內(nèi)銅含量及飼料銅含量的指標(biāo)。在生產(chǎn)中，Hodges和Fraser(1983)觀察到不同來源和年齡的豬肝臟樣本中銅含量存在巨大差異。9%的情況下，他們觀察到肝臟內(nèi)銅低于12mg/kg干物質(zhì)時(shí)，表明有缺銅的風(fēng)險(xiǎn)。但對(duì)于大部分動(dòng)物來說，其肝臟的銅含量超過20mg/kg干物質(zhì)，這表明銅被超營養(yǎng)劑量添加。肝臟銅含量不僅僅取決于飼料銅含量，也與銅源的生物學(xué)利用率有關(guān)（Roméo等，2018）。

1.1.2 生理和催化功能

鋅是近200種轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)和功能完整性的基礎(chǔ)。鋅是300多種金屬酶的輔助因子，大多數(shù)的代謝途徑依賴于與鋅有關(guān)的一種或多種蛋白質(zhì)（Suttle，2010）。它是DNA和RNA合成酶和轉(zhuǎn)運(yùn)酶及許多消化酶的組成成分（National Research Council，2012）。

銅是參與許多生物功能的必需元素，例如細(xì)胞呼吸、防止氧化應(yīng)激和鐵的運(yùn)輸（Suttle，2010），因?yàn)槠浯嬖谟诖罅康拿?、輔因子和蛋白質(zhì)中（Espinosa和Stein，2021年）。

鋅和銅在防止氧化應(yīng)激方面發(fā)揮作用，這是因?yàn)樗鼈冏鳛榈鞍踪|(zhì)和酶的輔助因子，可防止氧化應(yīng)激（超氧化物歧化酶、銅藍(lán)蛋白氧化亞鐵酶）。缺鋅會(huì)增加內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的敏感性。鋅是金屬硫蛋白的激活劑，后者會(huì)參與細(xì)胞解毒，對(duì)鋅和銅有很強(qiáng)的親和力，此外，金屬硫蛋白還表現(xiàn)出抗氧化特性（Suttle，2010）。

在藥理學(xué)劑量下，鋅和銅可以對(duì)豬起到促生長作用。這可能與改善動(dòng)物的消化吸收率和增加食欲有關(guān)（Suttle，2010)，以及與減少如腹瀉等消化道問題有關(guān)（Bikker等，2016），還有與其抑菌、改善腸道微生物群落和腸道完整性有關(guān)系（Villagómez-Estrada等，2020a）。

1.2 豬的需求

動(dòng)物對(duì)某種元素的需求對(duì)應(yīng)于為使其有機(jī)體完成其所有生理功能而需提供的數(shù)量（Revy，2003；Schlegel，2010)。這個(gè)量會(huì)因不同的相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的定義而有所不同。動(dòng)物生理需求的滿足取決于日糧中微量元素的生物學(xué)利用率（National Research Council，2012）。定義需求量時(shí)還需要考慮提供的形式。在生產(chǎn)中，需要了解動(dòng)物對(duì)鋅銅需求隨著其年齡的變化，以便隨時(shí)調(diào)整日糧，從而降低提供不足時(shí)對(duì)生產(chǎn)性能的影響，或者過量時(shí)對(duì)環(huán)境的影響。

1.2.1 對(duì)仔豬和生長豬需求量的評(píng)估

有兩種評(píng)估礦物質(zhì)需求的方法，一種是經(jīng)驗(yàn)法，一種是階乘法（Schlegel，2010）。前者是對(duì)于金屬元素最常見的方法。這包括通過試驗(yàn)測試逐漸增加日糧中鋅和銅含量的影響，以評(píng)估動(dòng)物的不同現(xiàn)場和生理參數(shù)的反應(yīng)。然后通常使用線性模型來描述響應(yīng)，并可以在拐點(diǎn)處預(yù)測動(dòng)物的需求（Kirchgessner，1993)。

必須觀察動(dòng)物對(duì)鋅或銅的功能之一的特定和代表性反應(yīng)，以確定作為需求特征的標(biāo)準(zhǔn)（Schlegel，2010)。對(duì)于 鋅，通常采用的最具代表性的標(biāo)準(zhǔn)是其在骨骼或血漿中的濃度；對(duì)于銅，這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)是其在肝臟中的濃度（Jongbloed，2010)。

斷奶后仔豬的鋅含量如圖1所示，數(shù)據(jù)是基于各種參考文獻(xiàn)。因此根據(jù)攝入量，我們可以定義①缺乏區(qū)（紅色區(qū)），其中攝入量不足以維持足夠的血漿水平；②由于建立了不同的穩(wěn)態(tài)機(jī)制（儲(chǔ)存、排泄等），血漿水平保持恒定的穩(wěn)態(tài)區(qū)（綠色區(qū)）；③過量區(qū)域（藍(lán)色區(qū)），其中血漿濃度隨著食物攝入而增加，體內(nèi)穩(wěn)態(tài)平衡機(jī)制可能已飽和。紅色和綠色區(qū)域之間的拐點(diǎn)可以定義營養(yǎng)需求，而綠色和藍(lán)色區(qū)域之間的拐點(diǎn)表明出現(xiàn)與采食量下降相關(guān)的過量風(fēng)險(xiǎn)。

圖1 斷奶后仔豬血漿鋅濃度隨飼料中鋅含量的變化（根據(jù)Hahn和Baker，1993；Hill等，2001；Revy，2003）

2012年NRC根據(jù)動(dòng)物的生長階段或生理階段對(duì)豬的鋅需求量給出不同的參考。斷奶仔豬的鋅需求量約為80mg/kg。NRC（2012）給出育肥豬基礎(chǔ)日糧中平均需求量約為50 mg/kg干物質(zhì)飼料。這個(gè)需求可能會(huì)根據(jù)鋅來源生物利用度的不同而有所不同：日糧的性質(zhì)、鈣和植酸鹽含量以及植酸酶的添加等（Revy，2003；Spears和Hansen，2008）。

仔豬對(duì)銅的嚴(yán)格的需求約為5～6 mg/kg干物質(zhì)飼料，并且對(duì)于更高級(jí)的生理階段也不超過該值（NRC，2012）。然而，這個(gè)需要量并未考慮在動(dòng)物的某些關(guān)鍵階段（如斷奶時(shí)或繁殖母豬）高銅對(duì)生長性能或消化健康的有益影響。對(duì)銅的需求可能會(huì)根據(jù)鋅的生物利用度的不同而變化，例如在食物中添加更多的鋅。

1.2.2 缺乏效應(yīng)

缺鋅的主要癥狀，一開始是缺乏食欲、出現(xiàn)腹瀉和生長遲緩。厭食是最早觀察到的跡象，接著出現(xiàn)缺鋅的仔豬股骨大小和堅(jiān)固性的降低（Suttle，2010)。出現(xiàn)腹瀉是由于腸細(xì)胞更新減少（Revy，2003）。此外，可以觀察到血漿或血清中鋅水平以及堿性磷酸酶和白蛋白水平降低（Suttle，2010；NRC，2012)。然而，動(dòng)物通過調(diào)節(jié)各種腸道鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白來應(yīng)對(duì)鋅缺乏癥，但這不足以彌補(bǔ)缺鋅仔豬血漿和血清中鋅濃度的過早下降（Suttle，2010)。缺鋅最突出的癥狀和最后出現(xiàn)的癥狀是稱為角化不全的皮 膚 過 度 角 化（Suttle，2010；NRC，2012)。

很少觀察到豬缺乏銅的情況，可能出現(xiàn)在斷奶仔豬飼喂大約100mg/kg干物質(zhì)的Fe、130mg/kg干物質(zhì)的鋅和2 mg/kg干物質(zhì)的銅時(shí)會(huì)發(fā)生缺銅（Jondreville等，2002）。缺銅的明顯跡象是貧血、四肢彎曲、自發(fā)性骨折、心臟和血管問題以及脫色（NRC，2012）。然而，最近的結(jié)果（Dalto等，2021）表明，在以藥理劑量（2500～3000 mg/kg干物質(zhì)）攝入鋅的情況下，存在銅缺乏的風(fēng)險(xiǎn)，從而證實(shí)了Hill等（2001）觀察到的血漿銅減少等（見1.3.4）。

1.2.3 過量效應(yīng)

鋅對(duì)于大部分哺乳動(dòng)物毒性較小。然而，日糧中過量的鋅會(huì)導(dǎo)致其吸收利用率降低，與金屬硫蛋白結(jié)合后，其在骨骼和腸細(xì)胞中的儲(chǔ)存增加，因此會(huì)增加鋅在組織和內(nèi)源性分泌的更新。在藥理學(xué)劑量下，過量的鋅會(huì)導(dǎo)致采食量降低，因此生長速度也會(huì)降低（Hahn和Baker，1983）。這會(huì)導(dǎo)致銅和鐵代謝的改變，如果飼喂過量鋅較長一段時(shí)間，則有缺銅和缺鐵的風(fēng)險(xiǎn)（Dalto等，2021）。此外，動(dòng)物對(duì)過量鋅的敏感性還取決于飼料中的鈣、鐵、銅和鎘的水平（Revy，2003）。

豬的銅中毒案例比較少見（Jondreville等，2002）。然而，長期飼喂超過250 mg/kg干物質(zhì)的銅會(huì)導(dǎo)致中毒，觀察到的跡象是血紅蛋白水平降低和黃疸（NRC，2012）。這會(huì)導(dǎo)致肝臟中鐵的儲(chǔ)存減少，從而導(dǎo)致貧血，這是由于銅對(duì)鐵吸收的負(fù)面作用，鐵的吸收受到限制。豬對(duì)高劑量銅的耐受性取決于飼料中鋅的供應(yīng)以及鋅和銅與金屬硫蛋白的相互作用（Jondreville等，2002）。

最后，飼料鋅銅的含量能否滿足豬對(duì)其的需求以及這些元素潛在的毒性作用，取決于它們的含量，也取決于其生物利用率（Hahn和Baker，1983；Suttle，2010）。吸收率和效率會(huì)影響動(dòng)物對(duì)它們的總需求量。

1.3 飼料中的鋅和銅

1.3.1 法規(guī)

2003年以來，歐盟修改了關(guān)于豬飼料中鋅和銅的最高限量（見圖2）。

圖2 歐盟關(guān)于生長豬料中鋅和銅最高限量的法規(guī)的變化

從2022年1月28日起，歐洲將禁止在獸藥處方中使用氧化鋅。這些法規(guī)旨在減少糞便中鋅的排泄（Revy，2003）及其在土壤中的蓄積，并降低動(dòng)物和人類抗生素耐藥性風(fēng)險(xiǎn)，而高鋅會(huì)增加這種現(xiàn)象的風(fēng)險(xiǎn)（Ciesinski等，2018）。

1.3.2原料中的組成和含量

豬的日糧主要由谷物（主要是玉米和小麥，還有大麥、黑小麥等）、餅粕（主要是大豆，還有油菜籽和向日葵）、油料和蛋白質(zhì)作物（豌豆……）、谷物副產(chǎn)品（麩皮、粗糧、谷物……）和維生素礦物質(zhì)組成（額外添加）。

谷物和蛋白原料平均含20～30 mg/kg干物質(zhì)的鋅，谷物副產(chǎn)品的鋅含量較高（70～90 mg/kg干物質(zhì)，見圖3）。油籽和餅粕類含30～90 mg/kg干物質(zhì)的鋅。谷物、其副產(chǎn)品、油籽和油餅含5～15mg/kg干物質(zhì)的銅。

圖3 豬料中鋅和銅的含量（根據(jù)INRA-AFZ，2004的數(shù)據(jù)庫）

1.3.3 不同形式的補(bǔ)充劑

為滿足動(dòng)物需要，豬飼料中需要額外添加鋅，因?yàn)閮H從原料中攝入是不夠的。此外，還必須考慮到日糧中不同成分導(dǎo)致的日糧鋅生物利用率的變化（Revy，2003)。

與鋅不同，理論上飼料中不額外添加銅是可以滿足生長豬對(duì)銅的需求（約6 mg/kg）。然而在實(shí)踐中，通常會(huì)在飼料中額外添加銅，以考慮到總需求量估計(jì)的不精確性，并抵消日糧中某些元素的拮抗作用，影響銅的生物利用率，從而影響對(duì)銅的需求。豬料中的額外加銅是作為安全邊際的作用（Jondreville等，2002）。

作為添加劑添加的鋅和銅可以來自不同的來源。比較生物利用率的研究中通常用硫酸鹽（ZnSO4和CuSO4）作為參考來源。然而這些硫酸鹽溶解速度太快，這意味著它們也更容易與日糧的其他元素結(jié)合，特別是許多原料中所含的植酸鹽，從而降低其生物利用率（Revy，2003）。銅和鋅還存在其他補(bǔ)充來源（氧化物、氯化物、螯合物），其物理化學(xué)特性和生物利用率差異很大。在實(shí)踐中，ZnO和CuSO4是最常用的動(dòng)物飼料來源（Revy，2003）。（譯者注：氧化鋅在歐洲是最常用的鋅源，在中國和歐洲有所區(qū)別，因本文是以歐洲為背景，特此解釋）

1.3.4 飼料中銅和鋅的生物利用率和變異因素

存在兩種實(shí)驗(yàn)方法來測量礦物質(zhì)的生物利用率。第一個(gè)方法是測量在低于動(dòng)物需求的劑量下，不同生理指標(biāo)對(duì)逐漸增加礦物質(zhì)攝入量的反應(yīng)。第二個(gè)方法是在攝入量遠(yuǎn)高于需求的劑量下，測量這些生理指標(biāo)，并測量元素在血液或不同組織（如骨骼或肝臟）中的積累（Spears和Hansen，2008）。這兩種方法，均以硫酸鹽形式的礦物質(zhì)為參考（CuSO4/ZnSO4），其吸收利用率定義為100%。然后通過計(jì)算不同試驗(yàn)下的響應(yīng)斜率來計(jì)算生物利用率。一般來說，微量元素的生物利用率受微量元素的來源、動(dòng)物生理狀態(tài)或其礦物質(zhì)狀態(tài)等因素的影響，以及與日糧、促進(jìn)劑或拮抗劑等其他元素相互作用的影響（O′Dell，1989；Manner，2008）。不同類型的相互作用是由于在腸道中形成不可吸收的復(fù)合物、陽離子之間競爭非特異性二價(jià)陽離子的轉(zhuǎn)運(yùn)或非特異性金屬對(duì)蛋白質(zhì)的誘導(dǎo)（Suttle，2010）?？梢杂眠@些影響其吸收的因素以及影響其溶解度的不同物理化學(xué)性質(zhì)，來解釋不同來源的鋅和銅生物利用率的巨大差異。

植酸鹽與鋅形成不可吸收的復(fù)合物，從而降低鋅的生物利用率（Suttle，2010）。植酸鹽水解后能釋放出鋅，但單胃動(dòng)物不會(huì)自然產(chǎn)生植酸酶，或者數(shù)量非常有限。因此，在日糧中添加微生物植酸酶可以提高鋅的利用率Revy等（2004）揭示了700個(gè)單位的植酸酶可以取代32～43 mg硫酸鹽形式的Zn。同樣，Bikker等(2012）估算500單位的植酸酶可以替代27 mg硫酸鹽形式的鋅。根據(jù)Schlegel和Jondreville（2011）進(jìn)行的薈萃分析，只有食物中天然存在的Zn會(huì)受到植酸鹽和植酸酶的影響，而不是以礦物質(zhì)或有機(jī)補(bǔ)充劑的形式添加到日糧中的鋅。在日糧中添加鈣后，植酸鹽的這種拮抗作用會(huì)增強(qiáng)（Suttle，2010)。植酸鹽-鈣-鋅復(fù)合物在消化道中形成（Revy，2003)。植酸鹽對(duì)鋅的拮抗作用在幼畜中更為重要，因?yàn)槠淙占Z中鈣含量往往超過了它們的需要（Suttle，2010)。

銅受日糧中植酸鹽和鈣的影響較小，因?yàn)樗鼘?duì)游離氨基酸具有更高的親和力，與游離氨基酸形成螯合物，從而使銅保持其溶解度（Jondreville等，2002）。然而，可溶性銅源也可在消化道中與植酸鹽相互作用并形成鋅-鈣-銅-植酸鹽或銅-鈣-植酸鹽絡(luò)合物（Oberleas，1973），影響植酸酶的作用。

鋅對(duì)銅有拮抗作用，即會(huì)抑制其吸收。這種作用是由于鋅對(duì)金屬硫蛋白合成的誘導(dǎo)作用，金屬硫蛋白與銅有很強(qiáng)的親和力，會(huì)阻止其轉(zhuǎn)移到腸上皮（Revy，2003）。