何沖，孫亞南，王彬，邊文文

陜西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院（西安 710048）

傳統(tǒng)的農(nóng)藥殘留的檢測(cè)分析前處理步驟繁瑣，樣品制備成本大，提取溶劑使用量多，危害性大。自QuEChERS方法問(wèn)世以來(lái)[1]，經(jīng)過(guò)十多年的探索，已經(jīng)逐步成熟，在農(nóng)藥殘留分析中得到廣泛的應(yīng)用。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是將液相色譜的高分離能力和質(zhì)譜的高鑒別能力相結(jié)合的一項(xiàng)分離分析技術(shù)，它有效地克服氣質(zhì)聯(lián)用在農(nóng)藥殘留檢測(cè)上的一些問(wèn)題，但同時(shí)仍存在普遍的基質(zhì)效應(yīng)[2]?；|(zhì)效應(yīng)根據(jù)基質(zhì)對(duì)檢測(cè)信號(hào)的影響程度不同分為基質(zhì)增強(qiáng)和基質(zhì)抑制效應(yīng)，其影響因素可能有許多方面[3-9]。雖然國(guó)內(nèi)外眾多研究工作者致力于消除和補(bǔ)償基質(zhì)效應(yīng)[10-13]，但其仍不可能完全被消除，因此在日常檢測(cè)中對(duì)基質(zhì)效應(yīng)的補(bǔ)償和校準(zhǔn)對(duì)于提高農(nóng)藥殘留分析結(jié)果的準(zhǔn)確性有著至關(guān)重要的作用。

用0.1%甲酸-乙腈，QuEChERS法對(duì)不同水果、蔬菜基質(zhì)中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行提取，通過(guò)UPLC-MS/MS對(duì)多種農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，考察不同基質(zhì)對(duì)不同農(nóng)藥殘留的影響。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與設(shè)備

Altis超高效液質(zhì)聯(lián)用儀（Thermo Fisher）；BSA224S電子天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]；漩渦混合器（VOrtex）；TDZ5-WS離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司）；FV64氮吹儀（得泰儀器科技有限公司）。

1.2 試劑和耗材

甲醇、乙腈、甲酸均為色譜純（試劑生產(chǎn)廠家：默克）；所用水為超純水；滅蠅胺、多菌靈、噻蟲嗪、吡蟲啉、噻蟲胺、啶蟲脒、氯吡脲、烯酰嗎啉、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、多效唑、苯醚甲環(huán)唑、唑蟲酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液（標(biāo)準(zhǔn)品生產(chǎn)廠家TMRM）；水果蔬菜提取鹽包（COQ050010P-J；4 g無(wú)水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉二水合物、0.5 g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物）；樣品凈化管（COQ015020P-J；每毫升提取液-150 mg無(wú)水硫酸鎂、25 mg PSA、2.5 mg GCB；QuEChER前處理包生產(chǎn)廠家：逗點(diǎn)生物）。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制

用乙腈分別將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制成質(zhì)量濃度為1 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液儲(chǔ)備液；分別精確吸取一定量的儲(chǔ)備液，用乙腈稀釋成質(zhì)量濃度為10，30，50，100和200 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；選擇不同基質(zhì)的空白樣品按照樣品前處理得到空白基質(zhì)溶液，精準(zhǔn)吸取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用空白基質(zhì)溶液稀釋成質(zhì)量濃度為10，30，50，100和200 ng/mL的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.4 樣品前處理

稱取10 g試樣（精確至0.01 g）于50 mL塑料離心管中，加入10 mL乙腈，劇烈振蕩1 min，加入水果蔬菜提取鹽包，劇烈振蕩1 min后以4 000 r/min離心5 min。吸取上清液至樣品凈化管，渦旋混勻1 min。按4 000 r/min離心5 min，吸取上清液，過(guò)0.22 μm微孔濾膜，待測(cè)定。同時(shí)做空白試驗(yàn)。

加標(biāo)回收試驗(yàn)同上述樣品前處理。

1.5 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)

1.5.1 液相色譜條件

色譜柱：VDX C18，2.6 μm，2.1 mm×100 mm；流動(dòng)相：A為含0.1%甲酸水溶液，B為甲醇。梯度洗脫程序見(jiàn)表1；流速：300 μL/min；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：2 μL。

表1 梯度洗脫程序

1.5.2 質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源（ESI+）；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；噴霧電壓：3.5 kV（ESI+）；離子傳輸管溫度：350 ℃；霧化器溫度：300 ℃；鞘氣壓力：30 Arb；輔助器壓力：10 Arb；掃氣壓力：0 Arb。

2 結(jié)果與討論

基于QuEChERS法，選取了18種水果蔬菜對(duì)12種農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行了研究探討，通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)基質(zhì)效應(yīng)主要表現(xiàn)為3種形式。第一類以滅蠅胺為例，與乙腈相比，不同的基質(zhì)對(duì)目標(biāo)物在液質(zhì)上的表現(xiàn)均為基質(zhì)抑制，滅蠅胺的基質(zhì)抑制效應(yīng)可達(dá)75%左右；第二類主要為不同的基質(zhì)在此類農(nóng)藥殘留上影響并不相同，即可產(chǎn)生基質(zhì)，也有基質(zhì)抑制的情況，以甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽為例，通過(guò)圖1可以看出大部分蔬菜基質(zhì)對(duì)于其起到了基質(zhì)增強(qiáng)的作用，而在多數(shù)水果為基質(zhì)的條件下，其表現(xiàn)為基質(zhì)抑制；還有一類農(nóng)藥殘留基質(zhì)效應(yīng)表現(xiàn)并不明顯，如吡蟲啉等。

圖1 滅蠅胺、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和吡蟲啉三種農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應(yīng)

對(duì)比了50 ng/mL下不同基質(zhì)對(duì)農(nóng)藥殘留的影響，從圖2可以看到：以生姜、韭菜和柑橘等一類物質(zhì)為基質(zhì)時(shí)，試驗(yàn)中所檢測(cè)的農(nóng)藥殘留均表現(xiàn)為較強(qiáng)基質(zhì)抑制作用，這可能和其中含有較多色素或者糖分有關(guān)；以黃瓜為基質(zhì)時(shí)，大部分農(nóng)藥殘留基質(zhì)效應(yīng)并不明顯，可能是其基質(zhì)較為簡(jiǎn)單，含水較多，當(dāng)前處理去除水分后就會(huì)產(chǎn)生較小的基質(zhì)影響。

圖2 多種農(nóng)藥殘留的不同基質(zhì)效應(yīng)

同時(shí)考察了0.01 mg/kg添加水平下不同基質(zhì)多種農(nóng)藥殘留的回收率情況，以基質(zhì)標(biāo)曲進(jìn)行數(shù)據(jù)計(jì)算，結(jié)果表明，當(dāng)以基質(zhì)標(biāo)曲進(jìn)行校正時(shí)各種農(nóng)藥殘留的回收率為81.2%～105.4%。

3 結(jié)論

試驗(yàn)中分別對(duì)18種基質(zhì)條件下12種農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行了探討。試驗(yàn)結(jié)果表明，不同的基質(zhì)對(duì)于不同的農(nóng)藥殘留表現(xiàn)各有不同，基質(zhì)增強(qiáng)和基質(zhì)抑制都有存在，同時(shí)也有部分農(nóng)藥殘留對(duì)基質(zhì)并不敏感，其基質(zhì)效應(yīng)并不明顯。在基質(zhì)干擾較大（基質(zhì)增強(qiáng)或基質(zhì)抑制均有可能）的情況下，應(yīng)當(dāng)采用相應(yīng)的基質(zhì)配制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)樣品中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行校正計(jì)算，其回收率可達(dá)81.2%～105.4%。