□文/安麗穎胡爽
豬瘟(CSF)在我國(guó)分布廣泛且時(shí)有發(fā)生,是對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害最大、最危險(xiǎn)的傳染病之一。典型豬瘟根據(jù)臨床癥狀可分為最急性型、急性型、亞急性型、慢性型和持續(xù)性(溫和)型、繁殖障礙型豬瘟,其中在妊娠期間發(fā)生的感染較為常見(jiàn)。病豬在感染后經(jīng)過(guò)4~7天(少數(shù)為10天,最長(zhǎng)可達(dá)21天)的潛伏期后表現(xiàn)臨床癥狀。病毒的毒力、宿主反應(yīng)以及繼發(fā)感染是豬瘟病情發(fā)展的主要影響因素。受該病影響的動(dòng)物可能會(huì)產(chǎn)生抗體,在某些情況下,這些抗體只是間歇性出現(xiàn),不會(huì)影響病毒清除。這與持續(xù)感染一起,特別是對(duì)受影響的野豬種群起作用。病毒感染后的急性發(fā)作過(guò)程中,病理學(xué)常顯示不同器官如肺、腎、腸和膀胱的漿膜和粘膜表面淋巴結(jié)腫大、出血和瘀點(diǎn)。還可以出現(xiàn)扁桃體炎、腸道壞死性潰瘍、淋巴網(wǎng)狀系統(tǒng)病變以及非化膿性腦炎脾臟梗死等,這些被視為CSF的主要病理學(xué)特征。
豬瘟病毒存在于發(fā)病豬的各個(gè)臟器、血液、糞便及分泌物中,淋巴結(jié)、脾臟和血液中含量較高。豬瘟病毒(CSFV)屬于黃病毒科鼠疫病毒屬。該屬的其他成員包括牛病毒性腹瀉病毒1和2(BVDV-1和-2)、邊界疾病病毒(BDV)和越來(lái)越多的未分類和所謂非典型鼠疫病毒等。CSFV為單股RNA型,直徑約為38~44納米,有囊膜病毒。被包裹病毒顆粒由四種結(jié)構(gòu)蛋白組成,即核心蛋白(C),以及包膜糖蛋白E1、E2和Erns。核包裹著大約12.3 kb的陽(yáng)性單鏈RNA基因組,被翻譯成一個(gè)多蛋白[1]。編碼區(qū)域的兩端都有非翻譯區(qū)域(NTR)。病毒和細(xì)胞蛋白酶對(duì)前體蛋白進(jìn)行共轉(zhuǎn)化以及翻譯后處理,可得到多種成熟蛋白質(zhì),如結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白Npro、p7、NS2-3等。
豬瘟病毒在不同環(huán)境條件下的存活率有很大差異,對(duì)溫度變化尤為敏感。病毒存活率對(duì)溫度有較強(qiáng)的依賴性,通常來(lái)講,其存活時(shí)間與寒冷、潮濕和富含蛋白質(zhì)的條件下相關(guān)。病豬的排泄物以及肉制品中的病毒載量是有關(guān)豬瘟防控的重要因素。病豬排泄物中的CSFV,在室溫條件下可存活多天,而在4℃及以下的條件下可存活幾周不等,需要注意的是,病毒在低溫條件下可以持續(xù)存活。在溫度高于35℃時(shí),病毒的存活時(shí)間將會(huì)大大縮短,當(dāng)溫度高于50℃時(shí),只需數(shù)小時(shí)甚至數(shù)分鐘病毒將被滅活。更高的溫度很容易使病毒失活。有研究表明,病毒在實(shí)驗(yàn)室60℃條件下持續(xù)3分鐘就可完全失去活性[2]。但這也要求滅活的混合物要保持溫度的均勻分布。當(dāng)圈舍內(nèi)遭受豬瘟病毒污染時(shí),尤其是寒冷冬季的背景條件下,其至少存活幾天到一個(gè)月。CSFV在pH值5~10保持穩(wěn)定。低pH水平下的病毒的半衰期取決于溫度,室溫下的平均半衰期要比4℃條件下低十倍以上。而另一點(diǎn)是,病毒常存活在肉類或下游產(chǎn)品中,可在處于-70℃的冷凍肉類中存活幾年,而溫度越低,病毒存活時(shí)間越長(zhǎng)。
豬瘟唯一的自然宿主是豬,最主要的傳染源為病豬,傳播方式主要包括水平和垂直傳播,易感豬與病豬的直接接觸是該病的主要傳播方式之一。間接傳播主要為感染豬在發(fā)病前可通過(guò)口、鼻及淚腺分泌物、尿和糞中排毒,污染環(huán)境、飼料、飲水、以及接觸人類或農(nóng)業(yè)和獸醫(yī)器具進(jìn)行的機(jī)械傳播。此外,豬群引進(jìn)無(wú)癥狀感染豬是豬瘟爆發(fā)最常見(jiàn)的原因。病毒還可以通過(guò)豬肉及其制品傳播。在自然條件下豬瘟病毒的感染途徑是上呼吸道的口鼻腔,還可通過(guò)結(jié)膜、生殖道或皮膚擦傷進(jìn)入進(jìn)行傳播。
易感宿主是豬科的不同成員,尤其是家豬和歐洲野豬。病毒可通過(guò)空氣在豬群內(nèi)進(jìn)行傳播。從懷孕母豬到胎兒,妊娠的所有階段都有可能,并導(dǎo)致持續(xù)感染的后代。急性病例中感染中毒力CSFV的斷奶仔豬也很常見(jiàn)。此外,受豬瘟影響的野豬群體可以作為病毒的蓄積者,并對(duì)家豬來(lái)說(shuō)是一個(gè)持續(xù)的危險(xiǎn)。
隨著養(yǎng)豬防疫水平的提高,典型豬瘟病例已較為少見(jiàn),臨診上多以非典型豬瘟為主??焖倏煽康脑\斷對(duì)豬瘟的防控至關(guān)重要。因此,就需要準(zhǔn)確的臨床診斷以及要采用先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)來(lái)進(jìn)行診斷與鑒別。
典型的急性豬瘟爆發(fā),根據(jù)流行病學(xué)、臨診癥狀以及病理變化來(lái)做出診斷。在診斷中應(yīng)注意與豬副傷寒、弓形蟲(chóng)病、偽狂犬、豬丹毒、豬肺疫等病相區(qū)別。尤其是與非洲豬瘟進(jìn)行區(qū)別,脾的病變是非洲豬瘟與豬瘟之間的重要區(qū)別,非洲豬瘟病豬的脾臟腫大、發(fā)黑;而豬瘟的脾臟不腫大,保持正常大小,常見(jiàn)出血點(diǎn)和邊緣性梗死。
由于CSF的臨床表現(xiàn)高度多變,可能與豬的其他病毒性疾病相混淆,實(shí)驗(yàn)室診斷對(duì)于確診是必不可少的。在國(guó)際層面上,OIE(動(dòng)物衛(wèi)生組織)指定的成熟CSFV診斷試驗(yàn)有:病毒分離、熒光抗體試驗(yàn)(FAT)、抗原捕獲抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)、病毒中和試驗(yàn)(VNT)和抗體ELISA。CSFV還可在不同的永久性細(xì)胞系上分離。淋巴結(jié)、脾臟和血液等組織中病毒的含量較高,因此在采樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)時(shí)應(yīng)注意采集相應(yīng)的組織。
使用成熟的實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)系統(tǒng)進(jìn)行豬瘟初步檢測(cè)比較常見(jiàn),且效果較好。此外,可以使用熒光抗體或免疫過(guò)氧化物酶檢測(cè)法在組織的固定冰凍切片上檢測(cè)抗原??乖璄LISA建議僅用于基于群體的檢測(cè),原因在于,雖然特異性檢測(cè)的靈敏度通常至少與病毒分離相當(dāng),但大多數(shù)CSF特異性檢測(cè)缺乏靈敏度。血清學(xué)篩查可使用不同的市售E2抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行。中和試驗(yàn)對(duì)于豬瘟的檢測(cè)在一定程度上也可起到效果,可用于確診。而由于RT-qPCR的敏感性增加,在野豬的口服疫苗接種活動(dòng)和家豬的疫苗接種計(jì)劃中,疫苗病毒檢測(cè)已經(jīng)很常見(jiàn)。
對(duì)已消滅豬瘟的地區(qū)要嚴(yán)格做到切斷傳播途徑,防止豬瘟病毒再次進(jìn)入。同時(shí)密切留意生產(chǎn)動(dòng)態(tài),剛發(fā)現(xiàn)豬瘟病例就立即采取撲殺預(yù)案,切斷傳染源并進(jìn)行追終溯源,排查接觸物,對(duì)被污染以及潛在污染風(fēng)險(xiǎn)的場(chǎng)所要進(jìn)行徹底消毒。豬瘟病毒對(duì)于許多消毒劑表現(xiàn)耐受,而2%氫氧化鈉溶液是針對(duì)豬瘟病毒效果較好的消毒劑。
兔弱化病毒疫苗是目前應(yīng)用最廣、效果最好疫苗,接種后5~7天即可產(chǎn)生免疫力,免疫期持續(xù)一年以上。在豬瘟防治實(shí)踐中,多采取以下程序:
豬瘟兔弱化凍干疫苗,種豬每年加強(qiáng)免疫1次,安排在適宜(隔胎)的配種前空胎進(jìn)行;每頭豬的劑量為2~4頭份,同場(chǎng)的種公豬同步免疫接種。不得不說(shuō)的是,母豬帶毒是引起流產(chǎn)和仔豬對(duì)豬瘟疫苗免疫耐受的主要原因。
疫場(chǎng)初生仔豬超前免疫,劑量為每頭豬2頭份,免疫疫苗后1~2小時(shí)方可吃奶。由于本方法難操作,一般都是在種豬場(chǎng)發(fā)生疫情時(shí)使用,直到最后一頭豬瘟病豬死亡半年,無(wú)疫情發(fā)生,方可改為常規(guī)免疫。超前免疫豬65~70日齡進(jìn)行第二次免疫,劑量為每頭豬4頭份。在疫情或環(huán)境污染較為嚴(yán)重的地區(qū),仔豬初免于20日齡,劑量為每頭豬2頭份;二免于60~65日齡,劑量為每頭豬4頭份。在污染小、疫情少的地區(qū),仔豬于30~35日齡免疫,劑量為每頭豬4頭份。在這兩種情況下的仔豬,作為商品豬到此即是終生免疫;作為種豬配種前加強(qiáng)免疫1次,以后每年加強(qiáng)免疫1次,劑量為每頭豬2~4頭份。
此外,在偽狂犬病疫區(qū),進(jìn)行偽狂犬弱毒苗免疫時(shí),必須與豬瘟免疫相隔1周,以避免偽狂犬對(duì)豬瘟的免疫產(chǎn)生干擾。