王維維，張運(yùn)強(qiáng),3，周昭彬，向 瑋，劉自逵,3*

1.湖南啄米生物技術(shù)有限公司，長(zhǎng)沙 410300；2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128；3.湖南加農(nóng)正和生物技術(shù)有限公司，長(zhǎng)沙 410300

隨著我國(guó)人民生活水平的提高，注重品質(zhì)和個(gè)性的“三高（高收入、高學(xué)歷、高職位）”人群成為消費(fèi)主力軍，他們更加精致化、美學(xué)化、健康化。因此，對(duì)具有保健功能的優(yōu)質(zhì)食品更加關(guān)注。ω-3 PUFA（ω-3 polyunsaturated fatty acid，ω-3 多不飽和脂肪酸）包括ALA（α-亞麻酸）、EPA（二十碳五烯酸）和DHA（二十二碳六烯酸）。其中，DHA 由于其強(qiáng)大的功能以及無(wú)明顯副作用從ω-3 多不飽和脂肪酸脫穎而出。DHA 占大腦PUFA 總量的40%以上，能介導(dǎo)細(xì)胞存活、神經(jīng)炎癥、神經(jīng)發(fā)生和參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)[1]，大量研究結(jié)果表明大腦需要循環(huán)DHA 持續(xù)不斷的供應(yīng)，以此來(lái)取代信號(hào)分子產(chǎn)生過(guò)程中代謝掉的DHA，同時(shí)維持支持其他神經(jīng)生理過(guò)程所需的DHA[2-3]。DHA 代謝也有助于促進(jìn)視網(wǎng)膜的發(fā)育[4]，人體大腦所需的DHA 雖然可由ALA 轉(zhuǎn)化，但ALA 在局部合成DHA 的能力有限，進(jìn)入大腦的ALA 僅0.2%轉(zhuǎn)化為DHA[3]。而中國(guó)孕產(chǎn)婦及嬰幼兒補(bǔ)充DHA 共識(shí)專家組根據(jù)FAO 專家委員會(huì)和國(guó)際圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)會(huì)專家委員會(huì)建議中國(guó)孕婦每日攝入DHA 不少于200 mg[5]。因此，為保證人體每日所需DHA，需額外通過(guò)富含DHA 的食物來(lái)進(jìn)行補(bǔ)充。雞蛋被譽(yù)為全營(yíng)養(yǎng)食品，富含蛋白質(zhì)、脂肪、礦物質(zhì)和多種維生素[6]，雞蛋蛋黃中含有甘油三酯、磷脂和膽固醇等脂質(zhì)，占比99%以上，磷脂較多，DHA 在雞蛋中主要與磷脂中的sn-2 位結(jié)合，因此雞蛋中的DHA 為磷脂型DHA[7]。目前，關(guān)于富含DHA 的雞蛋大多為ω-3 PUFA 雞蛋，而ω-3 PUFA 中的EPA 對(duì)嬰幼兒凝血功能、生長(zhǎng)與智力發(fā)育有不利影響；EPA 會(huì)顯著地抑制嬰幼兒體內(nèi)內(nèi)源性花生四烯酸（ARA）的生物合成并導(dǎo)致嬰幼兒生長(zhǎng)緩慢，具有促進(jìn)兒童性早熟的副作用風(fēng)險(xiǎn)[8]。因此，低EPA 含量、高DHA 含量的DHA 成為孕媽、寶媽與嬰幼兒補(bǔ)充DHA 的首選食品。本試驗(yàn)以大午金鳳產(chǎn)蛋高峰期蛋雞為研究對(duì)象，研究裂殖壺微藻油對(duì)蛋雞采食量、產(chǎn)蛋率以及蛋中ω-3 PUFA 沉積的影響，旨在為微藻油在蛋雞使用以及蛋中DHA 富集提供相關(guān)的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

微藻油（蛋黃金）：批號(hào)20210516，由湖南啄米生物技術(shù)有限公司提供，實(shí)測(cè)DHA 含量占比為36.5%～39%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及分組

試驗(yàn)地點(diǎn)在加農(nóng)正和北園蛋雞場(chǎng)進(jìn)行，蛋雞及飼料均由湖南普泰養(yǎng)殖場(chǎng)提供。試驗(yàn)選擇單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)隨機(jī)選用34 周齡體況良好的大午金鳳蛋雞60 只，隨機(jī)分為4 個(gè)組，每組15只雞。其中，C 組為對(duì)照組，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧（不額外補(bǔ)充DHA），T1、T2 和T3 組分別在基礎(chǔ)日糧中添加微藻油0.3%、0.6%和0.9%。預(yù)試驗(yàn)為7 d，正式試驗(yàn)30 d，于試驗(yàn)第20 天和第30 天每組隨機(jī)挑選9 個(gè)雞蛋進(jìn)行ω-3 多不飽和脂肪酸含量檢測(cè)。

1.3 試驗(yàn)飼糧

蛋雞日糧為玉米豆粕型基礎(chǔ)日糧，由湖南普泰養(yǎng)殖場(chǎng)提供，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理

本試驗(yàn)采用地面平養(yǎng)方式，根據(jù)該品種蛋雞產(chǎn)蛋高峰期飼養(yǎng)管理進(jìn)行，自然光照加人工補(bǔ)光（16 h/d），光照強(qiáng)度15～20 lx，舍溫（20±2）℃，相對(duì)濕度50%～60%，自然通風(fēng)。試驗(yàn)期間自由采食和飲水（槽式自動(dòng)飲水器飲水，每天清洗飲水槽），每天喂料2次（07:00、15:00），添加量以料槽內(nèi)略有剩余為準(zhǔn)，每天撿蛋1 次（18:00）。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1）生產(chǎn)性能指標(biāo)。預(yù)試驗(yàn)開(kāi)始，每天16:00 統(tǒng)計(jì)采食量、產(chǎn)蛋數(shù)、死淘數(shù)，并按照公式計(jì)算平均日采食量、產(chǎn)蛋率，以7 d 為1 個(gè)周期，計(jì)算平均值。平均日采食量=總耗料量/總蛋雞羽數(shù)；產(chǎn)蛋率=總產(chǎn)蛋數(shù)/總蛋雞數(shù)×100%。

2）雞蛋中ω-3 多不飽和脂肪酸含量檢測(cè)。在試驗(yàn)第20 天與第30 天各組分別取9 枚雞蛋、3 枚雞蛋混勻?yàn)? 個(gè)檢測(cè)樣品，每組檢測(cè)3 個(gè)樣品，每組獲得3 個(gè)DHA 含量數(shù)據(jù)。檢測(cè)方法采用中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T2068-2011《蛋與蛋制品中ω-3 多不飽和脂肪酸的測(cè)定氣相色譜法》[9]。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用WPS 軟件進(jìn)行初步收集和整理后，用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-ANOVA），采用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 微藻油對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率的影響

如表2 所示，第1-4 周的整個(gè)試驗(yàn)期間，T1 組產(chǎn)蛋率與CON 組（對(duì)照組）相比均沒(méi)有顯著差異，但空白期T1 組蛋雞產(chǎn)蛋率顯著低于CON 組，因此，飼料中添加0.3%微藻油可提高蛋雞產(chǎn)蛋率?？瞻灼?、第1-4 周乃至全期，T2 組產(chǎn)蛋率均顯著低于CON 組，但全期與空白期相比，CON 組蛋雞產(chǎn)蛋率提升了13.45 個(gè)百分點(diǎn)，而T2 組升高了21.66 個(gè)百分點(diǎn)，因此，飼料中添加0.6%微藻油能在一定程度上增加蛋雞產(chǎn)蛋率。與CON 組相比，整個(gè)試驗(yàn)期間，T3 組產(chǎn)蛋率均沒(méi)有顯著差異，但T3 組從空白期到試驗(yàn)全期產(chǎn)蛋率僅增加了6.42 個(gè)百分點(diǎn)，而CON 組產(chǎn)蛋率升高了13.45 個(gè)百分點(diǎn)，表明飼料中添加0.9%微藻油可能對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率產(chǎn)生負(fù)面影響；空白期，T3 組產(chǎn)蛋率顯著高于T1 組，而第1-4 周乃至全期，T3 組產(chǎn)蛋率均和T1 組相比無(wú)顯著差異，也證實(shí)添加0.9%微藻油對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率有不良影響。

表2 微藻油對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率的影響 %

2.2 微藻油對(duì)蛋雞平均日采食量的影響

如表3 所示，全期T1 和T2 組蛋雞平均日采食量與CON 組相比均沒(méi)有顯著差異，但空白期T1、T2組蛋雞平均日采食量顯著低于CON 組，因此，飼料中添加0.3%和0.6%微藻油可提高蛋雞平均日采食量。與CON 組比較，T3 組空白期和全期平均日采食量沒(méi)有顯著差異，表明飼料中添加0.9%微藻油不影響蛋雞采食量。

表3 微藻油對(duì)蛋雞采食量的影響 g

2.3 微藻油對(duì)蛋黃中ω-3 多不飽和脂肪酸含量的影響

由表4 可知，第20 天時(shí)，與CON 組比較，T1、T2和T3 組雞蛋中ALA 含量有升高的趨勢(shì)，T3 組ALA含量低于T2 組，但差異不顯著；第30 天時(shí)，T1 和T2組雞蛋中ALA 含量顯著高于CON 組，T3 組與CON組比較沒(méi)有顯著差異；與CON 組相比，20 天和30 天時(shí)，T1 組EPA 含量沒(méi)有顯著差異，T2 和T3 組EPA含量顯著高于CON 組；T1、T2 和T3 組雞蛋中DHA含量均顯著高于CON 組。以上結(jié)果表明，飼料中添加微藻油能使雞蛋中富集ALA、EPA 和DHA。

如表4 所示，空白對(duì)照組中的ALA 與DHA 含量在30～40 mg/100 g，不含EPA。隨著微藻油添加比例的增加，DHA 的含量出現(xiàn)梯度上升，ALA 與EPA 沒(méi)有富集上升趨勢(shì)。隨著微藻油添加時(shí)間的增加，雞蛋中的DHA 含量相應(yīng)增加，且數(shù)據(jù)表明，蛋雞在攝入微藻油后20 d，雞蛋中則可大量富集DHA，且在30 d DHA 富集含量與20 d 相比差值低于前20 d 的富集量，ALA 與EPA 在30 d 的富集含量與20 d 無(wú)顯著性差異。因此，推斷蛋雞在攝入微藻油后30 d，多不飽和脂肪酸富集含量趨于穩(wěn)定。當(dāng)微藻油添加比例為0.3%，使用20 d，雞蛋中DHA 含量可達(dá)到150 mg/100 g 以上；0.6%添加比例使用20 d，雞蛋中DHA 含量可達(dá)到200 mg/100 g 以上；0.9%添加比例使用20 d，雞蛋中DHA 含量可達(dá)到300 mg/100 g 以上。

表4 微藻油對(duì)雞蛋中ω-3 多不飽和脂肪酸含量的影響 mg/100 g

3 討 論

3.1 微藻油對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率的影響

產(chǎn)蛋率是反映蛋雞生產(chǎn)性能的指標(biāo)，微藻油中主要成分為DHA。王鈞藝等[10]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加DHA 復(fù)合添加劑可提升蛋雞產(chǎn)蛋率；付興周等[11]研究也表明，DHA 復(fù)合添加劑有升高蛋雞產(chǎn)蛋率的趨勢(shì)。本試驗(yàn)中，飼糧中添加0.3%和0.6%的微藻油均可提高蛋雞產(chǎn)蛋率，與前人研究一致。Sorbera 等[12]研究表明，DHA 能刺激卵母細(xì)胞成熟，這是飼糧中添加0.3%和0.6%微藻油提升產(chǎn)蛋率的直接原因。此外，微藻油還能通過(guò)增加蛋雞抗氧化酶活性和抗體水平，升高產(chǎn)蛋率[13]。本試驗(yàn)中，飼糧中添加0.9%的微藻油會(huì)對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率產(chǎn)生負(fù)面影響，可能是因?yàn)榇藭r(shí)飼糧中油脂含量過(guò)高。王愛(ài)民[14]研究證實(shí)，飼糧中添加過(guò)高脂肪酸會(huì)造成肝臟損傷，不利于血糖代謝。因此，飼糧中添加0.3%和0.6%微藻油較為適宜。

3.2 微藻油對(duì)蛋雞采食量的影響

楊蕊等[15]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加微藻DHA 能提高蛋雞平均日采食量。與楊蕊等[15]研究一致，本試驗(yàn)中，與CON 組相比，飼料中添加0.3%和0.6%微藻油可提升蛋雞采食量。飼糧中添加0.3%和0.6%的微藻油可能是通過(guò)促進(jìn)雞“三胃”發(fā)育從而使蛋雞采食量增加[16]。此外，本試驗(yàn)中，與CON 組比較，添加0.9%微藻油對(duì)蛋雞采食量影響不顯著，可能是因?yàn)樘砑?.9%微藻油致使飼糧中脂肪酸含量過(guò)高，而高脂會(huì)損傷胃壁細(xì)胞[17]，同微藻油的保護(hù)作用產(chǎn)生協(xié)同作用維持胃壁細(xì)胞平衡狀態(tài)，繼而使得蛋雞采食量保持穩(wěn)定。

3.3 微藻油對(duì)雞蛋中ω-3 多不飽和脂肪酸含量的影響

ALA 具有抗炎、抗氧化和調(diào)節(jié)腸道菌群等作用[18]，EPA 具有抗抑郁和降血脂等作用[19-20]，DHA 能夠促進(jìn)腦和視網(wǎng)膜發(fā)育、增強(qiáng)免疫力[21-22]。因此，食用ALA、EPA 和DHA 含量適當(dāng)?shù)碾u蛋，對(duì)人體具有積極作用。此外，雞蛋中ALA、EPA 和DHA 的富集也可以改善蛋品質(zhì)，維持雞蛋儲(chǔ)存期間的氧化穩(wěn)定性[23]。因此，雞蛋中ALA、EPA 和DHA 的富集具有重要意義。吳永保等[24]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加微藻可提升雞蛋中ω-3 多不飽和脂肪酸含量；馮嘉[25]研究也表明，藻油可顯著升高雞蛋中DHA 和總ω-3 多不飽和脂肪酸含量。與前人研究一致，本試驗(yàn)中，與CON 組相比，飼糧中添加不同比例的微藻油均能增加雞蛋中ALA、EPA 和DHA 含量。