任希力，李國勇，徐琨，趙立國，耿友軍，夏文龍

山東省食品藥品審評查驗中心 （山東濟南 250014）

質(zhì)譜分析是利用離子的質(zhì)荷比對物質(zhì)進行檢測的技術(shù)。串聯(lián)質(zhì)譜是將兩臺質(zhì)譜質(zhì)量分析器按順序排列，并將碰撞池放置于兩臺儀器中間。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)以液相色譜儀作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜儀作為檢測系統(tǒng)，化合物隨著流動相進入到質(zhì)譜，經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)荷比分開，經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)具有高靈敏度、高特異度、高通量、檢測時間短的優(yōu)點，已在臨床和研究實驗室及蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)和藥物分析等領(lǐng)域得到越來越多的應(yīng)用[1-5]，成為臨床檢驗中的新技術(shù)，比如在維生素類、兒茶酚胺、內(nèi)源性激素、環(huán)孢霉素和他克莫司等的檢測及新生兒遺傳代謝疾病篩查中已逐漸替代傳統(tǒng)分析方法[6]。目前，國內(nèi)液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品的注冊申報還較少，未形成審評操作規(guī)范，本研究從技術(shù)審評角度出發(fā)，詳細介紹該類產(chǎn)品的基本情況及審評工作中主要關(guān)注點，以期為企業(yè)的產(chǎn)品設(shè)計開發(fā)及注冊申報提供一定指導(dǎo)。

1 液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品概述

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品是利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，將液相色譜儀與質(zhì)譜儀通過一定接口耦合到一起的分析儀器[7-9]。該類產(chǎn)品管理類別為Ⅱ類，根據(jù)《醫(yī)療器械分類目錄》分類編碼為22-10-03[10]。

1.1 結(jié)構(gòu)組成

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品主要由液相色譜儀、三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀和軟件組成，液相色譜儀（通常采用反相色譜分離模式）通常由二元泵、自動進樣器、柱溫箱、色譜柱、恒溫器（如有）、脫氣機組成；三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀通常由進樣系統(tǒng)、真空系統(tǒng)及數(shù)據(jù)系統(tǒng)構(gòu)成，其中進樣系統(tǒng)通常包括直接進樣、電離進樣等，真空系統(tǒng)包括離子源（通常為電噴霧電離或大氣壓化學(xué)電離）、質(zhì)量分析器（四級濾質(zhì)器即四極桿）、檢測器；軟件包括控制型軟件和嵌入式軟件。

1.2 工作原理

液相色譜儀作為分離系統(tǒng)，串聯(lián)質(zhì)譜儀作為檢測系統(tǒng)，使用液體作為流動相，每種分析物在色譜柱的固定相和流動相間的相互作用存在差別，與固定相相互作用最強的組分將被固定相高度保留，與固定相相互作用較弱的組分相比，高度保留的組分通過系統(tǒng)的時間更慢，而在流動相中停留的時間更長，將導(dǎo)致不同組分在通過色譜儀時的移動速度存在差異，利用這種差異來分離混合物[11-13]，然后經(jīng)在特定的四級場中，某一質(zhì)荷比的離子能作穩(wěn)定的振蕩，通過四極場而被接收，其他質(zhì)荷比的離子則被濾掉，在保持直流電壓和射頻電壓與振幅比值恒定而連續(xù)改變其值時，不同質(zhì)荷比的離子依次通過四極場，從而實現(xiàn)質(zhì)量分離，并測定各離子的豐度（即譜峰強度）。

1.3 注冊單元和型號規(guī)格

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品的注冊單元原則上以技術(shù)原理、結(jié)構(gòu)組成、性能指標和適用范圍為劃分依據(jù)，如超高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品建議與高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品作為不同注冊單元（超高效液相色譜與高效液相色譜相比，耐高壓性能增加，對色譜柱固定相粒徑、色譜柱內(nèi)徑和長度要求降低，縮短了分析時間，增加了色譜峰容量，提高了分離度和靈敏度）[14-15]。

1.4 適用范圍

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品基于色譜與質(zhì)譜技術(shù)，用于對人體血液、尿液等人源樣本中的分子物質(zhì)進行定性或定量檢測。

1.5 主要危險源及控制措施

危險（源）指可能導(dǎo)致傷害的潛在根源[16]，主要包括電能、熱能、機械、真空度、噪聲、化學(xué)物質(zhì)、功能、人為因素、隨機信息。

控制措施分為產(chǎn)品設(shè)計、信息提示及日常操作、維護。產(chǎn)品設(shè)計包括電能、噪聲、機械的防護，超溫保護功能、接口、軟件、抽真空等的設(shè)計。信息提示，提供可選擇的固定相和流動相、提示等柱溫箱冷卻后方可開蓋操作、提供操作規(guī)范、提示可更換元器件更換周期、給出詳細的使用說明等。日常維護和操作，嚴格按照說明書提示操作、清洗、消毒、維護儀器，如嚴格保證電源條件、環(huán)境條件（溫度、濕度、灰塵），以免溫度過高影響產(chǎn)品使用壽命；定期更換真空系統(tǒng)中機械油泵的泵油；使用高純度的氮氣作為霧化氣體、干燥氣及碰撞氣；在質(zhì)譜準備過程中，嚴格按照先打開脫溶劑氣，再開高壓，最后向質(zhì)譜切換流動相的順序操作；每次樣品運行后嚴格清洗；定期更換離子源密封圈；定期調(diào)諧，校準質(zhì)量軸，建議按照JJF 1317-2011《液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準規(guī)范》定期校準；使用色譜級別或質(zhì)譜級別的流動相，如需添加緩沖液，可添加揮發(fā)性的鹽，避免抑制電噴霧電離的表面活性劑等[14，17-19]。

2 液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品技術(shù)審評要點

2.1 適用的相關(guān)標準及主要指標

醫(yī)療器械應(yīng)當(dāng)符合適用的強制性標準。沒有強制性標準的醫(yī)療器械，鼓勵申請人采用推薦性標準[20]。液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品適用的強制性標準有GB 4793.1-2007《測量、控制和實驗室用電氣設(shè)備的安全要求 第1部分：通用要求》（電氣安全性能研究中應(yīng)適用的強制性標準）、GB 4793.6-2008《測量、控制和實驗室用電氣設(shè)備的安全要求 第6部分：實驗室用材料加熱設(shè)備的特殊要求》（電氣安全性能研究中適用的強制性標準）、GB 4793.9-2013《測量、控制和實驗室用電氣設(shè)備的安全要求 第9部分：實驗室用分析和其他目的自動和半自動設(shè)備的特殊要求》（電氣安全性能研究中適用的強制性標準）、YY 0648-2008《測量、控制和實驗室用電氣設(shè)備的安全要求 第2-101部分：體外診斷（IVD）醫(yī)用設(shè)備的專用要求》；可采用的推薦性標準有GB/T 35410-2017《液相色譜-串聯(lián)四極質(zhì)譜儀性能的測定方法》、YY/T 1740.1-2021《醫(yī)用質(zhì)譜儀 第1部分：液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀》、GB/T 18268.1-2010《測量、控制和實驗室用的電設(shè)備 電磁兼容性要求 第1部分：通用要求》（電磁兼容性能研究中可采用的推薦性標準）、GB/T 18268.26-2010《測量、控制和實驗室用的電設(shè)備 電磁兼容性要求 第26部分：特殊要求 體外診斷（IVD）醫(yī)療設(shè)備》（電磁兼容性能研究中可采用的推薦性標準），其中GB/T 35410-2017和YY/T 1740.1-2021為該類產(chǎn)品的專用標準。此外，根據(jù)該類產(chǎn)品的特點，在性能研究中可適用其他標準。

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品有效性指標應(yīng)至少包括質(zhì)量范圍、質(zhì)量準確性與質(zhì)量分辨率、質(zhì)量穩(wěn)定性、掃描速度、輸液泵流速準確度、自動進樣器與色譜柱恒溫箱準確度、自動進樣器線性、靈敏度、精密度、線性、攜帶污染率、面積重復(fù)性、定性重復(fù)性、軟件功能、外觀。

2.2 軟件研究

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品包含軟件應(yīng)按照《醫(yī)療器械軟件注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》及YY 0664-2008《醫(yī)療器械軟件生存周期過程》提供軟件的研究資料，基于產(chǎn)品預(yù)期用途、使用環(huán)境和核心功能等方面風(fēng)險水平考慮，一般建議該類產(chǎn)品軟件安全級別不低于B 級，根據(jù)軟件安全級別提供軟件基本信息、實現(xiàn)過程、核心算法等內(nèi)容，應(yīng)詳細描述產(chǎn)品控制驅(qū)動、處理分析等功能及實現(xiàn)方法和復(fù)雜程度，應(yīng)提供系統(tǒng)測試、用戶測試的計劃和報告；具備電子數(shù)據(jù)交換、遠程控制或用戶訪問功能的產(chǎn)品，應(yīng)按照《醫(yī)療器械網(wǎng)絡(luò)安全注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》提交網(wǎng)絡(luò)安全研究資料，提供保證數(shù)據(jù)保密性、完整性、可得性所采取措施及驗證報告，同時應(yīng)提供網(wǎng)絡(luò)安全可追溯性分析報告。

2.3 效期及包裝研究

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品效期研究可采用實時老化研究或加速老化研究。實時老化研究可為產(chǎn)品效期研究提供最佳數(shù)據(jù)，但在產(chǎn)品更新較快的市場條件下，新產(chǎn)品需要在盡可能短的時間內(nèi)投入市場，實時老化研究不能滿足這一目的。加速老化試驗是一種測試產(chǎn)品性能退化特性的方法，可分為定性加速試驗、定量加速試驗、定量時間和事件壓縮試驗三種類型。加速老化研究可參照GB/T 34986-2017《產(chǎn)品加速試驗方法》及《有源醫(yī)療器械使用期限注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》。

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品為精密儀器，應(yīng)提供產(chǎn)品運輸穩(wěn)定性和包裝研究資料，以證明在規(guī)定的運輸包裝條件下，能夠保證產(chǎn)品的安全性、有效性。

2.4 臨床評價研究

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品不在《免于臨床評價醫(yī)療器械目錄》中，應(yīng)提供臨床評價資料。根據(jù)產(chǎn)品實際情況可采取同品種臨床評價路徑和/或臨床試驗評價路徑，若通過同品種比對的方式進行臨床評價，應(yīng)按照《醫(yī)療器械臨床評價技術(shù)指導(dǎo)原則》《醫(yī)療器械臨床評價等同性論證技術(shù)指導(dǎo)原則》論證申報產(chǎn)品與同品種產(chǎn)品在適用范圍（樣本、檢測項目）、技術(shù)特征（質(zhì)量范圍、準確度、穩(wěn)定性、線性、靈敏度、軟件功能等）、生物學(xué)特性方面具有廣泛相似性，并收集同品種產(chǎn)品的臨床數(shù)據(jù)，分析評價，最終形成臨床評價報告；若采取臨床試驗路徑進行臨床評價，應(yīng)根據(jù)適用范圍、檢驗樣本等合理設(shè)計臨床試驗方案，并提交臨床試驗方案、臨床試驗報告等。

2.5 說明書要求

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品說明書應(yīng)符合《醫(yī)療器械說明書和標簽管理規(guī)定》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）要求；應(yīng)符合產(chǎn)品適用的強制性標準中對于說明書的要求，例如GB 4793.1-2007、GB 4793.6-2008、GB 4793.9-2013、YY 0648-2008中對于說明書內(nèi)容的要求。此外，液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品說明書應(yīng)關(guān)注下述內(nèi)容（如適用）：（1）流動相防護，若需操作甲醇溶劑、乙腈溶劑或其他專用化學(xué)品，應(yīng)根據(jù)化學(xué)品對應(yīng)的化學(xué)品安全技術(shù)說明書（material safety data sheet，MSDS）中推薦的措施進行有效防護；（2）允許流動相范圍，如流動相的pH值、氯化物濃度等；（3）分離模式提示；（4）軟件與液相色譜儀及質(zhì)譜儀的傳輸協(xié)議；（5）儀器廢氣、廢液處理方式；（6）產(chǎn)品運輸儲存及使用環(huán)境要求（溫、濕度）；（7）可更換部件更換周期，如注射泵、切換進樣閥、真空泵、流動相、固定相等；（8）各組件清潔維護頻率及維護方式；（9）儀器開關(guān)機相關(guān)要求（電源、氣源、氣壓調(diào)整至儀器需求值等）；（10）短期停機和長期停機的防護操作；（11）溶劑和添加劑使用提示；（12）儀器安裝后移動要求；（13）校準周期。

3 總結(jié)

液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜產(chǎn)品在臨床檢測、代謝組學(xué)、藥物分析等方面已得到廣泛應(yīng)用。相比其他檢測技術(shù)，該技術(shù)具有快速、靈敏度高、特異度高的優(yōu)點。本研究結(jié)合醫(yī)療器械注冊法規(guī)及產(chǎn)品特點，從注冊審評角度對該類產(chǎn)品進行探討，以期為注冊申請人及審評技術(shù)人員提供一定指導(dǎo)。該類產(chǎn)品雖然有國家標準及行業(yè)標準，但隨著技術(shù)的進步，在產(chǎn)品實際設(shè)計生產(chǎn)中會出現(xiàn)區(qū)別于標準之處。在該類產(chǎn)品實際生產(chǎn)、使用中，應(yīng)充分考慮產(chǎn)品風(fēng)險、儀器維護、防護等方面，如設(shè)計生產(chǎn)中重點關(guān)注真空度密封、質(zhì)量軸調(diào)試、電壓校準、噴針位置、離子源的選擇，使用中應(yīng)充分考慮儀器校準、樣品制備要求、化學(xué)品的防護、軟件調(diào)試等。