陳俊宇，胡臨軒，王貴平，文世才

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410128； 2.長(zhǎng)沙優(yōu)繁生物科技有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 410128)

抗生素既可作為動(dòng)物促生長(zhǎng)添加劑，也可用于動(dòng)物疾病治療。但是抗生素的濫用導(dǎo)致抗生素殘留、細(xì)菌耐藥性等問(wèn)題，嚴(yán)重威脅著人類(lèi)健康和生態(tài)環(huán)境安全[1]。自2020年7月1日起，飼料生產(chǎn)企業(yè)將不能再生產(chǎn)含有促生長(zhǎng)類(lèi)藥物飼料添加劑的商品飼料(中草藥除外)[2]。

中草藥添加劑是以中草藥為原料制成的飼料添加劑，具有高效、安全、綠色、無(wú)殘留等優(yōu)點(diǎn)。在生豬養(yǎng)殖過(guò)程中，中草藥添加劑具有較好的疫病預(yù)防和提高生豬生長(zhǎng)性能的作用[3]。此外，中草藥可補(bǔ)充飼料的營(yíng)養(yǎng)成份，提高動(dòng)物產(chǎn)品的品質(zhì)[4]。

黃芪多糖能夠提高妊娠母豬的生產(chǎn)性能和仔豬的健康水平[5]。劉新平等[6]研究發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖顯著增加豬外周血T淋巴細(xì)胞數(shù)，緩解豬瘟的抑制。人參具有補(bǔ)脾益肺、生津止渴、安神益智、補(bǔ)氣生血等功效, 是傳統(tǒng)的補(bǔ)虛要藥。人參皂苷能有效地清除機(jī)體里過(guò)多的自由基，阻止自由基的過(guò)度產(chǎn)生, 起到抗疲勞的效應(yīng)[7]。哺乳優(yōu)苷肽是由天然植物提取的飼料保健產(chǎn)品，其主要成分包括黃芪、人參葉等，具有補(bǔ)中益氣、活血化瘀、健胰益胃等功效。

1 材料和方法

1.1 產(chǎn)品、試劑及主要儀器

哺乳優(yōu)苷肽(批號(hào)202101)購(gòu)自長(zhǎng)沙優(yōu)繁生物科技有限公司。IFN-γ測(cè)定ELISA試劑盒(批號(hào)20210615)、IL-2測(cè)定ELISA試劑盒(批號(hào)20210304)和TNF-α測(cè)定ELISA試劑盒(批號(hào)20210615)購(gòu)自北京四正佰生物科技有限公司。豬流行性腹瀉病毒IgG抗體檢測(cè)ELISA試劑盒(批號(hào)020112003)購(gòu)自青島立見(jiàn)診斷技術(shù)發(fā)展中心。豬流行性腹瀉病毒IgA抗體ELISA試劑盒(批號(hào)20156)購(gòu)自愛(ài)德士蒙彼利埃有限公司。MilkoScan FT+200 Type 76150乳成分儀。Fossomatic FC Type 79910體細(xì)胞器。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

40頭供試母豬來(lái)自湖南邵陽(yáng)某規(guī)?；i場(chǎng)，健康狀態(tài)良好,懷孕85-90天。在分娩前15- 45天對(duì)懷孕母豬注射豬流行性腹瀉病毒疫苗。40頭母豬隨機(jī)分成4組(對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組)，每組10頭豬，分別飼喂添加0、2、4、8 kg/t哺乳優(yōu)苷肽的飼糧，飼喂期從分娩前26天到分娩后20天。

1.3 樣品采集及指標(biāo)分析

樣品采集。母豬分娩前26天(妊娠88天)、分娩當(dāng)天、分娩后10天、分娩后20天采血，每次每頭母豬采血2 mL，分離血清備用。母豬分娩當(dāng)天、分娩后10天和20天，每次每頭母豬收集母乳10 mL。

血清指標(biāo)分析。采用ELISA方法檢測(cè)160份血樣的TNF-α、IL-2和IFN-γ及豬流行性腹瀉病毒IgG、IgA抗體含量。

用乳汁分析儀檢測(cè)母乳中乳脂、乳糖、體細(xì)胞、總固體、尿素氮等5項(xiàng)指標(biāo)。

1.4 繁殖性能

稱(chēng)量40窩仔豬中每頭仔豬的出生重和斷奶重，計(jì)算每組仔豬平均日增重。

母豬分娩后20天及仔豬斷奶后，觀察各組母豬發(fā)情數(shù)，并計(jì)算每組母豬發(fā)情率。發(fā)情率=發(fā)情母豬數(shù)/可繁母豬總數(shù)。

記錄每頭母豬產(chǎn)程。產(chǎn)程為第1頭仔豬產(chǎn)出到最后1頭仔豬產(chǎn)出所需要的時(shí)間。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用 SPSS26.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著時(shí)采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。數(shù)據(jù)表示為“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”。顯著水準(zhǔn)為P<0.05。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)胞因子

TNF-α、IL-2、IFN-γ三個(gè)細(xì)胞因子的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知，低、高劑量組的血清TNF-α 含量在飼喂20天后顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；低、高劑量組的血清IFN-γ含量在三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；低、高劑量組的血清IL-2 含量在三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表1 哺乳優(yōu)苷肽對(duì)TNF-α、IL-2、IFN-γ三個(gè)細(xì)胞因子的影響 pg/mL

2.2 流行性腹瀉病毒(PEDV)IgG、IgA抗體

流行性腹瀉病毒IgG、IgA抗體水平檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2，抗體陽(yáng)性率見(jiàn)表3。由表3可知，低劑量和高劑量組的PEDV IgA抗體含量在分娩當(dāng)天、分娩后10天、分娩后20天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。由表3可知，所有組的PEDV IgG抗體陽(yáng)性率在分娩當(dāng)天、分娩后10天、分娩后20天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均達(dá)到100.00%，高劑量組PEDV IgA陽(yáng)性率在在分娩當(dāng)天、分娩后10天、分娩后20天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)達(dá)到100.00%。

表2 哺乳優(yōu)苷肽對(duì)PEDV IgG、IgA抗體水平的影響 μg/mL

表3 哺乳優(yōu)苷肽對(duì)PEDV IgG、IgA抗體陽(yáng)性率的影響 %

2.3 哺乳優(yōu)苷肽對(duì)母豬乳汁成分的影響

乳汁體細(xì)胞數(shù)、乳脂率、乳糖、總固體、尿素氮含量的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4。由表4可知，低、中劑量組乳汁體細(xì)胞數(shù)在分娩后20天時(shí)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。低、中劑量組的乳脂率在分娩后10、20天均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表4 哺乳優(yōu)苷肽對(duì)母豬乳汁成份的影響

2.4 哺乳優(yōu)苷肽對(duì)母豬繁殖性能的影響

母豬繁殖成績(jī)見(jiàn)表5。由表5可知,低、中、高劑量組在仔豬初生重、斷奶均重、母豬發(fā)情率和發(fā)情間隔等方面均顯著優(yōu)于對(duì)照組；低、中、高劑量組母豬的產(chǎn)程短于對(duì)照組。

表5 哺乳優(yōu)苷肽對(duì)繁殖性能的影響

3 討論

本試驗(yàn)中，低、中、高劑量?jī)?yōu)苷肽可以不同程度提升母豬血清分娩當(dāng)天、分娩后10天、分娩后20天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清TNF-α、IFN-γ 和IL-2 含量(P<0.05)。涂文偉等[7]報(bào)道, 植物黃芪能夠提高母豬血清IL-2、IL-6 水平,進(jìn)而產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)作用，這與本試驗(yàn)的結(jié)果一致，說(shuō)明哺乳優(yōu)苷肽可以提高母豬體內(nèi)的細(xì)胞因子含量。低劑量組的母豬血清IgA抗體含量在分娩當(dāng)天、分娩后10天、分娩后20天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。而中劑量組對(duì)血清IgA抗體水平提升效果不顯著，因此，低劑量哺乳優(yōu)苷肽改善母豬免疫能力的效果更佳。

劉英姿等[8]發(fā)現(xiàn), 中草藥組母豬乳汁中體細(xì)胞數(shù)在分娩20天后顯著高于對(duì)照組，但本試驗(yàn)中,低、中劑量組乳汁體細(xì)胞數(shù)在分娩后20天時(shí)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而高劑量組的體細(xì)胞數(shù)明顯低于其他劑量組的體細(xì)胞數(shù)(P<0.05)，具體原因有待進(jìn)一步研究。乳糖及乳脂是哺乳仔豬的重要能量來(lái)源。在本試驗(yàn)中低、中劑量組的乳脂率在分娩后10、20天均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，說(shuō)明哺乳優(yōu)苷肽可以提升哺乳母豬乳汁中的乳糖和乳脂率。高、中、低劑量組在仔豬初生重、斷奶均重、產(chǎn)程、發(fā)情率和發(fā)情間隔等方面均顯著優(yōu)于對(duì)照組，說(shuō)明哺乳優(yōu)苷肽對(duì)哺乳母豬的繁殖性能有顯著的改善作用。