袁瑩瑩

中國藥科大學(xué)

喬亞森

中國食品藥品檢定研究院/國家藥品監(jiān)督管理局化妝品研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

董亞蕾＊

中國食品藥品檢定研究院/國家藥品監(jiān)督管理局化妝品研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

孫磊＊

中國食品藥品檢定研究院/國家藥品監(jiān)督管理局化妝品研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

隨著人們生活質(zhì)量的不斷提高，我國已成為化妝品消費(fèi)大國，與此同時(shí)消費(fèi)者安全意識(shí)日益增強(qiáng)，“安全、天然、綠色”逐漸成為化妝品領(lǐng)域的發(fā)展主題[1]?！痘瘖y品監(jiān)督管理?xiàng)l例》（以下簡稱《條例》）的頒布實(shí)施，使我國傳統(tǒng)特色植物資源化妝品原料的開發(fā)應(yīng)用邁入一個(gè)新的發(fā)展階段[2]。相比于化學(xué)合成類成分，植物提取物常應(yīng)用于不同功效化妝品中，滿足消費(fèi)者對(duì)于“安全、天然”及功效性的追求。

《條例》的頒布對(duì)我國化妝品市場的新原料發(fā)展趨勢(shì)具有較大的影響，植物提取物作為未來的發(fā)展重點(diǎn)，其注冊(cè)和備案數(shù)量也將大幅度增長。盡管植物提取物來源天然，但其組成較為復(fù)雜，因此對(duì)其安全性的考察[3]也是未來監(jiān)管重點(diǎn)之一。同時(shí)隨著宣稱植物提取物為功效成分的化妝品市場的擴(kuò)大，其中所含功效性植物原料的檢測方法也逐漸引起人們重視。植物原料功效成分的檢測，能夠?yàn)橹参镱惢瘖y品的質(zhì)量控制提供依據(jù)，還可以在一定程度上打擊概念性添加等問題。因此，本文將從檢測方法對(duì)植物化妝品的功效和安全兩方面進(jìn)行概述。

1 化妝品中植物提取物的應(yīng)用

植物提取物活性成分較為復(fù)雜，主要包括黃酮、多酚、萜類、揮發(fā)油、氨基酸等多種形式。根據(jù)活性組分不同的組成和結(jié)構(gòu)，植物提取物可以發(fā)揮抗氧化、保濕、舒緩等不同功效。目前化妝品原料的備案數(shù)量中約1/4 為植物提取物，據(jù)統(tǒng)計(jì)[4-5]，植物提取物中以甘草提取物、人參提取物、積雪草提取物等應(yīng)用較為廣泛。

2 化妝品中植物提取物的檢測方法

植物提取物的成分復(fù)雜，為保證化妝品市場的規(guī)范性和消費(fèi)者的身體健康，亟需相關(guān)的檢測方法對(duì)植物化妝品的安全性和有效性進(jìn)行檢測及監(jiān)督，并為打擊產(chǎn)品的虛假宣稱等行為提供技術(shù)支撐。目前，對(duì)于植物提取物的檢測常用的方法包括高效液相色譜 法（high performance liquid chromatography，HPLC）、高效液相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用法（high performance liquid c h r o m a t o g r a p h y-t a n d e m mass spectrometry，HPLCMS）（以下簡稱液質(zhì)聯(lián)用法）、氣相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用法（gas chromatography - tandem mass spectrometry，GC-MS）（以下簡稱氣質(zhì)聯(lián)用法）以及毛細(xì)管電泳法等。

2.1 高效液相色譜法

高效液相色譜法是一種較為成熟的色譜分離方法，具有高效、靈敏等優(yōu)點(diǎn)，目前廣泛應(yīng)用于各種藥物制劑、生物樣品、食品及化妝品等領(lǐng)域。目前高效液相色譜檢測技術(shù)可針對(duì)植物中的一種[6]或多種成分[7]進(jìn)行檢測。

在日益擴(kuò)張的美白類化妝品市場中，化妝品的不良反應(yīng)事件時(shí)有發(fā)生，因此國家藥品監(jiān)督管理部門對(duì)于美白類化妝品的管理越發(fā)嚴(yán)格，并將美白類產(chǎn)品列入特殊化妝品進(jìn)行管理。為提高效率，做到同時(shí)檢測不同植物提取物中美白活性標(biāo)識(shí)組分，高家敏等[8]開發(fā)了一種可以同時(shí)檢測包括甘草苷、紅景天苷等7 種植物提取物標(biāo)識(shí)組分的高效液相色譜法。該方法顯示了良好的線性范圍和靈敏度，是一種快速高效的檢測手段。高俊飛等[9]通過優(yōu)化樣品前處理及檢測參數(shù)，為使用頻率較高的植物提取物建立了快速準(zhǔn)確檢測化妝品中4 種植物提取物的11 種標(biāo)識(shí)組分的液相色譜法。

近年來，脫發(fā)逐漸變成困擾人們的問題，以中藥為主要原料的育發(fā)液隨之大量涌現(xiàn)。中藥提取物因其保存制備等環(huán)節(jié)中易引入風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)，易造成光毒性、皮膚刺激性等問題[10]，因此，亟需相應(yīng)的檢測方法對(duì)育發(fā)類產(chǎn)品進(jìn)行監(jiān)管。譚建華等[11]利用超高效液相色譜法對(duì)常見的包括何首烏苷、蘆丁在內(nèi)的17 種育發(fā)中藥提取物的標(biāo)識(shí)組分進(jìn)行檢測，建立了一種具有良好靈敏度和線性范圍的方法。并對(duì)市售多批育發(fā)類產(chǎn)品進(jìn)行檢測，得出目前該類產(chǎn)品的實(shí)際添加量較少，是否能起到真實(shí)作用有待后續(xù)查證的結(jié)論。

本文總結(jié)了近年來高效液相色譜技術(shù)在化妝品中植物提取物的檢測方面應(yīng)用實(shí)例，詳見表1。

表1 （超）高效液相色譜技術(shù)在化妝品中植物提取物檢測中的應(yīng)用實(shí)例

續(xù)表

2.2 高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

高效液相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用法技術(shù)不僅可以提供豐富的物質(zhì)結(jié)構(gòu)信息，還具有專屬性強(qiáng)、靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛運(yùn)用于藥學(xué)、臨床、食品以及化妝品等領(lǐng)域，解決了很多僅利用液相色譜或者質(zhì)譜面臨的難題。

張偉清等[18]利用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法建立了一種可以快速、準(zhǔn)確測定人參中人參皂苷Rg1 和Re 兩種指標(biāo)性成分的方法，為植物化妝品的監(jiān)管提供了技術(shù)支撐。對(duì)于其他具有美白功能的植物提取物，董亞蕾[19]等采用超高效液相色譜—四極桿串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜法對(duì)甘草提取物中的光果甘草進(jìn)行檢測，并利用31批樣品檢測方法的適用性，結(jié)果顯示該方法的專屬性、靈敏度良好，可對(duì)市售化妝品中的光甘草定進(jìn)行快速分析。

呋喃香豆素是一類光毒性物質(zhì)，其在一些作為香精香料的植物提取物中較為常見?？死椎聽朳20]等利用液質(zhì)聯(lián)用法對(duì)洗發(fā)水、沐浴露等化妝品中的光毒性呋喃香豆素類物質(zhì)進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示該方法可以快速準(zhǔn)確地對(duì)其進(jìn)行定性及定量，為化妝品的安全性檢測提供了新思路。

本文列舉了液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測化妝品中植物提取物的實(shí)例，詳見表2。

表2 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測化妝品中植物提取物的實(shí)例

續(xù)表

2.3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法適用于分析分子量較低的化合物，特別是揮發(fā)性物質(zhì)，其被廣泛應(yīng)用于分析和鑒定中藥材等植物原料中的揮發(fā)性成分、食品和中藥材中的農(nóng)藥殘留以及化妝品中的揮發(fā)性香精和香料。

香精和香料是化妝品中常見的添加劑，也是主要的致敏源。新鈴蘭醛在歐盟屬于禁用物質(zhì)，盡管目前我國并未將其歸為禁用物質(zhì)，但是建立相關(guān)的檢測方法也尤為重要。易路遙等[32]利用氣質(zhì)聯(lián)用法對(duì)多種化妝品中致敏香料新鈴蘭醛Ⅰ和Ⅱ含量進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示該方法的適用性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，為保障化妝品的質(zhì)量安全提供了良好的技術(shù)手段。

揮發(fā)油作為薄荷的功效成分具有抗炎鎮(zhèn)痛、抑菌的作用。周芳芳[33]利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法，對(duì)于多種混合油和薄荷原油進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示該方法專屬性、分離度良好，可以滿足在化妝品產(chǎn)品中的檢測需求。

植物精油因其宜人的芳香氣味經(jīng)常被應(yīng)用于香水類產(chǎn)品中，余悅等[34]利用氣質(zhì)聯(lián)用法對(duì)15種植物精油的致敏成分進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示植物精油中具有多種致敏組分，并建議應(yīng)建立相關(guān)的規(guī)范進(jìn)行監(jiān)管。近年來，已有研究人員針對(duì)化妝品中的揮發(fā)性植物原料組分建立了氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法，其典型應(yīng)用實(shí)例，詳見表3。

表 3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測化妝品中植物提取物的實(shí)例

2.4 毛細(xì)管電泳法

毛細(xì)管電泳法采用高壓直流電場作為驅(qū)動(dòng)力，以毛細(xì)管作為分離通道。毛細(xì)管電泳法可以基于不同性質(zhì)的待測樣品在毛細(xì)管中的遷移速度的差異實(shí)現(xiàn)快速、高效分離的目的。

Wang Ping 等[40]利 用 毛 細(xì)管電泳法對(duì)化妝品中的多種對(duì)羥基苯甲酸酯類防腐劑進(jìn)行測定，加標(biāo)回收率為93.0%～102.7%。該方法預(yù)處理簡單，可以滿足快速分析的要求。Xue Yong 等[41]采用液液微萃取前處理的方式，結(jié)合毛細(xì)管電泳法對(duì)化妝品中的水楊酸等防腐劑進(jìn)行檢測，該方法彌補(bǔ)了電泳法在微量測定中的不足。

2.5 實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜法

實(shí)時(shí)直接分析離子源作為軟電離技術(shù)，可與高分辨質(zhì)譜結(jié)合進(jìn)行檢測。該法具有快速、高效等優(yōu)點(diǎn)，在藥品、食品、環(huán)境等領(lǐng)域應(yīng)用較為廣泛。目前已有研究人員將實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜法應(yīng)用于化妝品檢測中，可以滿足直接、快速的需求。

張佳玲等[42]利用實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜法對(duì)精油類化妝品中的糖皮質(zhì)激素進(jìn)行檢測，該法不需復(fù)雜的前處理技術(shù)，可快速直接地進(jìn)行檢測，并可避免溶劑的浪費(fèi)實(shí)現(xiàn)快速檢測。邵澤輝等[43]利用實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜法對(duì)化妝品中的甜菜堿進(jìn)行檢測，可以在短時(shí)間內(nèi)測出精確分子量，該方法可以高效地對(duì)甜菜堿進(jìn)行定性分析。谷婕等[44]利用實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜法對(duì)膏霜類基質(zhì)化妝品中的禁用瑞香科植物提取物組分進(jìn)行檢測，并利用實(shí)測樣品檢測方法適用性。結(jié)果顯示，該法可以快速檢出芫花中的芫花素、羥基芫花素，以及了哥王中的芫花素和西瑞香素。該方法可簡便快捷地進(jìn)行定量，在高通量篩選上具有良好的應(yīng)用前景。

3 趨勢(shì)及展望

在植物源化妝品數(shù)量激增的趨勢(shì)下，植物提取物因含量、光毒性、致敏等因素帶來的安全隱患不容忽視。因此，建議監(jiān)管人員需進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)植物提取物功效成分的分析及其作用機(jī)制的研究，還要加強(qiáng)對(duì)其不良反應(yīng)及其安全性能的檢測研究。同時(shí)對(duì)于化妝品中的植物提取物概念性添加的問題出臺(tái)相應(yīng)的管理法規(guī)及檢測方法指南。

目前，應(yīng)用較為廣泛的高效液相色譜法、液質(zhì)聯(lián)用法具有高效、專屬性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，但是對(duì)于揮發(fā)性物質(zhì)具有一定局限性；氣質(zhì)聯(lián)用法可以對(duì)揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行檢測，但該方法前處理較為復(fù)雜；實(shí)時(shí)直接分析質(zhì)譜法溶劑消耗量少，但在定量方面仍需加強(qiáng)；毛細(xì)管電泳法具有高效、快速、簡便的優(yōu)點(diǎn)，但載樣量低，靈敏度不高。未來，研究人員仍需著重探尋高效簡便、綠色環(huán)保、高通量的檢測方法。此外，在研究過程中結(jié)合檢測方法篩選出的安全高效的植物提取物可以以其優(yōu)質(zhì)的特性在化妝品中進(jìn)行推廣應(yīng)用。