亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        苦蕎總黃酮對(duì)酒精性脂肪肝細(xì)胞的作用

        2022-12-13 04:02:12劉怡張娜吳萌萌嚴(yán)馨李姝王松濤沈才洪黃敏趙建
        食品研究與開發(fā) 2022年23期
        關(guān)鍵詞:苦蕎黃酮模型

        劉怡,張娜,吳萌萌,嚴(yán)馨,李姝,2,王松濤,沈才洪,黃敏,趙建*

        (1.四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,四川 成都 610064;2.瀘州品創(chuàng)科技有限公司,四川 瀘州 646000;3.國(guó)家固態(tài)釀造工程技術(shù)研究中心,四川 瀘州 646000;4.四川省原子能研究院,四川 成都 610101)

        苦蕎麥俗稱苦蕎,學(xué)名韃靼蕎麥[Fagopyrum tataricum(L.)Gaertn],是蓼科(Polygonaceae)蕎麥屬(Fagopyrum Mill)雙子葉植物中的一種藥食兩用的小宗雜糧[1]。就其食用價(jià)值而言,被譽(yù)為“五谷之王”的苦蕎麥常作為飲料、酒類以及面食中的添加物[2]。就其藥用價(jià)值而言,苦蕎黃酮已被證實(shí)在人體抗氧化[3]、清除自由基、降“三高”[4-7]等方面均有作用,因此又被譽(yù)為“三降食品”。

        目前,許多研究已證實(shí)長(zhǎng)期飲酒或是過度飲酒會(huì)對(duì)人體肝臟產(chǎn)生負(fù)面影響,造成肝臟解毒能力降低,最終誘發(fā)酒精性肝?。╝lcoholic liver disease,ALD)[8]。酒精性脂肪肝(alcoholic fatty liver,AFL)是 ALD 的早期階段,若未及時(shí)治療還會(huì)誘發(fā)一系列炎癥反應(yīng)。相關(guān)研究表明,長(zhǎng)期飲酒發(fā)展為酒精性脂肪肝?。╝lcoholic fatty liver disease,AFLD)的概率為 90%[9]。目前,在臨床上治療AFLD主要是通過戒酒和在戒酒過程中補(bǔ)充高蛋白食物以及多種維他命和葉酸來進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)支持。同時(shí),還可以通過藥物來改善AFLD患者的臨床癥狀和生物化學(xué)指標(biāo),但近40年來有關(guān)治療AFLD的藥物研究并未取得明顯進(jìn)展[10-11]。

        前期研究了苦蕎總黃酮(total flavonoids of tartary buckwheat,TFTB)的制備及成分分析[12],并證實(shí)了TFTB的體外抗氧化活性及解酒作用[13]。目前對(duì)于TFTB能緩解AFLD的機(jī)制研究尚不完全。因此,本實(shí)驗(yàn)采用0.9%乙醇和0.01%硫酸亞鐵體外誘導(dǎo)L-02細(xì)胞,擬進(jìn)一步探究TFTB是否具有體外抑制AFL細(xì)胞脂肪變性、氧化損傷以及降低細(xì)胞內(nèi)炎性因子的作用,為TFTB緩解AFLD的機(jī)制研究及苦蕎黃酮類解酒護(hù)肝產(chǎn)品的開發(fā)提供理論支持。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        苦蕎總黃酮:黃酮總含量為79.5%,由四川省資源微生物與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室制備;L-02細(xì)胞:四川省資源微生物與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保藏。

        RPMI-1640培養(yǎng)基、0.25%乙二胺四乙酸-胰酶(ethylenediamine tetraacetic acid-trypsin,EDTA-trypsin)、胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS):美國(guó)賽默飛世爾科技公司;油紅O染液、二甲亞砜(dimethyl sulfoxide,DMSO):北京索萊寶科技有限公司;丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase,ALT)試劑盒、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate transaminase,AST)試劑盒、甘油三酯(triglyceride,TG)試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)試劑盒、丙二醛(malondialdehyde,MDA)試劑盒、總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)試劑盒、游離脂肪酸(nonestesterified fatty acid,NEFA)試劑盒:南京建成生物工程研究所;細(xì)胞增殖-毒性檢測(cè)試劑盒(cell counting kit-8,CCK-8):賽國(guó)生物科技有限責(zé)任公司;腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)試劑盒、白介素-6(interleukin-6,IL-6)試劑盒、白介素-8(interleukin-8,IL-8)試劑盒:上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        CO2培養(yǎng)箱(3111)、連續(xù)波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(Multiskan go)、生物安全柜(1389):美國(guó)賽默飛世爾科技公司;低速離心機(jī)(TDZ5B-WS):上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司;倒置顯微鏡(DIAPHOT):日本尼康公司;紫外分光光度計(jì)(UV-2600):日本島津公司。

        1.3 方法

        1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)

        用RPMI-1640培養(yǎng)液(含10%FBS)對(duì)37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)狀態(tài)正常的L-02細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),每2 d~3 d 換液 1 次;每 4 d~6 d,使用 0.25%EDTA-胰酶37℃消化3 min~5 min,待細(xì)胞呈流沙狀脫落時(shí)停止消化,進(jìn)行傳代培養(yǎng)和細(xì)胞凍存[14]。

        1.3.2 CCK-8法篩選AFL細(xì)胞模型乙醇誘導(dǎo)濃度

        取T25培養(yǎng)瓶中融合度達(dá)80%的L-02細(xì)胞,使用0.25%EDTA-胰酶37℃消化3 min~5 min,待細(xì)胞呈流沙狀脫落時(shí)停止消化,計(jì)數(shù)后接種于96孔培養(yǎng)板內(nèi),使每孔細(xì)胞數(shù)為5×103個(gè)。置于5%CO2、37℃條件下培養(yǎng)24 h后,設(shè)置乙醇組、硫酸亞鐵組、空白對(duì)照組。乙醇組:L-02細(xì)胞懸液中乙醇體積終濃度分別為0.1%、0.5%、0.9%、1.3%、1.7%;硫酸亞鐵組:L-02細(xì)胞懸液中FeSO4質(zhì)量終濃度為0.01%;空白對(duì)照組:僅含L-02細(xì)胞懸液。于上述條件下培養(yǎng)48 h后,每孔加入10 μL CCK-8,再培養(yǎng) 50 min,使用連續(xù)波長(zhǎng)酶標(biāo)儀檢測(cè)并記錄各孔OD450值,計(jì)算細(xì)胞活性,計(jì)算公式為細(xì)胞活性/%=[(實(shí)驗(yàn)組OD值-空白OD值)/(空白對(duì)照組OD值-空白OD值)]×100[15]。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次,每組3個(gè)復(fù)孔。

        1.3.3 AFL細(xì)胞模型的建立

        取T25培養(yǎng)瓶中融合度達(dá)80%的L-02細(xì)胞,按照1.3.2中的消化條件進(jìn)行消化,計(jì)數(shù)后接種于6孔培養(yǎng)板內(nèi),使每孔細(xì)胞數(shù)為6×105個(gè)。細(xì)胞貼壁后,將實(shí)驗(yàn)設(shè)為空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、模型組??瞻讓?duì)照組:僅含L-02細(xì)胞懸液;陰性對(duì)照組:L-02細(xì)胞懸液中FeSO4質(zhì)量終濃度為0.01%;模型組:向陰性對(duì)照組中添加乙醇,使乙醇體積終濃度為1.3.2中篩選濃度。5%CO2、37℃條件下培養(yǎng),2 d換液1次,4 d傳代1次。誘導(dǎo)至第4代,命名為H4。使用油紅O染色法并測(cè)定各組細(xì)胞上清液中TG、AST、ALT含量以檢測(cè)AFL細(xì)胞模型是否構(gòu)建成功[16]。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次,每組3個(gè)復(fù)孔。

        1.3.4 CCK-8法篩選TFTB作用濃度

        參考1.3.2中的方法,設(shè)置以下組別,空白對(duì)照組:僅含L-02細(xì)胞懸液;實(shí)驗(yàn)組:L-02細(xì)胞懸液中TFTB質(zhì)量終濃度分別為 10、20、40、80、160、320 μg/mL[17]。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次,每組3個(gè)復(fù)孔。

        1.3.5 TFTB處理模型組細(xì)胞

        參考1.3.3中6孔培養(yǎng)板接種方法接種細(xì)胞,待細(xì)胞貼壁后設(shè)置以下組別??瞻讓?duì)照組:僅含L-02細(xì)胞懸液;處理前H4組:僅含H4組細(xì)胞懸液;TFTB處理組:向H4組細(xì)胞懸液中添加TFTB,使TFTB作用濃度為1.3.4中篩選濃度。37℃、5%CO2的條件下培養(yǎng),2 d換液1次,觀察16 d并收集各組細(xì)胞上清液。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次,每組3個(gè)復(fù)孔。

        1.3.6 生化指標(biāo)檢測(cè)

        對(duì)1.3.5中收集的各組細(xì)胞上清液進(jìn)行生化指標(biāo)檢測(cè),測(cè)定 TG、ALT、AST、MDA、NEFA、T-SOD、GSH-Px水平,均按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。同時(shí),采用酶聯(lián)免疫吸附法[18]測(cè)定各組細(xì)胞上清液中IL-6、IL-8、TNF-α水平。

        1.4 數(shù)據(jù)處理

        用GraphPad Prism 8進(jìn)行數(shù)據(jù)分析與作圖。數(shù)據(jù)表示為(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差),通過單因素方差分析(Oneway ANOVA)進(jìn)行組與組之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)比較,p<0.05表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 乙醇誘導(dǎo)濃度的確定

        不同濃度的乙醇對(duì)L-02細(xì)胞的影響結(jié)果見表1。

        表1 不同濃度的乙醇對(duì)L-02細(xì)胞生長(zhǎng)的影響Table 1 Effect of C2H5OH at different concentration on the growth of L-02 hepatocytes

        由表1可知,在本實(shí)驗(yàn)中,空白對(duì)照組細(xì)胞活性設(shè)為100%。與空白對(duì)照組相比,0.01%硫酸亞鐵組細(xì)胞活性為100.77%,表明0.01%硫酸亞鐵對(duì)細(xì)胞活性無明顯影響;0.1%乙醇組細(xì)胞活性為100.54%,表明當(dāng)乙醇濃度為0.1%時(shí)對(duì)細(xì)胞活性無明顯影響,并且還可略微促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng);1.3%和1.7%乙醇組細(xì)胞活性分別為84.71%、77.28%,分別降低了15.29%和22.72%,差異高度顯著(p<0.000 1),顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞體積增大、邊緣模糊、胞內(nèi)有較多雜質(zhì),細(xì)胞大量脫壁,細(xì)胞活性明顯降低;0.5%和0.9%乙醇組細(xì)胞活性分別為96.11%、87.22%,雖然分別降低了3.89%、12.78%,但在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞體積只略微增大,活細(xì)胞數(shù)目仍然較多,脫壁細(xì)胞較少。阮雪青[19]的研究表明,構(gòu)建體外AFL模型時(shí)為在細(xì)胞功能衰退前獲得AFL的若干指標(biāo),通常選擇較高乙醇濃度和較短誘導(dǎo)時(shí)間。因此,本實(shí)驗(yàn)選擇0.9%乙醇濃度來構(gòu)建AFL細(xì)胞模型,該濃度乙醇對(duì)細(xì)胞形態(tài)及貼壁能力影響較小,且乙醇濃度適中,可縮短誘導(dǎo)時(shí)間,提高誘導(dǎo)效果。

        2.2 細(xì)胞模型的鑒定

        2.2.1 油紅O染色倒置顯微鏡觀察結(jié)果

        油紅O染色倒置顯微鏡觀察結(jié)果見圖1。

        圖1 倒置顯微鏡下油紅O染色結(jié)果Fig.1 Results of oil red O staining under inverted microscope

        經(jīng)油紅O染色后,通過倒置顯微鏡可觀察到空白對(duì)照組(圖1A)與陰性對(duì)照組(圖1B)中有少數(shù)被染成橘紅色的脂滴正常分布于細(xì)胞內(nèi);模型組(圖1C)細(xì)胞中出現(xiàn)大量橘紅色脂滴,呈連珠狀有序排列,集中分布于細(xì)胞膜周圍,表明0.9%乙醇和0.01%FeSO4共同誘導(dǎo)后的H4細(xì)胞產(chǎn)生了脂肪累積,AFL細(xì)胞模型構(gòu)建成功。

        2.2.2 細(xì)胞上清液肝功能指標(biāo)驗(yàn)證

        TG是人體內(nèi)含量最多的脂類,其含量通常保持在一定范圍內(nèi),過度飲酒會(huì)導(dǎo)致TG升高,產(chǎn)生脂肪累積[20]。AST和ALT常被用來反映肝細(xì)胞損傷程度,乙醇作用于L-02細(xì)胞導(dǎo)致AFLD發(fā)生發(fā)展的過程中會(huì)伴隨著細(xì)胞膜通透性增加,AST、ALT從細(xì)胞內(nèi)釋放,細(xì)胞上清液中AST、ALT水平升高[21]。當(dāng)L-02細(xì)胞經(jīng)乙醇誘導(dǎo)至第4代,各組細(xì)胞上清液中TG、AST和ALT的變化結(jié)果見表2。

        由表2可知,與空白對(duì)照組比較,陰性對(duì)照組細(xì)胞上清液中 TG、AST、ALT 含量無顯著差異(p>0.05);模型組細(xì)胞上清液中TG、AST、ALT含量分別上升了185.71%、790.48%、193.44%,具有高度顯著差異(p<0.0001)。以上結(jié)果表明,空白對(duì)照組細(xì)胞通過0.9%乙醇和0.01%FeSO4的誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化成模型組細(xì)胞,且胞內(nèi)產(chǎn)生了脂肪累積與變性,同時(shí)伴隨細(xì)胞膜的損傷,造成ALT、AST大量滲漏到細(xì)胞上清液中,與卜曉芬等[17]、Kong等[22]的研究結(jié)果一致。因此,經(jīng)0.9%乙醇和0.01%FeSO4誘導(dǎo)后的H4細(xì)胞上清液指標(biāo)發(fā)生變化且符合酒精肝指標(biāo)變化趨勢(shì),AFL細(xì)胞模型構(gòu)建成功。

        表2 各組細(xì)胞上清液TG、AST和ALT的變化Table 2 Levels of TG,AST and ALT in supernatant of cells

        2.3 TFTB作用濃度的確定

        使用 10、20、40、80、160、320 μg/mL TFTB 處理 H4細(xì)胞48 h后,H4細(xì)胞活性見表3。

        表3 不同濃度的TFTB對(duì)H4細(xì)胞生長(zhǎng)的影響Table 3 Effect of TFTB at different concentration on the growth of H4cells

        由表3可知,與空白對(duì)照組相比,TFTB濃度大于80 μg/mL時(shí),H4細(xì)胞活性下降明顯且低于80%,差異高度顯著(p<0.000 1);10、20、40 μg/mL TFTB 處理組細(xì)胞活性分別為102.53%、99.92%、96.37%,對(duì)H4細(xì)胞分裂生長(zhǎng)無顯著影響(p>0.05),但低濃度的TFTB會(huì)延長(zhǎng)處理時(shí)間,降低作用效果;而80 μg/mL TFTB處理組細(xì)胞活性為84.55%,雖有所降低,但顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)活細(xì)胞數(shù)目仍較多且形態(tài)與空白對(duì)照組接近。同時(shí),該作用濃度適中,節(jié)約處理時(shí)間,提高作用效果。因此,選擇80 μg/mL作為TFTB的作用濃度。

        2.4 TFTB對(duì)AFL細(xì)胞的影響

        2.4.1 TFTB對(duì)AFL細(xì)胞上清液中肝功能指標(biāo)TG、AST、ALT水平的影響

        各組細(xì)胞上清液中TG、AST和ALT的變化見表4。

        表4 各組細(xì)胞上清液TG、AST和ALT的變化Table 4 Levels of TG,AST and ALT in supernatant of cells

        由表4可知,與處理前H4組比較,經(jīng)80μg/mL TFTB處理后細(xì)胞上清液中TG、AST、ALT高度顯著減少(p<0.000 1),分別降低了15.00%、61.50%和68.71%。表明經(jīng)80 μg/mL TFTB處理后,可抑制乙醇誘導(dǎo)后L-02細(xì)胞脂肪變性與堆積,也可減輕肝細(xì)胞的損傷程度。袁葉飛等[15]在體外構(gòu)建的AFL細(xì)胞模型中觀察到趕黃草總黃酮能明顯降低細(xì)胞內(nèi)TG水平且能明顯緩解脂肪變性。閆帥峰等[23]通過構(gòu)建大鼠AFLD模型,證明了苦蕎能夠減少脂肪在大鼠肝臟中的積蓄,但并未提出發(fā)揮效應(yīng)的成分。綜上,苦蕎中的黃酮成分能夠抑制體外誘導(dǎo)的AFL細(xì)胞模型脂肪變性與堆積。

        2.4.2 TFTB對(duì)AFL細(xì)胞上清液中氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA、NEFA、T-SOD、GSH-Px水平的影響

        MDA含量能夠反映機(jī)體抗氧化潛在能力與組織過氧化損傷程度,NEFA與機(jī)體的氧化應(yīng)激有關(guān),當(dāng)NEFA處于較高濃度時(shí),不僅會(huì)對(duì)細(xì)胞造成損傷,機(jī)體氧化系統(tǒng)與抗氧化系統(tǒng)的平衡狀態(tài)也會(huì)發(fā)生變化。TSOD、GSH-Px則是生物體系中抗氧化系的重要組成成員。Masarone等[24]的研究表明,酒精長(zhǎng)期作用于肝臟可誘導(dǎo)肝臟氧化應(yīng)激,MDA、T-SOD和GSH-Px的水平變化可用來表示經(jīng)乙醇誘導(dǎo)后以及藥物作用后肝臟氧化損傷程度。Grummer等[25]認(rèn)為奶牛血液中NEFA升高會(huì)導(dǎo)致氧化應(yīng)激并伴隨脂肪肝的產(chǎn)生。各組細(xì)胞上清液MDA、NEFA、T-SOD和GSH-Px的變化見表5。

        表5 各組細(xì)胞上清液MDA、NEFA、T-SOD和GSH-Px的變化Table 5 Levels of MDA,NEFA,T-SOD and GSH-Px in supernatant of cells

        由表5可知,與空白對(duì)照組比較,處理前H4組細(xì)胞上清液中MDA水平顯著升高13.25%(p<0.05),NEFA水平高度顯著升高 133.51%(p<0.000 1),T-SOD、GSH-Px水平分別高度顯著降低18.00%、22.28%(p<0.0001),表明乙醇能夠誘導(dǎo)L-02細(xì)胞產(chǎn)生氧化損傷。

        與處理前H4組比較,TFTB處理組細(xì)胞上清液中MDA水平顯著降低 13.83%(p<0.05),NEFA 水平高度顯著降低 47.51%(p<0.000 1),T-SOD、GSH-Px水平分別高度顯著升高 17.44%、101.57%(p<0.000 1),表明80 μg/mL TFTB可能是通過提高L-02細(xì)胞內(nèi)T-SOD和GSH-Px的酶活性以及降低MDA、NEFA的水平來提高細(xì)胞的抗氧化能力。Li等[26]研究結(jié)果表明,醉酒小鼠模型組肝臟中的MDA明顯升高,T-SOD、GSH-Px明顯降低,而經(jīng)枸杞色素和多糖治療后可逆轉(zhuǎn)前述情況。童鈺琴等[13]在體外抗氧化活性實(shí)驗(yàn)中觀察到苦蕎麩皮總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基(O2-·)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基及NO2-具有一定的清除能力,且在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)出量效關(guān)系。因此,TFTB可能通過提高L-02細(xì)胞內(nèi)T-SOD和GSH-Px的酶活性并降低MDA、NEFA水平來抑制O2-·、DPPH·及NO2-等的產(chǎn)生,從而提高細(xì)胞的抗氧化能力,改善AFL細(xì)胞氧化損傷,因此具有緩解AFLD的潛能。

        2.4.3 TFTB對(duì)AFL細(xì)胞上清液中炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α 水平的影響

        IL-6主要用于檢測(cè)積累性肝損傷,TNF-α可加速中性粒細(xì)胞的轉(zhuǎn)移導(dǎo)致活性氧增加,進(jìn)而造成肝臟的損傷[27],這兩項(xiàng)指標(biāo)的升高意味著嚴(yán)重的肝病甚至惡性腫瘤[28]。IL-8是一種有效的趨化因子,由巨噬細(xì)胞、肝細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生,多項(xiàng)研究表明患有AFLD患者的血漿及肝臟中的IL-8水平會(huì)增加[29]。Li等[26]的研究發(fā)現(xiàn)AFLD模型小鼠血清中IL-6、TNF-α顯著上升(p<0.05)。Wang等[30]的研究表明IL-8可通過蛋白激酶B/缺氧誘導(dǎo)因子-1α通路(protein kinase B/hypoxia inducible factor-1α pathway,Akt/HIF-1α pathway)加劇肝脂變性。各組細(xì)胞上清液中IL-6、IL-8和TNF-α的變化見表6。

        表6 各組細(xì)胞上清液IL-6、IL-8和TNF-α的變化Table 6 Levels of IL-6,IL-8 and TNF-α in supernatant of cells pg/mL

        由表6可知,與空白對(duì)照組比較,處理前H4組細(xì)胞上清液中IL-6、IL-8水平分高度顯著升高128.22%、595.68%(p<0.000 1),TNF-α 水平升高 18.77%(p>0.05),表明乙醇能夠誘導(dǎo)L-02細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。

        與處理前H4組比較,80 μg/mL TFTB處理組細(xì)胞上清液中IL-6水平下降8.31%(p>0.05),IL-8水平高度顯著下降 32.61%(p<0.000 1),TNF-α 水平顯著下降27.85%(p<0.05),表明 80 μg/mL TFTB 能夠降低 AFL細(xì)胞產(chǎn)生炎性因子的水平,起到緩解相關(guān)炎癥反應(yīng)的作用。王雪等[31]在體外構(gòu)建小鼠腹腔巨噬細(xì)胞RAW 264.7炎癥模型中觀察到天山堇菜總黃酮在0.78μg/mL~12.5 μg/mL 能明顯降低促炎癥因子 TNF-α、IL-6、IL-1β的水平,具有較好的抗炎活性。而本研究表明,80 μg/mL的TFTB能明顯降低AFL細(xì)胞上清液中炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α的水平。由此可見,黃酮緩解相關(guān)炎癥反應(yīng)的作用濃度因黃酮來源不同而呈現(xiàn)較大的差異。胡一冰等[32]研究發(fā)現(xiàn),苦蕎籽提取物也可緩解炎癥反應(yīng),抑制小鼠耳腫脹及大鼠蛋清性足腫脹。目前,還未有文獻(xiàn)報(bào)道TFTB對(duì)體外誘導(dǎo)的AFL細(xì)胞炎癥反應(yīng)的抑制作用。結(jié)合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,TFTB可通過降低炎性因子水平來緩解AFL細(xì)胞損傷,從而發(fā)揮保肝潛能。

        3 結(jié)論

        本文以TFTB為原料,以0.9%乙醇和0.01%FeSO4成功建立體外AFL細(xì)胞模型,研究了TFTB對(duì)AFL細(xì)胞的影響。研究結(jié)果顯示,80 μg/mL的TFTB可以減少酒精性脂肪肝L-02細(xì)胞上清液中TG、AST、ALT、MDA、NEFA的含量,并升高T-SOD、GSH-Px的含量,表明TFTB不僅可以抑制AFL細(xì)胞模型脂肪積累與變性,還可以減輕乙醇對(duì)肝細(xì)胞膜及肝細(xì)胞的氧化損傷,從而具有緩解AFLD的潛能。同時(shí),80 μg/mL TFTB也可降低酒精性脂肪肝L-02細(xì)胞上清液中IL-8、TNF-α的含量,表明TFTB能夠緩解炎癥反應(yīng)。因此,在保健食品及相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)中,考慮其能夠改善AFLD的潛能及緩解炎癥的功效作用,為產(chǎn)品開發(fā)提供新的理論依據(jù)。

        猜你喜歡
        苦蕎黃酮模型
        一半模型
        重要模型『一線三等角』
        重尾非線性自回歸模型自加權(quán)M-估計(jì)的漸近分布
        苦蕎花
        青年歌聲(2018年5期)2018-10-29 03:18:40
        HPLC法同時(shí)測(cè)定固本補(bǔ)腎口服液中3種黃酮
        中成藥(2017年8期)2017-11-22 03:19:40
        MIPs-HPLC法同時(shí)測(cè)定覆盆子中4種黃酮
        中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:13
        DAD-HPLC法同時(shí)測(cè)定龍須藤總黃酮中5種多甲氧基黃酮
        中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:50
        苦蕎殼和苦蕎籽中總黃酮的提取及含量比較
        廣東飼料(2016年3期)2016-12-01 03:43:12
        3D打印中的模型分割與打包
        城門苦蕎
        久久9精品区-无套内射无码| 久久久亚洲一区二区三区| 国产精品毛片极品久久| 99久久亚洲精品日本无码| 女人大荫蒂毛茸茸视频| 高清国产亚洲va精品| av一区二区在线免费观看| 在线中文字幕乱码英文字幕正常| 国产精品白丝喷水在线观看| 依依成人影视国产精品| 国产精品一区二区三区三| 国产av无码专区亚洲a∨毛片| 久青草久青草视频在线观看| 亚洲欧美国产日产综合不卡| 亚洲少妇一区二区三区老| 人妻中文字幕乱人伦在线| 天天看片视频免费观看| 亚洲无线码一区在线观看| 激情都市亚洲一区二区| 青娱乐极品视觉盛宴国产视频| 精品国产一区二区三区久久久狼| aa视频在线观看播放免费| 亚洲精品久久区二区三区蜜桃臀| 精品久久久久成人码免费动漫| 亚洲综合伊人制服丝袜美腿| 91麻豆精品激情在线观最新| 免费观看国产短视频的方法| 亚洲成av人片在线观看无码| аⅴ天堂一区视频在线观看| 久久国产精品免费专区| 少妇愉情理伦片| 毛片免费在线观看网址| 国产噜噜亚洲av一二三区| 国产精品天天看天天狠| 国产精品麻豆欧美日韩ww| 亚洲色欲色欲欲www在线| 麻神在线观看免费观看| 天堂aⅴ无码一区二区三区| 国产av综合一区二区三区最新| 侵犯了美丽丰满人妻中文字幕| 全免费a敌肛交毛片免费|