周芳芳

（浙江康瑞檢測(cè)有限公司，浙江溫州 325200）

化學(xué)實(shí)驗(yàn)室是相關(guān)研究人員對(duì)化學(xué)合成、分析檢測(cè)的一個(gè)重要場(chǎng)所，完善的化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的建立，才能讓研究結(jié)果更加準(zhǔn)確，從而減少環(huán)境因素對(duì)結(jié)果的影響[1]?；瘜W(xué)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要以中藥材的理化檢測(cè)、合成物的分析檢測(cè)以及相關(guān)的含量和殘留測(cè)定為主。

1 影響化學(xué)檢測(cè)的因素

以化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)中藥材的質(zhì)量檢測(cè)為例。一般中藥材在藥典中都有相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，根據(jù)藥典提供的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行理化實(shí)驗(yàn)，從檢測(cè)結(jié)果上對(duì)比相關(guān)數(shù)據(jù)，從而確定藥材是否為合格藥材。實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境等會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，從而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果存在差異。

中藥材質(zhì)量檢測(cè)主要以性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定為主。性狀檢測(cè)主要是根據(jù)藥物的外形、氣味等特征判斷是否為相應(yīng)的藥材。這類檢測(cè)結(jié)果通常以拍照和描述的方式進(jìn)行。主要影響判斷的主要為光線、通風(fēng)以及檢測(cè)臺(tái)面的潔凈度。不穩(wěn)定的光源會(huì)導(dǎo)致藥材表面呈現(xiàn)不同的光澤和反射，導(dǎo)致在描述外形時(shí)可能出現(xiàn)顏色偏差，從而使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。通風(fēng)狀態(tài)不良會(huì)導(dǎo)致藥材檢驗(yàn)前后氣味的殘留，從而讓藥材本身的氣味被掩蓋，造成檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。

藥物的鑒別主要對(duì)切面、粉末以及主要成分進(jìn)行分析。通過對(duì)藥物進(jìn)行切塊觀察判斷相應(yīng)斷口是否有該藥材的特有屬性，所以實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)當(dāng)有相應(yīng)工具對(duì)其進(jìn)行分離，確保斷面的整潔。對(duì)藥物粉末的鑒別主要以顯微鑒別為主，在顯微鏡下觀察相對(duì)應(yīng)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。對(duì)主要成分鑒別主要通過簡(jiǎn)單的化學(xué)反應(yīng)提取出藥材中的相關(guān)成分，通過薄層色譜法，在同等條件下根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比鑒別藥物的具體情況。同時(shí)，需要在鑒別過程中嚴(yán)格控制外界對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響。不同的切片工具會(huì)導(dǎo)致藥材的橫切面出現(xiàn)不同的物理特性，所以實(shí)驗(yàn)室工具的配備也是一個(gè)影響因素。在顯微鑒別中，需要電子顯微鏡，其儀器的存放和使用環(huán)境都有嚴(yán)格控制，應(yīng)當(dāng)滿足顯微鏡的存放和使用標(biāo)準(zhǔn)，具體環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)以顯微鏡說明書中的安裝準(zhǔn)備為準(zhǔn)。因此，相對(duì)獨(dú)立的檢測(cè)環(huán)境也是重要的影響因素。在成分鑒別中，需要對(duì)藥材進(jìn)行提取分離，提取應(yīng)當(dāng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，在薄層色譜檢測(cè)時(shí)。環(huán)境濕度、顯色條件控制、操作人員的熟練程度都會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。

在藥材檢查的過程中，需要對(duì)藥材進(jìn)行水分、灰分、金屬殘留或農(nóng)藥殘留等有關(guān)檢查。在水分檢測(cè)時(shí)會(huì)用到干燥器或烘箱等，在對(duì)藥材進(jìn)行干燥時(shí)，會(huì)將藥材置于烘箱中進(jìn)行烘烤，搬運(yùn)過程中，為了防止吸水，還應(yīng)放置在干燥器中進(jìn)行操作。在測(cè)量重量時(shí)，還要保證天平的準(zhǔn)確性。所以烘箱干燥室的建立以及天平室的建立都應(yīng)嚴(yán)格符合要求，不能簡(jiǎn)單將各類儀器混在一起，可能出現(xiàn)的相互影響都會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確的問題。在進(jìn)行灰分測(cè)定時(shí)，需要用馬弗爐將藥材加熱至完全成灰，其中影響最大的因素就是放置藥材的坩堝必須達(dá)到恒重。對(duì)于金屬殘留和農(nóng)藥殘留，就需要用氣相色譜進(jìn)行測(cè)定，所以相關(guān)的分析實(shí)驗(yàn)室建立也是有必要的。

在藥材的含量測(cè)定中，通常為減少提取過程的損失，一般將藥材進(jìn)行簡(jiǎn)單處理后，利用色譜技術(shù)進(jìn)行含量測(cè)定。根據(jù)藥材的性質(zhì)不同，選擇不同的分析色譜，常規(guī)藥品利用液相色譜進(jìn)行檢測(cè)、揮發(fā)性或油性藥物用氣相色譜進(jìn)行檢驗(yàn)，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果來確定有效成分含量，從而確定藥材的優(yōu)劣。所以儀器檢測(cè)的過程必須準(zhǔn)確，儀器狀態(tài)以及藥物的溶解狀態(tài)都會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生較大影響。

2 影響分析檢測(cè)的因素

分析檢測(cè)中，以各種色譜檢測(cè)最為常見，常用的色譜技術(shù)主要為薄層色譜、液相色譜以及氣相色譜。各類色譜在應(yīng)用中，環(huán)境、操作人員的水平以及儀器狀態(tài)對(duì)檢測(cè)結(jié)果都有影響[2]。

在薄層色譜檢測(cè)中，需要對(duì)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行點(diǎn)板、展開、顯色、檢測(cè)。在點(diǎn)板中，需要操作人員將樣品利用毛細(xì)管點(diǎn)至薄層板下沿1cm 左右。要求樣品點(diǎn)越小越好，最大不能超過4mm，并且樣品與標(biāo)準(zhǔn)品必須保持同一高度。所以在點(diǎn)板過程中操作人員的能力差異越大，對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響就會(huì)越大。目前也可進(jìn)行自動(dòng)點(diǎn)樣器進(jìn)行點(diǎn)板，其點(diǎn)板效果比一般操作人員更好，但仍比不上熟練的操作人員，所以可根據(jù)實(shí)際需求進(jìn)行靈活選擇。在展開過程中，展開劑的配比、展開缸的密封性等都會(huì)影響展開效果。展開劑一般按文獻(xiàn)要求配置一定比例溶劑，在量的要求方面，不能沒過樣品且保證樣品能夠完全展開。展開缸的破損也會(huì)導(dǎo)致內(nèi)部氣體均一度不同，造成樣品的比移值出現(xiàn)較大的波動(dòng)。顯色基于樣品可產(chǎn)生相應(yīng)的差異，一些樣品需要加熱顯色，在加熱過程中要關(guān)注顯色情況及時(shí)改變加熱時(shí)間。加熱不均勻?qū)е戮植砍霈F(xiàn)黑點(diǎn)，加熱時(shí)間短會(huì)導(dǎo)致顏色不明顯、時(shí)間長會(huì)出現(xiàn)樣品點(diǎn)碳化。在檢測(cè)時(shí)，通常在不同波長紫外線下檢測(cè)或日光下檢測(cè)，根據(jù)樣品需求選擇不同條件即可。在薄層色譜檢測(cè)中，要注意環(huán)境濕度的變化，在同等條件下濕度不同檢測(cè)結(jié)果也會(huì)呈現(xiàn)較大差異[3]。對(duì)薄層色譜影響的因素主要為環(huán)境濕度以及操作人員水平，其對(duì)儀器依賴程度相比其他色譜會(huì)小很多。

在液相色譜檢測(cè)中，儀器狀態(tài)和相關(guān)流動(dòng)相的配制是影響結(jié)果的重要因素。在進(jìn)行液相色譜檢測(cè)時(shí)，將樣品配制成實(shí)驗(yàn)要求濃度，放入進(jìn)樣器，流動(dòng)相將樣品帶入色譜柱（固定相）中，根據(jù)極性大小或吸附能力不同，分段流入檢測(cè)器中進(jìn)行檢測(cè)，從而得到相應(yīng)色譜圖[4]。根據(jù)色譜柱的規(guī)格不同，其載樣量也會(huì)有一定的差異，所以配制合適濃度的樣品至關(guān)重要。在流動(dòng)相的配置中，根據(jù)要求會(huì)添加適當(dāng)?shù)乃峄驂A來改變pH，色譜柱有最高和最低的耐酸堿程度，所以要保證流動(dòng)相pH 不能超過其范圍。樣品結(jié)構(gòu)中羥基和羧基比例不同也會(huì)導(dǎo)致樣品呈現(xiàn)不同的酸堿度。因此，在流動(dòng)相具體配制時(shí)，要根據(jù)樣品來選擇不同pH。流動(dòng)相的不同對(duì)樣品分離效果會(huì)產(chǎn)生較大影響，可能會(huì)造成樣品之間分離度不能達(dá)到檢測(cè)要求。色譜柱的柱效以及色譜柱類型也是影響液相色譜檢測(cè)的一個(gè)重要因素。在色譜柱類型的選擇上，需要根據(jù)樣品的極性大小進(jìn)行選擇，在反向色譜中一般樣品選擇常規(guī)C18柱，極性大的樣品就需要用AQ 柱進(jìn)行分離。當(dāng)色譜柱柱效下降時(shí)就會(huì)出現(xiàn)拖尾或分叉等情況，就需要進(jìn)行色譜柱更換。

在氣相色譜檢測(cè)中，樣品狀態(tài)和氣體（流動(dòng)相）純度是重要的影響因素。氣相色譜在工作時(shí)會(huì)通過進(jìn)樣器將樣品氣化后通過氣體帶入色譜柱上通過升溫程序?qū)⒏鹘M分進(jìn)行分離，從而達(dá)到檢測(cè)與檢驗(yàn)的需求[5]。氣相色譜對(duì)樣品中的含水量有較高的要求，水氣化后在氣相色譜柱上容易殘留，會(huì)導(dǎo)致在整個(gè)色譜圖上都會(huì)有水的存在，影響檢測(cè)結(jié)果。氣相色譜主要用于檢測(cè)揮發(fā)油類物質(zhì)，其可以較好地分離。在氣體的供應(yīng)上主要以氮?dú)夂蜌錃鉃橹?，為保證氣體純度，一般采用市面購買的壓縮氣體，所以選擇適當(dāng)?shù)臍怏w供應(yīng)商就尤為重要。氣相色譜主要依靠氣體進(jìn)行測(cè)量樣品，所以要及時(shí)檢查氣體相關(guān)余量，確保氣體供應(yīng)充足，保證儀器穩(wěn)定，減少儀器本身對(duì)結(jié)果的影響。

3 控制實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量的方法

3.1 建立完善獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室

對(duì)于化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的建立，需要具有完善且獨(dú)立的場(chǎng)所供其放置相關(guān)儀器，從而保證各儀器之間不會(huì)相互影響，從而提高檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量。在理化實(shí)驗(yàn)室中，要滿足每個(gè)研究員有一個(gè)獨(dú)立的通風(fēng)櫥進(jìn)行操作，防止各實(shí)驗(yàn)樣品的不同而產(chǎn)生相互交叉影響，也保證實(shí)驗(yàn)員在操作時(shí)減少試劑對(duì)身體的傷害。

對(duì)于化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中會(huì)用到的檢測(cè)儀器，應(yīng)當(dāng)分類建立獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室。烘箱以及馬弗爐屬于烘烤設(shè)備，設(shè)備的散熱與用電需求會(huì)高于普通實(shí)驗(yàn)室，若放在普通實(shí)驗(yàn)室會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室內(nèi)局部溫度的差異，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確，而大功率用電設(shè)備在普通實(shí)驗(yàn)室也容易出現(xiàn)用電安全事故。

對(duì)于電子顯微鏡等精密儀器，需要長期的維護(hù)，其對(duì)電壓電流的要求也會(huì)更高。在精密儀器的安裝時(shí)，要根據(jù)儀器要求適當(dāng)配備穩(wěn)壓器等設(shè)備，保證儀器在運(yùn)行時(shí)的穩(wěn)定[6]。

天平的放置也需要有獨(dú)立且無對(duì)流空氣產(chǎn)生的房間存放，在精密的分析天平上，空氣的流動(dòng)也會(huì)造成數(shù)據(jù)波動(dòng)。對(duì)于需要精密稱量的樣品，還要防止因吸潮而帶來的影響。所以天平室還要保持相對(duì)干燥，在天平內(nèi)部，應(yīng)當(dāng)根據(jù)需求放置干燥劑，保證稱量的準(zhǔn)確。

3.2 定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)

實(shí)驗(yàn)室常用的大度吸量管、量筒、容量瓶等精密玻璃儀器需要進(jìn)行檢查。在確保天平準(zhǔn)確的情況下，用吸量管等量取相應(yīng)刻度的水，再將其中的水進(jìn)行稱量。根據(jù)水的密度計(jì)算應(yīng)有水的體積，從而確定相應(yīng)儀器精密度是否合格。

對(duì)于分析儀器，以液相色譜為例。日常要檢查相應(yīng)的流動(dòng)相管理是否有漏液的情況，若發(fā)現(xiàn)漏液要及時(shí)更換相應(yīng)管路。每次在進(jìn)行樣品分析前應(yīng)當(dāng)走一針標(biāo)準(zhǔn)樣品，對(duì)比之前標(biāo)樣，查看標(biāo)樣出峰位置是否出現(xiàn)偏移，或?qū)?biāo)樣連續(xù)進(jìn)樣3～5針，對(duì)比出峰時(shí)間，看是否有異常。在日常樣品分析時(shí)要注意查看壓力是否出現(xiàn)異常波動(dòng)，在樣品分析過程中，大部分儀器問題都可以通過壓力波動(dòng)進(jìn)行反映。

3.3 提升操作人員水平

對(duì)于日常理化分析，涉及一些操作習(xí)慣，需要研究人員注意和改正。例如，在進(jìn)行薄層色譜操作時(shí)，手動(dòng)點(diǎn)樣需要少量多次，垂直于薄層板。在操作時(shí)根據(jù)樣品需求選擇適當(dāng)?shù)拿?xì)管，垂直薄層板，每滴液體及時(shí)吹干再進(jìn)行第二次點(diǎn)樣，這樣才能保證最后點(diǎn)樣大小不超過4mm。

在化學(xué)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中，對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員的操作水平有較高的要求，這樣才能保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確，從而減少由操作引起的實(shí)驗(yàn)誤差。

3.4 做好陰性對(duì)照

在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析時(shí)，通常會(huì)在實(shí)驗(yàn)的同時(shí)做一組陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)。在對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析時(shí)對(duì)比陰性對(duì)照結(jié)果，除去由溶劑和試劑等造成的影響。以氣相色譜為例，在氣相色譜的樣品測(cè)量中，常會(huì)以乙醇作為溶劑。為排除乙醇帶來影響，可以在樣品測(cè)量之前放入一針乙醇，用相同的方法進(jìn)行測(cè)定。再放入待測(cè)樣品。在結(jié)果分析時(shí)，將乙醇圖譜作為背景進(jìn)行扣除，從而保證樣品分析時(shí)可以更準(zhǔn)確地分析各成分。所以陰性對(duì)照可以在結(jié)果分析時(shí)更加準(zhǔn)確，從而減輕環(huán)境和溶劑帶來的影響。

3.5 實(shí)驗(yàn)室間的對(duì)比

對(duì)檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量控制上，要注重不同實(shí)驗(yàn)室之間的對(duì)比，檢驗(yàn)相同方法在不同環(huán)境下的重復(fù)性[7]。在實(shí)際的分析檢驗(yàn)過程中，相同的方法也會(huì)由于儀器批次的不同和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的不同而造成一定的差異。在樣品檢測(cè)中，同樣使用C18柱，由于儀器之間的微小差異或色譜柱廠家的不同，也會(huì)出現(xiàn)保留時(shí)間上的差異。一般這種差異會(huì)在毫秒內(nèi)，對(duì)樣品結(jié)果的分析不會(huì)產(chǎn)生過大影響。但在質(zhì)量控制上也應(yīng)當(dāng)進(jìn)行驗(yàn)證和控制，防止出現(xiàn)超出時(shí)間范圍的差異，從而導(dǎo)致在結(jié)果上的不準(zhǔn)確。實(shí)驗(yàn)室間的對(duì)比也可以全方位了解本實(shí)驗(yàn)室在檢測(cè)水平上的差異，幫助實(shí)驗(yàn)室建立完善的檢測(cè)體系。

4 質(zhì)量控制體系的建立

4.1 質(zhì)量控制體系設(shè)計(jì)

質(zhì)量控制系統(tǒng)的設(shè)計(jì)需要相關(guān)的從業(yè)人員有一定知識(shí)積累和工作經(jīng)驗(yàn)，根據(jù)整個(gè)檢測(cè)流程設(shè)計(jì)相應(yīng)的檢查檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)[8]。在質(zhì)量檢測(cè)前需要對(duì)樣品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，一般參照具體樣品確定相應(yīng)的處理手段。在檢測(cè)過程中，需要利用標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)儀器的進(jìn)行檢驗(yàn)。在檢測(cè)后，要注重對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)的審核。對(duì)于檢測(cè)不合格的樣品要初步分析原因，確定是檢測(cè)過程的不合理造成結(jié)果偏差還是樣品本身導(dǎo)致問題的出現(xiàn)，從而提高實(shí)驗(yàn)室樣品檢測(cè)的質(zhì)量。

4.2 質(zhì)量控制體系文件編制

化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的工作中，對(duì)質(zhì)量控制中的操作標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該有具體的判斷標(biāo)準(zhǔn)，書面的文件也是檢測(cè)操作人員的重要參考標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)量控制的文件在編制的過程中，不僅要符合相關(guān)的管理規(guī)范要求，也應(yīng)當(dāng)將一些日常操作習(xí)慣的內(nèi)容編制入文件中，確保操作人員不會(huì)因?yàn)殄e(cuò)誤的操作而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果受到影響。

4.3 質(zhì)量控制體系運(yùn)行與審核

在質(zhì)量控制體系編撰完成后，需要對(duì)于初版的質(zhì)量控制文件進(jìn)行試運(yùn)行。在運(yùn)行的過程中，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題并做出修改，避免運(yùn)行中不合理情況的出現(xiàn)。對(duì)于其中具體的操作和數(shù)據(jù)要求，需要與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比。例如，在編制過程若出現(xiàn)恒重一詞，就需要對(duì)最新版藥典進(jìn)行查閱，在不同資料文獻(xiàn)上記載是有一定差異的。所以在進(jìn)行審核時(shí)，要注意與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比，避免出現(xiàn)達(dá)不到檢測(cè)要求的情況出現(xiàn)。

5 結(jié)束語

質(zhì)量控制在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中一直起著積極的作用，標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室的建立、規(guī)范的操作手法、環(huán)境溫度濕度的變化等都會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。所以提升實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的結(jié)果的準(zhǔn)確性，需要從多方面進(jìn)行改善，在完善實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的同時(shí)，提升操作人員的能力，在此基礎(chǔ)上，也應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)相關(guān)文件的建立與建設(shè)。