林 琳 張 濤 王麗春 魏鴻波 陸紀(jì)宏

浙江金華康恩貝生物制藥有限公司，浙江金華 321016

草酸艾司西酞普蘭[1-3]是由美國(guó)Forest Lab 公司與丹麥H.Lundbeck A/S 公司于1997年開始聯(lián)合開發(fā)，于2002年獲美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)，商品名為L(zhǎng)EXAPRO?，草酸艾司西酞普蘭是西酞普蘭的S-對(duì)應(yīng)異構(gòu)體，是一種選擇性的5-羥色胺再攝取抑制劑。適用于成年及12～17 歲青少年重度抑郁癥（MDD）患者的急性和維持治療和成年患者的廣泛性焦慮癥（GAD）的急性治療，具有良好的耐受性和服藥依從性。目前已上市的劑型包括片劑（5、10、20 mg）、口服溶液和膠囊。本研究以H.Lundbeck A/S 公司生產(chǎn)的草酸艾司西酞普蘭片作為參比制劑，采用粉末直接壓片的方式進(jìn)行產(chǎn)品制備，采用正交試驗(yàn)法確定最佳處方，對(duì)自制制劑和參比制劑進(jìn)行體外溶出比較，同時(shí)對(duì)參比制劑和自制制劑開展加速穩(wěn)定性考察，比較自制制劑與參比制劑質(zhì)量。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

三維運(yùn)動(dòng)混合機(jī)（江蘇金斯瑞機(jī)械設(shè)備有限公司），2020 壓片機(jī)（菲特），XPE105 分析天平（梅特勒-托利多有限公司），F(xiàn)E28 型pH 計(jì)（梅特勒-托利多儀器有限公司），Acquity Arc 2998PDA 高效液相色譜儀（Waters），KQ800KDE 超聲波清洗器（廣東固特超聲股份有限公司），SNTR-8400A 智能溶出儀（SHIMADZU Excellence in Science），UN110plus自然對(duì)流烘箱（memment），KBF115 恒溫恒濕箱（德國(guó)賓德），KBF720 恒溫恒濕箱（德國(guó)賓德），F(xiàn)T2000A 顆粒和粉末特性分析儀（瑞柯儀器有限公司）。

1.2 試劑

草酸艾司西酞普蘭原料藥（浙江海森藥業(yè)有限公司，純度質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.0%），草酸艾司西酞普蘭對(duì)照品（浙江海森藥業(yè)有限公司，純度質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.7%），草酸艾司西酞普蘭雜質(zhì)對(duì)照品（USP），市售草酸艾司西酞普蘭片（H.Lundbeck A/S，商品名：LEXAPRO?），微晶纖維素（Asahi Kasei Corporation；Asahi Kasei Corporation）、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉（林州市環(huán)宇藥用輔料廠）、膠態(tài)二氧化硅（美國(guó)卡博特）、硬脂酸鎂（長(zhǎng)葛市白茹藥用材料有限公司）、滑石粉（廣西龍勝華美滑石粉開發(fā)有限公司）、薄膜包衣預(yù)混劑（胃溶型）85G68918-CN[贏創(chuàng)特種化學(xué)（上海）有限公司]，乙腈（色譜純，山東鑫贏舜新材料有限公司），磷酸（色譜純，TEDIA），鹽酸（色譜純，賽默飛），磷酸二氫鉀（色譜純，吳江市永和精細(xì)化工有限公司），氫氧化鈉（色譜純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），冰醋酸（色譜純，賽默飛），醋酸鈉（色譜純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 草酸艾司西酞普蘭片樣品的制備

稱取處方量的原料及輔料，將草酸艾司西酞普蘭與膠態(tài)二氧化硅先進(jìn)行混合5 min[4]，過40 目篩，然后將該混合物再加入三維運(yùn)動(dòng)混合機(jī)中，加入微晶纖維素PH102、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂、滑石粉，混合15 min，用直徑為7.0 mm 的沖模，直接壓片[5-6]，再采用薄膜包衣預(yù)混劑進(jìn)行包薄膜衣。

2.2 質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)與方法

2.2.1 休止角 采用粉體流動(dòng)性FT2000A 顆粒和粉末特性分析儀檢測(cè)中間體草酸艾司西酞普蘭片顆粒的休止角，每批樣品各檢測(cè)3 次，取其平均值。

2.2.2 脆碎度 按照《中華人民共和國(guó)藥典2020年版》（4 部）通則0923 片劑脆碎度檢查法測(cè)定，減失重量不得過1%，并不得出現(xiàn)斷裂、龜裂及粉碎的片[7]。

2.2.3 溶出度 按照《中華人民共和國(guó)藥典2020年版》（2 部）草酸艾司西酞普蘭片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)[7]。

2.3 處方優(yōu)化與正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.3.1 因素與水平[8-9]本品制備工藝為粉末直壓法，主要考察最終混合后的物料流動(dòng)性是否滿足生產(chǎn)需求，壓片后片子的脆碎度和溶出度需符合標(biāo)準(zhǔn)要求。本品采用原料與輔料微晶纖維素和交聯(lián)羧甲基纖維素鈉按既定比例混合后，直接壓片，可制得片子硬度和溶出度均符合質(zhì)量要求的產(chǎn)品。為確定各輔料的最終用量，本試驗(yàn)計(jì)劃選擇表1中A、B、C 三個(gè)因素為影響因素，并分別取3 個(gè)水平，以片劑脆碎度、休止角、溶出度三個(gè)指標(biāo)，進(jìn)行處方篩選優(yōu)化。因素與水平見表1。

表1 正交試驗(yàn)因素與水平表

2.3.2 綜合評(píng)分方法[10]總混后測(cè)定物料的休止角（a）、壓片后測(cè)定片子的脆碎度（b）及第30 分鐘測(cè)定的溶出度（c），通過上述三個(gè)指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)估。休止角反映顆粒的流動(dòng)性，脆碎度反映物料的可壓性，正交試驗(yàn)綜合評(píng)分公式為：M=（50-a）×2+（1-b）×20+c×0.4。

2.3.3 正交試驗(yàn)結(jié)果 通過正交試驗(yàn)結(jié)果分析可知，膠態(tài)二氧化硅比例（B）影響顯著，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉比例（A）和硬脂酸鎂比例（C）影響不顯著。影響因素的優(yōu)先順序?yàn)锽>C>A，最佳制備處方為交聯(lián)羧甲基纖維素鈉所占比例為5.0%，膠態(tài)二氧化硅為2.0%，硬脂酸鎂為1.0%。見表2。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

2.4 優(yōu)選處方驗(yàn)證

依照優(yōu)選的處方工藝制備三批草酸艾司西酞普蘭片樣品。按照《中華人民共和國(guó)藥典2020年版》（2 部）草酸艾司西酞普蘭片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)[7]，并與參比制劑開展體外溶出行為考察，分別取一批自制制劑和一批參比制劑進(jìn)行加速穩(wěn)定性考察，以進(jìn)一步驗(yàn)證處方工藝的可行性。

2.5 質(zhì)量檢測(cè)

2.5.1 外觀 所制得的片劑為薄膜衣片，除去包衣后顯白色。符合《中華人民共和國(guó)藥典2020年版》（2 部）草酸艾司西酞普蘭片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[7]。

2.5.2 有關(guān)物質(zhì) 按照《中華人民共和國(guó)藥典2020年版》（2 部）草酸艾司西酞普蘭片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)，結(jié)果表明，自制制劑有關(guān)物質(zhì)均符合標(biāo)準(zhǔn)要求[7]。見表3。

表3 自制制劑有關(guān)物質(zhì)考察結(jié)果

2.5.3 含量及含量均勻度 按照《中華人民共和國(guó)藥典2020年版》（2 部）草酸艾司西酞普蘭片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)[7]，三批仿制制劑含量分別為101.30%、100.30%、100.40%（限度為95.00%～105.00%），含量均勻度分別為4.90、2.80、3.40（限度初試：≤15.00）。結(jié)果表明，自制制劑含量和含量均勻度均符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.5.4 參比制劑與自制制劑溶出曲線比較與分析[11-12]取本品，照溶出度與釋放度測(cè)定法（通則0931 第二法）。溶出介質(zhì)：水、pH 1.0 鹽酸溶液、pH 4.5 醋酸溶液及pH 6.8 磷酸鹽緩沖液；轉(zhuǎn)速：50 r/s；體積：900 ml；取樣時(shí)間：分別于5、10、15、30 min 取樣。測(cè)定法：照《中華人民共和國(guó)藥典2020年版》（2 部）草酸艾司西酞普蘭片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)含量檢測(cè)項(xiàng)的色譜條件，量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20 μl，注入液相色譜儀，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算每片的溶出量，原研制劑和自研產(chǎn)品在不同介質(zhì)中的溶出曲線見圖1～4。參比制劑與自制制劑在溶出介質(zhì)pH 1.0、pH 4.5、pH 6.8 中，取樣點(diǎn)15 min 時(shí)，溶出度均達(dá)85%以上，按照《普通口服固體制劑溶出曲線測(cè)定與比較指導(dǎo)原則》[13]規(guī)定：“當(dāng)受試制劑和參比制劑在15 min 內(nèi)的溶出量≥85%時(shí)，可以認(rèn)為兩者溶出行為相似，無需進(jìn)行f2 的比較?！痹谒橘|(zhì)中，三批自研產(chǎn)品與原研制劑進(jìn)行f2 值計(jì)算分別為59.60、68.50、62.00，結(jié)果均大于50，即自研產(chǎn)品與原研制劑在介質(zhì)水中的溶出曲線具有相似性。可確定自研產(chǎn)品與原研產(chǎn)品體外溶出行為一致[14-15]。

2.6 穩(wěn)定性考察

將自制制劑按市售包裝與參比制劑置于40℃±2℃，相對(duì)濕度75%±5%條件下考察6 個(gè)月，分別于0、1、2、3、6 個(gè)月測(cè)定含量、溶出度和有關(guān)物質(zhì)與參比制劑進(jìn)行比較。結(jié)果表明，自制制劑與仿制制劑放置6月后各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)均無明顯變化。由此可見，粉末直壓法制備的草酸艾司西酞普蘭片劑含量、含量均勻度、溶出度、有關(guān)物質(zhì)均無明顯變化，質(zhì)量穩(wěn)定。見表4。

表4 穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)

3 討論

草酸艾司西酞普蘭對(duì)濕熱極其不穩(wěn)定，采用常規(guī)方法濕法制粒，極易導(dǎo)致發(fā)生水解等反應(yīng)有關(guān)物質(zhì)上升，導(dǎo)致療效降低，本研究采用粉末直壓工藝，降低了產(chǎn)品質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)，縮短了生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本，所制備的草酸艾司西酞普蘭片經(jīng)加速6 個(gè)月的留樣考察，質(zhì)量結(jié)果與參比制劑相似，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，達(dá)到預(yù)期目的。