■石子墨 肖 晴 玉 柱

（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，北京100193）

青貯飼料以其芳香的氣味、良好的適口性以及較高的營養(yǎng)價值等諸多優(yōu)點，現(xiàn)已普遍應(yīng)用于畜牧業(yè)的加工生產(chǎn)，成為不可或缺的基礎(chǔ)飼料之一。青貯是指在厭氧條件下，以乳酸菌發(fā)酵為基礎(chǔ)的飼料作物保鮮方法。以原料里的糖類等物質(zhì)為底物，代謝產(chǎn)生有機酸以營造酸性環(huán)境，抑制有害微生物的生長，最終得以長時間保存青貯飼料而避免變質(zhì)腐敗。目前世界上用于青貯的主要飼料作物包括玉米、苜蓿和各種牧草。其中玉米以其具有較高的生物產(chǎn)量、適宜的淀粉濃度和良好的發(fā)酵品質(zhì)，成為世界上最常見的青貯作物。而全株玉米青貯以其突出的營養(yǎng)價值和優(yōu)良的適食性，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于畜牧生產(chǎn)。在歐美國家，采用玉米青貯飼料的奶牛養(yǎng)殖規(guī)模超過六成。但優(yōu)質(zhì)玉米青貯飼料的生產(chǎn)依賴于許多因素，這些因素如若處理不當(dāng)，都可能對青貯飼料的生產(chǎn)和利用造成不良影響。其中開封后于有氧條件下較短的穩(wěn)定保存時間，極易發(fā)生二次發(fā)酵，就是目前影響全株玉米青貯利用效率的重要制約因素。

有氧穩(wěn)定性是指青貯飼料在接觸空氣后，理化性質(zhì)等保持穩(wěn)定，不會發(fā)生變質(zhì)的時間。當(dāng)玉米青貯切開，大量空氣進(jìn)入青貯，溫度逐漸升高，營養(yǎng)物質(zhì)含量隨之降低。有氧穩(wěn)定性越高，則青貯維持正常狀態(tài)的時間就越長，其中各類的營養(yǎng)物質(zhì)可以被更大程度地回收和利用；有氧穩(wěn)定性越差，則開封后穩(wěn)定保存的時間越短，有時只能維持幾個小時后便會腐敗變質(zhì)，不再適合飼用。Pereira 等（2021）的研究顯示對于青貯的頂部、中部、底部不同層的有氧穩(wěn)定性也存在差異性。從微觀層面而言，開封后青貯溫度的升高其實對應(yīng)的是從無氧到有氧環(huán)境后在以酵母菌和霉菌為首的一系列好氧微生物作用下的連鎖反應(yīng)，因為青貯飼料發(fā)酵產(chǎn)物（如乳酸）本身是這些有害的需氧微生物生長代謝所需的底物，當(dāng)玉米青貯被切開與空氣接觸之后，氧氣含量上升，酵母菌以乳酸和可溶性糖等物質(zhì)為底物快速生長繁殖，并在氧化反應(yīng)的作用下產(chǎn)生大量的熱量和氣體，使青貯飼料的溫度和pH 快速上升，開始腐敗變質(zhì)。而更加濕熱的環(huán)境也更促進(jìn)了有害微生物的繁殖活動，使飼料的腐敗過程加速，嚴(yán)重影響青貯飼料的品質(zhì)，最終降低家畜的生產(chǎn)性能。

面對玉米青貯打開后保存時間短且容易二次發(fā)酵這一問題，研究學(xué)者們主要傾向于從兩種方向解決，一是通過控制環(huán)境條件從源頭上抑制——連鎖反應(yīng)源于氧氣的進(jìn)入促進(jìn)了好氧菌的快速生長，但當(dāng)其生長的起始數(shù)目較低時，繁殖時間便會延長，青貯腐爛變質(zhì)前也就能保存更長的時間。所以通過環(huán)境條件控制酵母菌的數(shù)量，從起點上抑制整個連鎖反應(yīng)，可以使打開后的玉米青貯更長時間地保持穩(wěn)定。二是通過添加不同物質(zhì)盡可能維持開封前的環(huán)境條件，抑制酵母及霉菌等好氧菌的生長活動以延長整個連鎖反應(yīng)的時間，延長了全株玉米青貯在有氧狀態(tài)下穩(wěn)定保存的時間。

文章介紹了國內(nèi)外現(xiàn)階段有關(guān)改善玉米青貯有氧穩(wěn)定性在添加劑、環(huán)境條件、品種及成熟階段這三個方面的研究進(jìn)展，以期提高我國玉米青貯技術(shù)，降低二次發(fā)酵的營養(yǎng)損失。

1 添加劑對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

添加劑在青貯飼料制備中起關(guān)鍵作用，添加合適的添加劑能夠促進(jìn)青貯料內(nèi)部形成適宜目標(biāo)菌群生長繁殖，抑制其他有害微生物活動的環(huán)境，有效改善青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)，保存營養(yǎng)物質(zhì)，降低青貯飼料中的有害物質(zhì)含量。現(xiàn)階段最常使用的添加劑包括微生物菌劑、有機酸及其鹽類以及乙醇等其他物質(zhì)。乳酸菌與有機酸制劑的加入都可以顯著提高玉米青貯的發(fā)酵質(zhì)量。雖然有機酸制劑對乳酸菌的繁殖沒有直接的加速作用，但對青貯打開后的穩(wěn)定性有明顯的提升作用，對酵母菌、霉菌等的生長繁殖則起到抑制作用。

1.1 有機酸對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

有機酸的加入造成青貯飼料中pH下降從而抑制酵母及霉菌的生長活動。玉米青貯完全暴露于空氣中的時候添加乙酸和丙酸，可以使玉米青貯飼料的pH有效降低，提高乙酸、干物質(zhì)（dry matter，DM）與粗蛋白（crude protein，CP）的含量，顯著延長玉米青貯在有氧環(huán)境下保持穩(wěn)定的時間。除此之外含有其他有機酸鹽（如苯甲酸鈉、山梨酸鉀和亞硝酸鈉）的添加劑可以通過抑制可以消耗乳酸并引發(fā)有氧腐敗的酵母物種來提高有氧穩(wěn)定性。

1.1.1 甲酸對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

Filya（2004）的研究顯示，甲酸的添加對酵母菌與霉菌的數(shù)目降低作用十分顯著，而青貯發(fā)酵被抑制也使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)的損失降低。當(dāng)添加量控制在一定范圍內(nèi)（1～4 g∕kg）時，青貯玉米的需氧穩(wěn)定性與甲酸添加量呈現(xiàn)正相關(guān)性。添加甲酸不僅對有害菌類的發(fā)生起抑制作用，也能明顯減少氨態(tài)氮的產(chǎn)生量，并降低可溶性碳水化合物（water-soluble carbohydrates，WSC）的降解，從而使青貯飼料在有氧條件下保存的時間得到提高。

1.1.2 乙酸對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

大量研究表明乙酸可以提升青貯飼料有氧條件下的穩(wěn)定保存時間。在接觸有氧環(huán)境的初始階段，雖然青貯飼料中的氧氣含量上升，在經(jīng)過乙酸處理后，較強的酸性環(huán)境對酵母菌以及霉菌的生長繁殖仍可起到抑制作用。未解離形式的乙酸（pH 為4 左右）對腐生菌具有親脂作用，這種效應(yīng)可以減緩青貯飼料接觸空氣后的有氧惡化。Da 等（2020）對乙酸的研究發(fā)現(xiàn)，乙酸降低了青貯料中氨態(tài)氮（NH3-N）的含量和干物質(zhì)損失率（dry matter loss，DML）；而DM含量則相對地有所升高，延長了有氧穩(wěn)定的時間。邱小燕等（2014）研究表明，在有氧暴露9 d后，添加乙酸可以延長全混合日糧在有氧條件下的穩(wěn)定保存時間，當(dāng)處于有氧環(huán)境的整個過程中，pH、酵母菌以及需氧微生物的數(shù)目能夠始終保持在較低的水平。馬旭光等（2015）研究發(fā)現(xiàn)，在有氧條件下，乙酸可以顯著延長青貯飼料有氧條件下的穩(wěn)定保存時間，且乙酸的濃度和保存時間成正比，這是因為乙酸能在一定程度上使有害微生物的發(fā)生速率降低。高的乙酸濃度有利于青貯飼料的有氧穩(wěn)定性提升和DML下降。

1.1.3 丙酸及其鹽類對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

丙酸是一種比較有效的抗真菌劑，并被廣泛應(yīng)用于飼料貯藏，在延長青貯飼料有氧條件的保存時間上效果顯著。為了能更好地提高有氧條件下的穩(wěn)定保存時間，一般將丙酸與其他有機酸添加劑混合使用。Kung 等（2003）在青貯玉米中混合加入丙酸和甲酸時，發(fā)現(xiàn)效果明顯優(yōu)于單獨添加丙酸得到的青貯飼料。這是由于丙酸在起酸性作用的同時對蛋白質(zhì)還具有保護(hù)作用。王保平等（2013）在研究中發(fā)現(xiàn)，丙酸的抗真菌作用，隨著青貯飼料pH的降低而增加，起到降低腐敗菌對可溶性WSC 和蛋白質(zhì)分解的作用，從而使得NH3-N維持在較低的含量，有利于延長青貯玉米在有氧條件下的穩(wěn)定保存時間。郭艷萍等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，丙酸的添加能使青貯飼料中的乳酸含量有效上升，氨態(tài)氮的含量則相反，說明了丙酸對玉米青貯營養(yǎng)品質(zhì)的提升效果非常顯著。并且丙酸在和尿素混合加入時，可以延長玉米青貯有氧條件下的穩(wěn)定保存時間。白春生等（2011）研究發(fā)現(xiàn)，添加甲酸和丙酸有助于營養(yǎng)物質(zhì)的保存且均可提高全株玉米青貯飼料的有氧穩(wěn)定性，其中丙酸的效果優(yōu)于甲酸。陳雷等（2015）的研究表明添加丙酸會對乳酸發(fā)酵有一定程度的抑制，可以明顯提高全株玉米混合日糧在有氧條件下的穩(wěn)定保存時間。

1.2 不同微生物對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

天然青貯飼料上的微生物各式各樣，既有對生產(chǎn)有益的微生物，也有無益甚至有害的品種，二者大致呈現(xiàn)1∶10的比例。對于新鮮的植物，其上最主要分布的便是好氧細(xì)菌和霉菌等種類。這些微生物對植物的營養(yǎng)價值品質(zhì)影響很大，也在一定程度上間接決定了畜禽對植物的取食及自身健康狀況。各種微生物種群大小也是評價青貯發(fā)酵最常用的測量指標(biāo)之一。Drouin等（2020）和Wang等（2021）認(rèn)為更高的真菌多樣性可以提高全株玉米青貯飼料的有氧穩(wěn)定性。禾草或其他作物的水分含量足夠高時，通過厭氧發(fā)酵獲得青貯。高水分含量的玉米作為青貯材料比牧草和豆科作物更容易發(fā)生有氧變質(zhì)，因此可以選擇使用微生物接種劑來改善其發(fā)酵，這可能有助于青貯飼料的保存，從而提高其質(zhì)量。Bernardo 等（2018）的研究也證明了接種菌劑可以通過影響青貯飼料的溫度從而改善其有氧穩(wěn)定性。

1.2.1 乳酸菌對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

乳酸菌作為玉米青貯發(fā)酵的主要微生物，對于青貯乳酸含量的提升和酸性環(huán)境的營造有很重要的作用。而且乳酸菌能在和酵母菌等其他不利微生物的競爭中擠壓后者的生存空間，進(jìn)而有效延長青貯開封后于有氧條件下保存的時間。其抗菌活性主要與有機酸的產(chǎn)生有關(guān)。強有機酸的產(chǎn)生對非耐酸微生物有影響，而弱有機酸主要通過破壞滲透平衡作用于耐酸微生物。

鑒于不同種類乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生不同的物質(zhì)，將其分成同型發(fā)酵與異型發(fā)酵兩類乳酸菌。前者可以以少量可溶性糖等碳水化合物為底物生成大量的乳酸，有效固定飼料鮮度，但是當(dāng)青貯飼料打開后接觸氧氣，大量的可溶糖和乳酸等物質(zhì)很容易使有害微生物大量生長，導(dǎo)致青貯腐敗，而此情況能被異型發(fā)酵乳酸菌有效阻止。接種1×105CFU∕g的布氏乳桿菌是提高全株玉米青貯飼料有氧穩(wěn)定性的可行策略。在接種同型乳酸菌后，發(fā)酵過程沒有明顯的變化，但是青貯飼料有氧條件下的穩(wěn)定保存時間會縮短。Fernandes 等（2020）的研究也證明接種布氏乳桿菌和乳酸乳球菌增加了乙酸濃度，可提高短期發(fā)酵后的好氧穩(wěn)定性。布氏乳桿菌作為商業(yè)產(chǎn)品中最常用的一種異型發(fā)酵菌，是延長玉米青貯有氧條件下保存時間的上佳選擇。該菌群中有25 種不同的細(xì)菌，目前短乳桿菌（L.brevis）、高加索酸奶乳桿菌（L.kefiri）、希氏乳桿菌（L.hilgardii）、雙乳桿菌（L.diolivorans）已被證明可以減少玉米青貯飼料中的損失。

馬迪等（2014）在研究不同乳酸菌添加劑對青貯玉米與青貯黑麥草有氧條件下保存時間的影響時發(fā)現(xiàn)，布氏乳桿菌的加入，使青貯中的乙酸含量升高，乳酸含量下降。添加了布氏乳桿菌的青貯玉米從56 d開封開始時就保持了有氧穩(wěn)定，其他的組在120 d 保持了有氧穩(wěn)定，所有的組乙酸的含量都有增加。呂文龍等（2011）研究發(fā)現(xiàn)，布氏乳桿菌顯著延長了玉米青貯有氧條件下的穩(wěn)定保存時間，并且接種劑量和保存時間成正比。原因在于青貯飼料中乙酸的含量不斷上升，而乙酸可以有效抑制真菌繁殖，進(jìn)而延長其有氧保存時間。

Agarussi 等（2021）對11 種野生布氏桿菌的最新研究表明，LB-56.1∕2∕4∕8∕9∕25均表現(xiàn)出改善玉米青貯飼料有氧穩(wěn)定性的潛在特性，可以為進(jìn)一步篩選優(yōu)良菌種提供參考。Liu 等（2018）發(fā)現(xiàn)一種乳酸菌Lactobacillus parafarraginisZH1高產(chǎn)苯甲酸和十六烷酸，與其他菌株相比具有更強的抗酵母能力，可以顯著降低青貯飼料在有氧暴露后腐敗的速度。Saylor等（2020）的研究表明布氏乳桿菌LB1819只需14 d即可產(chǎn)生乙酸，到28 d 時，有可能對高含水量玉米的有氧穩(wěn)定性有提升作用。Zhang等（2021）同樣也證實無論是否添加同型發(fā)酵乳酸菌，布氏乳桿菌的加入都能使玉米青貯料在有氧條件下的穩(wěn)定保存時間延長。而布氏乳桿菌的接種延長了玉米青貯在正常期（34% DM）有氧條件下的穩(wěn)定保存時間，但不影響后期（43.8% DM）收獲玉米青貯的有氧穩(wěn)定性。

趙子夫等（2009）從青貯玉米中分離得到了消化乳桿菌和果糖乳桿菌，作為青貯玉米添加菌株。研究發(fā)現(xiàn)，添加消化乳桿菌能夠有效提升青貯玉米的營養(yǎng)品質(zhì)，減少發(fā)酵期間的DM損失；果糖乳桿菌的加入會使青貯中乙酸的含量有所上升，并延長青貯料的有氧穩(wěn)定期。在混合添加上述兩種乳酸菌時，發(fā)現(xiàn)既可以提升總體品質(zhì)，又能夠有效延長青貯玉米有氧狀態(tài)下保持穩(wěn)定的時間。Paradhipta 等（2021）的研究也表明短乳桿菌和布氏乳桿菌1∶1混合接種全株青貯玉米比單一接種這兩種菌株對其有氧穩(wěn)定性的改善更顯著。

另外，最新研究發(fā)現(xiàn)同屬于乳桿菌屬的谷糠桿菌（L.farraginis）接種青貯飼料后，青貯飼料在整個貯藏期間的DML均低于布氏乳桿菌處理組和希氏乳桿菌處理組，乳酸和乙酸的產(chǎn)生良好，有氧條件下的穩(wěn)定時間較對照也有顯著改善。該品種有望用作晚熟玉米青貯飼料的接種劑提高青貯飼料的品質(zhì)。

但需要注意的是，全株玉米的DM含量也會影響其附生微生物群落和接種劑的有效性，布氏乳桿菌的接種對高、中DM含量青貯組有氧穩(wěn)定性的提升效果要優(yōu)于低DM含量組。

1.2.2 丙酸菌添加劑對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

丙酸菌在厭氧微生物中較為特殊，可以代謝產(chǎn)生乳酸、丙酸、乙酸以及CO2等眾多物質(zhì)，且某些丙酸菌可以產(chǎn)生具有抑菌活性的細(xì)菌素，從而使丙酸菌在作為接種劑時能夠抑制其他有害微生物的活動，進(jìn)而延長青貯在有氧狀態(tài)下穩(wěn)定保存的時間。Dawson 等（1998）的研究表明，青貯42 d 后，添加酸性丙酸桿菌可增加玉米青貯中丙酸含量。此外，乙酸濃度也有所增加，環(huán)境酸性的增強會降低酵母菌與霉菌的數(shù)量。費氏丙酸桿菌可以將葡萄糖發(fā)酵生成乙酸和丙酸，以延長高含水量玉米有氧條件下穩(wěn)定保存的時間。

但是丙酸菌不夠穩(wěn)定的作用效果，使其一般在pH下降速率較低和最終pH較高（大于4.2）時才會有效。例如Weniberg 等（1996）的研究表明，在pH 小于4.0 時，對狼尾草和青貯玉米添加丙酸菌幾乎沒有任何的影響，但當(dāng)pH下降緩慢時，丙酸菌能夠有效延長小麥青貯有氧條件下穩(wěn)定保存的時間。之所以丙酸菌沒有發(fā)揮良好的效果，可能是其不耐酸、嚴(yán)格的厭氧和生長繁殖速度較慢等原因所導(dǎo)致。

1.2.3 枯草芽孢桿菌對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

一般來說芽孢桿菌屬細(xì)菌會與乳酸菌競爭底物，并且不能有效降低pH，此外，它們可能與青貯飼料的有氧變質(zhì)和乳制品的孢子污染有關(guān)。因此這類細(xì)菌通常被看作是損害青貯質(zhì)量的微生物種類之一。但近來有研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)生的纖維素酶，水解植物細(xì)胞壁增加可溶性糖的釋放，使乳酸含量提升，青貯質(zhì)量提高；同時對酵母菌和一些絲狀真菌的生長有抑制作用，提高有機物的消化率，增加玉米青貯飼料中的乙酸含量和有氧穩(wěn)定性。接種最高濃度的枯草芽孢桿菌（5×105CFU∕kg）的玉米青貯飼料最適合控制酵母生長和提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性。

1.3 無機鹽對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

向青貯飼料中添加無機鹽，可提高青貯環(huán)境的滲透壓，利用梭菌與乳酸菌對環(huán)境滲透壓敏感度差異較大的特點抑制梭菌等不良微生物活動，最終使青貯料的乳酸上升，乙酸、丁酸減少，從而提高青貯品質(zhì)，改善適口性。由于全株玉米等青貯飼料的含水量低，粗纖維含量高、料質(zhì)粗糙、細(xì)胞液不易滲出，添加無機鹽的效果尤其明顯。常見的無機鹽添加劑以鈉鹽為主，青貯全株玉米時，一定量鈉鹽的加入，有利于細(xì)胞液的滲出，進(jìn)而促進(jìn)乳酸菌發(fā)酵，改善玉米青貯的利用率、營養(yǎng)價值及有氧穩(wěn)定性。

1.3.1 青貯衛(wèi)士（Siloguard，SG）對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

SG 的主要成分為硫酸鈉、亞硫酸鈉、硫酸鉀、糖化麥芽、葡萄糖和丙二醇等，添加量建議控制為0.05%。

根據(jù)Kleinschmit 等（2005）的研究結(jié)果，SG 的添加對全株玉米青貯有氧條件下的穩(wěn)定保存時間沒有明顯影響。但郭艷萍等（2011）的試驗結(jié)果則表明，加入SG能夠使CP、乳酸等物質(zhì)含量升高，pH、氨態(tài)氮的含量下降，進(jìn)而提升全株玉米的發(fā)酵質(zhì)量，還能夠抑制不良微生物的繁殖，進(jìn)而延緩全株青貯的二次發(fā)酵，有效延長其在有氧條件下的穩(wěn)定保存時間。

1.3.2 鈉鹽對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

張新慧等（2008）對兩種乙酸鈉鹽的研究表明，脫氫乙酸鈉能夠降低酵母菌、霉菌等不良微生物的數(shù)量以及青貯飼料的DML；雙乙酸鈉使乙酸和乳酸等物質(zhì)含量上升，DML下降。在全株青貯打開空氣進(jìn)入飼料后脫氫乙酸鈉和雙乙酸鈉仍能有效抑制有害微生物的活動。脫氫乙酸鈉對有氧穩(wěn)定性的提升效果、飼料營養(yǎng)的保存上均優(yōu)于雙乙酸鈉。Qiu等（2019）有關(guān)雙乙酸鈉對玉米等青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性影響的研究結(jié)果顯示，添加0.5%的雙乙酸鈉能夠有效延長玉米青貯在有氧條件下的穩(wěn)定保存時間。

此外，苯甲酸鹽作為化學(xué)添加劑中的特異性成分，具有抗真菌特性，并已成功用于降低酵母和霉菌的生長速率。苯甲酸鈉作為食品添加劑，青貯時添加后能夠有效地抑制酵母菌和霉菌的生長繁殖，延長青貯在有氧條件下的穩(wěn)定保存時間。有報道稱，一株布氏乳桿菌新種AKKP 2047p在鈷胺存在下可將1，2丙二醇轉(zhuǎn)化為丙酸鹽，可能具有更大的抗真菌作用。然而，目前尚不確定自然產(chǎn)生的布氏乳桿菌菌株是否具有這種特性，由于丙酸鹽和乙酸鹽的聯(lián)合抗真菌作用，這種特性可能會進(jìn)一步增強青貯的有氧穩(wěn)定性。

1.4 酶制劑對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

全株玉米在單獨青貯時往往很難保證其最終質(zhì)量，而通過添加酶制劑改善發(fā)酵品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性已成為領(lǐng)域內(nèi)的重要研究方向之一，具有廣闊前景。如纖維素酶、葡萄糖苷酶、半纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶等相關(guān)酶制劑可以破壞細(xì)胞壁等結(jié)構(gòu)，釋放飼料原料中的養(yǎng)分，提高飼料營養(yǎng)價值，影響青貯的發(fā)酵質(zhì)量與有氧條件下的穩(wěn)定保存時間。

現(xiàn)階段有關(guān)青貯玉米酶制劑添加實效的研究結(jié)果在很多方面仍存在一定的差異，難以形成一致觀點。大多研究結(jié)果顯示，酶制劑的加入會對玉米青貯的發(fā)酵情況、有氧穩(wěn)定性以及消化率產(chǎn)生不同的影響；但另一些研究報道則指出，酶制劑對青貯飼料的發(fā)酵質(zhì)量和有氧穩(wěn)定性無明顯改善作用。根據(jù)史占全等（1998）的研究結(jié)果，玉米酶（Cornzyme，由纖維素酶、木聚糖酶和葡萄糖氧化酶等組成）的添加提高了玉米青貯中的乳酸、乙酸和有機酸含量，對pH和WSC含量無顯著影響。吳躍明等（2004）對秸稈酶（Strawzyme，由纖維素酶和木聚糖酶組成）的研究則表明玉米秸添加Strawzyme 酶制劑青貯，可以促進(jìn)乳酸生成，減少氨態(tài)氮產(chǎn)生，因而可明顯改善青貯玉米秸的發(fā)酵品質(zhì)，影響青貯有氧穩(wěn)定性。孫貴賓等（2018）的試驗表明纖維素酶和復(fù)合益生菌的聯(lián)合處理可降低WSC、pH、酵母菌和需氧菌的數(shù)量，提高全株玉米青貯的營養(yǎng)價值和品質(zhì)；張適等（2020）也得出纖維素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶可顯著提高玉米青貯WSC 和乳酸含量、降低氨態(tài)氮∕總氨，更適于用作全株玉米青貯飼料的酶制添加劑的結(jié)論。

此外，張適等（2020）對混合酶制劑的研究還表明，β-葡聚糖酶+纖維素酶和β-葡聚糖酶+果膠酶的組合能使WSC含量極顯著提高，氨態(tài)氮∕總氮顯著降低，更適于用作全株玉米青貯飼料的添加劑。殷術(shù)鑫等（2019）的研究則表明添加菌-酶制劑（主要成分為乳酸菌和纖維素酶）可提升DM和CP含量，降低粗脂肪、中性洗滌纖維含量，提升青貯品質(zhì)和效果；劉妍妍等（2021）也發(fā)現(xiàn)添加酶制劑可有效抑制酵母菌生長，提高青貯飼料質(zhì)量，增加CP含量，降低pH、中性洗滌纖維與酸性洗滌纖維的含量，表明酶制劑的加入能夠有效改善玉米青貯的發(fā)酵質(zhì)量和化學(xué)組成。

1.5 其他物質(zhì)對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

從國內(nèi)外青貯行業(yè)起步到發(fā)展至今，乙醇已成為較為普遍的有機添加劑，通過影響青貯制備的相關(guān)指標(biāo)改善其品質(zhì)。Weiss（2017）的研究表明乙醇濃度和青貯飼料pH 密切相關(guān)，而乙醇提取物的加入可以降低青貯中真菌毒素的濃度，提升飼料品質(zhì)。而乙醇與其他物質(zhì)作為混合添加劑時對有氧穩(wěn)定性提升所展現(xiàn)出的更明顯的效果，使其開發(fā)的前景更加寬廣。

乙醇可以作為單獨的添加劑，添加乙醇對全株玉米青貯的發(fā)酵并沒有顯示出明顯的抑制作用，但添加后pH上升速率的顯著降低表明了全株玉米青貯有氧穩(wěn)定性的提升，顯示出乙醇抑制青貯飼料有氧腐敗的較大潛力，而研究表明乙醇與其他物質(zhì)組成混合添加劑時對有氧穩(wěn)定性的提升效果更加明顯，乙醇與植物乳桿菌的結(jié)合保證了更高發(fā)酵質(zhì)量的同時，可以提高有氧穩(wěn)定性；Uegaki等（2017）的研究也表明乙醇蒸騰劑與氧清除劑的聯(lián)合使用可以促進(jìn)青貯發(fā)酵。這也為乙醇添加劑的開發(fā)指明了新的方向。

2 環(huán)境條件對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

環(huán)境條件的控制對于青貯發(fā)酵至關(guān)重要，堆積密度和溫濕度一直是青貯有氧穩(wěn)定性的關(guān)鍵環(huán)境因素，密切影響著青貯中各菌群的繁殖和數(shù)量變化，是保證有氧穩(wěn)定性時必須注意的方面之一。此外，間接影響環(huán)境條件的因素同樣需要注意，包裝后延遲密封對青貯發(fā)酵效率產(chǎn)生負(fù)面影響，表明嚴(yán)格避免延遲密封對提高青貯飼料生產(chǎn)穩(wěn)定性的重要性。在青貯飼料貯存的早期階段，空氣的存在促進(jìn)了酵母活性，縮短了青貯開啟后在有氧條件下穩(wěn)定保存的時間。

2.1 堆積密度對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

青貯料的堆積密度對有機質(zhì)氧化有影響，被認(rèn)為是青貯保存的關(guān)鍵參數(shù)。較高的密度與較低的孔隙率、較低的空氣量和青貯中較慢的氧氣流動有關(guān)，從而減少由于氧氣含量過高造成的損失，使全株玉米需氧穩(wěn)定性提升。Neureiter等（2005）對全株玉米青貯的研究也表明，未壓縮和未緊密密封的青貯具有比壓縮青貯更高的pH、更低的乳酸含量和更差的有氧穩(wěn)定性。玉米青貯飼料在采用布氏乳桿菌40788和戊糖片球菌12455初級處理制備后，正常密度的包裝相較于低密度組也展現(xiàn)出更好的有氧穩(wěn)定性。而這些結(jié)論在其他類似的青貯飼料上也已被多個學(xué)者證實。Ruppel（1992）對苜蓿青貯的研究發(fā)現(xiàn)密度與青貯總固體損失之間的關(guān)系總體呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性。Zheng等（2011）采用480、720 kg∕m3和960 kg∕m3的填料密度進(jìn)行的試驗表明較高的密度提供了更好的青貯品質(zhì)這一結(jié)論；Nussbaum（2012）發(fā)現(xiàn)，由于儲存期間堆積密度過低造成的有氧條件，多年生黑麥草青貯飼料的有氧穩(wěn)定性下降了98～104 h。但堆積密度可能影響廢水產(chǎn)量進(jìn)而影響有氧穩(wěn)定性，其間的具體關(guān)系仍有待探明。

2.2 溫濕度對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

不同的乳酸菌其生長繁殖的最適溫度范圍各不相同，因此溫度對青貯過程至關(guān)重要。Weinberg 等（2001）的研究表明全株玉米在高溫（37～41 ℃）中進(jìn)行青貯比低溫（24～28 ℃）時產(chǎn)生更高的pH、更少的乳酸和更大的損失。Kim 等（2006）也認(rèn)為40 ℃時青貯飼料的有氧穩(wěn)定性低于20 ℃時。溫度較高的青貯飼料在有氧條件下穩(wěn)定保存的時間更短，尤其是在環(huán)境溫度較高的情況下。除此之外，玉米收獲時的潮濕條件對玉米青貯發(fā)酵也有不利影響。有研究表明提高環(huán)境溫度會促進(jìn)有害微生物（如梭狀芽孢桿菌）的生長和繁殖從而增加青貯玉米有氧變質(zhì)的可能。另外貯藏溫度較高（30 ℃和45 ℃）的王草（Pennisetum purpureum×P.americanum）青貯飼料有氧穩(wěn)定較好，而貯藏溫度較低（15 ℃）的王草青貯飼料有氧穩(wěn)定性較差。

3 不同品種及成熟階段對青貯玉米有氧穩(wěn)定性的影響

袁仕改等（2019）研究發(fā)現(xiàn)，不同的玉米品種在有氧條件下的穩(wěn)定保存時間具有較大差異，最長的可達(dá)122 h，而最短的只有36 h。Higginbotham等（1998）試驗表明全株玉米于早期較于成熟期在有氧條件下表現(xiàn)出更短的穩(wěn)定保存時間，F(xiàn)ilya（2004）研究凹陷早期、乳線期（1∕3、2∕3階段）以及乳線消失期3個時期中全株玉米青貯，結(jié)果凹陷早期時有氧條件下的穩(wěn)定保存時間最短，與Higginbotham 的結(jié)果呈現(xiàn)出一定的相似性，可能原因是全株玉米青貯在凹陷早期相較于其他階段乙酸含量更低。劉朝干等（2007）的研究表明，WSC在玉米成熟的早期時含量較高，大量的WSC作為乳酸菌的發(fā)酵底物利于青貯玉米的發(fā)酵，到玉米的成熟晚期時，WSC含量較低，對玉米青貯的發(fā)酵無顯著影響。因此，對于玉米青貯，在其乳線期1∕3 到2∕3 階段時發(fā)酵質(zhì)量與有氧條件下的穩(wěn)定保存時間較為可觀。Bai等（2021）認(rèn)為全株青貯玉米含水量的不同會影響其有氧穩(wěn)定性，通過對比在1∕3和2∕3乳線期收獲的兩種不同水分水平（1∕3 乳線期為高水分含量680 g∕kg，2∕3乳線期為低水分含量620 g∕kg）的玉米植株發(fā)現(xiàn)高含水量提高了有氧穩(wěn)定性。

4 小結(jié)

各因素對全株玉米青貯有氧穩(wěn)定性的影響如表1所示。

表1 不同因素對全株玉米青貯有氧穩(wěn)定性的影響

目前提高青貯飼料有氧穩(wěn)定性主要是通過添加如有機酸、有益微生物等添加劑及控制環(huán)境條件。微生物與有機酸及其鹽類、乙醇等其他物質(zhì)組成的添加劑相比，布氏乳桿菌等異型乳酸菌制劑的加入雖然會損失部分營養(yǎng)物質(zhì)，但使其有氧穩(wěn)定性得到改善，在質(zhì)量提高的同時保存時間延長，因此開發(fā)潛力巨大。由此可見，開發(fā)新型添加劑對促進(jìn)青貯飼料有氧穩(wěn)定性品質(zhì)的提高意義重大。另一方面，越來越多的有益菌群已被發(fā)現(xiàn)和鑒定，對其機理的研究和開發(fā)也是今后值得關(guān)注的重點。