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        強(qiáng)直性脊柱炎患者Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子及miR-155與脊柱活動(dòng)度的關(guān)系*

        2023-01-15 00:47:22顧維杰鄭冰汪池吳旭強(qiáng)
        西部醫(yī)學(xué) 2022年12期
        關(guān)鍵詞:活動(dòng)期強(qiáng)直性脊柱炎

        顧維杰 鄭冰 汪池 吳旭強(qiáng)

        (成都市第五人民醫(yī)院,四川 成都 611130)

        強(qiáng)直性脊柱炎是一類慢性炎癥性的關(guān)節(jié)病變,累及的關(guān)節(jié)以髖部、頸部、腰部為主[1]。此外,由于強(qiáng)直性脊柱炎患者的骶髂關(guān)節(jié)、肌腱及其周圍附著點(diǎn)受到炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)致使外周關(guān)節(jié)炎的發(fā)生,嚴(yán)重影響其生存質(zhì)量[2-3]。強(qiáng)直性脊柱炎發(fā)病原因較為復(fù)雜,目前考慮與感染、免疫、環(huán)境以及遺傳等因素有關(guān)[4]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)T淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)在機(jī)體自身免疫疾病發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[5]。輔助性T細(xì)胞17(Th17)是近年新發(fā)現(xiàn)的一種CD4+細(xì)胞亞群,可特異性產(chǎn)生白細(xì)胞介素,其和具有抑制炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)在自身免疫性疾病和機(jī)體防御反應(yīng)中具有重要的意義[6]。微小核糖核酸-155(microRNA-155,miR-155)屬于微小核糖核酸(miRNA)家族中的一員,能調(diào)節(jié)T細(xì)胞的增殖、分化,在自身免疫疾病患者中呈異常表達(dá)狀態(tài)[7]。本研究就強(qiáng)直性脊柱炎患者Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155與脊柱活動(dòng)度關(guān)系進(jìn)行分析,現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 回顧性分析2018年1月~2021年3月我院收治的強(qiáng)直性脊柱炎患者116例,并將其歸為觀察組。根據(jù)強(qiáng)直性脊柱炎疾病活動(dòng)指數(shù)(BASDAI)[8]分為活動(dòng)期(BASDAI≥4,n=52)與穩(wěn)定期(BASDAI<4,n=64)。納入標(biāo)準(zhǔn):①所有患者的診斷均符合1984年制定的強(qiáng)直性脊柱炎紐約標(biāo)準(zhǔn)[9]。②近三個(gè)月未接受過(guò)免疫調(diào)節(jié)治療。③患者及家屬均知曉同意。④本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn):①存在自身免疫、血液疾病者。②心、腦、肝、腎等臟器功能嚴(yán)重不全者。③存在精神疾患、意識(shí)障礙等依從性差的情況。④存在其他類型風(fēng)濕性疾病者。⑤處于妊娠期或哺乳期女性。⑥存在感染性疾病者。另選取同期于我院進(jìn)行健康體檢的健康志愿者97例,設(shè)為對(duì)照組。

        1.2 方法 檢測(cè)Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155表達(dá)水平 觀察組在入院第2天、對(duì)照組在體檢當(dāng)日分別抽取空腹靜脈血5 mL,3000 r/min離心15 min,離心半徑10 cm,分離血清,置-80℃保存。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)檢測(cè)Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子,即IL-10、TGF-β、IL-17、IL-23水平,儀器為美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特全自動(dòng)免疫分析儀,試劑盒由深圳欣博盛生物科技有限公司生產(chǎn)。使用人淋巴細(xì)胞分離液將外周血單個(gè)核細(xì)胞分離,采用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞中miR-155的表達(dá),以U6為內(nèi)參,上游引物:5′-GCGA AAGCATTTGCCAAGAA-3′,下游引物:5′-GCGAA AGCATTTGCCAAGAA-3′。皆嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

        1.3 觀察指標(biāo) ①對(duì)比觀察組和對(duì)照組Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155表達(dá)水平。②對(duì)比活動(dòng)期和穩(wěn)定期強(qiáng)直性脊柱炎患者Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155表達(dá)水平。③采用Bath AS測(cè)量指數(shù)(BASMI)[10]評(píng)價(jià)強(qiáng)直性脊柱炎患者的脊柱活動(dòng)度,包括耳壁距、頸椎旋轉(zhuǎn)度、腰椎前屈、腰椎側(cè)屈、以及內(nèi)踝間距5個(gè)項(xiàng)目,分值越低代表患者脊柱活動(dòng)度越佳,并對(duì)比活動(dòng)期和穩(wěn)定期的脊柱活動(dòng)度。④分析強(qiáng)直性脊柱炎患者Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155與脊柱活動(dòng)度的相關(guān)性。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組一般資料比較 觀察組男性64例,女性52例,年齡23~69歲,平均(36.71±5.98)歲;病程1~9年,平均(3.48±1.72)年。對(duì)照組男54例,女43例,年齡22~73歲,平均(37.24±7.56)歲。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

        2.2 兩組Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155表達(dá)水平比較 觀察組IL-17、IL-23、miR-155表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05);兩組IL-10、TGF-β比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表1。

        表1 兩組Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155表達(dá)水平對(duì)比Table 1 Comparison of Th17/Treg-related cytokines and miR-155 expression levels between the study group and the control group

        2.3 活動(dòng)期和穩(wěn)定期強(qiáng)直性脊柱炎患者Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155表達(dá)水平比較 活動(dòng)期IL-17、IL-23、miR-155表達(dá)水平明顯高于穩(wěn)定期(P<0.05);活動(dòng)期與穩(wěn)定期IL-10、TGF-β比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表2。

        表2 活動(dòng)期和穩(wěn)定期強(qiáng)直性脊柱炎患者Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155表達(dá)水平比較Table 2 Comparison of Th17/Treg-related cytokines and miR-155 expression levels in patients with active and stable ankylosing spondylitis

        2.4 活動(dòng)期和穩(wěn)定期強(qiáng)直性脊柱炎患者BASMI評(píng)分比較 活動(dòng)期強(qiáng)直性脊柱炎患者BASMI評(píng)分(1.74±0.58)分明顯高于穩(wěn)定期(2.08±0.69)分(t=2.883,P<0.05)。

        2.5 強(qiáng)直性脊柱炎患者Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155與脊柱活動(dòng)度的相關(guān)性Pearson相關(guān)系數(shù)分析顯示,強(qiáng)直性脊柱炎患者IL-17、IL-23、miR-155表達(dá)水平與BASMI評(píng)分呈正相關(guān),IL-10、TGF-β表達(dá)水平與BASMI評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),見(jiàn)表3。

        表3 強(qiáng)直性脊柱炎患者Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155與脊柱活動(dòng)度的相關(guān)性Table 3 Analysis of the correlation between Th17/Treg-related cytokines, miR-155 and spinal mobility in patients with ankylosing spondylitis

        3 討論

        強(qiáng)直性脊柱炎的發(fā)病較為隱匿,活動(dòng)期和穩(wěn)定期往往呈現(xiàn)為交替出現(xiàn),并且無(wú)規(guī)律可言;其活動(dòng)期是機(jī)體炎癥反應(yīng)加劇、病變復(fù)發(fā)的一種急性表現(xiàn),每次病變活動(dòng)發(fā)作皆會(huì)引起病變加重,致使組織損害、活動(dòng)受限皆進(jìn)一步發(fā)展,可引起患者脊柱活動(dòng)度降低[11]。強(qiáng)直性脊柱炎是與HLA-B27存在明確關(guān)聯(lián)的自身免疫性病變,發(fā)病原因包括微生物與宿主間的相互作用、細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的紊亂等多方面[12]。分析強(qiáng)直性脊柱炎患者機(jī)體特異性指標(biāo)的表達(dá)情況,不僅可進(jìn)一步了解發(fā)病機(jī)制,同時(shí)還可為強(qiáng)直性脊柱炎患者的治療提供思路[13]。既往研究顯示強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血中miR-155表達(dá)可能影響Th17/Treg的平衡[14],但有關(guān)上述指標(biāo)與脊柱活動(dòng)度關(guān)系的研究較少見(jiàn)。因此,本研究就強(qiáng)直性脊柱炎患者Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155與脊柱活動(dòng)度的關(guān)系進(jìn)行探討,為臨床防治提供理論依據(jù)。

        Th17及Treg細(xì)胞是輔助性T細(xì)胞中的重要組成部分,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)過(guò)程[15]。Zeng等[16]研究指出,健康者體內(nèi)Th17和Treg在分化和成熟方面互相制約,二者呈平衡狀態(tài),并可通過(guò)某些細(xì)胞因子實(shí)施細(xì)胞轉(zhuǎn)化,若體內(nèi)細(xì)胞環(huán)境改變,Th17/Treg與細(xì)胞免疫失衡,致使病情進(jìn)一步發(fā)展。IL-23屬于促炎性細(xì)胞因子的一種,也是Th17的重要存活因子,其活化后可促進(jìn)IL-17、IL-6的生成[17]。此外,IL-23由樹(shù)突狀細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞分泌而來(lái),僅于炎癥刺激時(shí)分泌,說(shuō)明Th17細(xì)胞的長(zhǎng)期存活依賴于機(jī)體的炎癥刺激[18]。IL-17具有強(qiáng)大的致炎性,能誘發(fā)促炎性細(xì)胞因子的表達(dá),機(jī)體受炎性細(xì)胞的浸潤(rùn),從而造成組織損害[19]。本研究發(fā)現(xiàn),觀察組IL-17、IL-23表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組,且活動(dòng)期IL-17、IL-23表達(dá)水平明顯高于穩(wěn)定期,而IL-10、TGF-β表達(dá)水平并無(wú)顯著上升,說(shuō)明強(qiáng)直性脊柱炎患者體內(nèi)可能存在Th17與Treg細(xì)胞的紊亂。

        miR-155是位于21號(hào)染色體上因子,其與機(jī)體的炎癥免疫反應(yīng)存在一定的相關(guān)性,可通過(guò)調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞的增殖、分化,推動(dòng)炎癥因子的表達(dá)致使機(jī)體的免疫反應(yīng)出現(xiàn)失調(diào)[20]。Zhu 等[21]研究表明miR-155參與機(jī)體免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。本研究結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,觀察組miR-155表達(dá)水平明顯增加,且活動(dòng)期miR-155表達(dá)水平明顯高于穩(wěn)定期,這與既往研究結(jié)果報(bào)道相似[22]。表明miR-155在強(qiáng)直性脊柱炎患者中呈高表達(dá),且隨著病情的進(jìn)展miR-155表達(dá)水平也隨之上升。BASMI為用于評(píng)估患者脊柱功能狀況的評(píng)分,能客觀地反應(yīng)患者脊柱活動(dòng)度的情況[23]。本研究通過(guò)相關(guān)性分析顯示,強(qiáng)直性脊柱炎患者IL-17、IL-23、miR-155表達(dá)與BASMI評(píng)分呈正相關(guān),而IL-10、TGF-β表達(dá)與BASMI評(píng)分呈負(fù)相關(guān),提示Th17、Treg相關(guān)細(xì)胞因子及miR-155與患者病情的發(fā)生、發(fā)展有關(guān),可在一定程度上反應(yīng)患者的脊柱活動(dòng)情況。但由于本研究納入的樣本量較少,可能導(dǎo)致研究結(jié)果出現(xiàn)一定偏倚,后續(xù)將擴(kuò)大樣本量進(jìn)行深入研究。

        4 結(jié)論

        強(qiáng)直性脊柱炎患者miR-155、Th17相關(guān)細(xì)胞因子呈高表達(dá)狀態(tài)、Treg相關(guān)細(xì)胞因子呈低表達(dá)狀態(tài),Th17/Treg呈失衡狀態(tài),且Th17/Treg相關(guān)細(xì)胞因子、miR-155與患者脊柱活動(dòng)度具有一定的相關(guān)性,可作為臨床評(píng)估病情的輔助檢查。

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