文/鄭元強(qiáng) 馬嵩 蘇鍔 張簡(jiǎn) 臧濤

錦鯉起源于我國(guó)馴養(yǎng)的野生鯉魚，歷經(jīng)200多年的人工繁殖選育，部分野生鯉魚的優(yōu)良性狀逐步退化。本試驗(yàn)以血統(tǒng)優(yōu)良的錦鯉雌魚與野生黃河鯉雄魚配對(duì)雜交選育融入黃河鯉基因的雜交錦鯉F1代，對(duì)F1代培育優(yōu)選后，再次與日本錦鯉配對(duì)回交繁育錦鯉F2代。通過選育雜交，將黃河鯉抗病性強(qiáng)、生長(zhǎng)快、骨架大等優(yōu)良基因在子代錦鯉中不斷固定，以期培育出目標(biāo)性狀穩(wěn)定、品質(zhì)較高的國(guó)產(chǎn)錦鯉品種，助力我國(guó)觀賞魚產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展。

錦鯉起源于我國(guó)馴養(yǎng)的野生鯉魚，早在唐詩(shī)中就出現(xiàn)了“錦鯉”這一說法，傳入日本后，經(jīng)過多代培育，又改良篩選出多個(gè)錦鯉品種，即現(xiàn)在市場(chǎng)上較為常見的紅白、大正三色、昭和三色等。在20世紀(jì)90年代，我國(guó)內(nèi)地開展了市場(chǎng)化的錦鯉繁殖培育，其成為廣受市場(chǎng)歡迎的觀賞魚品種之一。經(jīng)多代追求花色的選育后，錦鯉所具有的野生鯉魚的一些優(yōu)勢(shì)性狀逐漸退化，抗逆性變差，生長(zhǎng)速度減慢。

針對(duì)這個(gè)問題，山東相關(guān)公司聯(lián)合濟(jì)南市淡水養(yǎng)殖科學(xué)研究所，聘請(qǐng)業(yè)界專家為顧問，從2015年開始，開展以血統(tǒng)優(yōu)良的錦鯉雌魚與野生黃河鯉雄魚配對(duì)雜交試驗(yàn)，繁育具有黃河鯉基因的雜交錦鯉苗種。在2018年～2021年，以符合錦鯉親本標(biāo)準(zhǔn)、抗病性強(qiáng)、生長(zhǎng)快、骨架大為選育目標(biāo)性狀，對(duì)融入黃河鯉基因的性成熟子代魚進(jìn)行選育，并再次與日本錦鯉配對(duì)回交繁育出二代錦鯉苗種。將黃河鯉抗病性強(qiáng)、生長(zhǎng)快、骨架大的基因在子代錦鯉中不斷固定，培育出目標(biāo)性狀穩(wěn)定的國(guó)產(chǎn)錦鯉品種。

一、材料與方法

（一）育種過程

2015年～2017年進(jìn)行錦鯉與黃河鯉的雜交繁育，對(duì)雜交一代F1開展苗種培育和挑選，有計(jì)劃地挑選后備親本重點(diǎn)培育。

2019年～2021年，雜交一代F1陸續(xù)滿4歲，選出成熟度好、性狀優(yōu)質(zhì)的雌性親本與日本錦鯉雄性回交繁育出F2代。測(cè)定成活率、養(yǎng)成規(guī)格等生長(zhǎng)數(shù)據(jù)，并于養(yǎng)殖池隨機(jī)選取樣本測(cè)定其體內(nèi)超氧化物歧化酶（SOD）活性，了解其抗氧化性能。

2015年～2021年，在相同養(yǎng)殖條件下經(jīng)過同等時(shí)長(zhǎng)的池塘培育，于每年10月選取不同年份F1代和F2代群體打樣，測(cè)量體長(zhǎng)、體高、體重等形態(tài)學(xué)指標(biāo)，進(jìn)行生長(zhǎng)指標(biāo)跟蹤記錄。

（二）繁殖設(shè)施和用具

使用6 m×3 m的水泥池作為繁殖池，用6 0目篩絹布制成規(guī)格為5m×2m×1m的網(wǎng)箱，產(chǎn)卵巢使用PP材質(zhì)成品魚巢。設(shè)施和用具用10g/m3的漂白粉消毒后曝曬，將網(wǎng)箱吊在水泥池內(nèi)，產(chǎn)卵兼孵化用。

（三）親魚配組方案

從候選親本中選擇色彩、斑紋、體型等性狀表現(xiàn)突出的個(gè)體，分析后代出現(xiàn)優(yōu)質(zhì)錦鯉的最大概率，進(jìn)行科學(xué)配對(duì)，為每組親本建立檔案，便于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，建立家譜。

雜交試驗(yàn)采用錦鯉♀×黃河鯉♂。5月上旬，分兩組兩批次催產(chǎn)。每一組選用紅白、大正三色、昭和三色三個(gè)錦鯉品種雌魚各2尾～3尾，總計(jì)7尾～9尾，黃河鯉雄魚2尾～3尾。為刺激錦鯉雌魚發(fā)情，配用3尾～5尾成熟度好的錦鯉雄魚作為催情魚，人工授精時(shí)不使用。

回交試驗(yàn)采用子一代F1♀×錦鯉♂。親本選擇F1代選育的雌魚和引進(jìn)的錦鯉親本雄魚，雌魚紅白、大正三色、昭和三色品種各2尾～3尾，雄魚紅白、大正三色、昭和三色品種各3尾～5尾。

（四）親本選擇

1.親魚的來(lái)源及培育

錦鯉以紅白、大正三色、昭和三色這“大三家”品種為主，由日本知名漁場(chǎng)引進(jìn)，品質(zhì)優(yōu)秀，年齡4歲～5歲，體長(zhǎng)60cm以上。黃河鯉由黃河濟(jì)南段捕獲，經(jīng)種質(zhì)檢測(cè)，具備“金鱗赤尾”、高背白腹的特征，4冬齡以上，體長(zhǎng)70cm以上。親本重點(diǎn)培育1年后確定性狀穩(wěn)定，健康無(wú)畸形、無(wú)傷病、鱗片完整，性腺發(fā)育成熟可用于人工催產(chǎn)。

2.親魚的雌雄鑒別

雌魚頭部稍窄長(zhǎng)，成熟的雌魚卵巢輪廓明顯，腹部膨大柔軟，生殖孔微突發(fā)紅，輕壓腹部可見卵粒。雄魚頭部寬而短，額部稍突起，雄魚較雌魚胸鰭尖長(zhǎng)。繁殖季節(jié)成熟的雄魚鰓蓋和胸鰭第一根鰭條上有“追星”，腹部平直，生殖孔內(nèi)凹，輕壓腹部有精液流出。

（五）催產(chǎn)藥物和催產(chǎn)方式

1.催產(chǎn)藥物

使用DOM和LRH-A2，注射劑量為雌魚DOM 5mg/kg+LRH-A210μg/kg，雄魚劑量減半，采用胸鰭基部一次性注射。

2.催產(chǎn)方式

采用人工授精方式。注射藥物后10h～12h，親魚追尾接近產(chǎn)卵時(shí)撈出，分別擠出魚卵和精液，混合后撒到孵化巢。

（六）苗種培育和人工挑選

雜交繁殖產(chǎn)出的水花魚苗分批次、分品種放入池塘培育。水花魚苗培育到1cm～2cm開始初次挑選，淘汰約80%～90%；魚苗培育到3cm～5cm開始二次挑選，再淘汰約6 0%；6cm～10cm開始第三次挑選，再淘汰約50%。之后，在當(dāng)年養(yǎng)殖期內(nèi)拉網(wǎng)2次～3次，再次淘汰部分商品品質(zhì)不高的苗種。依據(jù)色彩、質(zhì)地、斑紋、姿態(tài)、體型等選擇優(yōu)質(zhì)的魚苗繼續(xù)養(yǎng)殖。優(yōu)選后的魚稱為留養(yǎng)魚。留養(yǎng)魚經(jīng)過4年時(shí)間的養(yǎng)殖和培育，再選出很少數(shù)量符合親本標(biāo)準(zhǔn)的錦鯉重點(diǎn)培育。

（七）池塘養(yǎng)殖

對(duì)雜交、回交繁育的魚種和日本親本繁育的錦鯉魚種開展養(yǎng)殖對(duì)照試驗(yàn)，池塘規(guī)格660m2～1300m2，水深1.5m。

二、結(jié)果與分析

（一）2015年～2017年雜交繁育結(jié)果

留養(yǎng)數(shù)量指經(jīng)過5次～6次優(yōu)選，去除正常死亡后的數(shù)量，選育親本數(shù)量是指可用于雜交繁育并作為親本單獨(dú)培育的數(shù)量。雜交獲得F1代數(shù)據(jù)見表1。三年共計(jì)雜交繁育水花魚苗169萬(wàn)尾，累計(jì)獲得留養(yǎng)魚數(shù)量為20264尾，留養(yǎng)魚相對(duì)水花比率約為1.2%。

表1 2015年～2017年F1代雜交繁育情況

（二）2019年～2021年回交繁育結(jié)果

F1代雌魚分別和紅白、大正三色、昭和三色等日本血統(tǒng)的錦鯉雄魚進(jìn)行回交。回交獲得F2代數(shù)據(jù)見表2。三年共計(jì)回交繁育水花魚苗105.7萬(wàn)尾，累計(jì)獲得留養(yǎng)魚數(shù)量為21266尾，留養(yǎng)魚相對(duì)水花比率約為2.0%。

表2 2019年～2021年F1代回交得到F2代繁育情況

（三）池塘養(yǎng)殖結(jié)果

2017年～2018年、2020年～2021年分別對(duì)子一代F1、子二代F2和常規(guī)繁育的錦鯉苗種進(jìn)行同等條件單因子對(duì)比池塘養(yǎng)殖試驗(yàn)，相關(guān)生長(zhǎng)及免疫指標(biāo)數(shù)據(jù)見表3。數(shù)據(jù)表明，在個(gè)體規(guī)格、成活率等生長(zhǎng)指標(biāo)方面，雜交F1優(yōu)于回交F2優(yōu)于日本錦鯉。在反映免疫指標(biāo)的超氧化物歧化酶（SOD）活性方面，雜交F1代和回交F2代優(yōu)于日本錦鯉，但雜交F1代和回交F2之間差異不明顯。

表3 F1代和F2代生長(zhǎng)及免疫指標(biāo)與常規(guī)錦鯉苗種對(duì)比數(shù)據(jù)

（四）生長(zhǎng)指標(biāo)跟蹤

2015年～2021年，選取雜交F1、F2試驗(yàn)組和對(duì)照組抽測(cè)體長(zhǎng)、體高和體重?cái)?shù)據(jù)（見表4）。每群體隨機(jī)抽取30尾進(jìn)行體長(zhǎng)、體高、體重等形態(tài)學(xué)指標(biāo)測(cè)量。試驗(yàn)表明，雜交試驗(yàn)組生長(zhǎng)性狀優(yōu)于原有的錦鯉品種。

表4 2015年～2021年F1、F2代跟蹤生長(zhǎng)指標(biāo)數(shù)據(jù)

三、小結(jié)與討論

（一）雜交試驗(yàn)設(shè)計(jì)選擇

日本錦鯉的選育更注重雌性親本的選育和保種，錦鯉大賽的主要獎(jiǎng)項(xiàng)都只有雌魚有資格參與評(píng)選，因此往往留養(yǎng)下來(lái)的優(yōu)質(zhì)魚都為雌魚。母本選擇日本錦鯉可以保留更多錦鯉種質(zhì)的優(yōu)良性狀。結(jié)合鯉魚遺傳性狀的相關(guān)研究成果，選擇黃河鯉♂×日本錦鯉♀配對(duì)作為雜交試驗(yàn)的搭配繁殖組合進(jìn)行F1代子代繁育較為科學(xué)。

（二）回交試驗(yàn)設(shè)計(jì)選擇

根據(jù)染色體遺傳學(xué)理論，黃河鯉雄性親本性染色體為XY，錦鯉雌性親本性染色體為XX，雜交繁育出的子一代F1雌性性染色體XX中，必定包含一個(gè)黃河鯉的染色體X。因此試驗(yàn)中選育子一代雌性作為二代親本培育，以期后代苗種保留黃河鯉更多的遺傳性狀。

（三）F1、F2代生長(zhǎng)性狀的差異分析

通過比較F1、F2代及對(duì)照組的體重、成活率、免疫指標(biāo)等數(shù)據(jù)，證明了F1和F2代都具有明顯的雜交優(yōu)勢(shì)。其中生長(zhǎng)性狀中F1代優(yōu)于F2代，因?yàn)镕1代有著更多的基因遠(yuǎn)源屬性，可以產(chǎn)生更強(qiáng)的雜種優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)。F1和F2代抗氧化免疫指標(biāo)差異不大，說明這方面特性具有較穩(wěn)定的遺傳可能。

（四）F1跟蹤生長(zhǎng)指標(biāo)分析

比較F1代7年生長(zhǎng)數(shù)據(jù)，可以發(fā)現(xiàn)前4年在生長(zhǎng)性狀上雜種優(yōu)勢(shì)隨著時(shí)間增長(zhǎng)而小幅度擴(kuò)大，在4歲左右到達(dá)頂峰，之后的差距不斷縮小。分析原因，可能是養(yǎng)殖環(huán)境的趨同對(duì)于相關(guān)基因性狀的表達(dá)有一定影響。黃河鯉原生基因在一個(gè)靜態(tài)養(yǎng)殖環(huán)境中可能與其在野外原始環(huán)境中存在表達(dá)差異性。

（五）獲得優(yōu)質(zhì)錦鯉的比例

雜交一代F1魚苗顯示黃河鯉特性占比為23%，一選淘汰率87%?；亟欢鶩2魚苗顯示黃河鯉特性占比小于15%，一選淘汰率82%?；亟籉2代留養(yǎng)魚比率明顯高于雜交F1代，但是2%的比率依然低于常規(guī)錦鯉繁殖3%的優(yōu)選率。由此推測(cè)，后期三代、四代優(yōu)選精品錦鯉的比率將不斷提高，鯉魚特性苗種會(huì)逐漸減少。

（六）子代個(gè)體大型化的遺傳性狀

表4表明，F(xiàn)1、F2代體長(zhǎng)、體高、體重等生長(zhǎng)指標(biāo)相對(duì)常規(guī)繁殖的錦鯉有明顯的優(yōu)勢(shì)。計(jì)算體高/體長(zhǎng)數(shù)值可見有小幅提高，但并不明顯，因此本試驗(yàn)對(duì)于培育體型高、骨架大錦鯉的設(shè)想還需進(jìn)一步探索實(shí)踐。

（七）三個(gè)錦鯉品種挑選的區(qū)別

紅白錦鯉的挑選注重緋紋分布，大正三色錦鯉同時(shí)注重緋紋和墨斑的分布，掌握斑紋均衡、切邊整齊等要點(diǎn)，挑選相對(duì)容易。昭和錦鯉的挑選比較難，第一次挑選要區(qū)分鯉魚性狀和昭和錦鯉性狀，注意細(xì)致觀察，全黑色淘汰，有微小淺灰、白色斑紋的黑仔魚苗必須保留繼續(xù)養(yǎng)殖。

（八）人工授精的優(yōu)勢(shì)

人工授精具有受精率高、孵化率高的特點(diǎn)，精、卵根據(jù)產(chǎn)量和試驗(yàn)需要搭配。體長(zhǎng)、體重相當(dāng)?shù)挠H本，一尾黃河鯉雄魚的精液可供5尾～6尾雌性錦鯉使用，且不會(huì)影響受精率。