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        山東桃褐腐病病原菌種群鑒定及致病性分析

        2023-01-01 00:00:00李志偉汪少麗劉保友杜建峰王英姿
        果樹學(xué)報 2023年2期

        關(guān)鍵詞:桃褐腐??;山東;種群;rDNA-ITS;致病力

        中圖分類號:S662.1 S436.621 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1009-9980(2023)02-0327-13

        我國桃種植面積和產(chǎn)量分別為89.0 萬hm2 和1 599.3 萬t,均居世界第1 位,我國有20 個省份的桃種植面積超過1 萬hm2,山東省位居首位,其中蒙陰縣4.33 萬hm2,為中國桃第一大種植縣[1]。桃褐腐病又名菌核病、果腐病、實(shí)腐病,是由子囊菌鏈核盤菌Monilinia spp. (無性態(tài)為Monilia)引起的一種重要桃病害,世界產(chǎn)桃區(qū)均可發(fā)生[2]。桃褐腐病主要危害果實(shí),也可危害花、葉和枝梢。果實(shí)自幼果期至成熟期均可受害,若生長后期多雨常流行成災(zāi),發(fā)病率超過80%甚至絕收[3],還可在運(yùn)輸、貯藏期發(fā)生,使果實(shí)喪失商品價值[4]。

        在世界范圍內(nèi),對核果和仁果類果樹造成褐腐病的病原主要有6 種[5],分別為核果鏈核盤菌Monilinialaxa、果生鏈核盤菌Monilinia fructigena[6]、美澳型核果鏈核盤菌Monilinia fructicola[7]、梅生鏈核盤菌Monilinia mumecola (synonymy: Monilia mumecola)[8]、多子座鏈核盤菌Monilinia polystroma(synonymy: Monilia polystroma) [9]和云南鏈核盤菌Monilinia yunnanensis (synonymy: Monilia yunnanensis)[10]。目前,造成中國桃褐腐病病原菌的種主要為Monilinia fructicola、Monilia yunnanensis 和Moniliamumecola,其中Monilinia fructicola 是優(yōu)勢種[3,10-11],對中國經(jīng)濟(jì)危害最大、地理分布最廣,在中國各桃產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生[12-16]。Monilia yunnanensis 目前僅在中國有報道,為云南省的優(yōu)勢種,此外在陜西、北京、河北、甘肅及遼寧有分布[10-11,17]。

        不同桃褐腐病病原菌在菌落形態(tài)上存在較大差異,可從菌落顏色、生長速率、孢子形態(tài)及產(chǎn)孢量等形態(tài)學(xué)進(jìn)行初步鑒定[18-19]。但對一些種間形態(tài)差異較小、培養(yǎng)時出現(xiàn)性狀變異等不典型菌株的鑒定,傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)鑒定就會受到限制。近年來形態(tài)學(xué)觀察結(jié)合分子生物學(xué)鑒定的方法被廣泛應(yīng)用于菌種的鑒定分類[20-22]。談彬[23]采用形態(tài)學(xué)觀察與分子生物學(xué)鑒定方法將12 個省市23 株桃褐腐病病原菌確定為Monilinia fructicola 和Monilia yunnanensis。紀(jì)兆林等[24]的研究表明,山東、遼寧等桃主產(chǎn)區(qū)的桃褐腐病病原菌菌落形態(tài)存在明顯差異,并將桃褐腐病病原菌鑒定為Monilinia fructicola 和Monilia yunnanensis[2]。周芳[25]通過形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定明確了山西省81株桃褐腐病病原菌的分類地位,其中75 株為Monilinia fructigena,15 株為Monilinia laxa,3 株為Monilinia fructicola。另外,致病力方面也存在較大差異,談彬[23]證實(shí)桃褐腐病病原菌致病力差異與多聚半乳糖醛酸酶基因PG1 相關(guān)。

        山東省作為全國產(chǎn)桃大省,對桃褐腐病的研究報道主要集中在病害防治、桃褐腐病病原菌發(fā)病規(guī)律等方面,未見關(guān)于褐腐病病原菌種群鑒定及致病力分化方面的研究報道。為此,筆者在本研究中采集了山東省主要桃產(chǎn)區(qū)典型果實(shí)褐腐病樣本,并通過對其進(jìn)行形態(tài)觀察及rDNA-ITS 序列鑒定,對其種群結(jié)構(gòu)進(jìn)行聚類分析,并對其在葉片上的致病力進(jìn)行比較分析,為明確山東省各桃主產(chǎn)區(qū)桃褐腐病病原菌種類、深入研究其致病機(jī)制、制定適合不同產(chǎn)區(qū)的褐腐病防治技術(shù)提供理論依據(jù)。

        1 材料和方法

        1.1 材料

        自山東省臨沂、煙臺、威海等8 市不同地區(qū)采集具有桃褐腐病典型癥狀的發(fā)病果實(shí)、葉片、枝條,將發(fā)病樣品用紙袋分裝帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分離純化,4 ℃保存?zhèn)溆?;致病力測定所用桃樹葉片品種為金秋紅蜜,采集自煙臺市農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)農(nóng)場內(nèi)。

        1.2 試劑及儀器

        馬鈴薯葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar,PDA)培養(yǎng)基,生工生物工程(上海)股份有限公司;真菌基因組DNA提取試劑盒,天根生化科技(北京)有限公司;BioPhotometer Plus 核酸蛋白測定儀,Eppendorf中國有限公司;DM750 顯微鏡,德國萊卡公司;SPX-250 生化培養(yǎng)箱,上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司;RXZ智能型人工氣候箱,寧波江南儀器廠。

        1.3 方法

        1.3.1 桃褐腐病病原菌的分離純化 采用單孢分離法進(jìn)行分離。用滅菌挑針挑取發(fā)病部位外緣較新鮮的孢子堆,轉(zhuǎn)接至新鮮PDA平板上培養(yǎng),并經(jīng)科赫氏法則驗(yàn)證,最后將純化好的菌落切小塊保存于滅菌的25%甘油中,于4 ℃下保存?zhèn)溆茫ū?)。

        1.3.2 桃褐腐病病原菌的形態(tài)學(xué)鑒定 將單孢分離純化后的菌株分別接種到PDA 平板上,置于25 ℃全黑暗生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d 后,觀察菌落形態(tài)和色澤,測量菌落直徑,并在顯微鏡下觀察分生孢子、分生孢子梗形態(tài)特征,觀察10 個以上視野,每個視野觀察50個孢子,對其進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。

        1.3.3 桃褐腐病病原菌的分子生物學(xué)鑒定 PDA平板上活化菌株5 d 后,將菌絲刮下置于滅菌研缽中加液氮研磨,采用基因組DNA提取試劑盒提取病原菌基因組,于-20 ℃冰箱中保存,備用。委托生工生物工程(上海)股份有限公司利用rDNA-ITS序列引物ITS1(5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’)/ITS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)進(jìn)行菌株ITS 序列測定。測序所得序列與NCBI 中已知的基因序列進(jìn)行BLAST同源性檢索,從NCBI數(shù)據(jù)庫中下載與待測菌株相似度99%以上的部分桃褐腐菌株及其序列,采用最大似然法和鄰接法,運(yùn)用MEGA 6.0 軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

        1.3.4 桃褐腐病病原菌菌絲生長速率測定及產(chǎn)孢量測定 將各桃褐腐病病原菌菌株于PDA平板上25 ℃培養(yǎng)5 d,采用十字交叉法測量菌落的直徑,按照如下公式計算菌絲的平均生長速率:菌絲平均生長速率=(菌落直徑-0.5 cm)/5 d;利用DPS 18.10 高級版,采用DMRT法進(jìn)行顯著性分析,采用歐氏距離中的非加權(quán)組平均法(UPGMA)對不同菌株生長速率進(jìn)行聚類分析,將菌株按照生長速率分為不同等級。

        測量產(chǎn)孢量時,于菌落邊緣打取5 mm菌餅,接種于PDA培養(yǎng)基上,每菌株3 次重復(fù),于25 ℃暗培養(yǎng)7 d。用10 mL滅菌水將所有孢子洗下,搜集孢子懸浮液,加入10 顆小玻璃珠,振蕩器振蕩1 min,使孢子分散均勻。各菌株孢子懸浮液濃度用血球計數(shù)板計數(shù)。每個菌株3 次重復(fù),取平均值計算產(chǎn)孢量。

        1.3.5 桃褐腐病病原菌致病力測定及聚類分析 將4 ℃下保存的菌種接種于PDA 平板上,25 ℃恒溫培養(yǎng)5 d 后,用0.5 cm 的打孔器在菌落邊緣打孔制備菌餅。用75%乙醇進(jìn)行桃葉片表面消毒后用無菌水沖洗3 次,待葉片表皮自然風(fēng)干進(jìn)行有傷接種,用三號昆蟲針刺傷葉片背面表皮,每個菌株接種3 枚葉片,每枚葉片3 個接種點(diǎn),將上述菌餅帶菌絲一面緊貼刺傷部位,空白PDA菌餅為對照。用無菌水浸濕的脫脂棉包裹葉柄保鮮葉片,在葉片表面噴無菌水保濕,放置于溫度為25 ℃、相對濕度為70%、光照條件為16 h 光照/8 h 黑暗的人工氣候箱中培養(yǎng),觀察并記錄發(fā)病情況。采用十字交叉法測量病斑直徑,利用DPS 18.10 高級版對發(fā)病程度進(jìn)行差異顯著性及聚類分析。

        1.3.6 桃褐腐病病原菌菌絲生長速率及致病力相關(guān)性分析 利用Excel 對菌絲生長速率及致病力相關(guān)性進(jìn)行分析,0lt;|r|≤0.3,無相關(guān)性;0.3lt;|r|lt;0.8,弱相關(guān)性;|r|≥0.8,強(qiáng)相關(guān)性。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 桃褐腐病田間發(fā)病癥狀

        褐腐病病原菌可侵染核果及仁果植物的葉片、枝梢和果實(shí)等多個部位。葉片受害后,自葉邊緣開始變褐枯萎,干枯的病葉殘留枝上久不脫落(圖1-A);枝條受害后,產(chǎn)生菱形、不規(guī)則形的潰瘍病斑,初為黃褐色,后變?yōu)樯詈稚“甙枷?、界限明顯,不斷向上下擴(kuò)展蔓延,病斑處易形成流膠,可造成病部以上枝條干枯死亡甚至整個大枝枯死(圖1-B)。果實(shí)受害后,果面最初形成褐色圓形水潰狀小斑點(diǎn),后迅速擴(kuò)大造成全果腐爛,當(dāng)分生孢子梗突破病斑表層后,呈現(xiàn)成叢的同心輪紋狀的病癥,即分生孢子梗和分生孢子(圖1-C)。部分果實(shí)失水、干縮形成僵果,僵果落到地上,或懸掛枝上經(jīng)久不落。

        2.2 山東省不同地區(qū)桃褐腐病病原菌的分離鑒定

        2.2.1 桃褐腐病病原菌的形態(tài)學(xué)鑒定 對典型桃褐腐病樣本經(jīng)單孢分離純化后共獲得41 株菌株,從菌落形態(tài)觀察主要分為三大類。以THF-01 為代表的菌株:菌落邊緣較整齊,顏色呈灰黃色,產(chǎn)孢量豐富,為(14.49-20.11)×104個·cm-2(表2),孢子堆可形成同心圓環(huán)結(jié)構(gòu)(圖2-A1);菌落背面呈圓形邊緣淺灰色,中間顏色較深,邊緣及中心灰色菌圈間夾有白色菌圈(圖2-B1);分生孢子梗成串珠狀,不分枝或二叉狀分枝,分枝呈銳角形,產(chǎn)孢梗較短(圖2-C1);分生孢子無色單孢,串珠狀排列,卵圓形或檸檬形,分生孢子大小范圍為(15.3~18.9)μm×(13.4~14.8)μm,平均孢子大小為16.2~13.5 μm(圖2-D1)。

        以THF-06 為代表的菌株:菌落邊緣較整齊,菌絲呈暗灰色,氣生菌絲貼近培養(yǎng)皿(圖2-A2),產(chǎn)孢量稀少,為(0.36~0.43)×104個·cm-2( 表2);菌落背面黑褐色,邊緣呈灰白色,無明顯同心輪紋狀結(jié)構(gòu)(圖2-B2);分生孢子梗成串珠狀,不分枝或二叉狀分枝,分枝呈銳角形,產(chǎn)孢梗長短不一(圖2-C2);分生孢子無色單孢,串珠狀排列,卵圓形或檸檬形,分生孢子大小范圍為(14.9~18.0)μm×(13.6~14.9)μm,平均孢子大小為16.6~13.4 μm(圖2-D2)。

        以THF-14 為代表的菌株:菌落邊緣不整齊,呈不規(guī)則形或圓形,邊緣有明顯裂缺,菌絲灰白色,氣生菌絲較發(fā)達(dá)(圖2-A3),產(chǎn)孢量較少,為(8.43~9.47)×104個·cm-2(表2);菌落背面邊緣灰白色,中間深灰色及淺灰色交替呈同心輪紋狀(圖2-B3);分生孢子梗成串珠狀,不分枝或二叉狀分枝,分枝呈銳角形,產(chǎn)孢梗較長(圖2-C3);分生孢子無色單孢,串珠狀排列,卵圓形或檸檬形,分生孢子大小范圍為(15.6~18.2)μm×(14.4~15.8)μm,平均孢子大小為17.2~14.9 μm(圖2-D3)。

        2.2.2 桃褐腐病病原菌的分子生物學(xué)鑒定 從NCBIGenBank 下載相似性最高的同種和近似種褐腐病病原菌菌株以及桃樹黑斑病菌(Alternaria alter-nata,GenBank 登錄號為AF404664.1、OL958426.1)及炭疽病菌(Colletrichum gloeosporioides,GenBank登錄號為JX010152.1,AY423476.1)序列,用MEGA6.0 軟件進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析。采用最大似然法和鄰接法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹,自展值設(shè)為1000,基于rDNA-ITS 序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果表明,桃褐腐病病原菌菌株共分為三大類,第Ⅰ類包括THF-01 等菌株,共33 株,該類與Monilinia fructicola(GenBank登錄號為MZ047241.1,EF207419.1)聚在一個分支上,相似性高達(dá)99%,將其鑒定為Monilinia fructicola;第Ⅱ類包括THF-06 等菌株,共4 株,該類與Moniliayunnanensis(GenBank 登錄號為MW355895.1)聚在一起,相似性高達(dá)100%,將其鑒定為Moniliayunnanensis;第Ⅲ類包括THF-14 等菌株,共4 株,該類與Monilinia polystroma(GenBank 登錄號為LT615178.1、LT615192.1)聚在一個分支上,相似性為99%,將其鑒定為Monilinia polystroma(圖3)。

        2.2.3 山東省不同地區(qū)桃褐腐病病原菌的分布 經(jīng)形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)鑒定,確定山東省桃褐腐病病原菌為Monilinia fructicola、Monilia yunnanensis 和Monilinia polystroma,分別有33 株、4 株和4 株,其分離頻率分別為80.48%、9.76%和9.76%,具體分布如表1 所示。Monilinia fructicola 廣泛分布于山東省煙臺、青島等沿海及臨沂、濟(jì)南等內(nèi)陸大部分地區(qū),Monilia yunnanensis 僅存在于煙臺市,Moniliniapolystroma分布于煙臺市及青島市(表3)。

        2.3 山東省不同地區(qū)桃褐腐病病原菌菌絲生長速率分析

        對桃褐腐病病原菌菌絲生長速度進(jìn)行測定,結(jié)果顯示生長速率在0.47~1.09 cm?d-1之間(表2)。采用UPGMA對不同菌株生長速率進(jìn)行聚類分析(圖4),當(dāng)歐式距離取0.7時,41個供試菌株的生長速率被劃分為快速、中速和慢速3種類型。生長速率為快速類型的菌株有17株,占測定菌株的41.46%,菌株生長速率為0.95~1.09 cm?d-1,平均生長速率為1.00 cm?d-1;生長速率為中速類型的菌株為9 株,占測定菌株的21.95%,菌株生長速率為0.79~0.94 cm?d-1,平均生長速率為0.87 cm?d-1;生長速率為慢速類型的菌株有15株,占測定菌株的36.59%,菌株生長速率為0.47~0.75 cm?d-1,平均生長速率為0.62 cm?d-1。結(jié)果表明,山東省桃褐腐病病原菌以快、慢生長速率類型為主。

        2.4 山東省不同地區(qū)桃褐腐病病原菌致病力分析

        將桃褐腐病病原菌有傷接種到離體桃葉片,測量其病斑大小,結(jié)果顯示不同菌株對桃葉片的致病力存在明顯差異(表2)。采用UPGMA對不同桃褐腐病病原菌菌株的致病力進(jìn)行了聚類分析(圖5-B),當(dāng)歐式距離取0.4 時,41 個供試菌株被劃分為強(qiáng)致病力、中等致病力、弱致病力三種類型。強(qiáng)致病力的菌株共14 株,占測定菌株的34.15%,病斑長度為1.11~2.43 cm;中等致病力的菌株共25 株,占測定菌株的60.97%,病斑長度為0.75~1.02 cm;弱致病力的菌株共2 株,占測定菌株的4.88%,無病斑產(chǎn)生(表2,圖5-A)。對接種發(fā)病的病斑進(jìn)行再次分離,經(jīng)柯赫氏法則及分子生物學(xué)鑒定確定為原病菌菌株。

        2.5 桃褐腐病病原菌菌絲生長速率及產(chǎn)孢量與致病力相關(guān)性分析

        對桃褐腐病病原菌菌株的生長速率與致病力進(jìn)行相關(guān)性分析(圖6),其相關(guān)系數(shù)r為0.297 5,0<|r|≤0.3,顯示菌絲生長速率與致病力之間無相關(guān)性;對桃褐腐病病原菌菌株的產(chǎn)孢量與致病力進(jìn)行相關(guān)性分析(圖7),其相關(guān)系數(shù)r 為0.030 0,0<|r|≤0.3,顯示產(chǎn)孢量與致病力之間無相關(guān)性。

        3 討論

        山東省桃種植面積和產(chǎn)量均為中國第一,桃已成為山東省主導(dǎo)的水果產(chǎn)業(yè),是全國第一產(chǎn)桃大省。桃褐腐病病原菌可在花期至收獲貯藏期造成嚴(yán)重危害,嚴(yán)重威脅桃產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展[3-4,26]。而不同產(chǎn)區(qū)的桃褐腐病病原菌在形態(tài)及致病力方面均存在較大差異[2,23],因此針對不同桃褐腐病病原菌種類制定適合不同產(chǎn)區(qū)的防治技術(shù)對于桃褐腐病病原菌的防控至關(guān)重要。

        筆者在本研究中對山東桃褐腐病病原菌進(jìn)行菌落形態(tài)觀察及ITS 序列比對分析,確定了山東省桃褐腐病病原菌主要為Monilinia fructicola,而Moniliayunnanensis 和Monilinia polystroma 占比較低。在形態(tài)學(xué)觀察鑒定時發(fā)現(xiàn),3 種桃褐腐病病原菌在PDA培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)存在較大差異,分生孢子梗長短不一,存在顯著差異,分生孢子形態(tài)無明顯差異,但產(chǎn)孢量存在顯著差異:Monilinia fructicola產(chǎn)孢量最多,Monilinia polystroma 產(chǎn)孢量次之,Moniliayunnanensis 產(chǎn)孢量最少。其中Monilinia fructicola形態(tài)與周芳[25]、Hu等[10]及尹良芬[3]對Monilinia fructicola的菌落形態(tài)描述一致,且該菌種在山東省占比最大,這與紀(jì)兆林等[24]對中國桃產(chǎn)區(qū)桃褐腐病病原菌的鑒定結(jié)果一致,在山東省青島及泰安地區(qū)分離到的桃褐腐病病原菌均鑒定為Monilinia fructicola,且占比最大,而周芳[25]對山西省桃褐腐病病原菌調(diào)查時發(fā)現(xiàn)Monilinia fructigena 在山西省桃褐腐病病原菌中為優(yōu)勢菌群,這也證實(shí)了不同地區(qū)桃褐腐病病原菌菌群結(jié)構(gòu)差異較大,進(jìn)行廣泛深入的菌群結(jié)構(gòu)調(diào)查是有效防治桃褐腐病病原菌的重要研究基礎(chǔ)。

        Monilia yunnanensis 和Monilinia polystroma 占比較低可能與寄主選擇性及針對不同病原菌抗病性差異有關(guān)。僅在煙臺地區(qū)采集的Monilia yunnanensis為Hu 等[10]首次在蘋果和梨上發(fā)現(xiàn)的1 個新記錄種,其菌落形態(tài)特征與Hu等[10]及紀(jì)兆林等[24]的描述一致,產(chǎn)孢稀少,氣生菌絲緊貼培養(yǎng)基表面,難與培養(yǎng)基表面分離。Monilia yunnanensis 最早發(fā)現(xiàn)于云南,為云南的優(yōu)勢種,后來在北京、陜西及遼寧沈陽等部分地區(qū)也采集到[10-11,17],而筆者在本研究中首次發(fā)現(xiàn)證實(shí)在山東省桃果實(shí)上也分離得到了Moniliayunnanensis,這也暗示Monilia yunnanensis 傳播范圍在逐步擴(kuò)大,山東省乃至全國桃種植區(qū)褐腐病病原菌的種類日趨多樣化,對桃主產(chǎn)區(qū)進(jìn)行褐腐病病原菌的全面分離鑒定對其防控是十分必要的。

        41 株桃褐腐病病原菌菌株的菌絲生長速率也存在較大差異,菌絲生長速率從0.47~1.09 cm?d-1不等,聚類分析證實(shí),生長速率可被劃分為慢、中、快三大類,即使同一菌種不同菌株間菌絲生長速率也存在差異,這些差異或與地理氣候特點(diǎn)有關(guān),或是菌株適應(yīng)了當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件被賦予了一定的生物學(xué)特性。這暗示褐腐病病原菌存在豐富的生理生化多樣性,而這也為該病的防控帶來了一定的困難[24]。同時,菌絲生長速率的差異暗示可能在侵染寄主時存在致病力的差異,在對致病力進(jìn)行測定時發(fā)現(xiàn)41 株桃褐腐病病原菌確實(shí)在致病力方面存在較大差異,而致病力差異與菌絲生長速率差異類似,在不同菌種間不存在特異性。對其菌絲生長速率及致病力進(jìn)行相關(guān)性分析后證實(shí)二者無相關(guān)性,這也暗示在實(shí)際侵染寄主時菌絲擴(kuò)展速率并不能與致病力及危害性直接相關(guān)。41 株桃褐腐病病原菌的產(chǎn)孢量也存在較大差異,研究證實(shí)真菌的致病毒素在桃樹發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用[27],而毒素可由孢子萌發(fā)產(chǎn)生,產(chǎn)孢量多意味著產(chǎn)生毒素多,對寄主植物的致病力越強(qiáng)[28],但本研究中證實(shí)不同桃褐腐病病原菌的產(chǎn)孢量與致病力無相關(guān)性。致病力差異還與多種因素有關(guān),例如細(xì)胞壁降解酶活性及主要致病因子多聚半乳糖醛酸酶基因PG1 與桃褐腐病病原菌致病性密切相關(guān)[23]。因此,在不同桃褐腐病病原菌致病力差異機(jī)制方面應(yīng)進(jìn)行更深入全面的研究。

        筆者在本研究中對山東桃褐腐病病原菌種類進(jìn)行了較全面的鑒定及抗病性分析,初步確定了桃褐腐病病原菌的種類及占比。但仍存在部分地區(qū)菌株數(shù)較少的限制,今后有必要擴(kuò)大和增加不同產(chǎn)區(qū)褐腐病病原菌菌株數(shù)量,進(jìn)行更多地區(qū)桃褐腐病病原菌的生物學(xué)特性研究,并結(jié)合分子生物學(xué)研究,對其致病力機(jī)制進(jìn)行深入探索,完善不同產(chǎn)區(qū)病菌群體的多樣性分析,為不同產(chǎn)區(qū)桃褐腐病病原菌的有效防控提供理論基礎(chǔ)。

        4 結(jié)論

        引起山東省桃褐腐病病原菌有美澳型核果鏈核盤菌(Monilinia fructicola)、云南鏈核盤菌(Moniliayunnanensis)及多子座鏈核盤菌(Monilia polystroma),三者占比分別為80.48%、9.76%、9.76%,其中美澳型核果鏈核盤菌為優(yōu)勢種。3種桃褐腐病病原菌的菌絲生長速率、產(chǎn)孢量均與致病力無相關(guān)性。

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