馬艷紅，刁玉華，萬(wàn) 靜

(昆明市食品藥品檢驗(yàn)所 食品檢驗(yàn)中心，云南 昆明 650010)

甲醇，又稱(chēng)木醇、羥基甲烷，是無(wú)色透明、易揮發(fā)的液體，沸點(diǎn) 64.7 ℃，對(duì)人體有害，容易在體內(nèi)蓄積并損傷多處器官[1]。甲醇毒性作用主要是由甲醇本身及代謝產(chǎn)物(甲醛和甲酸)引起的，以中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷、代謝性酸中毒及眼部損傷為主，人攝入甲醇5～10 mL 可致嚴(yán)重中毒，7～15 mL 以上可致失明，30 mL 以上可致死亡[2-3]。由于原料的植物細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)含有果膠，在酒的釀造過(guò)程中不可避免有甲醇的產(chǎn)生，特別是，果膠含量較大的糧谷和水果受熱或在酶的作用下分解產(chǎn)生的甲醇含量更高[4-5]。通常，雖然酒中含有微量的甲醇是正常的，但是由于一些生產(chǎn)者釀造工藝技術(shù)的不完善或不良商家人為摻假、制售假酒等造成酒中甲醇超標(biāo)，嚴(yán)重危害廣大消費(fèi)者的生命安全[6]。GB 2757-2012《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 蒸餾酒及其配制酒》規(guī)定了甲醇在酒類(lèi)樣品中的最大殘留限量，糧谷類(lèi)和其他類(lèi)蒸餾酒的配制酒最大殘留限量分別為 0.6 g/L 和 2.0 g/L[7]。GB/T 15037-2006《葡萄酒》也特別說(shuō)明了白、桃紅葡萄酒和紅葡萄酒中甲醇的最大殘留限量分別為 250 mg/L 和 400 mg/L[8]。

目前，對(duì)酒中甲醇的檢測(cè)方法主要有氣相色譜法[9-14]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[15-17]、比色法和分光光度計(jì)法[18-19]。氣相色譜法具有較高的靈敏度、較好的穩(wěn)定性、極高的準(zhǔn)確性，因而已成為酒中甲醇檢測(cè)的最主要方法。我國(guó)于2017年6月23日實(shí)施的GB 5009.266-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中甲醇的測(cè)定》就是采用配置FID檢測(cè)器的氣相色譜法對(duì)酒精、蒸餾酒、配制酒及發(fā)酵酒中甲醇的測(cè)定[20]。其中，酒精、蒸餾酒及其配制酒直接取樣測(cè)定，但發(fā)酵酒及其配制酒還需進(jìn)行蒸餾處理,去除可能污染儀器和色譜柱的營(yíng)養(yǎng)成分、微量元素及色素等，例如葡萄酒。在長(zhǎng)期使用標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，許多醬香型白酒由于成分比其它白酒復(fù)雜，造成在檢測(cè)時(shí)甲醇峰較難完整、清晰地分離開(kāi)，嚴(yán)重影響定量的準(zhǔn)確性。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)比較靜態(tài)頂空和直接進(jìn)樣法探究酒中甲醇的測(cè)定,靜態(tài)頂空法一方面可以高效處理樣品，發(fā)酵酒及其配制酒無(wú)需進(jìn)行蒸餾，減輕前處理負(fù)擔(dān)并有效避免蒸餾過(guò)程中甲醇的損失；另一方面，對(duì)較難分離出良好甲醇峰形的醬香型白酒，可以得到分離完好、清晰的甲醇峰，增強(qiáng)定量的準(zhǔn)確性。

1 材料與方法

1.1 材料

標(biāo)準(zhǔn)品：φ(甲醇)≥ 99.7%，CAS 67-56-1，DR EHRENSTORFER。試劑：φ(乙醇)≥99.8%，色譜純，F(xiàn)isher Chmical；超純水。白酒質(zhì)控樣品：QC-DL-702，中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院測(cè)試評(píng)價(jià)中心；紅酒質(zhì)控樣品：FD192-QC，LGC；市售醬香型白酒3份，普通白酒2份(清香型白酒和高粱酒)，白葡萄酒2份，紅葡萄酒2份。

1.2 儀器設(shè)備

氣相色譜儀(配FID檢測(cè)器)，島津GC-2010Plus；頂空進(jìn)樣器，島津HS-20；十萬(wàn)分之一電子天平，美國(guó)梅特勒托利多公司；旋渦混合器 海門(mén)其林貝爾公司；超純水制備器，賽多利斯。

1.3 方法

外標(biāo)法定量[測(cè)定結(jié)果均按酒精度100%(體積分?jǐn)?shù))計(jì)算]。

1.3.1 溶液配置

40%乙醇水溶液：準(zhǔn)確移取 200 mL 無(wú)水乙醇至 500 mL 容量瓶，用超純水定容至刻度線，混勻待用。

1.3.2 頂空進(jìn)樣法

1.3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

準(zhǔn)確稱(chēng)取 25.30 mg 甲醇標(biāo)準(zhǔn)品于 25 mL 容量瓶，用40%乙醇水溶液定容至刻度線并混勻，得 1.012 mg/mL 甲醇儲(chǔ)備液。再用40%乙醇水溶液將儲(chǔ)備液依次稀釋為 5.06、10.12、50.6、101.2、253.0、506.0、809.6 μg/mL 的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，并各準(zhǔn)確移取 5 mL 至 20 mL 頂空進(jìn)樣瓶中，壓緊瓶蓋密封、混勻。

1.3.2.2 樣品前處理

通過(guò)事先模擬頂空恒溫狀態(tài)，將裝有 5 mL 紅酒的頂空瓶在 70 ℃ 下恒溫 20 min，移出瓶?jī)?nèi)蒸汽再經(jīng)冷卻后，冷凝液無(wú)色透明，污染物減少，說(shuō)明對(duì)于紅酒頂空進(jìn)樣無(wú)須進(jìn)行蒸餾。所以室溫下混合均勻樣品，從中準(zhǔn)確移取 5 mL 至 20 mL 頂空進(jìn)樣瓶，壓緊瓶蓋密封，待上機(jī)測(cè)定。

1.3.2.3 氣相色譜條件

色譜柱：聚乙二醇石英毛細(xì)管柱 DB-WAX UI(60 m×0.250 mm×0.25 μm)；程序升溫：初始溫度 40 ℃ 保持 5 min，以 3 ℃/min 升至 70 ℃ 不保持，再以 30 ℃/min 升至 230 ℃ 保持 2 min；檢測(cè)器溫度：250 ℃，氫氣流量 40.0 mL/min，空氣流量 400.0 mL/min，載氣：高純氮?dú)?φ≥99.999%)；進(jìn)樣器：恒溫爐溫度為 70.0 ℃，樣品流路溫度為 100.0 ℃，傳輸線溫度為 120.0 ℃，樣品恒溫時(shí)間為 20.0 min，樣品加壓時(shí)間 1.0 min，加壓平衡時(shí)間 0.1 min，進(jìn)樣時(shí)間 0.5 min，GC循環(huán)時(shí)間 32.0 min，分流比為50∶1，色譜柱流量 1.2 mL/min。

1.3.3 全自動(dòng)直接進(jìn)樣法

1.3.3.1 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

準(zhǔn)確稱(chēng)取 25.04 mg 甲醇標(biāo)準(zhǔn)品于 25 mL 容量瓶，用40%乙醇水溶液定容至刻度線并混勻，得 1.0016 mg/mL 甲醇儲(chǔ)備液。再用40%乙醇水溶液將儲(chǔ)備液依次稀釋為 5.008、10.016、50.08、100.16、250.40、500.80、801.28 μg/mL 的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，混勻。

1.3.3.2 樣品前處理

室溫下混合均勻樣品，澄清試樣過(guò) 0.45 μm 濾膜后混勻，移取 1 mL 至進(jìn)樣小瓶；顏色較深試樣經(jīng)蒸餾(按GB 5009.266-2016標(biāo)準(zhǔn)方法操作)后混勻，過(guò) 0.45 μm 濾膜并移取 1 mL 至進(jìn)樣小瓶，待上機(jī)測(cè)定。

1.3.3.3 氣相色譜條件

進(jìn)樣器：全自動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)樣口溫度為 220 ℃，進(jìn)樣量為 0.5 μL，分流比為20∶1，色譜柱流量 1.2 mL/min。色譜柱、檢測(cè)器、程序升溫條件同1.3.2.3。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜柱的選擇

由于甲醇和40%乙醇水溶液極性較大，根據(jù)色譜柱的使用規(guī)則及相似相溶原理，選擇WAX型的聚乙二醇石英毛細(xì)管極性色譜柱，確保甲醇有足夠的靈敏度和分離能力。使用WAX(30 m×0.25 mm×0.25 μm)和WAX(30 m×0.32 mm×0.25 μm)兩種色譜柱測(cè)定甲醇，通過(guò)減少進(jìn)樣量、降低初始溫度、延長(zhǎng)低溫保持時(shí)間、降低色譜柱流量、減慢升溫速率等操作均難以和溶劑乙醇峰分開(kāi)，不利于定量分析。采用 60 m 長(zhǎng)的色譜柱DB-WAX UI(60 m×0.250 mm×0.25 μm)增強(qiáng)分離效能，達(dá)到甲醇峰完整、清晰地分離開(kāi)，峰形尖銳、對(duì)稱(chēng)，可進(jìn)行準(zhǔn)確地定性定量分析，所以本實(shí)驗(yàn)選擇 60 m 長(zhǎng)的極性色譜柱(見(jiàn)圖1)。

圖1 三種不同長(zhǎng)度色譜柱的甲醇色譜圖

2.2 氣相色譜條件優(yōu)化

首先，按照GB 5009.266-2016標(biāo)準(zhǔn)給定的儀器參考條件設(shè)為方法一：全自動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)樣量為 1 μL；進(jìn)樣口溫度為 220 ℃，分流比為20∶1，載氣流量 1.0 mL/min；檢測(cè)器溫度為 250 ℃；程序升溫：初始溫度 40 ℃ 保持 1 min，以 4 ℃/min 升至 130 ℃ 不保持，再以 20 ℃/min 升至 200 ℃ 保持 5 min。該方法均沒(méi)能實(shí)現(xiàn)白酒中甲醇的分離，紅酒中甲醇出峰均拖尾嚴(yán)重。接著設(shè)置方法二：把進(jìn)樣量改為 0.5 μL，其余條件同方法一。該方法對(duì)紅酒和大多數(shù)白酒中甲醇分離良好，能滿足基本定性定量要求，但是對(duì)醬香型白酒依然實(shí)現(xiàn)不了甲醇分離。最后優(yōu)化得方法三：進(jìn)樣量為 0.5 μL，載氣流量 1.2 mL/min，程序升溫：初始溫度 40 ℃ 保持 5 min，以 3 ℃/min 升至 70 ℃ 不保持，再以 30 ℃/min 升至 230 ℃ 保持 2 min，其余條件同方法一。該方法可實(shí)現(xiàn)紅酒和所有白酒中甲醇的分離，出峰不與其它組分重疊，而且適當(dāng)提高載氣流量起到了改善拖尾的效果，三個(gè)方法分離情況見(jiàn)圖2。因此，這里選擇方法三作為全自動(dòng)進(jìn)樣的色譜條件。

圖2 同一醬香型白酒在直接進(jìn)樣三種方法中甲醇出峰情況

同理，頂空進(jìn)樣量也不宜過(guò)大。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)控制進(jìn)樣時(shí)間 0.5 min 并增大分流比至50∶1來(lái)控制低進(jìn)樣量。控制已優(yōu)化頂空進(jìn)樣器條件不變，分別設(shè)置方法四、方法五、方法六。方法四按方法一檢測(cè)器、程序升溫、載氣流量條件設(shè)置，該方法不能有效分離出甲醇峰。方法五檢測(cè)器、程序升溫條件同方法三，載氣流量 0.8 mL/min，該方法對(duì)醬香型白酒依然不能使甲醇完整清晰地分離開(kāi)。方法六檢測(cè)器、程序升溫條件同方法三，載氣流量 1.2 mL/min，該方法適當(dāng)提高載氣流量，可實(shí)現(xiàn)紅酒和全部白酒中甲醇的分離，特別是上述甲醇未分離開(kāi)的醬香型白酒，甲醇出峰完整、尖銳、對(duì)稱(chēng)。三個(gè)方法分離情況見(jiàn)圖3。因此，這里選擇方法六作為頂空進(jìn)樣的色譜條件。

圖3 同一醬香型白酒在頂空進(jìn)樣三種方法中甲醇出峰情況

2.3 頂空平衡條件的探究

本實(shí)驗(yàn)主要探究頂空進(jìn)樣中平衡溫度、平衡時(shí)間對(duì)頂空進(jìn)樣時(shí)的影響，并選擇最優(yōu)條件進(jìn)行試驗(yàn)。

2.3.1 平衡溫度

對(duì)于頂空進(jìn)樣，提高樣品瓶的溫度，有利于降低待測(cè)物在瓶?jī)?nèi)的分配系數(shù)，增大待測(cè)物在瓶?jī)?nèi)氣相中的濃度，從而增加頂空分析的靈敏度。但是該溫度也應(yīng)低于溶劑沸點(diǎn)，不能引起溶劑沸騰并避免頂空瓶脹裂脹破。根據(jù)甲醇沸點(diǎn) 64.7 ℃，溶劑和樣品主要為乙醇水溶的特點(diǎn)，本實(shí)驗(yàn)選擇對(duì)60、64.7、70、75、80 ℃ 5個(gè)溫度進(jìn)行探究對(duì)比。試樣和其它條件保持一致，同一試樣中甲醇響應(yīng)值均隨溫度升高而增大，再結(jié)合甲醇峰分離情況來(lái)看，70 ℃ 時(shí)分離情況最好。特別是醬香型白酒，75 ℃ 和 80 ℃ 時(shí)甲醇峰不能和甲醇之后的其它組分峰有效、完全分離開(kāi)(見(jiàn)圖4)。所以綜合考慮，選擇 70 ℃ 作為平衡恒溫時(shí)間，即達(dá)到了足夠的靈敏度，又能實(shí)現(xiàn)甲醇良好地分離。

圖4 同一醬香型白酒不同平衡溫度下甲醇出峰情況

2.3.2 平衡時(shí)間

控制頂空平衡溫度為 70 ℃，對(duì)同一均勻試樣在平衡時(shí)間為 10、15、20、25、30、40 min 下各進(jìn)行3次平行測(cè)試，結(jié)果是當(dāng)時(shí)間增加至 20 min 時(shí)，甲醇已達(dá)到最大響應(yīng)，繼續(xù)延長(zhǎng)平衡時(shí)間甲醇響應(yīng)已不再發(fā)生明顯變化(見(jiàn)圖5)，同時(shí)6個(gè)恒溫時(shí)間下，甲醇峰分離均完整且不與前后峰交疊。所以本實(shí)驗(yàn)選擇 20 min 作為頂空進(jìn)樣的平衡時(shí)間。

圖5 同一試樣平衡時(shí)間與響應(yīng)值之間關(guān)系

2.4 數(shù)據(jù)結(jié)果分析與比較

2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

將1.3.2.1配制的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液按1.3.2.2條件通過(guò)靜態(tài)頂空進(jìn)樣；將1.3.3.1配制的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液按1.3.3.2條件通過(guò)直接進(jìn)樣，分別得到兩種進(jìn)樣測(cè)定的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積數(shù)據(jù)，并繪制得兩種進(jìn)樣方式的標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見(jiàn)表1、圖6、圖7。質(zhì)量濃度范圍覆蓋3個(gè)級(jí)別，包含7個(gè)點(diǎn)，相關(guān)系數(shù)大于0.99，均滿足GB/T 27404-2008要求。頂空進(jìn)樣達(dá)到與全自動(dòng)直接進(jìn)樣一致的良好線性，滿足準(zhǔn)確定量的要求。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系

圖6 頂空進(jìn)樣標(biāo)準(zhǔn)曲線 圖7 直接進(jìn)樣標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.4.2 加標(biāo)回收率

根據(jù)所配置的甲醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，選擇低度數(shù)的普通白酒作為加標(biāo)試樣，對(duì)頂空進(jìn)樣和直接進(jìn)樣分別進(jìn)行4個(gè)不同質(zhì)量濃度的進(jìn)樣，依次測(cè)定并計(jì)算其加標(biāo)回收率，數(shù)據(jù)和結(jié)果見(jiàn)表2。頂空進(jìn)樣回收率為95.12%～100.92%，直接進(jìn)樣回收率為99.54%～102.62%，兩種進(jìn)樣方式都取得較好的加標(biāo)回收率，滿足GB/T 27404-2008對(duì)回收率的要求。因此靜態(tài)頂空進(jìn)樣同樣可準(zhǔn)確進(jìn)行酒中甲醇的測(cè)定和質(zhì)量控制。

表2 頂空進(jìn)樣和直接進(jìn)樣回收率結(jié)果

2.4.3 精密度

頂空進(jìn)樣和直接進(jìn)樣分別對(duì)每個(gè)質(zhì)量濃度重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算得各相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差見(jiàn)表3。頂空進(jìn)樣RSD值為0.277%～0.511%，直接進(jìn)樣RSD值為0.127%～0.338%，兩種進(jìn)樣方式都取得較好的精密度，滿足GB/T 27404-2008對(duì)精密度的要求。靜態(tài)頂空進(jìn)樣同樣取得較小的偏差，可進(jìn)行酒中甲醇的準(zhǔn)確測(cè)定。

表3 頂空進(jìn)樣和直接進(jìn)樣精密度測(cè)試結(jié)果

2.4.4 測(cè)定低限

根據(jù)所配甲醇儲(chǔ)備液，直接進(jìn)樣對(duì)加標(biāo)量為 5.008 μg/mL 的6個(gè)加標(biāo)試樣連續(xù)進(jìn)樣，平均加標(biāo)回收率為101.018%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.825%。頂空進(jìn)樣對(duì)加標(biāo)量為 5.06 μg/mL 的6個(gè)加標(biāo)試樣連續(xù)進(jìn)樣，平均加標(biāo)回收率為94.097%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.239%。兩種進(jìn)樣方式加標(biāo)回收率高且穩(wěn)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較小，精密度較高，因此以 5 μg/mL 作為酒中甲醇測(cè)定的定量限。

2.4.5 準(zhǔn)確度

頂空進(jìn)樣和直接進(jìn)樣分別對(duì)白酒和紅酒兩種質(zhì)控樣品進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果和誤差見(jiàn)表4。對(duì)白酒質(zhì)控樣品，頂空進(jìn)樣和直接進(jìn)樣測(cè)定結(jié)果都較接近特性值，并都取得了較高準(zhǔn)確度。對(duì)紅酒質(zhì)控樣品，頂空進(jìn)樣測(cè)定結(jié)果相對(duì)高于直接進(jìn)樣，準(zhǔn)確度相對(duì)比直接進(jìn)樣更高，絕對(duì)誤差更小。因此，靜態(tài)頂空進(jìn)樣對(duì)酒中甲醇的測(cè)定效果良好，特別是，對(duì)于紅酒不經(jīng)蒸餾可直接吸取原樣進(jìn)行進(jìn)樣測(cè)定，在一定程度上避免了因蒸餾造成甲醇的損失，可靠性比直接進(jìn)樣高。

表4 頂空進(jìn)樣和直接進(jìn)樣對(duì)質(zhì)控樣品測(cè)定的結(jié)果

2.4.6 樣品測(cè)定結(jié)果

頂空進(jìn)樣和直接進(jìn)樣分別對(duì)市售2份白葡萄酒、2份紅葡萄酒、1份高粱白酒、1份清香型白酒、3份醬香型白酒中甲醇進(jìn)行測(cè)定，同一試樣采用雙樣連續(xù)兩次進(jìn)樣，測(cè)定結(jié)果平均值見(jiàn)表5。從表5來(lái)看，通過(guò)頂空進(jìn)樣測(cè)得葡萄酒的甲醇含量，特別是紅葡萄酒，明顯比蒸餾后全自動(dòng)直接進(jìn)樣測(cè)得的甲醇含量高。這說(shuō)明頂空進(jìn)樣法測(cè)定葡萄酒比直接進(jìn)樣法具有更高可靠性，直接移取原樣測(cè)定，在一定程度上避免了因蒸餾、冷卻等前處理過(guò)程造成甲醇的損失。從甲醇出峰來(lái)看，兩種進(jìn)樣方式甲醇峰形都較好且無(wú)干擾。高粱白酒兩種進(jìn)樣方法測(cè)得絕對(duì)差值比上算術(shù)平均值1.602%<10%、清香型白酒兩種進(jìn)樣方法測(cè)得絕對(duì)差值比上算術(shù)平均值0.161%<10%?？梢?jiàn)，對(duì)于普通白酒，兩種進(jìn)樣方法結(jié)果偏差較小，而且兩種進(jìn)樣方式甲醇峰形都較好且無(wú)干擾，所以兩種進(jìn)樣方式皆適宜普通白酒甲醇的測(cè)定。對(duì)于醬香型白酒(以本實(shí)驗(yàn)所選用的3種為例)，通過(guò)頂空進(jìn)樣法測(cè)得甲醇色譜峰尖銳、對(duì)稱(chēng)，無(wú)拖尾，可進(jìn)行準(zhǔn)確定性定量分析(見(jiàn)圖8)。通過(guò)直接進(jìn)樣，在經(jīng)過(guò)一系列色譜條件優(yōu)化后，雖然使甲醇峰得到了有效的分離，但是均出現(xiàn)了嚴(yán)重的拖尾(見(jiàn)圖9)。通過(guò)軟件自動(dòng)積分，由于包含了拖尾部分，定量計(jì)算得甲醇含量值明顯高于頂空進(jìn)樣法測(cè)得值；通過(guò)手動(dòng)積分，去除拖尾部分，得到甲醇含量值與頂空進(jìn)樣法測(cè)得值保持一致，偏差較小。說(shuō)明對(duì)于甲醇峰難分離的醬香型白酒選擇靜態(tài)頂空法更合適，特別是需要準(zhǔn)確定量分析甲醇的時(shí)候。綜上，選擇靜態(tài)頂空進(jìn)樣法測(cè)定酒中甲醇含量比全自動(dòng)直接進(jìn)樣法更簡(jiǎn)化、準(zhǔn)確。

表5 頂空進(jìn)樣和直接進(jìn)樣分別對(duì)不同試樣測(cè)定結(jié)果

圖8 3種醬香型白酒頂空進(jìn)樣的甲醇色譜峰

圖9 3種醬香型白酒直接進(jìn)樣的甲醇色譜峰自動(dòng)積分與手動(dòng)積分

2.5 儀器比對(duì)驗(yàn)證

采用賽默飛科技世爾的頂空-氣相色譜儀(頂空進(jìn)樣器型號(hào)：TRIPLUS 300；氣相色譜儀型號(hào)：TRACE 1310)；色譜柱：TG-WAX MS 60 m×0.250 mm×0.25 μm)，對(duì)酒中甲醇通過(guò)靜態(tài)頂空進(jìn)樣和全自動(dòng)直接進(jìn)樣測(cè)定進(jìn)行儀器對(duì)比驗(yàn)證。①方法：進(jìn)樣口溫度、程序升溫與檢測(cè)器溫度保持與上述島津的一致，依然須控制低進(jìn)樣量才能使目標(biāo)峰完整、良好地分離開(kāi)。對(duì)于直接進(jìn)樣，本實(shí)驗(yàn)選擇分流比20∶1，進(jìn)樣量 0.4 μL，載氣流量 1.2 mL/min 效果最佳；對(duì)于頂空進(jìn)樣平衡溫度、時(shí)間與上述島津的一致，由于儀器本身存在的差異，這里選擇進(jìn)樣量 1 mL，分流比100∶1，載氣流量 1.0 mL/min 效果最佳。②數(shù)據(jù)結(jié)果：兩種進(jìn)樣方式都得到了較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)對(duì)比了兩臺(tái)不同廠家儀器和不同色譜柱對(duì)幾種紅酒和3種醬香型白酒中甲醇測(cè)定的結(jié)果。對(duì)于紅酒，兩種進(jìn)樣方式甲醇出峰良好，頂空進(jìn)樣測(cè)得甲醇含量比蒸餾后直接進(jìn)樣測(cè)得的甲醇含量高，與使用島津氣相色譜儀測(cè)得結(jié)果一致；對(duì)于3種醬香型白酒，直接進(jìn)樣方式在優(yōu)化保證甲醇峰分離開(kāi)的前提下，得到的甲醇峰依然拖尾嚴(yán)重，而頂空進(jìn)樣法得到的甲醇峰分離良好，測(cè)得結(jié)果與使用島津氣相色譜儀測(cè)得結(jié)果一致。

3 結(jié)論

本方法采用靜態(tài)頂空進(jìn)樣與全自動(dòng)直接進(jìn)樣兩種方式對(duì)不同酒中甲醇含量的測(cè)定比較，通過(guò)對(duì)色譜柱的選擇、色譜條件的優(yōu)化、頂空進(jìn)樣條件的確定、標(biāo)準(zhǔn)曲線、樣品加標(biāo)回收率、紅酒和白酒質(zhì)控樣品準(zhǔn)確度、方法精密度、不同樣品酒中甲醇測(cè)定結(jié)果等方面進(jìn)行探究和對(duì)比。采用頂空進(jìn)樣法改進(jìn)酒中甲醇的測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)較高，樣品加標(biāo)回收率和精密度高，且符合GB/T 27404-2008。在樣品的測(cè)定中，一方面減少了GB 5009.266-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中甲醇的測(cè)定》中顏色較深的發(fā)酵酒及其配制酒前處理蒸餾、定容等繁瑣過(guò)程，避免了因蒸餾造成的甲醇損失，同時(shí)也減少了對(duì)色譜的污染；另一方面對(duì)于甲醇難分離的醬香型白酒，頂空進(jìn)樣甲醇峰分離效果比直接進(jìn)樣分離更好，體現(xiàn)在峰形完整良好上，定性定量更準(zhǔn)確，而且頂空進(jìn)樣也適用其它型白酒中甲醇的測(cè)定并取得較好結(jié)果。另外，由于頂空進(jìn)樣直接取樣裝瓶上機(jī)，前處理過(guò)程簡(jiǎn)單、快捷，適合批量檢測(cè)。所以，靜態(tài)頂空-氣相色譜法可適用于高效、準(zhǔn)確地檢測(cè)各類(lèi)酒中甲醇含量，特別是對(duì)于紅酒和醬香型白酒更是優(yōu)勢(shì)明顯，準(zhǔn)確可靠。