亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        固相萃取/超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)養(yǎng)殖“非藥品”投入品中37種禁限獸藥

        2023-01-05 11:16:30曼張兵吳花黃浩徐媛原
        分析測(cè)試學(xué)報(bào) 2022年12期
        關(guān)鍵詞:投入品磺胺甲酸

        張 微,肖 曼張,兵吳,丹 鐘 仕,花黃浩,*鵬,徐媛原,

        (1.深圳市質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)研究院,廣東 深圳 518101;2.廣東省市場(chǎng)監(jiān)督管理局食用農(nóng)產(chǎn)品監(jiān)管重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東 深圳 518101)

        隨著我國水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)的迅猛發(fā)展,水產(chǎn)行業(yè)對(duì)漁業(yè)投入品的需求越來越大,而目前對(duì)漁業(yè)“非藥品”投入品的監(jiān)管則有所缺失?!胺撬幤贰蓖度肫返淖饔脩?yīng)為改良水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境,且不會(huì)造成養(yǎng)殖產(chǎn)品質(zhì)量安全問題,但部分投入品卻對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境造成污染,給水產(chǎn)品安全及人類健康帶來隱患[1-2]。目前,化學(xué)類水質(zhì)底質(zhì)改良劑、微生物制劑、中草藥制劑、免疫增強(qiáng)劑等漁用非藥品數(shù)量已遠(yuǎn)超正規(guī)獸藥成為水產(chǎn)養(yǎng)殖第一大投入品[3-4],一些以“國標(biāo)藥品”為主成分的養(yǎng)殖投入品也被包裝成“非藥品”在市場(chǎng)上銷售[5]。有研究報(bào)道了水產(chǎn)“非藥品”致螃蟹大批量死亡[6]的事件,對(duì)國家產(chǎn)地水產(chǎn)品監(jiān)控中發(fā)現(xiàn)的獸藥殘留陽性樣品進(jìn)行溯源也證實(shí)違禁藥品來自“非藥品”的使用[7]。針對(duì)當(dāng)前存在的“非藥品”成分不明、無生產(chǎn)技術(shù)及質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)等問題,有必要建立一種快速、準(zhǔn)確測(cè)定“非藥品”投入品中多種禁限獸藥殘留的方法,以保障水產(chǎn)品質(zhì)量安全,并進(jìn)一步提升養(yǎng)殖投入品監(jiān)管監(jiān)測(cè)水平。

        超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法因靈敏度高、準(zhǔn)確度好、基質(zhì)干擾小等優(yōu)勢(shì),是復(fù)雜基質(zhì)樣品快速測(cè)定的首選[8-10]。在水產(chǎn)領(lǐng)域,現(xiàn)有研究大多是針對(duì)水產(chǎn)品中多種獸藥殘留的檢測(cè)[11-14],對(duì)“非藥品”投入品中獸藥殘留的研究較少。本研究針對(duì)基質(zhì)復(fù)雜的投入品,重點(diǎn)從色譜條件、質(zhì)譜條件、提取液、萃取方式等方面進(jìn)行研究論證,最終采用PRiME-HLB固相萃取/超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)“非藥品”投入品中37種禁限獸藥進(jìn)行測(cè)定。此外,本研究還對(duì)市售的170份水產(chǎn)養(yǎng)殖投入品進(jìn)行了分析檢測(cè),以期為監(jiān)管部門提供數(shù)據(jù)參考,嚴(yán)防假劣投入品流入水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域。

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 儀器、試劑與樣品

        Agilent 1290II超高效液相色譜串聯(lián)AB SCIEX三重四極桿5500質(zhì)譜儀(配備電噴霧離子源);PL602E百分之一電子天平;MTV-100多管旋渦混合儀;AS30600BDT超聲波清洗儀;Sigma 3-30KS高速冷凍離心機(jī);N-EVAP-24全自動(dòng)氮吹儀;Waters PRiME-HLB固相萃取柱(6 mL,200 mg)。

        乙腈、甲醇、甲酸、乙酸銨均為色譜純;超純水(Milli-Q超純水儀制得),Mcllvaine-乙二胺四乙酸二鈉(Mcllvaine-Na2EDTA)緩沖溶液(0.1 mol/L)。

        分析標(biāo)準(zhǔn)品:磺胺類(磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺對(duì)甲氧嘧啶、磺胺氯噠嗪、磺胺甲氧噠嗪、磺胺鄰二甲氧嘧啶、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺甲基異唑、磺胺二甲異唑、磺胺喹啉、甲氧芐啶、磺胺苯吡唑),酰胺醇類(氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考),硝基咪唑類(羥基甲硝唑、甲硝唑、地美硝唑、洛硝噠唑、氯甲硝咪唑、苯硝咪唑、異丙硝唑、甲苯咪唑、5-羥基-甲苯咪唑、替硝唑、奧硝唑、羥基異丙硝唑),苯并咪唑類(氟苯達(dá)唑、芬苯達(dá)唑砜、噻苯噠唑、阿苯達(dá)唑砜),抗病毒類(金剛烷胺)(純度≥92%,德國Dr.Ehrenstorfre公司)。

        實(shí)際樣品隨機(jī)抽樣于廣東省各市水產(chǎn)養(yǎng)殖主要生產(chǎn)區(qū)水產(chǎn)藥品銷售點(diǎn)和互聯(lián)網(wǎng)上經(jīng)營的水產(chǎn)藥品銷售點(diǎn)。抽樣品類包括底質(zhì)改良劑、水質(zhì)改良劑、消毒劑、殺菌殺蟲和殺藻劑、中草藥制劑等“非藥品”共計(jì)170份。將固態(tài)、半固態(tài)樣品充分均質(zhì)后備用。

        1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

        分別準(zhǔn)確稱取10.0 mg按純度折算成100%質(zhì)量的磺胺類、酰胺醇類、硝基咪唑類、苯并咪唑類、抗病毒類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),用甲醇溶解并定容至10.0 mL,配制成1.00 mg/mL的單物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。分別移取適量上述單物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用甲醇稀釋成適當(dāng)質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液,-20℃下避光保存。

        1.3 樣品前處理

        準(zhǔn)確稱取2.50 g(精確至0.01 g)均質(zhì)試樣于50 mL離心管內(nèi),加入10 mL 80%(體積分?jǐn)?shù))乙腈水(含0.2%甲酸)提取液和5 mL Mcllvaine-Na2EDTA緩沖溶液,置于多管旋渦混合儀上,以2 000 r/min渦旋振蕩3 min,使用超聲波清洗儀超聲提取10 min后,用高速冷凍離心機(jī)以10 000 r/min離心5 min。準(zhǔn)確吸取3.5 mL上清液直接過Waters PRiME-HLB固相萃取柱,保持1滴/s速度過柱。準(zhǔn)確吸取收集好的濾液2.5 mL至5 mL帶刻度離心管內(nèi),于40℃水浴下氮?dú)獯抵翞V液少于0.5 mL,用復(fù)溶液將殘留液定容至1.00 mL,渦旋振蕩溶解殘留物,過0.22 μm濾膜后上機(jī)測(cè)定。

        1.4 儀器條件

        1.4.1 液相色譜條件色譜柱:BEH C18(3.0 mm×100 mm,1.7 μm);柱溫:40℃;流動(dòng)相:A1為0.1%甲酸水溶液,A2為5 mmol/L乙酸銨水溶液,B為甲醇;流速:0.4 mL/min;進(jìn)樣量:5.00 μL。梯度洗脫程序見表1。

        表1 流動(dòng)相梯度洗脫程序Table 1 Gradient elution program of mobile phase

        1.4.2 質(zhì)譜條件離子源:電噴霧離子源;掃描方式:正/負(fù)離子模式;檢測(cè)方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM);電噴霧電壓(IS):5.5 kV(正離子模式),-4.5 kV(負(fù)離子模式);離子源溫度:550℃;氣簾氣壓力(CUR):241.3 kPa;碰撞氣壓力(CAD):62.1 kPa;噴霧氣(GS1)、輔助加熱氣壓力(GS2):379.2 kPa。以子、母離子的豐度比和保留時(shí)間定性,以峰面積定量。各禁限獸藥的質(zhì)譜參數(shù)見表2。

        表2 37種獸藥的質(zhì)譜參數(shù)Table 2 MS parameters of 37 veterinary drugs

        (續(xù)表2)

        2 結(jié)果與討論

        2.1 色譜條件的優(yōu)化

        為使色譜峰分離且獲得良好峰形,提高目標(biāo)化合物的靈敏度,實(shí)驗(yàn)對(duì)流動(dòng)相體系進(jìn)行了優(yōu)化。由于在正離子模式下,向流動(dòng)相中加入適量甲酸或乙酸銨可提高目標(biāo)化合物離子化效率;而負(fù)離子模式下,加入甲酸會(huì)抑制目標(biāo)化合物的離子化效率。因此,考察了0.1%甲酸水、5 mmol/L乙酸銨溶液、5 mmol/L乙酸銨溶液(含0.1%甲酸)與甲醇或乙腈的不同組合作為流動(dòng)相時(shí)的分離效果。結(jié)果表明,以甲醇為有機(jī)相時(shí),各目標(biāo)化合物的響應(yīng)均較乙腈時(shí)好,峰形更對(duì)稱更尖銳。通過對(duì)比,實(shí)驗(yàn)最終確定2個(gè)最佳色譜條件:正離子模式采集時(shí),磺胺類、硝基咪唑類、苯并咪唑類、抗病毒類的流動(dòng)相體系為0.1%甲酸水溶液-甲醇;負(fù)離子模式采集時(shí),酰胺醇類的流動(dòng)相體系為5 mmol/L乙酸銨-甲醇。此時(shí),各目標(biāo)化合物間的分離效果最好,響應(yīng)最高,峰形無拖尾,更對(duì)稱。圖1為空白加標(biāo)(10.0 μg/kg)樣品的MRM色譜圖。

        圖1 空白加標(biāo)(10.0 μg/kg)樣品的MRM色譜圖Fig.1 MRM chromatograms of a spiked(10.0 μg/kg)blank sample

        2.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

        取各個(gè)藥物的單標(biāo)溶液(100 μg/L),以針泵注射方式單標(biāo)進(jìn)樣,采用全掃描模式進(jìn)行掃描,通過質(zhì)荷比和各化合物的相對(duì)分子質(zhì)量確定母離子,再對(duì)母離子進(jìn)行打碎掃描獲得各化合物的子離子信息,選取響應(yīng)強(qiáng)度高的子離子作為定量離子和定性離子對(duì)。在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式下,優(yōu)化各化合物的去簇電壓和碰撞能量,結(jié)果見表2。

        2.3 前處理方法的優(yōu)化

        2.3.1 提取溶劑的優(yōu)化本實(shí)驗(yàn)對(duì)比了乙腈、酸化乙腈(含1%甲酸)、80%(體積分?jǐn)?shù),下同)乙腈水(含0.2%甲酸)、乙酸乙酯對(duì)37種目標(biāo)物提取效率的影響。結(jié)果表明,乙酸乙酯對(duì)磺胺類藥物的提取效率較低,乙腈對(duì)金剛烷胺的提取效率較低,酸化乙腈(含1%甲酸)和80%乙腈水(含0.2%甲酸)對(duì)目標(biāo)物的提取效率無顯著差異。從環(huán)保和節(jié)約資源的方面考慮,最終選取80%乙腈水(含0.2%甲酸)作為提取溶劑。

        2.3.2 凈化方法的優(yōu)化水產(chǎn)養(yǎng)殖“非藥品”基質(zhì)成分較為復(fù)雜,凈化效果對(duì)方法靈敏度有較大影響。QuEChERS法[15-16]與PRiME-HLB固相萃取柱法[17-18]各有優(yōu)勢(shì),被廣泛應(yīng)用于獸藥殘留檢測(cè),本實(shí)驗(yàn)對(duì)比了這兩種方法的凈化效果。實(shí)驗(yàn)中采用的QuEChERS凈化粉中含有50 mg C18、100 mg PSA和500 mg硫酸鎂,采用的Waters PRiME-HLB柱是一款無需活化的固相萃取柱,與傳統(tǒng)柱相比,省去了活化、淋洗、洗脫等步驟,大幅提高了檢測(cè)效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,采用QuEChERS法時(shí)目標(biāo)化合物的平均回收率為56.6%~130%,其中磺胺甲氧噠嗪、磺胺二甲異唑、甲氧芐啶、甲砜霉素的平均回收率分別僅為56.6%、58.2%、60.5%、63.6%,氯苯達(dá)唑、甲苯咪唑的平均回收率均大于120%;而采用PRiME-HLB柱凈化后,各目標(biāo)化合物的平均回收率范圍為71.6%~119%。最終選取Waters PRiMEHLB固相萃取柱進(jìn)行凈化。

        2.4 方法學(xué)評(píng)價(jià)

        2.4.1 線性范圍與檢出限以“非藥品”投入品中37種禁限用獸藥零檢出的產(chǎn)品作為空白樣品,添加一系列濃度的各物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液,制得系列加標(biāo)樣品,按“1.3”方法前處理后供超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定,以各化合物定量離子的峰面積(Y)為縱坐標(biāo),質(zhì)量濃度(X)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,各物質(zhì)的線性方程、相關(guān)系數(shù)見表3。結(jié)果表明,各禁限獸藥均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)(r)均不小于0.991。根據(jù)信噪比(S/N)為3計(jì)算得到該方法檢測(cè)各目標(biāo)化合物的檢出限(LOD),根據(jù)S/N=10計(jì)算得到該方法檢測(cè)各目標(biāo)化合物的定量下限(LOQ),得到LOD為0.156~1.94 μg/kg,LOQ為0.520~6.47 μg/kg,方法靈敏度較高。

        表3 37種獸藥的線性關(guān)系、檢出限、定量下限、加標(biāo)回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Table 3 Linear relationships,LODs,LOQs,spiked recoveries and relative standard deviations of 37 veterinary drugs

        (續(xù)表3)

        2.4.2 回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差對(duì)空白基質(zhì)進(jìn)行低、中、高3個(gè)水平的加標(biāo),進(jìn)行回收率測(cè)定,除氯霉素、金剛烷胺的3個(gè)加標(biāo)水平為1.00、2.00、6.00 μg/kg外,磺胺類、硝基咪唑類、苯并咪唑類、甲砜霉素、氟苯尼考的3個(gè)加標(biāo)水平均為50.0、100、200 μg/kg,每個(gè)水平做6次平行,考察Waters PRiMEHLB固相萃取柱作為凈化柱的回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。得到不同加標(biāo)水平下的平均回收率為71.6%~119%,RSD為1.2%~15%。該方法的回收率及精密度良好,滿足實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的相關(guān)要求。

        2.5 實(shí)際樣品測(cè)定

        對(duì)隨機(jī)購買的170份水產(chǎn)養(yǎng)殖“非藥品”(包括底質(zhì)改良劑、水質(zhì)改良劑、消毒劑、殺菌殺蟲和殺藻劑、中草藥制劑5類)開展檢測(cè),有32個(gè)產(chǎn)品檢出藥物,檢出率為18.8%,上述5類藥品的檢出率分別為9.52%、15.4%、10.0%、23.3%、21.4%(圖2)。其中中草藥制劑中有10個(gè)產(chǎn)品同時(shí)檢出多種磺胺類及酰胺醇類藥物。從檢出品類看,禁用抗病毒類藥物金剛烷胺檢出1次,限用獸藥磺胺類藥物(磺胺甲基異唑、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹啉、磺胺嘧啶、甲氧芐啶)和酰胺醇類藥物(氟苯尼考、甲砜霉素)為投入品中主要添加的風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì),其含量范圍為1.21~6.57×103μg/kg。各檢出藥物的具體名稱、檢出頻次、檢出含量范圍見表4。結(jié)果表明,部分水產(chǎn)養(yǎng)殖投入品中存在非法添加獸藥的情況,應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)管。

        表4 實(shí)際樣品檢測(cè)結(jié)果Table 4 Test results of practical samples

        圖2 不同類別“非藥品”投入品的檢出情況Fig.2 The detection of different types in“non-pharmaceutical”inputs

        3 結(jié)論

        本研究建立了固相萃取/超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定水產(chǎn)養(yǎng)殖“非藥品”投入品中37種禁限獸藥(包括磺胺類、酰胺醇類、硝基咪唑類、苯并咪唑類、抗病毒類5類藥物)殘留的分析方法,實(shí)現(xiàn)了上述5類獸藥殘留的同時(shí)分析,大幅提高了檢測(cè)效率。方法穩(wěn)定性好,靈敏度、準(zhǔn)確度高,可為“非藥品”投入品的檢測(cè)工作提供有力的技術(shù)支持。

        猜你喜歡
        投入品磺胺甲酸
        成立20余載,水產(chǎn)投入品3.0時(shí)代,這家動(dòng)保企業(yè)憑何成為養(yǎng)殖戶的“首選熱愛”?
        農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)《通知》進(jìn)一步加強(qiáng)水產(chǎn)養(yǎng)殖用投入品監(jiān)管
        規(guī)模化奶牛場(chǎng)投入品的管理
        試談水產(chǎn)養(yǎng)殖投入品制售企業(yè)應(yīng)該如何面對(duì)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的監(jiān)管
        磺胺嘧啶銀混懸液在二度燒傷創(chuàng)面治療中的應(yīng)用
        甲酸治螨好處多
        甲酸鹽鉆井液完井液及其應(yīng)用之研究
        養(yǎng)豬不能濫用磺胺藥
        基于環(huán)己烷甲酸根和2,2′-聯(lián)吡啶配體的雙核錳(Ⅱ)配合物的合成與表征
        兩種磺胺嘧啶鋅配合物的合成、晶體結(jié)構(gòu)和熒光性質(zhì)
        99国产精品久久99久久久| 国产AV无码无遮挡毛片| 久久99精品久久久久久久清纯| 亚洲一区二区在线| 日韩精品一区二区av在线| 亚洲一区亚洲二区视频在线| 国产av激情舒服刺激| 免费a级毛片无码| 97成人精品| 61精品人妻一区二区三区蜜桃| 青青久久精品一本一区人人| 蜜桃视频一区二区在线观看| 国产成人综合亚洲精品| 日韩无码电影| 日本一区二区三区精品免费| 无码人妻一区二区三区在线| 亚洲男人av天堂午夜在| 国产在线不卡AV观看| 久久久久久一本大道无码| 亚洲男人的天堂av一区| 又粗又硬又大又爽免费视频播放| 性夜夜春夜夜爽aa片a| 中文乱码字幕在线中文乱码| 日韩有码中文字幕在线观看| 高潮迭起av乳颜射后入| 国产丝袜一区二区三区在线不卡 | 亚洲AV无码乱码精品国产草莓| 东京热加勒比视频一区| 乱子伦在线观看| 日本精品人妻无码77777| 久久综合给日咪咪精品欧一区二区三| 人妻一区二区三区免费看| 亚洲国产色一区二区三区| 黄色a级国产免费大片| 青春草在线视频精品| 亚洲一区二区三区在线视频| 人妻少妇精品视频专区| 精品视频入口| 久久中文字幕av一区二区不卡 | 国产av人人夜夜澡人人爽| 亚洲一区精品中文字幕|