陳艷艷
江蘇省宿遷市宿豫區(qū)順河街道畜牧獸醫(yī)服務(wù)站,江蘇宿遷 223800
微生態(tài)產(chǎn)品是養(yǎng)殖生產(chǎn)過(guò)程中常用的一種飼料添加劑,該產(chǎn)品以益生菌、益生元等為主要成分,通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體局部微生態(tài)平衡來(lái)發(fā)揮防控疾病、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、提升機(jī)體免疫以及降低飼養(yǎng)成本的作用[1]。目前在我國(guó)減抗限抗的養(yǎng)殖模式推動(dòng)下,微生態(tài)制劑是重要的替抗產(chǎn)品之一,被廣泛應(yīng)用于臨床。目前市售微生態(tài)產(chǎn)品種類(lèi)較多,產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊,有一小部分廠家為了眼前利益還可能生產(chǎn)和銷(xiāo)售假冒偽劣產(chǎn)品,導(dǎo)致終端養(yǎng)殖場(chǎng)遭受較大經(jīng)濟(jì)損失。下面就基層養(yǎng)殖場(chǎng)如何科學(xué)鑒別微生態(tài)產(chǎn)品進(jìn)行探討交流。
隨著社會(huì)的不斷發(fā)展,人們的消費(fèi)觀念也不斷改變,尤其是在動(dòng)物食品類(lèi)的消費(fèi)方面,已經(jīng)把健康飲食放在第一位,而健康的飲食首先需要食品原材料必須安全。對(duì)于肉、蛋、奶等動(dòng)物蛋白消費(fèi)類(lèi)食品,抗生素在其中的殘留應(yīng)在規(guī)定值以下,同時(shí),對(duì)于已經(jīng)進(jìn)入產(chǎn)奶期、產(chǎn)蛋期的畜禽,或臨出欄的畜禽,禁止使用抗生素。這就需要從養(yǎng)殖端抓緊管理,確?;瘜W(xué)藥物少用或者不用,倡導(dǎo)無(wú)抗養(yǎng)殖,規(guī)范用藥。但有些疾病的治療對(duì)抗生素依賴(lài)性非常強(qiáng),如果不用則會(huì)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失,但若使用則會(huì)帶來(lái)食品安全問(wèn)題,比如對(duì)于蛋雞飼養(yǎng)來(lái)講,幼齡期和青年期不涉及雞蛋上市,允許適當(dāng)使用抗生素來(lái)防控疾病,進(jìn)入產(chǎn)蛋期后,若不慎發(fā)生了大腸桿菌或沙門(mén)氏菌感染時(shí),對(duì)于養(yǎng)殖場(chǎng)來(lái)講,使用抗生素意味著疾病好得更快,最終造成的損失也更小,但產(chǎn)出的雞蛋食用無(wú)疑是不安全的,對(duì)于這樣的矛盾問(wèn)題,解決方案之一就是選擇一種能替代抗生素功能的物質(zhì)進(jìn)行治療,微生態(tài)制劑就是最常用的一種[2]。
由于我國(guó)養(yǎng)殖模式結(jié)構(gòu)中,家庭農(nóng)場(chǎng)式和散養(yǎng)戶模式仍占很大比例,和大型養(yǎng)殖集團(tuán)、龍頭企業(yè)、規(guī)模化養(yǎng)殖合作社相比,養(yǎng)殖人員專(zhuān)業(yè)知識(shí)十分匱乏,平常接受專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)的機(jī)會(huì)也少,最終使得這些家庭農(nóng)場(chǎng)和散養(yǎng)戶成為很多假冒偽劣獸藥、飼料添加劑使用的重災(zāi)區(qū)。在國(guó)家無(wú)抗、限抗的養(yǎng)殖模式倡導(dǎo)下,有些不良商家以微生態(tài)添加劑產(chǎn)品為幌子,將不合格產(chǎn)品違規(guī)銷(xiāo)售給基層中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng),致使養(yǎng)殖者受到較大經(jīng)濟(jì)損失。因此,每一位養(yǎng)殖人一定要具備一定的辨別能力,對(duì)假冒偽劣獸用微生態(tài)產(chǎn)品進(jìn)行鑒別。
微生態(tài)產(chǎn)品在國(guó)家嚴(yán)格實(shí)施無(wú)抗、減抗養(yǎng)殖模式的背景下,生產(chǎn)企業(yè)越來(lái)越多,產(chǎn)品參差不齊,有些是真正的微生態(tài)產(chǎn)品,無(wú)論是鏡檢,還是體外培養(yǎng),都能見(jiàn)到益生菌菌體和菌落,而有些則是打著微生態(tài)的名義生產(chǎn)假產(chǎn)品或劣質(zhì)產(chǎn)品,對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展帶來(lái)負(fù)面影響。建議大家在采購(gòu)產(chǎn)品時(shí),從以下幾個(gè)方面進(jìn)行鑒別和判斷。
性狀主要指產(chǎn)品的外觀,如果為液體制劑,則產(chǎn)品久置后一定是分層的,上層澄清透明,下層渾濁或有一層沉淀物,用力搖晃后變?yōu)闇啙峋坏捏w系。如果手頭的產(chǎn)品澄清透明,且長(zhǎng)時(shí)間放置后沒(méi)有明顯沉淀,這個(gè)產(chǎn)品很可能是假的微生態(tài)制劑。因當(dāng)下所有的益生素種類(lèi)中,菌體的大小直徑都是在微米級(jí)別,可見(jiàn)光無(wú)法通過(guò)衍射的方式穿透,故只要含有益生菌,體系一定是非透明的。做過(guò)微生物相關(guān)試驗(yàn)的人員都知道,細(xì)菌在合適的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24~48 h 后,培養(yǎng)基會(huì)由澄清狀態(tài)變?yōu)闇啙釥顟B(tài)也是這個(gè)原理。如果為固體制劑,則可取少量溶解于水中,若完全溶解,體系澄清透明,也表明產(chǎn)品中沒(méi)有益生菌存在,可果斷放棄購(gòu)買(mǎi)。
若購(gòu)買(mǎi)的產(chǎn)品宣傳的是含有乳酸菌的制劑,如植物乳桿菌、糞腸球菌、乳酸乳球菌等,則由于乳酸菌代謝產(chǎn)物以乳酸為主,可使體系呈現(xiàn)出酸性特征。根據(jù)筆者多年的經(jīng)驗(yàn),液體藥物的原液pH 值一般在3.0~5.0,實(shí)驗(yàn)室有pH 計(jì)的可直接進(jìn)行檢測(cè),原液未經(jīng)稀釋的情況下若為中性或堿性,則是無(wú)乳酸菌存在的。小型養(yǎng)殖場(chǎng)沒(méi)有pH 計(jì)的,可采用pH試紙?zhí)娲?,pH 試紙雖然無(wú)法定量判斷體系的酸堿度值,但通過(guò)定性檢測(cè)也能有個(gè)判斷,且不受時(shí)間、空間等條件限制,可隨時(shí)攜帶檢測(cè)。如果檢測(cè)結(jié)果不符合產(chǎn)品宣傳要求,則很有可能是劣質(zhì)產(chǎn)品或假產(chǎn)品。還有些廠家產(chǎn)品為了以次充好,在菌液中額外添加有機(jī)酸,以干擾人們對(duì)結(jié)果的判定,這些都需要通過(guò)結(jié)合其他方法進(jìn)一步檢查才能確定。
顯微觀察法主要是通過(guò)光學(xué)顯微鏡,將菌體革蘭氏染色后在視野下進(jìn)行觀察,通過(guò)染色特征、菌體形態(tài)來(lái)進(jìn)行鑒別。如酵母菌為革蘭氏染色呈陽(yáng)性的大桿菌或球狀菌,寬度大約在2~6 μm,長(zhǎng)度在3~35 μm,若視野中找不到這樣的菌存在,則表明產(chǎn)品存在質(zhì)量問(wèn)題。顯微觀察法相對(duì)于性狀和酸度鑒別法,對(duì)操作人員的專(zhuān)業(yè)度要求較高,同時(shí)鑒別準(zhǔn)確率也高很多,通常適用于有資金實(shí)力保證的大型養(yǎng)殖場(chǎng)。
對(duì)于細(xì)菌類(lèi)、真菌類(lèi)等微生物來(lái)講,每種微生物都有各自的培養(yǎng)特征和生化特征,經(jīng)過(guò)體外培養(yǎng)后通過(guò)菌落形態(tài)的鑒別就可以進(jìn)行菌種的判斷。如乳酸桿菌屬的益生菌在MRS 瓊脂表面獲得的菌落為黃色、中等大小、凸起、表面濕潤(rùn)、邊緣整齊的圓形菌落,培養(yǎng)24 h 的菌落直徑范圍在2.0~4.0 mm。雙歧桿菌屬的益生菌在兼性需氧培養(yǎng)條件下不生長(zhǎng),在絕對(duì)厭氧培養(yǎng)條件下,MC 瓊脂培養(yǎng)基表面培養(yǎng)24 h 可形成粉紅色或白色、邊緣整齊、直徑在0.5~2.5 mm 的小菌落,大部分菌株周?chē)€可有淡淡的暈。另外,不同的菌也都有各自不同的生化代謝特征,通過(guò)將單個(gè)菌落接種于不同的生化發(fā)酵管,基于培養(yǎng)發(fā)酵產(chǎn)生的現(xiàn)象來(lái)進(jìn)行判斷,常用的發(fā)酵管有葡萄糖、麥芽糖、乳糖、甘露醇、蔗糖、菊糖等,還有些生化反應(yīng)鑒定,如淀粉酶試驗(yàn)、接觸酶試驗(yàn)、三糖鐵試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、維倍試驗(yàn)等,通過(guò)將這些發(fā)酵特征和生化反應(yīng)鑒定結(jié)果對(duì)比,進(jìn)而對(duì)產(chǎn)品中的微生物菌種進(jìn)行判斷。
由于益生菌是活的微生物,在后期存放過(guò)程中也在不斷生長(zhǎng)和繁殖,消耗環(huán)境中的營(yíng)養(yǎng),故液體類(lèi)的微生態(tài)產(chǎn)品保質(zhì)期一般不超過(guò)12 個(gè)月,即使在低溫冷藏條件下儲(chǔ)存也不會(huì)太長(zhǎng)。微生物在繁殖過(guò)程中會(huì)呈現(xiàn)出一個(gè)“S”型的曲線,從接種開(kāi)始,分別經(jīng)歷遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期4 個(gè)時(shí)期,進(jìn)入衰亡期后,大部分的菌體開(kāi)始死亡,代謝產(chǎn)物增加,對(duì)益生菌的生長(zhǎng)不利。大量菌體死亡后,其活菌數(shù)量開(kāi)始與標(biāo)準(zhǔn)不符,故而保質(zhì)期較短,如果液態(tài)類(lèi)微生態(tài)產(chǎn)品保質(zhì)期標(biāo)明的是12 個(gè)月以上,則可高度懷疑產(chǎn)品的偽劣性。如果是固體制劑,且保質(zhì)期標(biāo)明在24 個(gè)月甚至更長(zhǎng)的,則產(chǎn)品成分通常為芽孢菌。芽孢是細(xì)菌的一種休眠體,在體外惡劣環(huán)境中能長(zhǎng)期保存,保質(zhì)期非常長(zhǎng),如枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌等。如果產(chǎn)品標(biāo)明的是非芽孢類(lèi)菌,同時(shí)保質(zhì)期還標(biāo)明在24 個(gè)月以上,這種產(chǎn)品肯定是不合格的。
目前市場(chǎng)上微生態(tài)產(chǎn)品種類(lèi)較多且復(fù)雜,非專(zhuān)業(yè)人員臨床使用時(shí)若無(wú)判別標(biāo)準(zhǔn),謹(jǐn)以此文作為參考,希望在使用微生態(tài)產(chǎn)品時(shí)能有自己的鑒別依據(jù),以免造成不必要的損失。另外,不要把微生態(tài)產(chǎn)品的作用過(guò)于夸大,很多時(shí)候在疾病治療方面其效果是不如化學(xué)藥物的,有些廠家為了短時(shí)間內(nèi)推銷(xiāo)自己的產(chǎn)品,在作用效果上夸大宣傳,誤導(dǎo)買(mǎi)家長(zhǎng)時(shí)間超劑量使用,最終也未獲得理想效果,這種情況在基層養(yǎng)殖場(chǎng)很普遍,建議將該類(lèi)產(chǎn)品多用在畜禽日常保健、疾病預(yù)防及抗生素替代使用等方面[3]。