柴曉瑩 王 艷 賈小水 馬文峰 曹忠洋 王占彬*

(1.河南科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，洛陽(yáng) 471000；2.河南新仰韶生物科技有限公司，三門峽 472400)

產(chǎn)蛋后期蛋雞的生理機(jī)能逐漸退化，同時(shí)由于集約化養(yǎng)殖環(huán)境中各種應(yīng)激因素的影響，雞群常處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，產(chǎn)蛋性能降低，腸道組織形態(tài)變差，腸道微生物群落失調(diào)，利用年限縮短。因此，研究高效綠色飼料添加劑對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞產(chǎn)蛋性能、腸道組織形態(tài)以及腸道微生物的影響對(duì)于提高蛋雞養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益有重要意義。隨著全面禁抗時(shí)代的到來(lái)，尋找抗生素的有效替代品成為研究的熱點(diǎn)，其中酶制劑是很好的抗生素替代品之一。葡萄糖氧化酶(GOD)是一種氧化還原酶，在有氧條件下能將β-D-葡萄糖分解為葡萄糖酸和過氧化氫，反應(yīng)消耗氧氣和產(chǎn)生葡萄糖酸為腸道有益菌提供有利生存環(huán)境，無(wú)毒無(wú)害，其提高蛋雞生產(chǎn)性能、改善蛋雞腸道健康的作用已經(jīng)在前人的研究中得到證實(shí)。王恒毅等[1]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加0.2%的GOD可提高蛋雞的產(chǎn)蛋率，降低采食量、料蛋比及死淘率，節(jié)約生產(chǎn)成本。Wu等[2]研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)于21日齡的肉仔雞，添加GOD組與添加抗生素生長(zhǎng)促進(jìn)劑組相比，肉仔雞盲腸中細(xì)菌多樣性顯著增加，但與對(duì)照組相比沒有顯著差異；此外，Alpha多樣性指數(shù)如AEC、Chao1、Shannon和Simpson指數(shù)也沒有發(fā)現(xiàn)顯著性變化。但是目前關(guān)于GOD對(duì)盲腸微生物的研究只關(guān)注幾種常見菌種，本試驗(yàn)旨在系統(tǒng)探究GOD對(duì)蛋雞盲腸微生物的影響，為蛋雞腸道微生物的研究提供數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理

選取270只產(chǎn)蛋率相近的70周齡海蘭褐蛋雞，隨機(jī)分為3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組產(chǎn)蛋率無(wú)顯著差異(P>0.05)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加150 、300 mg/kg活性為1 000 U/g的GOD。預(yù)試期7 d，正試期50 d。飼養(yǎng)試驗(yàn)在河南省洛陽(yáng)市新安縣紅雨養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)蛋雞采用3層階梯式籠養(yǎng)，每籠3只蛋雞。試驗(yàn)蛋雞的飼養(yǎng)管理與本雞場(chǎng)的飼養(yǎng)管理相同，雞舍采用自然光照加人工補(bǔ)光(16 h/d，光照程序控制器控制)，雞舍溫度為(20±2) ℃，相對(duì)濕度為50%～60%，自然通風(fēng)結(jié)合縱向負(fù)壓通風(fēng)。試驗(yàn)蛋雞自由采食，每天07:00、14:00及18:00各喂料1次，每天勻料3次，保證料槽中料量均勻；乳頭式飲水器自由飲水。每天15:30清1次糞，16:00收蛋?；A(chǔ)飼糧參照NRC(1994)營(yíng)養(yǎng)需要配制成粉狀配合飼糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平參見文獻(xiàn)[3]。

1.2 產(chǎn)蛋性能測(cè)定

每天17:00收集蛋，以每組各重復(fù)為單位記錄每天的產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、破蛋數(shù)及蛋雞死淘數(shù)；每周統(tǒng)計(jì)采食量，計(jì)算全期的產(chǎn)蛋率、平均日產(chǎn)蛋重、平均日采食量、料蛋比及破蛋率。

1.3 腸道組織形態(tài)測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1只雞屠宰，分別采集每只雞的十二指腸、空腸和回腸中段2 cm[4]，將取下的組織放在新鮮的4%多聚甲醛中固定24 h以上，以備制作腸道組織石蠟切片，觀察腸道組織形態(tài)。在制備的腸道組織切片上選取6個(gè)典型視野，用CaseViewer圖像分析軟件測(cè)量絨毛高度(villous height，VH)、隱窩深度(crypt depth，CD)、腸壁厚度(intestinal wall thickness)，并計(jì)算絨隱比(VH/CD)[5]。

1.4 盲腸微生物多樣性檢測(cè)

盲腸樣品的采集：在屠宰試驗(yàn)雞的同時(shí)，分別從對(duì)照組、300 mg/kg GOD組宰殺的雞中隨機(jī)在相同部位截取4段相同長(zhǎng)度的盲腸樣品，將截取下來(lái)的8個(gè)盲腸樣品放入EP管中，并快速放進(jìn)液氮中保存，最后放入-80 ℃冰箱中保存，以備檢測(cè)其微生物多樣性及結(jié)構(gòu)。盲腸樣品進(jìn)行16S rDNA V3～V4區(qū)擴(kuò)增與高通量測(cè)序分析。

1.5 數(shù)據(jù)分析

產(chǎn)蛋性能、腸道組織形態(tài)的數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，差異顯著時(shí)，用Duncan氏法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)[4]。盲腸微生物多樣性采用Alpha多樣性分析，相關(guān)指數(shù)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，群落結(jié)構(gòu)采用層級(jí)聚類分析和物種豐度circos分析，對(duì)照組和300 mg/kg GOD組的8個(gè)樣本中不同種類微生物相對(duì)豐度的數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 GOD對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

由表1可知，150 mg/kg GOD組、300 mg/kg GOD組產(chǎn)蛋率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；300 mg/kg GOD組平均日產(chǎn)蛋重顯著高于對(duì)照組與150 mg/kg GOD組(P<0.05)，150 mg/kg GOD組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)；300 mg/kg GOD組料蛋比顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，150 mg/kg GOD組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)；各試驗(yàn)組平均日采食量與破蛋率與對(duì)照組均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.2 GOD對(duì)蛋雞腸道組織形態(tài)的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，150 mg/kg GOD組和300 mg/kg GOD組蛋雞十二指腸、空腸和回腸絨毛高度顯著提高(P<0.05)；300 mg/kg GOD組蛋雞十二指腸絨隱比顯著提高(P<0.05)。

表1 GOD對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

表2 GOD對(duì)蛋雞腸道組織形態(tài)的影響

2.3 GOD對(duì)蛋雞盲腸微生物多樣性的影響

2.3.1 Alpha多樣性分析

由表3可知，在產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中添加300 mg/kg GOD對(duì)盲腸微生物操作分類單元(OTU)數(shù)目以及反映物種多樣性的Shannon、Chao1、PD指數(shù)均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

2.3.2 盲腸群落結(jié)構(gòu)分析

如圖1所示，根據(jù)層級(jí)聚類分析的結(jié)果在門水平上可將8個(gè)樣本分為4個(gè)類群，即Group Ⅱ 4為一個(gè)類群，Control 1、Control 2、Control 4為一個(gè)類群，Group Ⅱ 1、Group Ⅱ 3為一個(gè)類群，Control 3和Group Ⅱ 2為一個(gè)類群，并不能表現(xiàn)出對(duì)照組和300 mg/kg GOD組間物種組成差異；在屬的水平上8個(gè)樣本也是分為4個(gè)類群，即Group Ⅱ 4為一個(gè)類群，Group Ⅱ 1、Group Ⅱ 3為一個(gè)類群，Group Ⅱ 2為一個(gè)類群，Control 1、Control 2、Control 3、Control 4為一個(gè)類群，這表明在屬的水平上300 mg/kg GOD組與對(duì)照組物種組成存在差異。在門水平和屬水平上的物種豐度見圖2。如表4所示，在門水平上，飼糧中添加300 mg/kg GOD可以極顯著增加螺旋菌門(Spirochaetes)、迷蹤菌門(Elusimicrobia)的相對(duì)豐度(P<0.01)，顯著降低藍(lán)藻菌門(Cyanobacteria)的相對(duì)豐度(P<0.05)，極顯著降低疣微菌門(Verrucomicrobia)的相對(duì)豐度(P<0.01)；同時(shí)，還可以增加擬桿菌門(Bacteroidetes)的相對(duì)豐度，降低厚壁菌門(Firmicutes)、變形菌門(Proteobacteria)的相對(duì)豐度，但差異均未達(dá)顯著水平(P>0.05)。如表5所示，在屬水平上，飼糧中添加300 mg/kg GOD可以顯著增加擬桿菌屬(Bacteroides)、未分類的瘤胃球菌科(Ruminococcaceae_unclassified)的相對(duì)豐度(P<0.05)，極顯著增加瘤胃球菌科NK4A214群(Ruminococcaceae_NK4A214_group)的相對(duì)豐度(P<0.01)，顯著降低普雷沃氏菌科UCG-001(Prevotellaceae_UCG-001)的相對(duì)豐度(P<0.05)；同時(shí)，還可以增加未分類的擬桿菌目(Bacteroidales_unclassified)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、瘤胃球菌科UCG-010(Ruminococcaceae_UCG-010)的相對(duì)豐度，降低糞便桿菌屬(Faecalibacterium)、未分類的毛螺菌科(Lachnospiraceae_unclassified)、瘤胃球菌科UCG-014(Ruminococcaceae_UCG-014)、克里斯滕森菌科R7群(Christensenellaceae_R-7_group)、瘤胃球菌科UCG-005(Ruminococcaceae_UCG-005)、副桿菌屬(Parabacteroides)、脫硫弧菌屬(Desulfovibrio)的相對(duì)豐度，但差異均未達(dá)到顯著水平(P>0.05)。

表3 Alpha多樣性指數(shù)

Control 1、Control 2、Control 3和Control 4為對(duì)照組的4個(gè)樣本，Group Ⅱ 1、Group Ⅱ 2、Group Ⅱ 3、Group Ⅱ 4為300 mg/kg GOD組的4個(gè)樣本。Control 1, Control 2, Control 3 and Control were 4 samples from the control group, and Group Ⅱ 1, Group Ⅱ 2, Group Ⅱ 3 and Group Ⅱ 4 were 4 samples from the 300 mg/kg GOD group.

Bacteroidetes：擬桿菌門；Firmicutes：厚壁菌門；Spirochaetes：螺旋菌門；Proteobacteria：變形菌門；Deferribacteres：脫鐵桿菌門；Verrucomicrobia：疣微菌門；Synergistetes：互養(yǎng)菌門；Actinobacteria：放線菌門；Elusimicrobia：迷蹤菌門；Fusobacteria：梭桿菌門；Cyanobacteria：藍(lán)藻菌門；Rikenellaceae_RC9_gut_group：理研菌科RC9腸道群；Bacteroides：擬桿菌屬；Ruminococcaceae_unclassified：未分類的瘤胃球菌科；Bacteroidales_unclassified：未分類的擬桿菌目；Phascolarctobacterium：考拉桿菌屬；Faecalibacterium：糞便桿菌屬；[Ruminococcus]_torques_group：瘤胃球菌屬扭鏈群；Christensenellaceae_R-7_group：克里斯滕森菌科R-7群；Lachnospiraceae_unclassified：未分類的毛螺菌科；Rikenellaceae_unclassified：未分類的理研菌科；Spirochaetaceae_unclassified：未分類的螺旋體科；Ruminococcaceae_UCG-005：瘤胃球菌科UCG-005；Butyricicoccus：丁球菌屬；[Eubacterium]_coprostanoligenes_group：產(chǎn)糞甾醇真桿菌；Ruminococcaceae_UCG-014：瘤胃球菌科UCG-014；Ruminococcaceae_NK4A214_group:瘤胃球菌科NK4A214群；Desulfovibrio：脫硫弧菌屬；Prevotellaceae_Ga6A1_group：普雷沃氏菌科Ga6A1群；Rumen bacterium_unclassified 134：未分類的瘤胃細(xì)菌134；Ruminiclostridium_5：瘤胃梭菌屬5；Alistipes：另枝菌屬；Clostridiales_vadinBB60_group_unclassified：未分類的梭菌目vadinBB60群；Parabacteroides：副桿菌屬；Ruminococcaceae_UCG-010：瘤胃球菌科UCG-010； Oribacterium：顫桿菌克屬；Prevotellaceae_UCG-001：普雷沃氏菌科UCG-001；Oscillibacter：顫桿菌屬；Lactobacillus：乳桿菌屬；Mucispirillum：脫鐵桿菌屬；Others:其他。

表4 門水平盲腸微生物相對(duì)豐度

3 討 論

3.1 GOD對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

GOD能改善飼糧的適口性，在養(yǎng)殖動(dòng)物出現(xiàn)厭食的情況時(shí)，添加GOD可以讓養(yǎng)殖動(dòng)物恢復(fù)正常采食[5]。李嘉輝等[6]研究了GOD對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋種雞產(chǎn)蛋性能、孵化性能及抗氧化能力的影響，結(jié)果顯示，GOD可以緩解產(chǎn)蛋后期蛋種雞的氧化應(yīng)激狀態(tài)，延緩蛋雞機(jī)體衰老和卵巢功能退化，從而提高蛋雞產(chǎn)蛋后期的產(chǎn)蛋性能。趙必遷等[7]在產(chǎn)蛋后期羅曼粉殼蛋雞飼糧中添加300 mg/kg的GOD，發(fā)現(xiàn)顯著提高了產(chǎn)蛋率和顯著降低了料蛋比，極顯著降低了死亡率和破殼率。曲浩杰等[8]在產(chǎn)蛋后期海蘭褐蛋雞飼糧中添加博落回提取物和GOD，發(fā)現(xiàn)顯著提高了產(chǎn)蛋率，顯著降低了料蛋比。本研究結(jié)果表明飼糧中添加150、300 mg/kg GOD可使處于產(chǎn)蛋后期蛋雞的產(chǎn)蛋率顯著提高，添加300 mg/kg GOD可使料蛋比顯著降低。生產(chǎn)實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，在蛋雞飼糧中添加GOD確實(shí)能使產(chǎn)蛋率提高2%左右，但是產(chǎn)蛋率并不是隨著GOD添加量的增加而直線上升，而是以3%的添加量產(chǎn)蛋率最高，超過這個(gè)添加量產(chǎn)蛋率不但提高不明顯，由于生產(chǎn)成本的提高，反而使經(jīng)濟(jì)效益受到了影響[9]。因此，大型養(yǎng)殖場(chǎng)從經(jīng)濟(jì)角度出發(fā)，在考慮添加時(shí)期的同時(shí)也應(yīng)結(jié)合所用GOD市場(chǎng)價(jià)格，考慮添加量，不能盲目在蛋雞飼糧中添加GOD。

表5 屬水平盲腸微生物相對(duì)豐度

3.2 GOD對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞腸道組織形態(tài)的影響

小腸是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的重要場(chǎng)所，腸絨毛高度越大，腸黏膜與食糜接觸面積越大，小腸消化和吸收能力越強(qiáng)[10]。隱窩深度能反映細(xì)胞的增殖率，隱窩深度變淺說(shuō)明腸上皮細(xì)胞成熟率上升，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力增強(qiáng)。因此，絨隱比可綜合反映小腸功能，絨隱比越高，小腸消化吸收功能越強(qiáng)，絨隱比減小說(shuō)明腸黏膜受損，影響小腸對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。腸壁厚度能反映腸道組織結(jié)構(gòu)的完整性，特別是腸壁內(nèi)肌層厚度的增加，能使小腸蠕動(dòng)增強(qiáng)，可以提高其消化吸收能力，從而提高生產(chǎn)性能[11-14]。隨著養(yǎng)殖蛋雞養(yǎng)殖周期的延長(zhǎng)，蛋雞的死淘率快速上升，這與蛋雞腸道健康有著密不可分的關(guān)系。宋海彬等[15]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加GOD可提高肉雞十二指腸和空腸絨毛高度，降低隱窩深度，增加絨毛膜高度/隱窩深度。崔細(xì)鵬等[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加GOD對(duì)肉雞十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度、隱窩深度、絨毛膜高度/隱窩深度均無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加150或300 mg/kg GOD均可顯著提高產(chǎn)蛋后期蛋雞十二指腸、空腸和回腸絨毛高度；飼糧中添加300 mg/kg GOD可顯著提高十二指腸的絨隱比。Gu等[17]研究表明，若動(dòng)物應(yīng)激較大，其腸道微生物區(qū)系就會(huì)發(fā)生改變，進(jìn)而影響腸道的形態(tài)結(jié)構(gòu)。據(jù)研究表明，由葡萄糖酸發(fā)酵生成的乙酸、丙酸、丁酸等揮發(fā)性短鏈脂肪酸(SCFA)主要是腸道微生物產(chǎn)生的，且極易在腸道內(nèi)被上皮細(xì)胞吸收[18]。而經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，短鏈脂肪酸可以明顯提高腸絨毛高度、黏膜厚度及絨毛面積，降低隱窩深度[15,19]。此外，隨著蛋雞飼養(yǎng)周期的延長(zhǎng)，體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生大量自由基，破壞腸道上皮細(xì)胞。而GOD具有氧化還原作用，可以有效清除自由基，保護(hù)腸道組織結(jié)構(gòu)的完整性[20]。以上這些對(duì)GOD作用機(jī)理的研究增加了本試驗(yàn)的可信度。至于與崔細(xì)鵬等[16]的試驗(yàn)結(jié)果存在的偏差，猜測(cè)是GOD添加量不同引起的。

3.3 GOD對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞盲腸微生物的影響

產(chǎn)蛋后期蛋雞產(chǎn)蛋性能慢慢降低，蛋殼變薄易碎，破損率大幅度增加；免疫力和抵抗力減弱，易發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)。而這些均與蛋雞在產(chǎn)蛋后期體內(nèi)代謝變化和腸道內(nèi)微生態(tài)變化等密切相關(guān)[10]。高通量測(cè)序技術(shù)目前已經(jīng)成為很多研究不可缺少的工具。通過這個(gè)技術(shù)，可以深入地了解腸道菌群的組成情況與動(dòng)態(tài)，幫助研究者查清楚宿主與細(xì)菌間的相互影響關(guān)系[21]。另外，細(xì)菌16S rDNA基因包含9個(gè)高變區(qū)，這些高變區(qū)可以用來(lái)檢測(cè)并分類細(xì)菌[22-23]。由于16S rDNA V3～V4區(qū)擁有高分類一致性，所以本試驗(yàn)選擇對(duì)蛋雞盲腸V3～V4區(qū)進(jìn)行細(xì)菌16S rDNA分析。有研究表明GOD可以影響盲腸微生物多樣性，王前光等[24]在GOD對(duì)1～6周齡臨武鴨生長(zhǎng)性能、血清生化和抗氧化指標(biāo)、腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)和微生物多樣性影響的研究中發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加30 g/t GOD時(shí)，臨武鴨盲腸微生物豐富度指數(shù)顯著高于對(duì)照組，與本試驗(yàn)結(jié)果不一致，這可能與試驗(yàn)動(dòng)物不同有關(guān)。而Wu等[2]在肉仔雞上的研究結(jié)果與本試驗(yàn)是一致的。研究表明，脫硫弧菌屬具有很高的纖維降解能力[25]，擬桿菌門能夠降解非纖維性碳水化合物、蛋白質(zhì)，促進(jìn)胃腸道免疫系統(tǒng)發(fā)育[26-27]；厚壁菌門與纖維分解、碳水化合物代謝有關(guān)[28]；此外，家禽盲腸中厚壁菌門的相對(duì)豐度與體增重[29]和產(chǎn)蛋性能[30]存在正相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加300 mg/kg GOD可以降低厚壁菌門的相對(duì)豐度，提高擬桿菌門的相對(duì)豐度，降低脫硫弧菌屬的相對(duì)豐度，提高擬桿菌屬的相對(duì)豐度。擬桿菌門和厚壁菌門相對(duì)豐度的改變?cè)谀壳把芯恐写嬖跔?zhēng)議，黃婧溪[30]研究表明,GOD降低擬桿菌門相對(duì)豐度，高晶萍等[31]研究表明,GOD極顯著提高擬桿菌門的含量，Wu等[2]研究提到GOD組厚壁菌門豐度顯著增加。綜上所述,本試驗(yàn)驗(yàn)證了高晶萍等[31]的試驗(yàn)結(jié)果。變形菌門包括大量的革蘭氏陰性菌，如大腸桿菌，它們通過細(xì)胞壁上的脂多糖(LPS)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)[32]，副桿菌屬可以通過誘導(dǎo)抗炎因子的產(chǎn)生以及抑制炎癥因子的分泌減少腸道炎癥反應(yīng)，維持腸道正常功能[33]。普雷沃氏菌屬具有多種作用，包括減輕炎癥，消化纖維素，產(chǎn)生乙酸、丁酸以及少量異丁酸[34]；作為一種常見的腸道有益菌，乳桿菌屬可以通過下調(diào)一些炎癥因子如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá)來(lái)緩解結(jié)腸炎模型大鼠的腸道炎癥反應(yīng)[35]；此外，乳桿菌屬可以與彎曲桿菌等病原菌爭(zhēng)奪黏膜結(jié)合位點(diǎn)來(lái)防止腸道病原體感染，保護(hù)腸道健康[36]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加300 mg/kg GOD可以降低變形菌門和副桿菌屬的相對(duì)豐度，提高普雷沃氏菌UCG-001和乳桿菌屬的相對(duì)豐度，說(shuō)明GOD可能通過提高普雷沃氏菌_UCG-001屬的相對(duì)豐度來(lái)降低蛋雞炎癥的發(fā)生。瘤胃球菌科NK4A214群、糞便桿菌屬、未分類的毛螺菌科可以在腸道中產(chǎn)生短鏈脂肪酸。在龐凱悅等[37]的研究中發(fā)現(xiàn)，瘤胃球菌科UCG-014、瘤胃球菌科UCG-005、瘤胃球菌科UCG-010、克里斯滕森菌科R7群與一些牛瘤胃的一些短鏈脂肪酸有顯著的正相關(guān)或者負(fù)相關(guān)關(guān)系。短鏈脂肪酸是調(diào)節(jié)腸道功能和腸道免疫的關(guān)鍵性因子，對(duì)宿主有多種有益作用，包括維持腸道屏障功能和抗炎作用。本試驗(yàn)中，飼糧中添加300 mg/kg GOD使瘤胃球菌科NK4A214群的相對(duì)豐度極顯著上升，未分類的毛螺菌科、瘤胃球菌科UCG-014、瘤胃球菌科UCG-005、瘤胃球菌科UCG-010、克里斯滕森菌科R7群、糞便桿菌屬的相對(duì)豐度沒有顯著變化，這表明GOD有可能通過增加瘤胃球菌科NK4A214群的相對(duì)豐度來(lái)增加腸道中短鏈脂肪酸的含量，進(jìn)而增強(qiáng)腸道免疫功能。疣微菌門中的嗜黏蛋白阿克曼氏菌(Akkermansiamuciniphila)由于在黏蛋白降解過程中的特殊性能而成為腸腔與宿主細(xì)胞間黏膜界面的關(guān)鍵生物，和炎癥性腸病、肥胖、酒精肝、孤獨(dú)癥、結(jié)腸炎、2型糖尿病、1型糖尿病及其他代謝紊亂等密切相關(guān)[38]。飼糧中添加300 mg/kg GOD后疣微菌門的相對(duì)豐度極顯著降低，由于不能夠確定本試驗(yàn)測(cè)序的是疣微菌門中哪一種，故不能夠確定此菌門增加的相關(guān)效應(yīng)。藍(lán)藻菌門在動(dòng)物腸道中研究還很少，不能確定藍(lán)藻菌門相對(duì)豐度的增加對(duì)蛋雞腸道調(diào)節(jié)有無(wú)影響。有研究表明梭桿菌門對(duì)動(dòng)物具有毒害作用，300 mg/kg GOD組梭桿菌門的相對(duì)豐度較對(duì)照組略有下降，故不會(huì)對(duì)蛋雞造成危害。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加150或300 mg/kg GOD均能顯著提高產(chǎn)蛋后期蛋雞的產(chǎn)蛋率；添加300 mg/kg GOD還能顯著提高平均日產(chǎn)蛋重、顯著降低料蛋比，在一定程度上改善了產(chǎn)蛋后期蛋雞的產(chǎn)蛋性能。

② 飼糧中添加150或300mg/kg GOD均顯著提高了蛋雞十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度；添加300 mg/kg GOD還顯著提高了蛋雞十二指腸絨隱比，利于蛋雞的腸道健康和機(jī)體免疫。

③ 飼糧中添加300 mg/kg GOD有利于優(yōu)化蛋雞盲腸微生物群落結(jié)構(gòu)組成。