河南省土壤肥料站 程傳凱

氨基酸水溶肥料作為肥料行業(yè)的新成員，除具有水溶肥料易溶解、易吸收等優(yōu)點外，還具有調(diào)節(jié)植物生長和土壤酸堿度的特點。近年，河南省針對氨基酸水溶肥料進行了大量作物田間試驗，加上水肥一體化技術(shù)的推廣和春季“一噴三防”項目的大力推動，使農(nóng)民真正看到良好的效果。但在氨基酸水溶肥料快速發(fā)展的同時，由于大家對氨基酸肥料缺乏了解，再加上氨基酸水溶肥料生產(chǎn)對設(shè)備場地的要求相對較低，導(dǎo)致氨基酸水溶肥料產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，在一定程度上限制了氨基酸肥料的發(fā)展。河南省土壤肥料站作為肥料質(zhì)量監(jiān)督的重要一環(huán)，有必要引進氨基酸水溶肥料檢測儀器，開展氨基酸水溶肥料檢測工作。

氨基酸水溶肥料檢測標準——《水溶肥料 游離氨基酸含量的測定》（NY/T 1975-2010）是氨基酸水溶肥料檢測的主要依據(jù)，標準內(nèi)提到使用液相色譜法中的氨基酸自動分析儀法（柱后衍生法）和柱前衍生法兩種方法測定水溶肥料中游離氨基酸的含量。而自動分析儀法是最終仲裁法。本文主要以柱后衍生法為基礎(chǔ)，以德國塞卡姆全自動氨基酸分析儀為主要檢測儀器，分析檢測過程中常見的幾種故障和解決方法。

一、儀器內(nèi)進入氣泡

（一）原因分析

由于全自動氨基酸分析儀在運行中主要靠泵推動試劑進行檢測，一旦氣泡進入泵頭，將造成液體流速不穩(wěn)甚至完全停止，泵壓來回變化或泵壓降低，圖譜錯亂甚至無峰。分析產(chǎn)生原因主要有以下幾點：首先，試劑更換或者添加試劑時沒有及時排氣泡；其次，全自動氨基酸分析儀的自動化程度較高，且單針運行時間約為1 h，如果樣品較多，儀器分析的時間將會延長，某一種試劑在運行中耗盡并且沒有得到補充，那么密封氮氣將會隨管路進入儀器。

（二）解決方法

通過與工程技術(shù)人員溝通、整理操作規(guī)程，檢測人員在每次運行儀器前要檢查各個試劑余量，確保能夠滿足當前批次使用，然后在每次更換或添加試劑后及時進行管路排除氣泡操作，確保管路中沒有氣泡。

二、茚三酮溶液配置問題

（一）原因分析

全自動氨基酸分析儀為了降低后期使用成本，除能夠使用原廠茚三酮試劑外，還提供了氨基酸分析所需茚三酮試劑的配比方法。檢測人員在實際化驗中可以根據(jù)廠家提供的試劑配置方案自行配置，從而大大節(jié)約試劑成本。由于茚三酮容易氧化變質(zhì)，根據(jù)化驗需要自行配置茚三酮試劑，可防止剩余試劑因為放置時間過長而變質(zhì)。但是，由于精密度高，儀器對試劑的要求非常高，使用純度達不到要求的茚三酮試劑極易發(fā)生氧化造成變質(zhì)失效，且由于這種試劑所含雜質(zhì)較多易造成儀器在運行時堵塞毛細管，使儀器內(nèi)壓力過大損壞反應(yīng)單元。

（二）解決方法

1.檢測人員配置茚三酮溶液時要使用大廠出品的茚三酮，品質(zhì)有保證；使用0.45 mm 孔徑濾膜進行過濾，去除雜質(zhì)，減少堵塞毛細管的概率。

2.在檢測過程中出現(xiàn)的反應(yīng)顏色或者壓力異常，很有可能是由于茚三酮溶液變質(zhì)造成的。遇到這種情況應(yīng)立即終止儀器運行，檢查管路，運行管路清洗程序。如果仍然不能使壓力降低，原因就能夠確定為管路已經(jīng)堵塞，需要把反應(yīng)池兩頭的毛細管反接，進行反沖。

三、鉀鈉緩沖液配置問題

（一）原因分析

由于Cys 對pH 最敏感，所以配置的鉀鈉緩沖液對pH 的要求非常高。鉀鈉緩沖液的pH 要為5.51±0.03。pH 偏高就會造成Cys 出峰提前與Ala 粘連或重疊；相反，如果pH 偏低，Cys 則與Val 粘連或重疊，無法正常積分。而影響pH 最主要的因素是溫度，由于配置鉀納緩沖溶液時使用乙酸，一旦溫度過高，乙酸容易揮發(fā)造成pH的變化。

（二）解決方法

通過實際驗證，配置鉀鈉緩沖液要在低溫條件下使用磁力攪拌，并且使用保鮮膜覆蓋燒杯以免造成乙酸揮發(fā)。溶解試劑應(yīng)避免使用超聲波震蕩儀，因為超聲波震蕩儀在工作時會產(chǎn)生一定熱量，容易造成鉀鈉緩沖溶液pH 的變化。

四、管路茚三酮試劑沉淀問題

（一）原因分析

實際操作中會出現(xiàn)個別樣品茚三酮試劑濃度較高，常規(guī)清洗程序和洗液不能夠徹底去除管路內(nèi)殘留的茚三酮試劑。儀器如果不連續(xù)使用，容易在管路內(nèi)部殘留茚三酮試劑沉淀，堵塞管路。

（二）解決方法

通過多次摸索和試驗，提高異丙醇洗液濃度至50%，并且把自動清洗程序連續(xù)運行2 遍，能夠較好地保證儀器正常運行。