裴 明,胡曉玥
(1.太原市衛(wèi)生學(xué)校,山西 太原 030012;2.山西醫(yī)科大學(xué),山西 晉中 030600)
實(shí)驗(yàn)室生物安全是指實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平,可避免實(shí)驗(yàn)室人員、來(lái)訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到不可接受的損害,符合相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任的要求。根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)室的操作內(nèi)容和危害程度,應(yīng)在不同等級(jí)的生物安全實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)[1]。作為一名從事病原生物學(xué)與免疫學(xué)基礎(chǔ)教學(xué)和科研的教師,在實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)或課題研究過(guò)程中,如何加強(qiáng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)室安全意識(shí)培養(yǎng),避免生物毒性因子的暴露、有毒化學(xué)藥品的泄露,有效阻止其向周?chē)h(huán)境和人群擴(kuò)散,顯得尤為重要。因此,筆者擬從實(shí)驗(yàn)前、實(shí)驗(yàn)中、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后幾方面談?wù)剬?duì)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室生物安全教育的思考。
為打造平安和諧的校園,每年新生入學(xué)教育的安全教育課程中,都將實(shí)驗(yàn)室安全列入其中,這也是新生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的第一課。教師通過(guò)介紹國(guó)內(nèi)外高校發(fā)生的實(shí)驗(yàn)室安全事故,使學(xué)生認(rèn)識(shí)到出現(xiàn)事故的主要原因是違反實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程或?qū)嶒?yàn)操作不當(dāng),應(yīng)引起高度關(guān)注。實(shí)驗(yàn)室安全事故中爆炸與火災(zāi)占比最高,第二是化學(xué)有毒藥品的泄露,第三是生物安全,第四是中毒。這些事故離我們很近,時(shí)刻都有可能發(fā)生在我們身邊,因此學(xué)生要把實(shí)驗(yàn)室安全意識(shí)扎根心中。
大多數(shù)學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前未經(jīng)過(guò)系統(tǒng)的安全教育培訓(xùn),缺乏必要的實(shí)驗(yàn)室安全知識(shí)。學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前,要了解國(guó)家的有關(guān)法律法規(guī),如《國(guó)家危險(xiǎn)廢物名錄》《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》等,由于實(shí)驗(yàn)課時(shí)的限制,這部分內(nèi)容可在課前自學(xué)[2]。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后,要認(rèn)真學(xué)習(xí)相應(yīng)實(shí)驗(yàn)室的安全管理制度、實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備的使用規(guī)定、實(shí)驗(yàn)室的注意事項(xiàng)等。做實(shí)驗(yàn)前組織考核,可以通過(guò)學(xué)習(xí)通App、問(wèn)卷星等,以選擇題方式進(jìn)行測(cè)試,合格者方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)。通過(guò)學(xué)習(xí)和考核,學(xué)生的實(shí)驗(yàn)室安全意識(shí)大大增強(qiáng)。
另外,嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)入制度。在儀容儀表上,首先要穿實(shí)驗(yàn)服,摘除首飾,不留長(zhǎng)指甲,長(zhǎng)發(fā)應(yīng)扎好,避免在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中長(zhǎng)發(fā)遮蓋眼睛,用手整理時(shí)引發(fā)危險(xiǎn)或使用酒精燈時(shí)燒著頭發(fā);在實(shí)驗(yàn)室不穿露腳趾的鞋,防止試劑直接滴灑在皮膚上;進(jìn)行特殊實(shí)驗(yàn)時(shí)要求學(xué)生穿隔離衣并戴口罩、護(hù)目鏡、防毒面具。在行為規(guī)范上,在實(shí)驗(yàn)室不吸煙、不吃零食、不化妝打扮、不戴隱形眼鏡等;實(shí)驗(yàn)臺(tái)上不放書(shū)包、衣服等與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品。
實(shí)驗(yàn)教師作為實(shí)驗(yàn)室的第一責(zé)任人,不僅要具備豐富的理論知識(shí)及熟練的操作技能,還要具有學(xué)習(xí)新知識(shí)的興趣和能力[3]。學(xué)校要鼓勵(lì)和組織實(shí)驗(yàn)教師參加有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全的交流、培訓(xùn)活動(dòng),不斷更新實(shí)驗(yàn)教師的實(shí)驗(yàn)室安全知識(shí),提高綜合業(yè)務(wù)素養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)教師在實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、管理、合理使用過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,也是保證學(xué)生實(shí)驗(yàn)安全的重要力量。
學(xué)校根據(jù)實(shí)驗(yàn)室和學(xué)生實(shí)際情況安排實(shí)驗(yàn)教學(xué),既要保證實(shí)驗(yàn)課的開(kāi)出率,又要考慮到學(xué)生實(shí)驗(yàn)的安全性。教研室授課教師和實(shí)驗(yàn)教師集體備課,對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行調(diào)整,采取逐層遞進(jìn)原則,首先設(shè)置一些基本的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),其次設(shè)置綜合性實(shí)驗(yàn),最后設(shè)置創(chuàng)新設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),在保證學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)室基本操作技能和實(shí)驗(yàn)規(guī)范的基礎(chǔ)上,注重培養(yǎng)其實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力。
在病原微生物實(shí)驗(yàn)室開(kāi)設(shè)的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)包括細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查法、培養(yǎng)基的配制、細(xì)菌的分離與培養(yǎng)、藥敏試驗(yàn)等;綜合性實(shí)驗(yàn)主要是細(xì)菌的生化實(shí)驗(yàn)和鑒定;設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)材料選擇上盡量選擇容易得到的、安全性能高的、學(xué)生感興趣的材料,讓學(xué)生自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟、流程,不僅可以大大提高學(xué)生的實(shí)驗(yàn)積極性,還能加強(qiáng)學(xué)生對(duì)理論知識(shí)的理解。如在人體天然防御功能實(shí)驗(yàn)中,可選擇學(xué)生自己的唾液作為實(shí)驗(yàn)材料,做唾液中溶菌酶的殺菌實(shí)驗(yàn)。對(duì)一些操作時(shí)間長(zhǎng)、難度大的實(shí)驗(yàn),可以選取部分內(nèi)容對(duì)學(xué)生進(jìn)行示范教學(xué),這就要求教師在實(shí)驗(yàn)前做更多準(zhǔn)備工作和預(yù)實(shí)驗(yàn),也可選擇一些認(rèn)真負(fù)責(zé)的學(xué)生參與進(jìn)來(lái)和實(shí)驗(yàn)教師共同完成,這對(duì)學(xué)生來(lái)說(shuō)是一個(gè)很好的鍛煉機(jī)會(huì),對(duì)實(shí)驗(yàn)教師來(lái)說(shuō)也減輕了工作量。對(duì)有可能造成學(xué)生感染的實(shí)驗(yàn),可以采用錄像教學(xué)或虛擬實(shí)驗(yàn)方式,不但彌補(bǔ)了實(shí)驗(yàn)課時(shí)的不足,還開(kāi)闊了學(xué)生的視野。
病原生物實(shí)驗(yàn)室與其他生物實(shí)驗(yàn)室有很大不同,有微生物培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)范進(jìn)行。如在進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中,接種前要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行燒灼滅菌處理(有可能被環(huán)境中的微生物污染),接種過(guò)細(xì)菌的接種環(huán)一定要再次燒灼滅菌后再放回接種環(huán)架(避免接種環(huán)上殘留的細(xì)菌污染環(huán)境)。雖然實(shí)驗(yàn)室一般選取的菌種標(biāo)本是安全的,但學(xué)生在操作時(shí)可能由于不熟練導(dǎo)致菌種被污染,而實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)本和培養(yǎng)物均有可能具有傳染性,要做好個(gè)人防護(hù)措施。實(shí)驗(yàn)室所有用過(guò)的樣本、培養(yǎng)物和廢棄物應(yīng)假定有傳染性,要以安全方式進(jìn)行處理。任何使形成氣溶膠的危險(xiǎn)性上升的操作都必須在生物安全柜里進(jìn)行,盡可能使氣溶膠或氣霧的形成控制在最小限度,有害氣溶膠不得直接排放[4]。盡量避免使用尖銳物品(如一次性手術(shù)刀、針頭、玻璃等),使用后的利器應(yīng)放入利器盒中,不能隨意丟棄。
良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣是實(shí)驗(yàn)科研工作的重要組成部分,是減少實(shí)驗(yàn)事故的有力保障[5]??茖W(xué)實(shí)驗(yàn)都是非常嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的,容不得半點(diǎn)馬虎,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要嚴(yán)格要求自己。
在使用水電的時(shí)候一定不要離開(kāi),萬(wàn)一要離開(kāi),應(yīng)請(qǐng)其他人幫忙照看;實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要按實(shí)驗(yàn)步驟逐步完成,不要為了省時(shí)省事而同時(shí)進(jìn)行幾項(xiàng)不可能完成的事情;隨身帶上記號(hào)筆,養(yǎng)成隨時(shí)做記錄的好習(xí)慣,每次記錄的數(shù)據(jù)不能隨意亂放,要及時(shí)分析;新配制好的試劑一定要及時(shí)做好標(biāo)記,加入試劑前一定要混勻,以免放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)試劑濃度不均,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果;在使用天平進(jìn)行測(cè)量時(shí),不能直接把測(cè)量的藥品放在托盤(pán)里,應(yīng)該在托盤(pán)里放上濾紙,再把藥品放在濾紙上;使用移液器移取溶液時(shí)要用洗耳球,禁止用口吹吸,不能甩移液管,防止移液管中的酸或堿等液體甩出傷到自己或他人;玻璃管冷凝管上套膠塞時(shí)一定要小心,不要用力過(guò)猛導(dǎo)致冷凝管破碎,扎傷皮膚。
使用有機(jī)高危溶劑或鹽酸等有刺激性氣味的物品時(shí),一定要在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)期間要開(kāi)排風(fēng)扇或開(kāi)窗通風(fēng);硫酸、硝酸等氧化性酸若不小心滴在身上,要用清水清洗,然后用碳酸氫鈉液洗滌,不要因?yàn)闈舛鹊投鲆?,因?yàn)殡S著水分的蒸發(fā)硫酸的濃度會(huì)增高,會(huì)使原來(lái)的稀硫酸變成濃硫酸[6]。
加熱試管一定不能集中加熱,試管口不得對(duì)準(zhǔn)人,嚴(yán)防液體過(guò)熱而沖出試管[7];未經(jīng)處理的有害微生物或有害化學(xué)品,不能直接向下水道排放,有可能污染周?chē)h(huán)境;用移液槍頭吸完后,應(yīng)當(dāng)及時(shí)取下來(lái),以免忙亂時(shí)又用同一槍頭吸取其他試劑;移液槍千萬(wàn)不能用于揮發(fā)性有機(jī)溶劑的吸取。
在進(jìn)行革蘭氏染色過(guò)程中,每一步染色步驟都有嚴(yán)格的時(shí)間規(guī)定,時(shí)間不能延長(zhǎng)也不能縮短,否則會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。染色過(guò)程中使用的載玻片、蓋玻片要先放入消毒液里消毒處理,不能直接在水龍頭下沖洗,不能直接丟入生活垃圾中,防止有活的微生物存在污染環(huán)境。實(shí)驗(yàn)中使用過(guò)的玻璃器皿要及時(shí)浸泡、清洗、晾干,為下次實(shí)驗(yàn)做好準(zhǔn)備。
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,要將實(shí)驗(yàn)臺(tái)上的實(shí)驗(yàn)試劑統(tǒng)一放回原來(lái)的位置。對(duì)工作臺(tái)面進(jìn)行清潔消毒,脫去手套后用液體肥皂和流動(dòng)水按七步洗手法洗手,脫去實(shí)驗(yàn)服,確保水、電、門(mén)窗全都關(guān)好后方可鎖門(mén)離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室。這些看起來(lái)都微不足道,但一旦出現(xiàn)事故可能會(huì)造成不可估量的損失。良好實(shí)驗(yàn)習(xí)慣的養(yǎng)成對(duì)于高素質(zhì)人才培養(yǎng)非常重要,不僅可以避免很多意外事故的發(fā)生,還會(huì)對(duì)以后的生活、工作產(chǎn)生潛移默化的影響,使學(xué)生受益終身[8]。
(1)在生物實(shí)驗(yàn)室中經(jīng)常要注意水、火、電的安全,水龍頭不能有滴漏現(xiàn)象,不能用濕手碰觸電器。在明火周?chē)荒芊乓兹家妆锲?,在使用電爐加熱配制培養(yǎng)基時(shí)燒杯、燒瓶一定要墊上石棉網(wǎng),防止容器破碎液體外流引起火災(zāi),加熱容器中的液面不得超過(guò)2/3,防止液體噴出,電爐短路。使用過(guò)程中操作人員不得離開(kāi),直至加熱完畢關(guān)閉電源電爐絲冷卻后方可離開(kāi)。冰箱中不能放置易揮發(fā)的溶劑,否則有爆炸的風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)驗(yàn)室突發(fā)火災(zāi)(酒精燈里的酒精著火、電爐著火)的處理辦法,可以通過(guò)消防演練形式讓學(xué)生熟悉。在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí),要檢查鍋內(nèi)水量是否達(dá)到標(biāo)準(zhǔn),防止燒干,加熱前檢查鍋蓋是否密封良好,還要定期檢查壓力閥門(mén)是否堵塞。干烤箱消完毒后一定要溫度降下來(lái)方可打開(kāi)箱門(mén),并帶上厚手套防止?fàn)C傷,取出所需物品后及時(shí)關(guān)好箱門(mén)。在使用離心機(jī)時(shí),要選擇重量相等的離心管,對(duì)稱(chēng)放置;離心的液體不得超過(guò)離心體積的2/3,防止液體泄漏腐蝕轉(zhuǎn)頭,發(fā)生危險(xiǎn);離心機(jī)工作過(guò)程中有異常聲響時(shí)立刻切斷電源,等離心機(jī)停止運(yùn)轉(zhuǎn)后再靠近。這些常識(shí)可以小視頻或Flash動(dòng)畫(huà)形式發(fā)送給學(xué)生,讓學(xué)生提前觀看,課堂上檢查學(xué)生掌握情況。
(2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如有試劑濺出、有明顯或潛在的暴露感染性材料,應(yīng)及時(shí)報(bào)告實(shí)驗(yàn)教師,不要擅作主張自行處理,根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行消毒或立即按照意外事故應(yīng)急預(yù)案的程序處理。
實(shí)驗(yàn)室大型儀器設(shè)備必須有專(zhuān)人管理,儀器負(fù)責(zé)人在使用前需經(jīng)專(zhuān)門(mén)培訓(xùn),考核合格方可操作使用,未經(jīng)允許任何人不準(zhǔn)私自操作運(yùn)行。儀器使用過(guò)程中不得私自離開(kāi),當(dāng)儀器出現(xiàn)報(bào)警時(shí)能熟練處理,能做到安全斷電、斷水、斷氣,徹底消除因儀器故障出現(xiàn)的安全隱患。儀器使用完要按正確操作關(guān)機(jī),切斷電源。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將實(shí)驗(yàn)儀器恢復(fù)到實(shí)驗(yàn)前的狀態(tài),將儀器內(nèi)的樣品及時(shí)取出進(jìn)行安全處理,嚴(yán)禁在儀器內(nèi)存留實(shí)驗(yàn)樣品。定期對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行安全檢查和維護(hù),保證實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行。教師以演示方式邊操作邊講解,學(xué)生操作時(shí)一定要有教師在旁邊指導(dǎo)。
實(shí)驗(yàn)室工作人員要牢固樹(shù)立環(huán)保意識(shí),熟悉國(guó)家有關(guān)環(huán)境保護(hù)的法律法規(guī),對(duì)醫(yī)療廢物可按《醫(yī)療廢物分類(lèi)目錄(2021年版)》處理。嚴(yán)格執(zhí)行國(guó)家環(huán)保制度,對(duì)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須進(jìn)行環(huán)保方面的安全教育,使其熟悉廢棄物處理的原則和規(guī)定[9]。每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室廢棄物的特點(diǎn),做到分類(lèi)收集、存放,集中處理,處理方法應(yīng)簡(jiǎn)單、易操作,處理效率高,不需要很多投資。
(1)廢棄的消毒液,有毒、有害、有腐蝕性的試劑,過(guò)期或廢棄的藥品等,不能隨意倒入水池中,應(yīng)放在指定的地點(diǎn)分類(lèi)進(jìn)行無(wú)害化處理,對(duì)于含有高濃度有機(jī)溶劑的廢液應(yīng)回收再用。對(duì)于某些數(shù)量較少、濃度較高的有毒有機(jī)物,可通入燃燒爐中供給充分的氧氣,使其完全燃燒,生成二氧化碳和水。對(duì)高濃度廢酸、廢堿液要經(jīng)中和至中性時(shí)排放。少量有毒氣體可通過(guò)通風(fēng)設(shè)備排出室外,通風(fēng)管道應(yīng)有一定的高度,使排出的氣體能讓空氣稀釋。產(chǎn)生毒氣量大時(shí),必須經(jīng)過(guò)吸收處理才能排出。如氮、硫、磷等酸性氧化物氣體可用導(dǎo)管通入堿液中,使其被吸收后排出[10]。自己處理不了的廢棄物可收集后交由具備相應(yīng)資質(zhì)的醫(yī)療廢物處置單位或危險(xiǎn)廢物處置單位進(jìn)行處置。
(2)感染性廢物,如廢棄的細(xì)菌病毒標(biāo)本、培養(yǎng)使用后的細(xì)菌、細(xì)胞、病毒,病原體培養(yǎng)基和污染的試管,菌種和毒種保存液及其容器,應(yīng)及時(shí)使用壓力蒸汽滅菌鍋進(jìn)行消毒滅菌處理,然后按感染性廢物收集于符合環(huán)保規(guī)定的醫(yī)療廢物包裝袋中,運(yùn)送至專(zhuān)門(mén)的處理地進(jìn)行焚燒或深埋。
(3)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物嚴(yán)禁帶出實(shí)驗(yàn)室,如狗、兔子等不能作為寵物被領(lǐng)養(yǎng),堅(jiān)決制止實(shí)驗(yàn)人員食用經(jīng)無(wú)害化實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,活體動(dòng)物如小白鼠、青蛙、蟾蜍等實(shí)驗(yàn)后要妥善保管組織標(biāo)本,廢棄的動(dòng)物尸體、組織器官必須統(tǒng)一收集、集中存放、統(tǒng)一及時(shí)進(jìn)行處理,不得積壓在室內(nèi)亂放。不得將動(dòng)物尸體或器官隨意丟棄,應(yīng)由專(zhuān)人負(fù)責(zé)收集于符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的醫(yī)療廢物包裝袋中,作為醫(yī)療廢棄物交由具有相關(guān)資質(zhì)的環(huán)保部門(mén)統(tǒng)一處理。
(4)損傷性廢物指能夠刺傷或割傷人體的廢棄的醫(yī)用銳器,如廢棄的金屬類(lèi)銳器針頭、探針、解剖刀、手術(shù)刀,玻璃類(lèi)的載玻片、蓋玻片,應(yīng)收集于符合《醫(yī)療廢物專(zhuān)用包裝袋、容器和警示標(biāo)志標(biāo)準(zhǔn)》(HJ421)的利器盒中,利器盒達(dá)到3/4滿(mǎn)時(shí),應(yīng)當(dāng)封閉嚴(yán)密,按流程運(yùn)送、貯存[11]。
習(xí)近平總書(shū)記在指導(dǎo)抗擊新冠肺炎疫情的戰(zhàn)斗中強(qiáng)調(diào),必須從保護(hù)人民健康、保障國(guó)家安全、維護(hù)國(guó)家長(zhǎng)治久安的高度,把生物安全納入國(guó)家安全體系[12]。突如其來(lái)的疫情使我們深刻認(rèn)識(shí)到實(shí)驗(yàn)室安全的重要性,要將實(shí)驗(yàn)室安全教育貫穿于實(shí)驗(yàn)教學(xué)的全過(guò)程,加強(qiáng)培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)室生物安全意識(shí),養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)室安全操作習(xí)慣,不斷提高自身的生物安全素養(yǎng)[13],從而更好地服務(wù)社會(huì)、服務(wù)患者。