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        肝細(xì)胞癌組織中PHF2表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系

        2022-12-19 06:52:40楊軍孫龍趙健全季驪宋輝
        臨床外科雜志 2022年11期
        關(guān)鍵詞:肝細(xì)胞肝硬化分級(jí)

        楊軍 孫龍 趙健全 季驪 宋輝

        原發(fā)性肝癌是我國(guó)常見(jiàn)惡性腫瘤,死亡率占惡性腫瘤前三[1-2]。目前關(guān)于肝細(xì)胞癌發(fā)生機(jī)制尚未完全明確[3]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn),PHF手指蛋白2(PHF2)參與惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[4]。PHF2是Jmjc家族成員之一,位于9q22.31,能夠調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄。PHF2在結(jié)腸癌、胃癌組織中呈低表達(dá),并且低表達(dá)影響預(yù)后,并能促進(jìn)腫瘤進(jìn)展,但在肝細(xì)胞癌作用沒(méi)有完全清楚[5],與腫瘤臨床病理特征及預(yù)后關(guān)系尚不清楚。我們檢測(cè)肝細(xì)胞癌病人癌組織及癌旁組織中PHF2表達(dá)情況,分析其與臨床病理特征、預(yù)后的關(guān)系。

        對(duì)象與方法

        一、對(duì)象

        2015年1月~2019年1月診治的肝細(xì)胞癌病人121例,術(shù)前未做過(guò)任何針對(duì)本病的治療。年齡44~81歲,平均年齡(50.50±5.15)歲;男性86例、女性35例;脈管癌栓97例;腫瘤直徑1.25~11.51 cm,平均(5.26±1.45)cm;病理分級(jí)Ⅰ級(jí)16例、Ⅱ級(jí)64例、Ⅲ級(jí)26例、Ⅳ級(jí)15例;血清HBsAg陰性21例、陽(yáng)性100例;肝硬化97例;吸煙史94例;飲酒史106例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)病理檢查為肝細(xì)胞癌;(2)成年病人;(3)知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn):酒精性脂肪肝;妊娠期哺乳期;合并其他惡性腫瘤;合并代謝性疾??;血液性疾病。

        二、方法

        1.臨床資料收集:包括年齡、性別、腫瘤直徑、病理分級(jí)、血清HBsAg、肝硬化、吸煙史和飲酒史。血清HBsAg陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)≥20 ng/ml,陰性<20 ng/ml。病理分級(jí)參考《中國(guó)常見(jiàn)惡性腫瘤診治規(guī)范》中的Edmondson分級(jí)法,Ⅰ級(jí)癌細(xì)胞形態(tài)似正常肝細(xì)胞、Ⅱ級(jí)癌細(xì)胞略異型、Ⅲ級(jí)癌細(xì)胞異形明顯、Ⅳ級(jí)癌細(xì)胞形態(tài)變異大。

        2.肝細(xì)胞癌病人癌組織及癌旁組織中PHF2表達(dá)檢測(cè):手術(shù)取除肝細(xì)胞癌組織及癌旁組織(近腫瘤邊緣2 cm)。采用免疫組化SP法。組織切片經(jīng)二甲苯、不同濃度酒精脫蠟,枸櫞酸鈉修復(fù)抗原,過(guò)氧化物酶封閉15分鐘。加入兔抗人PHF2抗體(1∶200,Abcam 公司),4 ℃冰箱過(guò)夜。二抗1小時(shí),3,3'-二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽顯色5分鐘,依次通過(guò)蘇木素、鹽酸酒精、氨水,通過(guò)不同濃度酒精、二甲苯,封片。PHF2陽(yáng)性位于細(xì)胞核。(1)染色程度:無(wú)0分,淺黃色1分,黃色2分,棕黃色3分。(2)每張高倍鏡下選5個(gè)視野,計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比:<5% 為0分。5%~25%為1分,25%~50%為 2分,>50%為3分。(1)+(2)<2為陰性,≥2為陽(yáng)性。

        3.隨訪:采用電話隨訪及門(mén)診復(fù)查等方式統(tǒng)計(jì)病人3年生存情況及生存時(shí)間,如病人失聯(lián)則聯(lián)系其親屬。

        三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        結(jié)果

        1.癌組織及癌旁組織的PHF2表達(dá)情況比較見(jiàn)表1、圖1。結(jié)果表明,癌旁組織中PHF2陽(yáng)性表達(dá)率高于癌組織,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        表1 癌組織及癌旁組織的PHF2表達(dá)情況比較(例,%)

        A.癌旁組織(SP×20);B.癌組織(SP×20)圖1 癌旁組織及癌組織PHF2表達(dá)

        2.癌組織中PHF2表達(dá)情況與肝細(xì)胞癌臨床資料關(guān)系分析見(jiàn)表2。結(jié)果表明,PHF2表達(dá)與年齡、性別、吸煙史、飲酒史無(wú)關(guān)(P>0.05);PHF2表達(dá)與腫瘤直徑、病理分級(jí)、血清HBsAg、肝硬化有關(guān)(P<0.05)。

        表2 癌組織中PHF2表達(dá)情況與肝細(xì)胞癌臨床資料的關(guān)系(例,%)

        3.肝細(xì)胞癌病人組織中PHF2表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系分析:PHF2陰性表達(dá)病人平均生存時(shí)間為(16.24±2.11)個(gè)月,陽(yáng)性表達(dá)為(21.29±2.18)個(gè)月,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖2。多因素Cox回歸分析顯示,病人預(yù)后與腫瘤直徑、年齡、性別、飲酒史、肝硬化、血清HBsAg無(wú)關(guān),而與病理分級(jí)、PHF2表達(dá)相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表3。

        圖2 肝細(xì)胞癌病人組織中PHF2表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系

        表3 多因素Cox回歸分析肝細(xì)胞癌預(yù)后相關(guān)的危險(xiǎn)因子

        討論

        近年來(lái)肝細(xì)胞癌發(fā)病率逐漸升高,大部分病人確診時(shí)已是中晚期,錯(cuò)失最佳手術(shù)時(shí)機(jī)。早期診斷對(duì)改善預(yù)后尤為重要。

        PHF2也稱為KDM7C,主要在正常組織表達(dá),可通過(guò)甲基化賴氨酸進(jìn)行調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄。多項(xiàng)研究表明,PHF2在多種惡性腫瘤組織中低表達(dá),與腫瘤的臨床病理特征、預(yù)后有關(guān)。但PHF2在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)尚不清楚[6-8]。本研究結(jié)果顯示,肝細(xì)胞癌組織中PHF2低表達(dá),提示PHF2可能參與了肝細(xì)胞癌的發(fā)生。我們分析可能是PHF2的去甲基化,促進(jìn)凋亡基因轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡,抑制腫瘤細(xì)胞的增殖,從而抑制腫瘤生長(zhǎng)。病理分級(jí)與腫瘤預(yù)后密切相關(guān),分級(jí)越高病人預(yù)后越差,本研究發(fā)現(xiàn)PHF2表達(dá)水平與病理分級(jí)、腫瘤直徑有關(guān),可能是因?yàn)镻HF2下調(diào)失去了對(duì)腫瘤的抑制作用,從而使腫瘤的侵襲、遷移等行為增強(qiáng),導(dǎo)致分期的升高,腫瘤直徑的增加。乙肝病毒是肝癌的病因之一,此類病人預(yù)后不佳。本研究結(jié)果顯示,PHF2表達(dá)水平與血清HBsAg、有肝硬化有關(guān),提示PHF2在乙肝病毒感染病人中起到特殊作用。

        我們分析了PHF2表達(dá)與肝細(xì)胞癌病人預(yù)后的關(guān)系,結(jié)果顯示,PHF2陰性表達(dá)病人的預(yù)后較差,與文獻(xiàn)結(jié)果相似[9-10]。有研究顯示,Wnt、P13K/AKt/mTOR信號(hào)通路在原發(fā)性腫瘤表達(dá)上調(diào)[11-12];與腫瘤的增殖、凋亡及轉(zhuǎn)移關(guān)系密切,但關(guān)于PHF2是否通過(guò)抑制Wnt、P13K/AKt/mTOR信號(hào)通路或激活P53信號(hào)通路發(fā)揮抑癌作用的尚不清楚。我們還將進(jìn)一步探索PHF2是通過(guò)何種信號(hào)通路對(duì)肝癌的發(fā)生、發(fā)展及生物學(xué)行為產(chǎn)生影響。

        綜上所述,肝細(xì)胞癌病人癌組織中PHF2低表達(dá),與臨床病理特征及預(yù)后有關(guān),有望成為潛在的靶點(diǎn)。

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