王野諶，邱智東，張衍旭，李榮森，楊永潤(rùn)，董雪蓮

長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)（長(zhǎng)春 130117）

相關(guān)研究表明[1]，睡眠障礙已經(jīng)成為世界第二大精神疾病，全球三分之一的人口都存在入睡困難的問(wèn)題，這種現(xiàn)象與快節(jié)奏的現(xiàn)代生活、不規(guī)律的生活作息及壓力、焦慮等不良情志等多種因素的影響密不可分，失眠也直接或間接地誘發(fā)各類健康問(wèn)題，如免疫力低下等，極大程度降低這類人群的生活質(zhì)量?！秲?nèi)經(jīng)》中將失眠稱為“目不瞑”“不得眠”“不得臥”，認(rèn)為導(dǎo)致失眠的兩大因素是：其他病癥的影響及氣血陰陽(yáng)的失和，是由于情志、飲食內(nèi)傷，或病后及年邁，稟賦不足，心虛膽怯等病因，引起心神失養(yǎng)或心神不安，從而導(dǎo)致經(jīng)常不能獲得正常睡眠為特征的一類病癥。五味子藥材具有補(bǔ)腎寧心、收斂固澀、益氣生津之功，可用于自汗盜汗、心悸失眠等癥狀，作為滋補(bǔ)佳品對(duì)于氣血失和所致的失眠有較好療效，此外五味子中多糖類成分能夠改善胸腺發(fā)育，促進(jìn)相關(guān)免疫細(xì)胞和蛋白的產(chǎn)生，從而提高機(jī)體免疫功能[2]。因此，試驗(yàn)以五味子提取物為主要原料，輔以卡拉膠、吉利丁粉、瓊脂、零卡糖和水，制備能夠改善睡眠和免疫的五味子膏，相比于西藥治療，五味子膏不僅更加適口，而且沒有藥物依賴性，具有明顯的優(yōu)越性和較好的市場(chǎng)前景。

1 材料與方法

1.1 原料和輔料

五味子飲片（酒泉市培豐中藥材生態(tài)種植加工有限公司）；卡拉膠（滕州市香凝生物工程有限公司）；吉利丁粉（安琪酵母股份有限公司）；瓊脂粉（石獅市環(huán)球瓊膠工業(yè)有限公司）；零卡糖（安徽唯甜生物科技開發(fā)有限公司）；苯甲酸鈉（山東省同泰維潤(rùn)化工有限公司）；桔子香精（連云港新愛食品科技有限公司）；純凈水（杭州哇哈哈集團(tuán)有限公司）。

1.2 設(shè)備與儀器

DE-300g萬(wàn)能高速粉碎機(jī)（浙江紅景天工貿(mào)有限公司）；JM-A5002電子天秤（諸暨市超澤衡器設(shè)備有限公司）；DHG-P40F2電火鍋（小熊電器股份有限公司）；RF425NQMA1J冰箱（三星電子株式會(huì)社）；分裝盒（浙江惠居家日用品有限公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 工藝流程

五味子膏的制備詳細(xì)流程見圖1。

圖1 五味子膏的工藝流程

1.3.2 試驗(yàn)步驟

先對(duì)五味子飲片的吸水率及五味子糖漿制備中的浸漬工藝進(jìn)行考察，確定適宜的浸泡時(shí)間和浸漬條件后，通過(guò)正交試驗(yàn)確定輔料卡拉膠、吉利丁粉、瓊脂三者的添加量，篩選出輔料的最佳配比方案。

1.3.3 質(zhì)量評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)

1.3.3.1 感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

隨機(jī)選取15名健康狀況良好、感官正常的不同年齡段、不同性別的人員作為五味子膏感官評(píng)價(jià)員，分別從色澤、口感、組織形態(tài)、彈性、風(fēng)味5個(gè)方面對(duì)五味子膏成品進(jìn)行客觀評(píng)價(jià)，主要采取問(wèn)卷調(diào)查的形式，共5項(xiàng)，每項(xiàng)20分，總計(jì)100分，匯總?cè)繑?shù)據(jù)后，計(jì)算平均得分。五味子膏感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)詳見表1。

表1 五味子膏感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)表

1.3.3.2 成品薄層色譜鑒別

五味子膏成品的薄層鑒別主要參考中國(guó)藥典（2020版）中五味子藥材的相關(guān)測(cè)定方法，設(shè)置五味子醇甲組、對(duì)照藥材組、供試品組（1，2和3組）及陰性對(duì)照組，要求在相應(yīng)位置均有相同顏色斑點(diǎn)。

1.3.3.3 成品中五味子醇甲含量測(cè)定

五味子膏中五味子醇甲含量測(cè)定方法采用中國(guó)藥典（2020版）一部中五味子糖漿的含量測(cè)定方法，由于五味子膏中除了五味子糖漿外還添加其他幾種輔料，因此考慮將原方法中的“5 mL糖漿”改為“10 g五味子膏”，隨機(jī)測(cè)定3個(gè)批次的五味子膏，計(jì)算平均值后，對(duì)其中的五味子醇甲含量進(jìn)行標(biāo)定。

1.3.3.4 成品的總灰分含量測(cè)定

參照GB 5009.4—2016《食品中灰分的測(cè)定》，測(cè)定3個(gè)批次樣品中的灰分，計(jì)算平均值后對(duì)其總灰分進(jìn)行標(biāo)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 五味子糖漿的制備

2.1.1 五味子飲片溶劑吸收率考察

藥材在提取之前進(jìn)行浸泡，可使藥材細(xì)胞充分膨脹，利于有效成分充分溶出。取300 g五味子飲片，平均分為3份，各加10倍量即1 000 mL的30%乙醇浸泡，每隔30 min測(cè)定1次剩余醇量，直至五味子飲片全部浸透，濾出未被吸收的醇液，計(jì)算五味子飲片的平均吸醇率，結(jié)果見表2。根據(jù)表2得知，五味子飲片在浸漬2 h后，其剩余醇量基本不發(fā)生變化，可見2 h時(shí)飲片已經(jīng)浸漬完全，平均吸醇量為97.3 mL，平均吸醇量為97.3%，故吸醇量為0.97倍，以1倍量計(jì)，因此，最終確定提取五味子飲片的加醇量追加1倍，并在提取前先浸泡2 h為宜。

表2 五味子飲片吸醇率試驗(yàn)結(jié)果

2.1.2 浸漬工藝的確定

其主要方法參照中國(guó)藥典（2020版）一部中五味子糖漿的相關(guān)制備方法，確定方法：取100 g五味子飲片粗粉，加1倍量的30%乙醇浸泡2 h至浸泡完全；以30%乙醇作為溶劑，繼續(xù)浸漬72 h后緩緩滲漉，收集200 mL漉液，濾過(guò)；將600 g零卡糖制成糖漿，加入上述濾液中；加入適量苯甲酸鈉和桔子香精，混勻，加水調(diào)整至1 000 mL，即得。

2.2 輔料加入工藝優(yōu)選

根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[3-5]，決定選擇卡拉膠、吉利丁粉、瓊脂作為五味子膏的輔料，為明確卡拉膠、吉利丁粉、瓊脂的添加量及彼此間的配比，進(jìn)一步優(yōu)化五味子膏的口感，因此采用正交試驗(yàn)對(duì)三者加入量進(jìn)行考察，該正交試驗(yàn)共設(shè)置卡拉膠（A）、吉利丁粉（B）、瓊脂（C）、空白項(xiàng)（D）4個(gè)因素，并且每個(gè)因素均設(shè)置3個(gè)水平進(jìn)行配比，詳細(xì)情況見表3。

表3 因素水平表 單位：%

準(zhǔn)備9份100 mL五味子糖漿，取一定量卡拉膠、吉利丁粉、瓊脂加入到小燒杯中，加入8倍水?dāng)嚢柚寥芙猓訜?，加入五味子糖漿，攪拌至混合液全部溶解混勻，放冷。待其冷卻至室溫后，放入冰箱冷藏室靜止50～90 min定型，觀察五味子膏成型狀態(tài)。以感官指標(biāo)為考察指標(biāo)，正交試驗(yàn)結(jié)果見表4和表5。

表4 L9(34)正交試驗(yàn)直觀分析結(jié)果

表5 L9(34)正交試驗(yàn)方差分析結(jié)果表

結(jié)果表明：五味子膏的最佳配比是A3B3C2，即當(dāng)卡拉膠、吉利丁粉和瓊脂的添加量為五味子糖漿的3%，3%和0.2%時(shí)，五味子膏感官最好。配方以1 000盒產(chǎn)品計(jì)：五味子5 kg、蔗糖30 kg、卡拉膠0.09 kg、吉利丁粉0.09 kg、瓊脂0.006 kg，加水至50 000 mL，分裝，每盒50 g即得。

2.3 質(zhì)量評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)

2.3.1 感官評(píng)價(jià)

對(duì)3個(gè)批次的五味子膏進(jìn)行感官評(píng)價(jià)，結(jié)果認(rèn)為五味子膏呈有光澤的紫紅色膏體，且色澤均勻一致，口感細(xì)膩爽滑，酸甜適口，無(wú)澀味且具有五味子的特殊香氣，膏體本身無(wú)氣泡和結(jié)塊，透明無(wú)雜質(zhì)，富有彈性，色澤、口感、形態(tài)、彈性及風(fēng)味均良好。

2.3.2 理化檢驗(yàn)

2.3.2.1 薄層色譜檢驗(yàn)

五味子膏薄層色譜檢驗(yàn)結(jié)果詳見圖2。3批供試品色譜中，在與五味子對(duì)照藥材色譜和五味子醇甲色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)，且陰性對(duì)照組在相同位置上無(wú)斑點(diǎn)，可以初步判定五味子膏中具有發(fā)揮保健功效的五味子藥材。

圖2 五味子膏薄層鑒別結(jié)果

2.3.2.2 五味子醇甲含量測(cè)定

五味子膏中五味子醇甲含量測(cè)定結(jié)果見表6。3批供試品中的五味子醇甲含量分別為10.2，9.71和9.62 mg/100 g，按照每盒50 g計(jì)，經(jīng)計(jì)算每日攝入五味子的量不超過(guò)藥典標(biāo)準(zhǔn)五味子日攝入量2～6 g。最終，3批樣品的平均含量為9.84 mg/100 g，下調(diào)20%，即為7.87 mg/100 g。

表6 五味子膏中五味子醇甲的含量測(cè)定結(jié)果

2.3.2.3 總灰分測(cè)定

3個(gè)不同批次五味子膏總灰分測(cè)定結(jié)果見表7。

表7 3批樣品中灰分的測(cè)定結(jié)果

根據(jù)表7可知，批號(hào)180601，180602和180603的3批五味子膏的總灰分分別為6.6%，6.7%和6.6%，其平均總灰分為6.63%，故規(guī)定該品的灰分為≤7%。

3 結(jié)論

以五味子藥材為原料，卡拉膠、吉利丁粉、瓊脂等為輔料，通過(guò)感官評(píng)估評(píng)分結(jié)合正交試驗(yàn)，對(duì)五味子膏的配比進(jìn)行優(yōu)化，最終獲得質(zhì)量穩(wěn)定、色澤風(fēng)味俱佳的3批五味子膏成品。以單盒量計(jì)，五味子5 g、零卡糖30 g、卡拉膠0.09 g、吉利丁粉0.09 g、瓊脂0.006 g、水50 mL為五味子膏最佳配比。產(chǎn)品在改善五味子藥材的苦澀味的同時(shí)，對(duì)于失眠及免疫力提高等亞健康問(wèn)題的日常保健也有顯著作用，此外該產(chǎn)品為小包裝，有方便攜帶食用及適合于各年齡段人群等優(yōu)勢(shì)。試驗(yàn)所得五味子膏成品及試驗(yàn)結(jié)果可為相關(guān)改善睡眠、免疫力的果膏或果凍類產(chǎn)品提供基礎(chǔ)的配方及研究思路，為五味子膏市場(chǎng)的進(jìn)一步開拓和相同類型產(chǎn)品的開發(fā)提供科學(xué)、客觀的解決方案及理論依據(jù)。