趙曉麗，馬永鑫，錢 凈，朱 丹，楊如風(fēng)，田 敏，徐躍軒，陽春麗，唐樹榮，黎海生

（昆明醫(yī)科大學(xué)附屬甘美醫(yī)院，昆明市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南 昆明 650011）

《中國心血管健康與疾病報(bào)告2019 概要》[1]表明高血壓的患病率呈逐年上升趨勢，從 2012～2015 年的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，18 歲及以上居民高血壓患病粗率為 27.9%，標(biāo)準(zhǔn)化率為23.2%，并且患病率隨年齡的增加而升高，平均患病年齡逐漸年輕化。心腦血管疾病的發(fā)病率和死亡風(fēng)險(xiǎn)與自身的血壓水平之間存在密切的關(guān)系，血壓升高會(huì)使心血管疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)增高，進(jìn)而造成患者過早死亡。相關(guān)研究顯示，如果高血壓能夠得到有效的控制，心血管事件的發(fā)生率將顯著降低，但目前我國居民對高血壓疾病的認(rèn)識還不全面，高血壓疾病的控制率、治療率還很低，如何降低我國心血管病的發(fā)生，降壓治療是核心內(nèi)容和基本策略。

原發(fā)性高血壓發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，但大多數(shù)原發(fā)性高血壓患者的病因仍不明確，心鈉肽（atrial natriuretic peptide，ANP）由于利尿和高血壓本身的相關(guān)作用而成為明顯的候選者。筆者團(tuán)隊(duì)的前期研究[2]表明NPR-C 基因 A-55C 位點(diǎn)處于基因表達(dá)調(diào)控區(qū)，推測該位點(diǎn)多態(tài)性有可能影響 NPR-C的表達(dá)，進(jìn)而影響其對配體ANP 的清除，或影響NPR-C 及其配體結(jié)合后的信號通路。國外學(xué)者對NPR-C 的配體ANP 的關(guān)注度較高，而我國對此方面鮮見報(bào)道。

本研究以云南原發(fā)性高血壓患者和體檢中心健康者作為研究對象，預(yù)探索原發(fā)性高血壓患者血清中ANP 水平變化與原發(fā)性高血壓發(fā)生機(jī)制之間的關(guān)系，以期為臨床高血壓的發(fā)病提供一定的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2019 年6 月至9 月在昆明市第一人民醫(yī)院心內(nèi)科住院診斷為原發(fā)性高血壓的患者44 例，設(shè)為病例組，另外收集同期昆明市第一人民醫(yī)院體檢中心的健康體檢患者44 例，作為健康對照組。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

云南漢族的界定：父系，母系三代均為漢族，均居住云南境內(nèi)。高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照2019年發(fā)布的《中國高血壓防治指南（2018 年修訂版）》，用以下標(biāo)準(zhǔn)篩選：（1）在未使用降壓藥物的情況下，非同日3 次測量血壓，收縮壓≥140 mmHg 和（或）舒張壓≥90 mmHg；患者既往有高血壓史，現(xiàn)正在服用降壓藥物，血壓低于140/90 mmHg，仍診斷為高血壓；動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測的高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)為：平均SBP/DBP24h≥130/80 mmHg；白天≥135/85 mmHg；夜間≥120/70 mmHg。家庭血壓監(jiān)測的高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)為≥135/85 mmHg。高血壓患者年齡選擇：高血壓患者的年齡在40～80歲之間。研究對象之間的關(guān)系：研究對象個(gè)體間無血緣關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的收集、使用均通過患者和家屬簽字確認(rèn)同意，并通過醫(yī)院倫理審查委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）臨床資料不全者；（2）研究對象的民族界定不清或基本特征指標(biāo)信息不清者；（3）觀察指標(biāo)檢測失敗者；（4）有臨床或?qū)嶒?yàn)室信息提示為繼發(fā)性高血壓可能者；（5）患有影響檢測結(jié)果的疾病。

1.4 研究方法與試劑

研究對象的觀察指標(biāo)：年齡、性別、體重、身高、BMI、心鈉肽（ANP）、收縮壓（Systolic blood pressure，SBP）、舒張壓（Diastolic blood pressure，DBP）。ELISA 法檢測血清中ANP 的水平。主要試劑Artrial Natruireitc Peptide 購自Biovision 公司。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS Statistics 17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。ANP 水平的數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，采用四分位間距表示研究對象血清ANP 濃度水平，使用秩和檢驗(yàn)分析2 組間差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以高血壓病發(fā)生與否為因變量，以血清ANP 為自變量進(jìn)行Logistic 回歸分析。SBP 和DBP 的數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，分別采用t-檢驗(yàn)分析2 組間差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，最后采用person 相關(guān)性分析ANP 與SBP/DBP 之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ANP 濃度水平檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線

標(biāo)準(zhǔn)曲線根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度繪制，見圖1。

圖1 血清 ANP 標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of serum ANP

2.2 研究對象年齡、性別、體重、身高、BMI 分析結(jié)果

病例組與對照組年齡、性別、體重、身高、BMI 統(tǒng)計(jì)學(xué)沒有意義（P＞ 0.05），2 組之間有可比性，結(jié)果見表1。

表1 研究對象年齡、性別、體重、身高、BMI 分析結(jié)果（）Tab.1 Results of age，sex，weight，height，and BMI of the study subjects（）

表1 研究對象年齡、性別、體重、身高、BMI 分析結(jié)果（）Tab.1 Results of age，sex，weight，height，and BMI of the study subjects（）

2.3 SBP、DBP 及ANP 濃度水平

病例組與對照組SBP、DBP 統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著差異（P＜ 0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；病例組血清ANP 濃度水平低于對照組，z 值為-4.978，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），見表2。

表2 研究對象SBP、DBP 和ANP 濃度水平（）Tab.2 The concentration of SBP，DBP and ANP of the study subjects（）

表2 研究對象SBP、DBP 和ANP 濃度水平（）Tab.2 The concentration of SBP，DBP and ANP of the study subjects（）

*P ＜ 0.05。

2.4 高血壓病發(fā)生因素的logistic 回歸分析

以高血壓病發(fā)生與否為因變量，以血清ANP為自變量進(jìn)行l(wèi)ogistic 回歸分析，結(jié)果顯示ANP與高血壓偏回歸系數(shù)為0.071，P值為0.002（P＜0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.5 ANP 與SBP/DBP 相關(guān)性分析

采用person 相關(guān)性分析分別對ANP 與SBP/DBP 進(jìn)行分析，結(jié)果顯示ANP 與SBP 的相關(guān)系數(shù)為-0.374，P值為0.000（P＜ 0.05）；ANP 與DBP的相關(guān)系數(shù)為-0.331，P值為0.002（P＜ 0.05），都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但相對于DBP，ANP 與SBP 的相關(guān)性更顯著。

3 討論

高血壓是一種常見的慢性疾病，是世界范圍內(nèi)導(dǎo)致死亡的主要危險(xiǎn)因素。根據(jù)2019 年發(fā)布的《中國高血壓防治指南》[3]1958 年，1979 年，1991 年，2002 年，2012 年和2015 年我國進(jìn)行的6 次大規(guī)模高血壓患病率調(diào)查中，報(bào)告的高血壓患病率分別為5.1%，7.7%，13.6%，18.8%，25.2%和27.9%，雖然各次研究調(diào)查的總?cè)藬?shù)、診斷標(biāo)準(zhǔn)不完全一致，但是總體來看高血壓的患病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢。目前大量的研究文獻(xiàn)表明，高血壓的發(fā)病機(jī)制包括遺傳、精神、神經(jīng)作用、RAAS 系統(tǒng)平衡失調(diào)、胰島素抵抗、肥胖等[4]。

近年來，鈉尿肽家族及其受體基因調(diào)控的信號通路在心血管疾病的病理生理中發(fā)揮的作用越來越來受到廣大學(xué)者的關(guān)注。ANP 主要由心房產(chǎn)生和分泌，心室肥厚也可以促進(jìn)心室肌細(xì)胞分泌ANP 并且直接釋放到外周血中。據(jù)報(bào)道[5]ANP 的過度表達(dá)能減輕高血壓的發(fā)生，LUIS G.MELO 等人的研究[6]表明過表達(dá)ANP 的轉(zhuǎn)基因小鼠相對于其非轉(zhuǎn)基因?qū)φ胀C仔小鼠降壓（25±30）mmHg，而ANP 基因敲除小鼠與野生型對照小鼠相比血壓高（20±30）mmHg，與本次實(shí)驗(yàn)原發(fā)性高血壓患者的外周血中的ANP 水平顯著低于正常人的結(jié)果相一致。Li 等人的研究[7]表明ANP 水平的升高，可以使原發(fā)性高血壓大鼠的血壓降低，此外，段翔等的研究[8]表明高鹽組血液中ANP 基因表達(dá)水平（1.82±0.11）明顯高于中鹽組（1.43±0.09），中鹽組血液中ANP 基因表達(dá)水平明顯高于低鹽組（0.95±0.08），這也更加證實(shí)了ANP 與高血壓之間有聯(lián)系。有研究表明[9]ANP 升高后會(huì)通過舒張血管、促進(jìn)腎臟對水和鈉的排泄來使血壓降低。此外ANP 還可以抑制ET 的合成和分泌，拮抗ET 的生物學(xué)效應(yīng)，減弱血管緊張素Ⅱ的升壓作用，從而有效的控制血壓的升高[10]。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示ANP 與SBP/DBP 具有相關(guān)性，且與DBP 比較，ANP 與SBP 的相關(guān)性更顯著。有研究報(bào)道[11]收縮壓（SBP）是心血管疾病的重要危險(xiǎn)因子，隨著SBP 水平的升高，患者心、腎不良事件發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)持續(xù)增加。由此可推測ANP 可降低SBP值，減少患者患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。據(jù)Shravya Vinnakota 等[12]的報(bào)道，目前已經(jīng)研究了合成的ANP 應(yīng)用在高血壓的治療中，并且正在進(jìn)行著有希望的實(shí)驗(yàn)。

綜上所述，本文得出如下結(jié)論：（1）外周血中ANP 濃度水平低與血壓升高密切相關(guān)；（2）NPR-C基因配體ANP 參與了原發(fā)性高血壓的發(fā)病機(jī)制；（3）ANP 濃度水平影響著SBP/DBP值的變化，與DBP 比較，ANP 對SBP 的影響更為顯著。

基于以上信息，提示血漿中的ANP 在原發(fā)性高血壓的發(fā)生、發(fā)展中可能發(fā)揮著重要的作用，但其確切的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究探討。雖然本次實(shí)驗(yàn)研究觀察的指標(biāo)比較單一，但是也為高血壓的發(fā)病機(jī)制研究與治療提供了一種新思路。本次初步探究所觀察的標(biāo)本量較少，還存在著一定的局限性，后期課題組會(huì)加大研究標(biāo)本量進(jìn)行進(jìn)一步的探究。