王運盛，陳 輝，王叢菊，范昕琳，國欣欣，趙素芬，蔣 鵬，盧 巖*

（1.北京動物園管理處，北京 100044；2.圈養(yǎng)野生動物技術(shù)北京市重點實驗室，北京 100044；3.歐樂堡動物王國，山東德州 251104）

疾病防治在野生動物飼養(yǎng)管理工作中占有舉足輕重的作用和意義[1]。然而，由于病理技術(shù)的缺乏，野生動物疾病診治工作現(xiàn)階段主要依靠臨床獸醫(yī)進(jìn)行推進(jìn)。如何將病理學(xué)診斷盡快應(yīng)用于野生動物疾病診斷中，成為現(xiàn)階段需要關(guān)注的問題。北京動物園獸醫(yī)院于2021年收到外單位死亡赤猴樣本，通過組織病理學(xué)方法對赤猴進(jìn)行病理學(xué)診斷，以期為今后病理診斷技術(shù)在野生動物中的推廣應(yīng)用供對應(yīng)思路和基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 病料（病例概述）

赤猴，雌性，成年，2021年12月28日流產(chǎn)，流產(chǎn)后精神不振、持續(xù)消瘦，下頜水腫；臨床獸醫(yī)根據(jù)病情及時進(jìn)行治療（拜有利、巴曲亭、地塞米松等），經(jīng)治療未見好轉(zhuǎn)，最后死亡。

1.2 試驗方法

1.2.1 血樣化驗室診斷

赤猴發(fā)病后進(jìn)行血樣采集，采血前1天進(jìn)行隔離觀察，禁食16h，采血后進(jìn)行外周血生化檢測。

1.2.2 病理樣本采集

赤猴死后立即解剖，取材后內(nèi)臟組織迅速投入10%的福爾馬林液，進(jìn)行病理組織切片前處理。

1.2.3 H.E.染色

石蠟切片分別經(jīng)二甲苯I、II脫蠟5 min，之后浸入無水乙醇/二甲苯（1：1）混合液中5min，依次經(jīng)無水乙醇I、無水乙醇II、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度復(fù)水，下行至雙蒸水中，蘇木精染色10 min，1%鹽酸酒精分色數(shù)秒，水洗返藍(lán)15min，再依次通過50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脫水后，伊紅染色1 min，95%乙醇洗滌3次，再經(jīng)無水乙醇I、II各5min，二甲苯I、II各透明5min，最后用中性樹膠封片。切片放置于37℃溫箱內(nèi)過夜烘干后鏡檢。光學(xué)顯微鏡下觀察赤猴組織病理學(xué)變化情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 赤猴血液生化指標(biāo)檢測結(jié)果

經(jīng)化驗室診斷發(fā)現(xiàn)赤猴肌酐（364.6）、尿素氮（38.86）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（650）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（599）、乳酸脫氫酶（1030）、肌酸激酶（1132）、淀粉酶（820）指標(biāo)顯著高于參考范圍，其余指標(biāo)基本在參考范圍上下浮動。結(jié)合動物臨床癥狀，赤猴疑似出現(xiàn)急性腎炎與肝損傷、心肌炎與急性胰腺炎（表1）。

表1 赤猴生化參數(shù)檢測

2.2 赤猴臨床剖檢病觀察

赤猴尸重4.5kg。胸腔積液，積液呈淡紅色（圖1A）；

各器官色澤偏淡，水腫明顯（圖1B）；

右心房心室壁肥厚，左心房心室壁薄，二尖瓣有少量淤血塊，心肌蒼白，心包積液約10ml（圖1C）；

肺表現(xiàn)可見彌漫性出血斑，邊緣少量氣腫（圖1D）；

肝呈淡黃色濁腫，質(zhì)地如泥，表面不光滑（圖1E）；

腎皮質(zhì)、髓質(zhì)分界不清，呈土黃色（圖1F）。

圖1 赤猴臨床剖檢觀察

膽囊充盈，膽汁濃稠呈黃色。脾質(zhì)地硬實，腫大，表面不光滑。胰腺腫脹，呈紅褐色。

2.3 赤猴病理變化

鏡下觀察，腎組織水腫明顯，腎間質(zhì)可見管型；高倍鏡下腎小囊間隙增寬，腎小囊內(nèi)可見少量蛋白滲出。近曲小管、遠(yuǎn)曲小管上皮細(xì)胞中腫脹明顯，部分上皮細(xì)胞破裂、崩解（圖2A）；

脾組織水腫，小梁增生，白髓結(jié)構(gòu)紊亂，白髓輕微增生，淋巴細(xì)胞腫脹（圖2B）；

肝細(xì)胞水泡變性明顯；高倍鏡下肝細(xì)胞壞死、腫脹，成氣球樣，細(xì)胞核濃縮，懸浮于肝細(xì)胞中央，肝組織少量出血，少量炎性細(xì)胞浸潤（圖2C）；

心內(nèi)膜心肌細(xì)胞腫脹；高倍鏡下可見少量出血，心肌細(xì)胞增寬，心肌細(xì)胞水腫明顯（圖2D）；

低倍鏡下可見胰腺輕微壞死，胰腺內(nèi)可見炎性細(xì)胞聚集；高倍鏡下胰腺水腫，組織間隙增寬，壞死胰腺泡出現(xiàn)聚集，炎性細(xì)胞主要成分為淋巴細(xì)胞（圖2E）；

肺組織間隔增寬，高倍鏡下肺間隔內(nèi)可見炎性細(xì)胞浸潤（圖2F）。

圖2 赤猴病理學(xué)觀察

3 診斷

經(jīng)臨床剖檢觀察以及組織病理學(xué)診斷，赤猴患有亞急性腎小球腎炎；脾水腫、增生；肝壞死、水腫；心肌水腫；急性胰腺炎以及間質(zhì)性肺炎，最后導(dǎo)致赤猴的死亡。

4 討論

亞急性腎小球腎炎（subacute glomerulonephritics）通常是急性腎小球腎炎的后續(xù)表現(xiàn)。臨床上多表現(xiàn)為體積腫大、手觸質(zhì)軟、顏色蒼白或淡黃。在病理學(xué)診斷中亞急性腎小球表現(xiàn)在腎小球囊內(nèi)出現(xiàn)滲出（上皮細(xì)胞、白細(xì)胞、紅細(xì)胞、纖維素等），嚴(yán)重時滲出可見新月形或環(huán)狀體。若病程繼續(xù)發(fā)展，將導(dǎo)致腎小管上皮細(xì)胞腫脹、顆粒變性，甚至萎縮、消失，最后發(fā)生腎纖維化。

急性胰腺炎（acute pancreatitis），又稱急性出血性胰腺壞死（hemorrhagic necrosis of pancreas），是以胰腺水腫、出血和壞死為特征的胰腺炎。臨床上多表現(xiàn)為胰腺水腫、手觸質(zhì)軟、色澤暗紅。顯微鏡下胰腺泡壞死細(xì)胞周圍可見炎性細(xì)胞聚集，并伴隨出血或微血栓。急性胰腺炎后期往往出現(xiàn)胰腺纖維化或發(fā)展為慢性胰腺炎。

間質(zhì)性肺炎（interstitial pneumonia）屬于肺炎的一種，其特征為肺間質(zhì)（肺泡壁、支氣管及血管周圍、肺小葉間質(zhì)）發(fā)生的炎癥。臨床上間質(zhì)性肺炎與大葉性肺炎難以進(jìn)行鑒別診斷，需要依靠病理學(xué)診斷進(jìn)行確診。間質(zhì)性肺炎病理學(xué)診斷要點為肺間質(zhì)增寬，增寬的間質(zhì)中炎性細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞）浸潤。若病程延長，后期可引起肺組織纖維化，導(dǎo)致右心衰竭。

赤猴（Erythrocebus patas），原產(chǎn)于西非，由于其外表呈橘紅色，故稱為赤猴?！妒澜缱匀槐Ｗo聯(lián)盟》（IUCN）2008年瀕危物種紅色名錄被列為無危（LC），屬于《華盛頓公約》CITES 附錄Ⅱ級保護動物[4]。作為引進(jìn)物種，赤猴具有較高的觀賞性，近年來國內(nèi)赤猴種群規(guī)模不斷擴大。因此，與赤猴相關(guān)的疾病診治工作壓力也逐年增加。由于赤猴靈活性強、奔跑速度快，常見赤猴疾病主要為運動、打斗引起的損傷。對于其他疾病，由于專業(yè)的野生病理學(xué)技術(shù)的缺乏，往往需要臨床獸醫(yī)的個人經(jīng)驗進(jìn)行處置[5]。在本文中，死后赤猴臨床剖檢主要表現(xiàn)為各臟器的水腫，眼觀病變并不明顯，而經(jīng)過病理學(xué)診斷，發(fā)現(xiàn)該赤猴的心、肝、腎、脾、肺、胰腺均出現(xiàn)不同程度的病變，其中腎、胰腺、肺組織病變明顯。表明赤猴生前經(jīng)歷流產(chǎn)，體質(zhì)衰弱，機體免疫力降低，引起亞急性腎小球腎炎、急性胰腺炎、間質(zhì)性肺的發(fā)生；赤猴腎功能、消化功能以及肺功能出現(xiàn)障礙，最后導(dǎo)致了赤猴的死亡。

該病例也從病理學(xué)角度闡明了一個問題，即在野生動物疾病診治的過程中，由于臨床剖檢工作的局限性，死后剖檢往往無法用肉眼觀察到明顯病變，導(dǎo)致無法及時確診，極易影響后續(xù)同群動物的預(yù)防性治療。因此，病理學(xué)診斷在野生動物疾病防治工作中的應(yīng)用，就顯得額外重要。

5 結(jié)論

本研究采用病理學(xué)技術(shù)，結(jié)合臨床病理變化及系統(tǒng)病理學(xué)觀察，對死亡赤猴進(jìn)行病理學(xué)診斷，分析得出死亡赤猴患有亞急性腎小球腎炎、急性胰腺炎、間質(zhì)性肺，此病例的完成，為今后野生動物急性病的診斷以及治療工作提供了較為可靠的經(jīng)驗和方案。