王維維，張運強,3，周昭彬，向 瑋，劉自逵,3*

1.湖南啄米生物技術(shù)有限公司，長沙 410300；2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，長沙 410128；3.湖南加農(nóng)正和生物技術(shù)有限公司，長沙 410300

隨著我國人民生活水平的提高，注重品質(zhì)和個性的“三高（高收入、高學(xué)歷、高職位）”人群成為消費主力軍，他們更加精致化、美學(xué)化、健康化。因此，對具有保健功能的優(yōu)質(zhì)食品更加關(guān)注。ω-3 PUFA（ω-3 polyunsaturated fatty acid，ω-3 多不飽和脂肪酸）包括ALA（α-亞麻酸）、EPA（二十碳五烯酸）和DHA（二十二碳六烯酸）。其中，DHA 由于其強大的功能以及無明顯副作用從ω-3 多不飽和脂肪酸脫穎而出。DHA 占大腦PUFA 總量的40%以上，能介導(dǎo)細(xì)胞存活、神經(jīng)炎癥、神經(jīng)發(fā)生和參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)[1]，大量研究結(jié)果表明大腦需要循環(huán)DHA 持續(xù)不斷的供應(yīng)，以此來取代信號分子產(chǎn)生過程中代謝掉的DHA，同時維持支持其他神經(jīng)生理過程所需的DHA[2-3]。DHA 代謝也有助于促進視網(wǎng)膜的發(fā)育[4]，人體大腦所需的DHA 雖然可由ALA 轉(zhuǎn)化，但ALA 在局部合成DHA 的能力有限，進入大腦的ALA 僅0.2%轉(zhuǎn)化為DHA[3]。而中國孕產(chǎn)婦及嬰幼兒補充DHA 共識專家組根據(jù)FAO 專家委員會和國際圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)會專家委員會建議中國孕婦每日攝入DHA 不少于200 mg[5]。因此，為保證人體每日所需DHA，需額外通過富含DHA 的食物來進行補充。雞蛋被譽為全營養(yǎng)食品，富含蛋白質(zhì)、脂肪、礦物質(zhì)和多種維生素[6]，雞蛋蛋黃中含有甘油三酯、磷脂和膽固醇等脂質(zhì)，占比99%以上，磷脂較多，DHA 在雞蛋中主要與磷脂中的sn-2 位結(jié)合，因此雞蛋中的DHA 為磷脂型DHA[7]。目前，關(guān)于富含DHA 的雞蛋大多為ω-3 PUFA 雞蛋，而ω-3 PUFA 中的EPA 對嬰幼兒凝血功能、生長與智力發(fā)育有不利影響；EPA 會顯著地抑制嬰幼兒體內(nèi)內(nèi)源性花生四烯酸（ARA）的生物合成并導(dǎo)致嬰幼兒生長緩慢，具有促進兒童性早熟的副作用風(fēng)險[8]。因此，低EPA 含量、高DHA 含量的DHA 成為孕媽、寶媽與嬰幼兒補充DHA 的首選食品。本試驗以大午金鳳產(chǎn)蛋高峰期蛋雞為研究對象，研究裂殖壺微藻油對蛋雞采食量、產(chǎn)蛋率以及蛋中ω-3 PUFA 沉積的影響，旨在為微藻油在蛋雞使用以及蛋中DHA 富集提供相關(guān)的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

微藻油（蛋黃金）：批號20210516，由湖南啄米生物技術(shù)有限公司提供，實測DHA 含量占比為36.5%～39%。

1.2 試驗動物及分組

試驗地點在加農(nóng)正和北園蛋雞場進行，蛋雞及飼料均由湖南普泰養(yǎng)殖場提供。試驗選擇單因素完全隨機試驗設(shè)計，試驗隨機選用34 周齡體況良好的大午金鳳蛋雞60 只，隨機分為4 個組，每組15只雞。其中，C 組為對照組，對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧（不額外補充DHA），T1、T2 和T3 組分別在基礎(chǔ)日糧中添加微藻油0.3%、0.6%和0.9%。預(yù)試驗為7 d，正式試驗30 d，于試驗第20 天和第30 天每組隨機挑選9 個雞蛋進行ω-3 多不飽和脂肪酸含量檢測。

1.3 試驗飼糧

蛋雞日糧為玉米豆粕型基礎(chǔ)日糧，由湖南普泰養(yǎng)殖場提供，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理

本試驗采用地面平養(yǎng)方式，根據(jù)該品種蛋雞產(chǎn)蛋高峰期飼養(yǎng)管理進行，自然光照加人工補光（16 h/d），光照強度15～20 lx，舍溫（20±2）℃，相對濕度50%～60%，自然通風(fēng)。試驗期間自由采食和飲水（槽式自動飲水器飲水，每天清洗飲水槽），每天喂料2次（07:00、15:00），添加量以料槽內(nèi)略有剩余為準(zhǔn)，每天撿蛋1 次（18:00）。

1.5 測定指標(biāo)及方法

1）生產(chǎn)性能指標(biāo)。預(yù)試驗開始，每天16:00 統(tǒng)計采食量、產(chǎn)蛋數(shù)、死淘數(shù)，并按照公式計算平均日采食量、產(chǎn)蛋率，以7 d 為1 個周期，計算平均值。平均日采食量=總耗料量/總蛋雞羽數(shù)；產(chǎn)蛋率=總產(chǎn)蛋數(shù)/總蛋雞數(shù)×100%。

2）雞蛋中ω-3 多不飽和脂肪酸含量檢測。在試驗第20 天與第30 天各組分別取9 枚雞蛋、3 枚雞蛋混勻為1 個檢測樣品，每組檢測3 個樣品，每組獲得3 個DHA 含量數(shù)據(jù)。檢測方法采用中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T2068-2011《蛋與蛋制品中ω-3 多不飽和脂肪酸的測定氣相色譜法》[9]。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)采用WPS 軟件進行初步收集和整理后，用SPSS 22.0 軟件進行單因素方差分析（One-ANOVA），采用Duncan’s 法進行多重比較。試驗結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 微藻油對蛋雞產(chǎn)蛋率的影響

如表2 所示，第1-4 周的整個試驗期間，T1 組產(chǎn)蛋率與CON 組（對照組）相比均沒有顯著差異，但空白期T1 組蛋雞產(chǎn)蛋率顯著低于CON 組，因此，飼料中添加0.3%微藻油可提高蛋雞產(chǎn)蛋率。空白期、第1-4 周乃至全期，T2 組產(chǎn)蛋率均顯著低于CON 組，但全期與空白期相比，CON 組蛋雞產(chǎn)蛋率提升了13.45 個百分點，而T2 組升高了21.66 個百分點，因此，飼料中添加0.6%微藻油能在一定程度上增加蛋雞產(chǎn)蛋率。與CON 組相比，整個試驗期間，T3 組產(chǎn)蛋率均沒有顯著差異，但T3 組從空白期到試驗全期產(chǎn)蛋率僅增加了6.42 個百分點，而CON 組產(chǎn)蛋率升高了13.45 個百分點，表明飼料中添加0.9%微藻油可能對蛋雞產(chǎn)蛋率產(chǎn)生負(fù)面影響；空白期，T3 組產(chǎn)蛋率顯著高于T1 組，而第1-4 周乃至全期，T3 組產(chǎn)蛋率均和T1 組相比無顯著差異，也證實添加0.9%微藻油對蛋雞產(chǎn)蛋率有不良影響。

表2 微藻油對蛋雞產(chǎn)蛋率的影響 %

2.2 微藻油對蛋雞平均日采食量的影響

如表3 所示，全期T1 和T2 組蛋雞平均日采食量與CON 組相比均沒有顯著差異，但空白期T1、T2組蛋雞平均日采食量顯著低于CON 組，因此，飼料中添加0.3%和0.6%微藻油可提高蛋雞平均日采食量。與CON 組比較，T3 組空白期和全期平均日采食量沒有顯著差異，表明飼料中添加0.9%微藻油不影響蛋雞采食量。

表3 微藻油對蛋雞采食量的影響 g

2.3 微藻油對蛋黃中ω-3 多不飽和脂肪酸含量的影響

由表4 可知，第20 天時，與CON 組比較，T1、T2和T3 組雞蛋中ALA 含量有升高的趨勢，T3 組ALA含量低于T2 組，但差異不顯著；第30 天時，T1 和T2組雞蛋中ALA 含量顯著高于CON 組，T3 組與CON組比較沒有顯著差異；與CON 組相比，20 天和30 天時，T1 組EPA 含量沒有顯著差異，T2 和T3 組EPA含量顯著高于CON 組；T1、T2 和T3 組雞蛋中DHA含量均顯著高于CON 組。以上結(jié)果表明，飼料中添加微藻油能使雞蛋中富集ALA、EPA 和DHA。

如表4 所示，空白對照組中的ALA 與DHA 含量在30～40 mg/100 g，不含EPA。隨著微藻油添加比例的增加，DHA 的含量出現(xiàn)梯度上升，ALA 與EPA 沒有富集上升趨勢。隨著微藻油添加時間的增加，雞蛋中的DHA 含量相應(yīng)增加，且數(shù)據(jù)表明，蛋雞在攝入微藻油后20 d，雞蛋中則可大量富集DHA，且在30 d DHA 富集含量與20 d 相比差值低于前20 d 的富集量，ALA 與EPA 在30 d 的富集含量與20 d 無顯著性差異。因此，推斷蛋雞在攝入微藻油后30 d，多不飽和脂肪酸富集含量趨于穩(wěn)定。當(dāng)微藻油添加比例為0.3%，使用20 d，雞蛋中DHA 含量可達到150 mg/100 g 以上；0.6%添加比例使用20 d，雞蛋中DHA 含量可達到200 mg/100 g 以上；0.9%添加比例使用20 d，雞蛋中DHA 含量可達到300 mg/100 g 以上。

表4 微藻油對雞蛋中ω-3 多不飽和脂肪酸含量的影響 mg/100 g

3 討 論

3.1 微藻油對蛋雞產(chǎn)蛋率的影響

產(chǎn)蛋率是反映蛋雞生產(chǎn)性能的指標(biāo)，微藻油中主要成分為DHA。王鈞藝等[10]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加DHA 復(fù)合添加劑可提升蛋雞產(chǎn)蛋率；付興周等[11]研究也表明，DHA 復(fù)合添加劑有升高蛋雞產(chǎn)蛋率的趨勢。本試驗中，飼糧中添加0.3%和0.6%的微藻油均可提高蛋雞產(chǎn)蛋率，與前人研究一致。Sorbera 等[12]研究表明，DHA 能刺激卵母細(xì)胞成熟，這是飼糧中添加0.3%和0.6%微藻油提升產(chǎn)蛋率的直接原因。此外，微藻油還能通過增加蛋雞抗氧化酶活性和抗體水平，升高產(chǎn)蛋率[13]。本試驗中，飼糧中添加0.9%的微藻油會對蛋雞產(chǎn)蛋率產(chǎn)生負(fù)面影響，可能是因為此時飼糧中油脂含量過高。王愛民[14]研究證實，飼糧中添加過高脂肪酸會造成肝臟損傷，不利于血糖代謝。因此，飼糧中添加0.3%和0.6%微藻油較為適宜。

3.2 微藻油對蛋雞采食量的影響

楊蕊等[15]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加微藻DHA 能提高蛋雞平均日采食量。與楊蕊等[15]研究一致，本試驗中，與CON 組相比，飼料中添加0.3%和0.6%微藻油可提升蛋雞采食量。飼糧中添加0.3%和0.6%的微藻油可能是通過促進雞“三胃”發(fā)育從而使蛋雞采食量增加[16]。此外，本試驗中，與CON 組比較，添加0.9%微藻油對蛋雞采食量影響不顯著，可能是因為添加0.9%微藻油致使飼糧中脂肪酸含量過高，而高脂會損傷胃壁細(xì)胞[17]，同微藻油的保護作用產(chǎn)生協(xié)同作用維持胃壁細(xì)胞平衡狀態(tài)，繼而使得蛋雞采食量保持穩(wěn)定。

3.3 微藻油對雞蛋中ω-3 多不飽和脂肪酸含量的影響

ALA 具有抗炎、抗氧化和調(diào)節(jié)腸道菌群等作用[18]，EPA 具有抗抑郁和降血脂等作用[19-20]，DHA 能夠促進腦和視網(wǎng)膜發(fā)育、增強免疫力[21-22]。因此，食用ALA、EPA 和DHA 含量適當(dāng)?shù)碾u蛋，對人體具有積極作用。此外，雞蛋中ALA、EPA 和DHA 的富集也可以改善蛋品質(zhì)，維持雞蛋儲存期間的氧化穩(wěn)定性[23]。因此，雞蛋中ALA、EPA 和DHA 的富集具有重要意義。吳永保等[24]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加微藻可提升雞蛋中ω-3 多不飽和脂肪酸含量；馮嘉[25]研究也表明，藻油可顯著升高雞蛋中DHA 和總ω-3 多不飽和脂肪酸含量。與前人研究一致，本試驗中，與CON 組相比，飼糧中添加不同比例的微藻油均能增加雞蛋中ALA、EPA 和DHA 含量。