范佳彬
吉林省磐石市明城鎮(zhèn)綜合服務(wù)中心,吉林磐石 132301
牛病毒性腹瀉病具有較高的感染率和發(fā)病率,能夠迅速在牛群中進(jìn)行傳播,被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為B 類動(dòng)物疫病,我國將其列為3 類動(dòng)物疫病[1]。該病很容易被養(yǎng)殖場(chǎng)所忽視,一旦發(fā)生會(huì)給養(yǎng)殖場(chǎng)造成嚴(yán)重的損失。
牛病毒性腹瀉的病原為牛病毒性腹瀉病病毒,屬于黃病毒科、瘟病毒屬的成員,是一種單鏈RNA病毒。病毒粒子外觀呈現(xiàn)球形,表面被一層囊膜覆蓋,直徑為40~60 nm。病毒表面的囊膜由脂蛋白組成,在囊膜內(nèi)部被環(huán)狀亞單位結(jié)構(gòu)所填充,這種亞單位結(jié)構(gòu)的大小約為10 nm。有的病毒可以引起細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞病變,稱為致細(xì)胞病變型病毒,不引起細(xì)胞發(fā)生病變的稱為非致細(xì)胞病變型。該病毒有2個(gè)基因型,分別是BVDV-1 型和BVDV-2 型,而在養(yǎng)殖場(chǎng)流行的毒株多為BVDV-1 型。
牛病毒性腹瀉的傳染源主要是發(fā)病牛,發(fā)病牛的分泌物和排泄物中均帶有大量的病毒。當(dāng)健康牛和發(fā)病牛通過直接或者間接接觸時(shí),就有可能受到病毒的侵襲。該病可通過呼吸道和消化道進(jìn)行傳播,還可以通過血液和直接接觸的方式進(jìn)行傳播,也能夠通過胚胎和精液等進(jìn)行垂直傳播,甚至還能夠通過馬蠅等進(jìn)行傳播。易感動(dòng)物為牛,不同年齡和品種的牛均有易感性,但以幼齡牛易感性最高,尤其是處于6~18月齡的犢牛發(fā)病率最高。犢牛在感染后如果沒有及時(shí)進(jìn)行診斷和治療,病死率較高,可達(dá)40%以上。成年牛在感染后常能夠耐過,但耐過牛具有較長(zhǎng)時(shí)間的排毒期,通常可達(dá)6 個(gè)月,甚至更長(zhǎng)。該病的發(fā)生具有一定的季節(jié)性,通常是在春季和秋季發(fā)病率較高,但在夏季和冬季也可以發(fā)生。
牛在感染病原后會(huì)有一段時(shí)間的潛伏期,潛伏期的長(zhǎng)短和牛自身的體質(zhì)相關(guān),通常潛伏期為2~14 d。潛伏期過后,病牛表現(xiàn)出臨床癥狀,根據(jù)疾病發(fā)展的快慢可以將該病的臨床癥狀分為3 種,即急性型、慢性型和持續(xù)感染型。
急性型的病牛多見于犢牛,尤其是處于18月齡以內(nèi)的犢牛。本型的病牛具有發(fā)病率高和死亡率高等特點(diǎn)。病牛精神不振,食欲下降,體溫上升,甚至可以達(dá)到42 ℃,持續(xù)2~3 d 后體溫開始下降,而后再次升高至42 ℃,呈雙相熱型。病牛表現(xiàn)為流涕、結(jié)膜潮紅,還在鼻腔、口腔等部位的黏膜處出現(xiàn)不同程度的潰瘍或糜爛。病程較長(zhǎng)的病牛在糞便中還可見有黏液和血液等,此時(shí)的病牛如未進(jìn)行及時(shí)治療,則會(huì)因脫水而死亡。
慢性型多是由急性型長(zhǎng)期感染沒有痊愈轉(zhuǎn)變而來。本型的病牛表現(xiàn)為不斷消瘦,生長(zhǎng)停滯、并從眼淚和鼻腔等部位分泌出大量的分泌液,還出現(xiàn)間斷性的腹瀉;在糞便中還可以見到脫落壞死的黏膜;有的病牛還可能出現(xiàn)慢性的蹄葉炎,表現(xiàn)為跛行。本型的病牛病程較長(zhǎng),如果未采取任何措施進(jìn)行救治,可因持續(xù)性的消耗而導(dǎo)致病牛死亡。
本型的病牛通常無臨床癥狀。當(dāng)牛的機(jī)體免疫力下降時(shí)則會(huì)表現(xiàn)出臨床癥狀,并具有傳染性,能夠感染其他健康牛群。本型的妊娠期母牛不會(huì)出現(xiàn)流產(chǎn)癥狀,但產(chǎn)出的犢牛也攜帶本病原,并且犢牛具有排毒性,可以將病原遞給其他健康牛。有的病牛不出現(xiàn)臨床癥狀,終生帶毒,并且能夠不斷地向體外排毒,給周圍的健康牛群造成嚴(yán)重的威脅。
對(duì)病死牛進(jìn)行剖檢,可見其病變主要集中于消化道和淋巴組織。在病牛的上腭、齒齦、鼻腔內(nèi)黏膜處均存在不同程度的潰瘍或糜爛。從食道到胃腸道均有不同程度的潰瘍,尤其是在空腸、盲腸、結(jié)腸存在壞死性、潰瘍性、出血性的炎癥[2]。犢牛發(fā)病后還表現(xiàn)為小腦的發(fā)育不全以及腦室積水情況。如妊娠母牛感染時(shí),常表現(xiàn)為流產(chǎn),流產(chǎn)胎兒的口腔、食道和氣管以及胃腸道內(nèi)均會(huì)出現(xiàn)有不同程度的潰瘍?cè)罨蛘叱鲅唿c(diǎn)。
通過流行病學(xué)調(diào)查以及臨床癥狀和病理變化無法進(jìn)行確診,僅能做出初步診斷,需要結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)才能確診該病。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要通過電鏡觀察,從病牛的腸道內(nèi)容物提取病原后通過負(fù)染操作,進(jìn)行電鏡檢測(cè)。如果觀測(cè)到有大量存在的呈圓形的病毒粒子且病毒粒子大小約為60 nm,表面有10~20 nm 的囊膜,由此可以確診該病。此外,對(duì)該病的診斷還可以通過ELISA 或者分子生物學(xué)方法。使用ELISA 方法具有高效和簡(jiǎn)潔的特點(diǎn),結(jié)果具有較高的特異性,而且在試驗(yàn)過程中操作技術(shù)相對(duì)簡(jiǎn)單,普通人員均可以操作使用,本方法適合于對(duì)病料樣本進(jìn)行快速診斷。分子生物學(xué)方法常見的有3種:普通PCR 技術(shù)、熒光定量PCR 技術(shù)和LAMP 技術(shù)。普通PCR 技術(shù)相對(duì)于其他分子生物學(xué)技術(shù)具有快捷和高靈敏度的特點(diǎn),能夠檢測(cè)出病料中含有的微量病原,并能夠?qū)⒉煌≡瓍^(qū)別開來。但其操作較復(fù)雜,對(duì)儀器和技術(shù)的要求較高,不利于在臨床上進(jìn)行快速診斷。而且使用本方法容易出現(xiàn)假陽性,對(duì)診斷病情不利。根據(jù)普通PCR 技術(shù)發(fā)展起來的熒光定量PCR 技術(shù)具有較高的靈敏度和高通量,但在設(shè)計(jì)引物和探針的環(huán)節(jié)上要求較高,具有一定的難度[3];而且需要較為先進(jìn)的儀器設(shè)備,不利于臨床應(yīng)用。而應(yīng)用LAMP 技術(shù)對(duì)檢測(cè)樣品的要求較低,可以對(duì)乳制品以及組織等進(jìn)行檢測(cè),還具有較高的特異性和可視性,操作簡(jiǎn)便。對(duì)試驗(yàn)所需要儀器設(shè)備和操作技術(shù)也比較低,但其在試驗(yàn)前的引物設(shè)計(jì)等方面的要求較高,可見其也不適合在臨床診斷中進(jìn)行應(yīng)用[4]。
牛病毒性腹瀉可以通過疫苗接種來預(yù)防,疫苗多在犢牛處于斷奶期前后進(jìn)行接種,母牛和公牛的接種應(yīng)在其配種前。如果處于本病的疫區(qū),應(yīng)每隔3~5年對(duì)全部牛群免疫疫苗,可以有效防止該病的發(fā)生。但在進(jìn)行免疫前要選擇正規(guī)廠家生產(chǎn)的疫苗,不可隨意購買而影響預(yù)防效果,選好疫苗后還要注意疫苗的運(yùn)輸方式和保存方式,如果運(yùn)輸和保存不當(dāng),就會(huì)造成疫苗失效,使得其在免疫接種后沒有效果,從而導(dǎo)致牛群對(duì)該病沒有抵抗力。
養(yǎng)殖場(chǎng)最好采用自繁自養(yǎng)的方式進(jìn)行飼養(yǎng),如需從外部引進(jìn)種牛,需要在引種前做好檢疫工作,尤其是從國外進(jìn)口時(shí)要做到嚴(yán)格的檢疫,防止種牛攜帶病原。牛在引種的運(yùn)輸過程中,應(yīng)避免造成病原感染和各種應(yīng)激因素的刺激,這樣可以降低引種帶來的風(fēng)險(xiǎn),牛在引種后要經(jīng)過一段時(shí)間的隔離觀察,通常需要隔離30 d,如果在隔離期內(nèi)引進(jìn)種牛沒有出現(xiàn)發(fā)病,則需要再次進(jìn)行嚴(yán)格的檢疫,如仍舊未發(fā)現(xiàn)病原則可混群飼養(yǎng)。
在日常飼養(yǎng)過程中要定期對(duì)牛群進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè),一旦發(fā)現(xiàn)陽性病例應(yīng)立即淘汰處理,同時(shí)公母牛在配種前也要進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測(cè),防止病原通過精液傳播給母牛,同時(shí)也可避免母牛感染后形成垂直傳播,將病原傳播給犢牛。
牛場(chǎng)要具有能夠保持相對(duì)恒溫的圈舍,確保圈舍內(nèi)具有相對(duì)恒定的溫度和濕度環(huán)境,這樣可以使得牛群保持生活在舒適的環(huán)境下,可以減少環(huán)境對(duì)牛群造成的各種應(yīng)激。圈舍內(nèi)還要有良好的通風(fēng)條件,能夠及時(shí)將舍內(nèi)的有害氣體排出,保持舍內(nèi)空氣新鮮。在日常飼養(yǎng)管理中,要對(duì)圈舍常打掃,及時(shí)將各種污染物清理出去,避免這些污染物造成病原滋生,引起牛群發(fā)病。在清掃后及時(shí)進(jìn)行消毒,消毒不能留有死角,做到全面和徹底。同時(shí),養(yǎng)殖場(chǎng)還要制定嚴(yán)格的消毒規(guī)程,定期對(duì)牛場(chǎng)內(nèi)外進(jìn)行消毒。消毒不僅要對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)墻面、地面和器具進(jìn)行消毒,還要對(duì)進(jìn)入牛場(chǎng)的人員、車輛、器具等進(jìn)行嚴(yán)格消毒,防止將病原攜帶入養(yǎng)殖場(chǎng)。在飼養(yǎng)中,要給牛群提供優(yōu)質(zhì)的飼料和清潔的飲水。飼料要求品質(zhì)較高且營(yíng)養(yǎng)豐富,能夠滿足牛群的生長(zhǎng)和生產(chǎn)的需求。但在天氣炎熱多雨的季節(jié)要注意飼料的保存,避免出現(xiàn)霉變,一旦牛采食到霉變的飼料,就會(huì)導(dǎo)致體質(zhì)下降,從而對(duì)病原的易感性升高。此外,飼料、獸藥、疫苗等必須經(jīng)過嚴(yán)格的監(jiān)管,防止受到病原的污染。
由于牛病毒性腹瀉是由病毒感染引起,尚無特效藥物進(jìn)行治療。發(fā)現(xiàn)病牛應(yīng)及時(shí)進(jìn)行淘汰。如發(fā)病較輕,也可以進(jìn)行隔離治療,治療以增強(qiáng)病牛抵抗力和對(duì)癥治療為主[5]。針對(duì)脫水、腹瀉嚴(yán)重的病牛,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)水、補(bǔ)液、糾正酸中毒癥狀,同時(shí)還應(yīng)給病牛喂服止瀉藥物以緩解腹瀉癥狀。在對(duì)癥治療的同時(shí)還需要使用抗生素控制繼發(fā)感染。具體的治療方法:及時(shí)對(duì)病牛的腸道進(jìn)行清理,并應(yīng)用硫酸鈉和硫酸鎂等溶液進(jìn)行口服,以保護(hù)胃腸道黏膜不受損傷,同時(shí)還具有消炎止瀉的功效。補(bǔ)液的方法是取2 000~3 000 mL 濃度為10%的葡萄糖鹽水,在其中加入500 mg 維生素C、20 mL 地塞米松、10~15 g 頭孢曲松,500 mg 利巴韋林等混合后進(jìn)行灌服,每天灌服1 次,持續(xù)灌服1 周,能夠達(dá)到補(bǔ)液的效果。如果病牛排出的糞便中含有血液,應(yīng)在灌服的混合液中加入維生素K,這樣能夠起到止血的效果。對(duì)發(fā)燒的病牛,可以服用退燒藥物,如安乃近,用量為20~40 mL,每天用藥1 次,連續(xù)用藥2~3 d[6];還可以應(yīng)用白頭翁散煎汁后給病牛灌服,能對(duì)病情起到一定的緩解效果。