劉增再，羅湘，奉佳*，張韜，唐愛(ài)明，鄭姣妹，李妍芬，譚丹，黃甜

（1.長(zhǎng)沙市動(dòng)植物疫病預(yù)防控制中心 長(zhǎng)沙 410007；2.瀏陽(yáng)市佳和養(yǎng)殖專(zhuān)業(yè)合作社 長(zhǎng)沙 410300）

長(zhǎng)沙屬于山區(qū)丘陵平原地帶地域，呈東西向長(zhǎng)條形狀，北、西、南緣為山地，東南丘陵為主，東北以崗地為主。山地、丘陵、崗地、平原大體各占四分之一，具有生態(tài)養(yǎng)雞的良好條件。近年來(lái)，長(zhǎng)沙市引入了湘黃雞、桃源雞、東安雞等外來(lái)地方品種家禽，在利用地方品種獨(dú)特的優(yōu)良性狀的基礎(chǔ)上，經(jīng)長(zhǎng)期的生產(chǎn)實(shí)踐中培育出瀏黃雞、香黃雞等優(yōu)良地方品種家禽，對(duì)長(zhǎng)沙市養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展起到了很大作用。長(zhǎng)沙市瀏陽(yáng)和寧鄉(xiāng)將生態(tài)家禽養(yǎng)殖作為脫貧致富、鄉(xiāng)村振興的重要產(chǎn)業(yè)之一，生態(tài)養(yǎng)雞產(chǎn)業(yè)得到了蓬勃發(fā)展。

隨著養(yǎng)禽產(chǎn)業(yè)工廠化、商品化，高致病性禽流感（highly pathogenic avian influenza，HPAI）、新城疫（newcastle disease，ND）、禽白血?。╝vian leukemia，AL）和雞白痢（pullorum disease，PD）是嚴(yán)重危害我國(guó)及世界養(yǎng)禽業(yè)健康發(fā)展的重要疫病，也是我國(guó)家禽列為優(yōu)先防治的病種[1]。目前，在我國(guó)大部分地方家禽品種中普遍發(fā)生，且發(fā)病種類(lèi)和發(fā)病數(shù)量也長(zhǎng)期居高不下，給家禽養(yǎng)殖場(chǎng)（戶(hù)）造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重影響地方家禽品種的健康發(fā)展。為掌握長(zhǎng)沙市地方品種規(guī)模雞場(chǎng)主要?jiǎng)游镆卟〉牧餍星闆r，2021 年1 月—12月，筆者對(duì)長(zhǎng)沙市的16 家地方品種規(guī)模雞場(chǎng)進(jìn)行上述4 種疫病摸底監(jiān)測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源

根據(jù)各縣（區(qū)、市）地方品種家禽2,000 羽以上規(guī)模雞場(chǎng)養(yǎng)殖情況，結(jié)合本轄區(qū)實(shí)際，采用兩階段抽樣法隨機(jī)抽取養(yǎng)殖場(chǎng)。第一階段：結(jié)合以往禽白血病陽(yáng)性情況，對(duì)全市摸底的112 家地方品種規(guī)模雞場(chǎng)按照估計(jì)流行率（10%預(yù)定流行率、95%置信水平、10%可接受誤差）隨機(jī)抽樣，抽取16 個(gè)場(chǎng)戶(hù)。第二階段：從養(yǎng)殖場(chǎng)平行采集咽-泄殖腔拭子、血清樣品和種蛋樣品，每個(gè)場(chǎng)點(diǎn)按照估計(jì)流行率（5%預(yù)定流行率、95%置信水平、5%可接受誤差）計(jì)算實(shí)際需要抽樣數(shù)量，共采集1,163 份血清樣品、1,163 份咽-泄殖腔棉拭子樣品和1,163 份種蛋樣品。

1.2 檢測(cè)及結(jié)果判定

1）血清抗體檢測(cè)。檢測(cè)方法參照國(guó)家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，按照試劑配套說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作和結(jié)果判定[2]。

2）病毒核酸提取。取采集的咽-泄殖腔棉拭子浸出上清液200μ L。使用西安天隆科技有限公司的核酸提取儀以及配套核酸提取試劑盒（磁珠法）提取病毒核酸，按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作[3]。

3）實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)。按照相應(yīng)疫病的病毒核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作及結(jié)果判定。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

統(tǒng)計(jì)規(guī)模雞場(chǎng)檢測(cè)數(shù)據(jù)，采用Excel 2010 進(jìn)行資料整理，用SPSS 25.0 軟件對(duì)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性和差異性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 總體情況

2021 年，長(zhǎng)沙市共檢測(cè)地方品種規(guī)模雞場(chǎng)16 家，分布在4 個(gè)區(qū)縣（市）、14 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，涵蓋全市12.3%的鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）。禽流感H5 亞型（Re-11）個(gè)體免疫合格率93.55%、禽流感H5 亞型（Re-12）個(gè)體免疫合格率93.72%、禽流感H7 亞型（Re-3）個(gè)體免疫合格率93.21%和新城疫個(gè)體免疫合格率93.90%，禽白血病感染率7.48%，雞白痢感染率4.99%，禽白血病與雞白痢不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=1.000＞0.05）。

2.2 血清學(xué)抗體檢測(cè)結(jié)果

本次共采集16 家規(guī)模雞場(chǎng)的1,163 份血清學(xué)樣品，分別進(jìn)行禽流感H5 亞型（Re-11 和Re-12）、禽流感H7 亞型（Re-3）、新城疫抗體檢測(cè)。從表1 可知，規(guī)模雞場(chǎng)禽流感H5 亞型（Re-11）、禽流感H5 亞型（Re-12）、禽流感H7 亞型（Re-3）和新城疫個(gè)體合格率分別為93.55%（95%CI：92.13%～94.96%，P＜0.001）、93.72%（95%CI：92.71%～94.72%，P＜0.001）、93.21%（95%CI：92.08%～94.32%，P＜0.001）、93.90%（95%CI：93.03%～94.74%，P＜0.001）均大于90%；所有場(chǎng)的群體合格率為100%。

表1 16家規(guī)模雞場(chǎng)主要疫病抗體檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)（%）

2.3 病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果

本次共采集16 家規(guī)模雞場(chǎng)的1,163 份咽-泄殖腔棉拭子樣品，分別進(jìn)行禽流感H5 亞型病毒核酸、禽流感H7 亞型病毒核酸、新城疫病毒核酸檢測(cè)。從表2 可知，禽流感H5 亞型、H7 亞型和新城疫病毒核酸檢測(cè)全部為陰性。采集16 家規(guī)模雞場(chǎng)的1,163 份種蛋樣品進(jìn)行禽白血病P27 抗原檢測(cè)。從表2 可知，禽白血病檢測(cè)感染率為7.48%（95%CI：2.66%～12.25%，P=0.005）。

表2 16家規(guī)模雞場(chǎng)主要疫病病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)（%）

2.4 雞白痢檢測(cè)結(jié)果

本次共采集16 家規(guī)模雞場(chǎng)的1,163 份血清樣品進(jìn)行雞白痢抗體檢測(cè)。從表3 可知，檢出陽(yáng)性場(chǎng)10 個(gè)，檢測(cè)陽(yáng)性樣品58 份，規(guī)模雞場(chǎng)中雞白痢感染率為4.99%（95%CI：2.28%～8.35%，P=0.002）。

表3 16家規(guī)模雞場(chǎng)雞白痢檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.5 禽白血病和雞白痢相關(guān)性

本次共采集16 家規(guī)模雞場(chǎng)，同時(shí)檢出禽白血病和雞白痢陽(yáng)性場(chǎng)有7 個(gè)，從表4 的卡方檢驗(yàn)結(jié)果可以看出，禽白血病與雞白痢不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=1.000＞0.05）。

表4 16家規(guī)模雞場(chǎng)禽白血病與雞白痢相關(guān)性分析

3 討論

1）根據(jù)各縣（區(qū)、市）地方品種家禽養(yǎng)殖情況，采用兩階段抽樣法隨機(jī)抽取養(yǎng)殖場(chǎng)和樣品數(shù)量，隨機(jī)抽取養(yǎng)殖場(chǎng)提高了樣品的代表性，總體上反映了全市地方品種家禽HPAI 和ND 總體情況。16家規(guī)模雞場(chǎng)的禽流感H5 亞型、H7 亞型和新城疫免疫抗體個(gè)體合格率超過(guò)90%，群體合格率達(dá)到100%，均超過(guò)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和湖南省相關(guān)要求（≥70%）；病原學(xué)檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性樣品。規(guī)模場(chǎng)戶(hù)防疫意識(shí)較強(qiáng)，管理規(guī)范，免疫程序合理，HPAI 和ND 基礎(chǔ)免疫工作扎實(shí)，免疫抗體合格率和整齊度更高，發(fā)生疫情的風(fēng)險(xiǎn)較低。

2）病原學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，個(gè)別雞場(chǎng)存在雞白痢、禽白血病陽(yáng)性情況，但由于未進(jìn)行禽白血病A/B 和J亞群病毒的抗體檢測(cè)，雞群禽白血病真實(shí)感染率還需作進(jìn)一步檢測(cè)來(lái)確定。不同類(lèi)型雞泄殖腔棉拭子ALV p27 抗原檢測(cè)法存在很高的假陽(yáng)性率和漏檢率[4]。雞白痢臨床沒(méi)有商品化疫苗，控制雞白痢主要依靠藥物。禽白血病和雞白痢作為一種垂直傳播的疫病，最有效的防控辦法是以“檢測(cè)-淘汰陽(yáng)性雞”為主的凈化措施[5]。

3）個(gè)別養(yǎng)雞場(chǎng)存在禽白血病和沙門(mén)氏菌病的混合感染，且禽白血病感染較為嚴(yán)重。分析其原因主要是：①地方品種家禽主要是放養(yǎng)為主，兼顧籠養(yǎng)，放養(yǎng)環(huán)境較為潮濕，空氣流通不暢，容易導(dǎo)致疫病的發(fā)生與流行；②養(yǎng)殖雞品種主要是湖南本地雞品種，而本地雞品種原種雞場(chǎng)很少開(kāi)展禽白血病的凈化工作，導(dǎo)致商品雞群禽白血病隱性感染率較高[6]；③個(gè)別養(yǎng)殖場(chǎng)戶(hù)主要疫病防控意識(shí)較差，認(rèn)為放養(yǎng)雞群活動(dòng)強(qiáng)度大，疫病抵抗力強(qiáng)，可以不免疫或少免疫疫苗，導(dǎo)致養(yǎng)殖場(chǎng)免疫程序欠合理。

4 結(jié)論

通過(guò)對(duì)長(zhǎng)沙市16 家地方品種規(guī)模雞場(chǎng)分別采集血清、泄殖腔棉拭子和種蛋樣品進(jìn)行了4 種主要?jiǎng)游镆卟∶庖呖贵w和病原學(xué)監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)禽流感、新城疫免疫抗體水平高，雞群未攜帶相應(yīng)病原，禽白血病和雞白痢存在帶毒情況，且有一定的混合感染。因此，首先要加強(qiáng)雞種引種管理，堅(jiān)持從疫病凈化較好的種雞場(chǎng)引進(jìn)商品雞；其次要制訂科學(xué)合理的免疫程序，實(shí)施有效的免疫注射措施，保證雞群獲得有效的免疫抵抗力；然后要加強(qiáng)養(yǎng)殖環(huán)節(jié)雞白痢和禽白血病防控，有條件的規(guī)模雞場(chǎng)可探索開(kāi)展“兩白”的凈化。