鄧曙初

(湖南省永州市零陵區(qū)富家橋鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，湖南 永州 425024)

0 引言

牛結(jié)節(jié)疹病又稱牛結(jié)節(jié)性皮膚病、牛疙瘩皮膚病、牛結(jié)節(jié)性皮炎等，其病原為牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒，是養(yǎng)牛過程中較為常見的一種病毒性皮膚病。該病主要通過蚊蟲等節(jié)肢動物叮咬而傳播，一旦發(fā)生會對牛體表皮膚造成嚴(yán)重?fù)p害，導(dǎo)致牛皮的加工及銷售受到影響。雖然牛結(jié)節(jié)疹病的死亡率不高，但是其病毒傳播速度極快，未及時防控極容易導(dǎo)致病情的擴(kuò)大蔓延，必須采取針對性措施以有效調(diào)查該病的流行病學(xué)，在疫情發(fā)生后立即采取緊急防控措施，從而控制疫病于萌發(fā)階段，防止造成進(jìn)一步的損失。

1 病原

牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒屬于痘病毒，其與牛痘病毒存在較大差異，但是與山羊痘病毒以及綿陽痘病毒較為相似，均屬于山羊痘病毒屬。牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒僅具備一種血清型，在血清學(xué)上牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒、綿羊痘病毒、山羊痘病毒存在一定的交叉反應(yīng)。牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒是一種DNA雙鏈病毒，其發(fā)生遺傳變異的概率極低。牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒具備囊膜，因而對外界環(huán)境抵抗力較強(qiáng)，pH值在6.6～8.6時，牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒可長期存活。在風(fēng)干牛皮以及皮膚結(jié)節(jié)內(nèi)，該病毒存活時間可達(dá)到35 d。在組織培養(yǎng)液內(nèi)、4℃甘油鹽水內(nèi)，病毒存活時間一般為4～6個月。在干燥的圈舍環(huán)境內(nèi)，病毒存活時間可持續(xù)數(shù)月。在-20℃的溫度條件下，病毒存活時間可達(dá)幾年，而在-80℃的溫度條件下存活時間可達(dá)10年。牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒對熱較為敏感，55℃的環(huán)境條件病毒僅可存活2 h，而在65℃的環(huán)境內(nèi)病毒即徹底滅活[1]。牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒對酸、堿以及福爾馬林、酒精、石炭酸、乙醚、氯仿等常見消毒液均較為敏感。

2 流行特點(diǎn)

牛結(jié)節(jié)疹病最為重要的傳染源以及自然宿主便是牛只，任何品種、任何性別、任何年齡的牛只均對該病易感，但是相比較而言，普通牛只易感性最高，奶牛以及亞洲水牛亦較為易感[2]。水牛、家兔、綿羊、山羊、長頸鹿以及黑羚羊液可能感染該病毒。牛結(jié)節(jié)疹病潛伏期一般為7～14 d，牛只在患病后其皮膚表面疙瘩、唾液、鼻液、血液、精液、尿液、乳汁、肌肉、脾臟以及淋巴結(jié)等各個部位內(nèi)均包含有大量病毒，經(jīng)過治療即使病?？祻?fù)，其帶毒時間仍然可持續(xù)超過21 d。牛結(jié)節(jié)疹病的發(fā)病率為3%～85%，而其死亡率一般為1%～3%。若病毒毒株變異、病牛免疫力較低，其死亡率將有所提升。在同一養(yǎng)殖條件下，同群牛只在感染該病后，病牛由隱性感染至死亡差異性較大，這可能與傳播媒介密切相關(guān)。蚊蠅對牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒的傳播發(fā)揮著重要作用，尤其是庫蚊屬、伊蚊屬等，當(dāng)前獸醫(yī)工作者以及相關(guān)研究人員均對牛結(jié)節(jié)疹病進(jìn)行了大量研究，但是截至當(dāng)前，仍然未掌握造成牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒傳播的主要途徑，在后期仍需在此方面擴(kuò)大研究，并采取針對性的防控措施，以有效控制該病，減少該病可能造成的危害[3]。

3 臨床癥狀

牛結(jié)節(jié)疹病的潛伏期一般為7～14 d，而在實(shí)驗(yàn)室條件下其感染后的潛伏期為4～12 d，其中以7 d為最多。在感染牛結(jié)節(jié)疹病后，患病牛只體溫明顯升高，甚至超過了40℃，其高溫癥狀可持續(xù)7 d左右。在感染初期，牛只出現(xiàn)鼻炎或者結(jié)膜炎癥狀，與此同時鼻部以及眼部不斷流出黏膿狀分泌物，隨著病情發(fā)展成為角膜炎?；疾∨Ｖ惑w表皮膚出現(xiàn)圓形較為堅(jiān)硬、向外凸起的直徑為20～30 mm的結(jié)節(jié)，其結(jié)節(jié)存在明顯界限，在觸碰后病牛存在明顯痛感，絕大多數(shù)情況下，病牛頭部、頸部、四肢、口腔、胸部、背部、會陰以及直腸等多個部位可出現(xiàn)結(jié)節(jié)，隨著病情發(fā)展逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)闈?，甚至遍布全身。若病情?yán)重，病牛頰內(nèi)面以及牙床還會出現(xiàn)肉芽腫性病變。

病牛耳下、肩前、腹股溝、股前以及后肢等多個部位淋巴結(jié)均存在明顯的水腫現(xiàn)象，特別是其四肢部位將明顯腫大，體積甚至達(dá)到正常的3～4倍。若牛只病情嚴(yán)重，還會出現(xiàn)原發(fā)性肺炎或者繼發(fā)性肺炎，此時其很難康復(fù)。哺乳期母牛在患病后，還會發(fā)生乳房炎，這會嚴(yán)重影響其產(chǎn)奶量；妊娠母牛患病后常引發(fā)流產(chǎn)；公牛在患病后4～6周即可表現(xiàn)出不孕癥狀，若發(fā)生睪丸炎，則可能引發(fā)終生不孕。

在切開牛只病變部位皮膚后，可見其切面漿液顏色為灰紅色，切開結(jié)節(jié)后，壞死組織即表現(xiàn)為灰白色干酪樣，組織內(nèi)部包含有血液及膿液。在病牛表皮及真皮上，其結(jié)節(jié)大小各不相同，部分結(jié)節(jié)會相互聚集而形成腫塊，其形狀各不相同，隨著病情發(fā)展會出現(xiàn)壞死現(xiàn)象，病牛皮膚很難自然硬固，牛只病變癥狀將長期出現(xiàn)，可達(dá)數(shù)月乃至數(shù)年。若牛只壞死部位皮膚遭受蠅蟲叮咬，可能會引發(fā)結(jié)痂脫落，同時其病害部位將會留下孔洞，部分牛只可能因蚊蟲叮咬而患有蠅蛆病，這種情況多因化膿性細(xì)菌感染而引發(fā)。此外，牛只在患病后通常精神萎靡、食欲不佳、呼吸受阻，大量黏稠狀鼻液從其鼻孔內(nèi)流出，同時口腔部位不斷流涎。犢牛在患病后死亡率將超過10%。

4 病理變化

對病死牛尸體剖檢，可見其呼吸道、消化道、泌尿生殖道等多個部位黏膜均發(fā)生病變，尤其是牛只口腔、鼻腔、咽喉、氣管、支氣管、肺臟、皺胃、包皮、子宮壁、引導(dǎo)等部位病變現(xiàn)象較為明顯。病牛皮下、結(jié)締、黏膜下等組織可見血性或者漿液性滲出液，其顏色為黃色或者紅色，結(jié)節(jié)周圍通常不會發(fā)生明顯的炎癥反應(yīng)。在發(fā)病初期，病牛皮膚可見表皮增生、水腫以及皮樣細(xì)胞浸潤等現(xiàn)象，同時可見淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞，病牛皮下組織以及真皮組織血管淋巴結(jié)出現(xiàn)栓塞，表現(xiàn)為血炎、淋巴管炎，其血管周邊聚集有大量稀薄，可見胞漿內(nèi)出現(xiàn)呈圓形或者卵圓形的包涵體。

5 實(shí)驗(yàn)室診斷

可結(jié)合流行特點(diǎn)、臨床癥狀、病理變化對病牛觸診，要想確診還需對病牛實(shí)驗(yàn)室診斷。

在無菌條件下采集病牛皮膚結(jié)節(jié)、淋巴結(jié)結(jié)節(jié)以及肺臟等病料，將病毒分離出后進(jìn)行檢測，在病牛體內(nèi)牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒可存活35 d接著才會出現(xiàn)中和抗體，也就是在出現(xiàn)臨床癥狀7 d后采集樣品并進(jìn)行PCR檢測；在中和抗體產(chǎn)生前便出現(xiàn)臨床癥狀，可在7 d內(nèi)采集樣品并進(jìn)行ELISA檢測；對病毒血清進(jìn)行檢測，一般是選擇發(fā)病前4 d內(nèi)血清，并向其中加入肝素；若樣品需進(jìn)行組織解剖學(xué)檢測，可將其存放于10%的福爾馬林溶液內(nèi)并置入冰塊以保存。

可采用透射電子顯微鏡以檢查牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒，這是最為迅速的一種方法。通過顯微鏡，可觀察到病毒大小為270 nm×290 nm，形狀為短管狀或者磚塊狀。在檢查工作具體開展過程中，首先需研磨病料，將其制成懸濁液，向蠟板上滴入1滴，1 min后滴入1滴pH為7.8的Tris-ED-TAbuffer，20 s后滴入pH值為7.2的1%的磷鎢酸，待干燥后即可進(jìn)行鏡檢。

血清學(xué)診斷常見措施為病毒中和實(shí)驗(yàn)、間接熒光抗體試驗(yàn)、ELISA檢測等。其中最為常見的為病毒中和試驗(yàn)，其具備較高的效率，但是若病牛體內(nèi)抗體水平不高發(fā)生二次感染采用此方法將很難確診。由于牛結(jié)節(jié)性皮膚病抗體以及痘病毒感染所引發(fā)的偽牛結(jié)節(jié)疹病存在交叉反應(yīng)，因而采取熒光抗體試驗(yàn)檢測發(fā)展的檢驗(yàn)特異性并不理想[4]。ELISA檢測方法具備較高的敏感性以及較好的特異性，在具體操作過程中所需投入的精力以及時間較多，因而該方法的應(yīng)用也受到了一定影響。在具體診斷過程中，需要結(jié)合實(shí)際情況采取適宜的實(shí)驗(yàn)室檢測方法。

采用血清學(xué)檢驗(yàn)方法很難徹底區(qū)分山羊痘病毒、綿羊痘病毒以及牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒，因而需要在分子水平上對其檢驗(yàn)。通常可對病?；蚱蜳CR檢測以鑒定病毒，限制性核酸內(nèi)切酶可酶切PCR產(chǎn)物以達(dá)到鑒定目的。

6 治療方法

1)若病牛皮膚結(jié)節(jié)已破潰，可將其潰爛部位采用手術(shù)刀切除，利用2%的雙氧水對創(chuàng)口反復(fù)清洗，接著采用1%的高錳酸鉀溶液反復(fù)沖洗，向其中填充磺胺結(jié)晶消炎粉，并將碘甘油涂抹于潰瘍面，或者將100g黃柏、10g雄黃以及5g冰片混合后研碎，用醋調(diào)和后涂抹于潰瘍面。

2)為病牛肌肉注射800萬IU的青霉素以及500萬IU的鏈霉素，用藥2次/d，為病牛喂服黃芪多糖，以達(dá)到抗病毒目的。

7 預(yù)防措施

7.1 及時隔離消殺

牛結(jié)節(jié)疹病是一種牛羊共患病，在牛群或者羊群內(nèi)一旦發(fā)現(xiàn)患病牲畜，立即對其隔離，嚴(yán)禁混合飼養(yǎng)牛羊，同時徹底對牛只皮膚以及圈舍做好消毒工作。牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒對強(qiáng)酸、強(qiáng)堿敏感性均較高，因而在消毒過程中可采用3.0%碘溶液、0.5%新潔爾滅溶液、3.0%次氯酸鈉溶液等作為消毒藥液[5]。

7.2 重視蚊蠅防控及消毒防控

在養(yǎng)殖場內(nèi)需要構(gòu)建完善的日常衛(wèi)生消毒管理制度并嚴(yán)格落實(shí)，確保養(yǎng)殖場具備較高的生物安全水平。養(yǎng)殖場內(nèi)一旦出現(xiàn)患病牛只，必須每天對場區(qū)內(nèi)嚴(yán)格消毒，對養(yǎng)殖場內(nèi)的金屬設(shè)施，一般采取熏蒸或者火焰方式消毒；養(yǎng)殖場內(nèi)圈舍、場地以及車輛等一般采取2%燒堿溶液等各種有效消毒劑消毒；養(yǎng)殖場內(nèi)電療可采取焚燒處理或者發(fā)酵處理；糞便一般采取堆積密封發(fā)酵；對病死牛的尸體采取嚴(yán)格的無害化處理方式。若養(yǎng)殖場內(nèi)不存在患病牛只但是相鄰區(qū)域養(yǎng)殖場或者所在地存在此疫情，養(yǎng)殖場至少需要開展3次/周消毒作業(yè)[6]。在每年的3-10月。養(yǎng)殖場還需要對蚊蠅防控工作加強(qiáng)重視，若養(yǎng)殖場內(nèi)存在庫蚊屬、伊蚊屬等，必須對場內(nèi)及周邊雜草及時清除。若采取一定防控措施后養(yǎng)殖場內(nèi)蚊蠅防控效果仍然不理想，應(yīng)當(dāng)注意將消殺頻次適當(dāng)提升。另外，養(yǎng)殖場還需要積極與林業(yè)以及草業(yè)等相關(guān)主管部門加強(qiáng)溝通，相互間通力合作，動態(tài)調(diào)查并監(jiān)測易感野生動物以及媒介昆蟲，從而實(shí)現(xiàn)對牛結(jié)節(jié)疹病更為科學(xué)的評估。

7.3 科學(xué)調(diào)運(yùn)防控，全面凈化污染源

在夏季或者對牛只運(yùn)輸后，在應(yīng)激反應(yīng)作用下牛只更易發(fā)生或者感染牛結(jié)節(jié)疹病，因而養(yǎng)殖戶應(yīng)當(dāng)堅(jiān)持自繁自育、全進(jìn)全出的養(yǎng)殖管理方案，盡量避免從外地引種，確需引種時，在牛只調(diào)運(yùn)過程中必須強(qiáng)化其疫病防控工作。養(yǎng)殖場需要結(jié)合實(shí)際情況制定科學(xué)合理的購牛計(jì)劃，在確定購牛計(jì)劃后，采取多種措施以掌握待引入牛只養(yǎng)殖場的實(shí)際情況，明確牛只具體健康狀況，嚴(yán)禁引入疑似病牛[7]。在對牛只裝車前，必須對車輛徹底清理并嚴(yán)格消毒。待所購買牛只運(yùn)輸至養(yǎng)殖場后，派遣專人仔細(xì)排查牛只健康狀況。在到達(dá)養(yǎng)殖場后，對新采購牛只隔離飼養(yǎng)，其隔離時間須超過28 d，同時在隔離過程中還應(yīng)注意強(qiáng)化牛舍消毒管理，動態(tài)監(jiān)測牛群健康狀況。一旦養(yǎng)殖場發(fā)現(xiàn)牛結(jié)節(jié)疹病病牛，嚴(yán)禁調(diào)運(yùn)任何牛只，以防止疫病發(fā)生進(jìn)一步的擴(kuò)散以及蔓延。

7.4 接種疫苗

若某一地區(qū)已發(fā)生牛結(jié)節(jié)疹病，須為其健康牛只免疫接種，以避免牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒進(jìn)一步擴(kuò)散，有效降低牛結(jié)節(jié)疹病的發(fā)生概率。當(dāng)前，我國最為常見的疫苗為羊痘雞胚化弱毒疫苗，其免疫效果良好，部分國家及地區(qū)為牛群接種綿羊痘病毒亦可獲取良好預(yù)防效果[8]。一般是在每年的3-4月為牛群接種，接種劑量為3 mL/頭。其次，母牛體內(nèi)若存在母源抗體，進(jìn)而通過初乳為新生犢牛傳播抗體，以確保犢牛在出生后6個月內(nèi)免遭感染。最后，在患病牛只康復(fù)后，其體內(nèi)會存在滴度較高的中和抗體，上述中和抗體會在牛只體內(nèi)保持?jǐn)?shù)年，這樣可有效降低牛只再次感染牛結(jié)節(jié)疹病的概率。

7.5 強(qiáng)化飼養(yǎng)管理

在日常養(yǎng)殖中，需要為牛群提供清潔衛(wèi)生的飼料，避免其遭受農(nóng)藥或者化肥污染，重視飼料清潔及場舍通風(fēng)，確保其保持干燥狀態(tài)，以防止飼料變質(zhì)。結(jié)合牛群特點(diǎn)對其規(guī)律飼喂，避免牛只饑飽無常。每天為牛群提供充足飲水，確保飲水清潔衛(wèi)生。還應(yīng)結(jié)合不同品種牛只體質(zhì)、習(xí)性、食性等特點(diǎn)對其分群管理，根據(jù)結(jié)合牛群營養(yǎng)需求特點(diǎn)為其科學(xué)合理的配制飼料，以滿足牛只營養(yǎng)需求。

8 結(jié)語

我國牛結(jié)節(jié)疹病的確診時間較短，一部分養(yǎng)殖戶對牛結(jié)節(jié)疹病存在嚴(yán)重的認(rèn)識不足。近年來，針對該病國家已出臺了一系列防控方案，基層畜牧獸醫(yī)工作人員需要深入到養(yǎng)殖場內(nèi)，嚴(yán)格落實(shí)該病相關(guān)防疫要求，同時積極為養(yǎng)殖戶宣傳牛結(jié)節(jié)疹病的相關(guān)知識，幫助養(yǎng)殖戶明確該病的流行特點(diǎn)、漸變的診斷方法以及有效的防控措施，不斷提升養(yǎng)殖人員防范意識，以降低該病發(fā)生的概率，為牛群的養(yǎng)殖安全奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。